卵母细胞经冷冻步骤改良的玻璃化法冻融后临床效果分析

目的 探讨卵母细胞经冷冻步骤改良的玻璃化法冻融后行卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)受精的临床效果.方法 回顾性对比分析经改良法冻融后的卵母细胞(解冻卵组)与同期基本资料与其匹配的ICSI 患者的新鲜卵母细胞(新鲜卵组)受精后的临床结局.结果 解冻卵组和新鲜卵组的受精率(77.6% vs 76.1%)、卵裂率(98.5% vs 100.0%)、D3优质胚胎率(36.2% vs 27.5%)、优质囊胚(47.7% vs 47.3%)及可利用囊胚比率(52.2% vs 52.6%)差异无统计学意义;解冻卵组有62.5%的患者子宫内膜准备是自然周期,新鲜卵组所有患者均是超促排卵周期;但解冻卵的临床妊娠率及继续妊娠率分别为87.5%和81.3%,均显著性高于新鲜卵组的59.2%和51.3%;流产率新鲜卵组略高(7.1% vs 13.3%),但差异无统计学意义.结论 改良后的冻卵方法极大地改善了卵母细胞的发育潜能,几乎无异于新鲜卵母细胞.     

人冻融卵母细胞赠送的初步研究

目的为要求接受赠卵的不孕症患者提供一种人卵母细胞的保存方法。方法将供卵者体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期中自愿捐献的多余的成熟卵母细胞29个,慢冻快融后采用受者丈夫精子行单精子胞浆内注射(ICSI),观察受精、卵裂及发育过程,选择形态好的胚胎移植。结果29个成熟卵母细胞冻融后存活22个(存活率75．86％),17个正常受精(受精率77．27％),形成胚胎12枚(胚胎形成率70．59％),移植9个胚胎。4例接受赠卵者中1例获临床妊娠。结论慢速冷冻快速融冻人卵母细胞是一种可行的卵母细胞的冻融方法。并获得赠卵临床妊娠成功。     

卵细胞胞浆内单精子注射对胚胎冻融结果的影响

目的比较卵细胞胞浆内单精子注射(ICSI)和常规试管内授精(IVF)两种受精方式对胚胎冻融结果的影响。方法51对夫妇59个冻胚移植周期(ICSI组27周期,IVF组32周期),比较冻胚复苏后胚胎的存活率和临床妊娠率。结果59个冻胚移植周期,解冻胚胎235个,存活199个,存活率84.7%,临床妊娠率37.3%。其中IVF组32个周期,解冻胚胎132个,存活112个,存活率84.8%,临床妊娠率37.5%;ICSI组27个周期,解冻胚胎103个,存活87个,存活率84.4%,临床妊娠率37.0%。两组比较结果P>0.05,两组无显著差异。结论IVF组与ICSI组冻融胚胎存活率、妊娠率差异无显著性。结果表明ICSI技术是治疗男性因素引起不孕症的安全有效的方法。     

实施ICSI后对复苏胚胎的妊娠结局

目的 讨论卵泡浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection ICSI)与常规体外受精(in vitro fetrilizationⅣF)受精方式对冷冻胚胎的解冻和移植后对临床妊娠的影响.方法 慢速冷冻IVF或ICSI周期中剩余的优质胚胎,随后用快速融解法复苏后进行移植.观察各组胚胎冷冻解冻后的胚胎存活率及相关指标和临床妊娠率.结果 50例患者中,IVF组为30个周期,妊娠4例,妊娠率为13.33%,ICSI组为20个周期,妊娠5例,妊娠率为25%,ICSI组冷冻胚胎优胚率、复苏后胚胎存活率、存活胚胎累积细胞数与复苏胚胎的累积细胞数百分比(累积细胞存活率)和存活胚胎累积评分与复苏细胞累积评分的百分比(累积评分率)有显著差异.结论 冷冻胚胎的优胚率及复苏后获得高质量的胚胎是影响解冻胚胎移植的临床妊娠率重要因素.     

实施ICSI后对复苏胚胎的妊娠结局

目的 讨论卵泡浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection ICSI)与常规体外受精(in vitro fetrilizationⅣF)受精方式对冷冻胚胎的解冻和移植后对临床妊娠的影响.方法 慢速冷冻IVF或ICSI周期中剩余的优质胚胎,随后用快速融解法复苏后进行移植.观察各组胚胎冷冻解冻后的胚胎存活率及相关指标和临床妊娠率.结果 50例患者中,IVF组为30个周期,妊娠4例,妊娠率为13.33%,ICSI组为20个周期,妊娠5例,妊娠率为25%,ICSI组冷冻胚胎优胚率、复苏后胚胎存活率、存活胚胎累积细胞数与复苏胚胎的累积细胞数百分比(累积细胞存活率)和存活胚胎累积评分与复苏细胞累积评分的百分比(累积评分率)有显著差异.结论 冷冻胚胎的优胚率及复苏后获得高质量的胚胎是影响解冻胚胎移植的临床妊娠率重要因素.     

玻璃化冷冻人卵母细胞体外受精－胚胎移植9例临床分析

目的：探讨人卵母细胞玻璃化冷冻在体外受精－胚胎移植（ IVF-ET）中的应用效果。方法行IVF-ET 治疗、因取卵日男方因素无法进行受精的患者9例,对其成熟卵子进行玻璃化冷冻保存,解冻后进行卵胞浆内显微授精（ICSI）,记录卵子复苏、受精、卵裂及移植后妊娠情况。结果9例患者共解冻复苏58枚卵子,复苏率68．2％（58／85）;复苏后进行ICSI的成熟卵子中,受精40枚,形成胚胎34枚,受精率69．0％,卵裂率85．0％。7个移植周期共移植胚胎15枚,临床妊娠3例,临床妊娠率42．9％。结论人卵母细胞玻璃化冷冻可以获得一定的临床妊娠率,在IVF-ET中可作为临床治疗的选择之一。     

补救ICSI在常规IVF不受精或低受精周期中的应用

目的 探讨对常规体外受精(IVF)不受精或低受精的病例行补救卵胞浆内单精子注射(ICSI)的临床价值.方法 回顾性分析2008年11月～2009年5月在华中科技大学同济医学院附属同济医院生殖医学中心接受常规IVF治疗的98例非男性因素不孕患者,授精后4～6 h根据第二极体判断卵母细胞受精情况,若卵母细胞完全未受精或受精率低于25%,立即行补救ICSI再受精.结果 在98个常规IVF不受精或低受精周期中,共有卵母细胞1 013个,其中MⅡ期卵840个,经补救ICSI后共受精584个,受精率为69.5%,卵裂率为96.7%,形成可移植胚胎共288个.在86个新鲜移植周期共有32例临床妊娠,妊娠率为37.2%;在9个冷冻复苏移植周期中,有5例临床妊娠,妊娠率为55.5%.结论 常规IVF失败后补救ICSI再受精是可行的,合理的补救时间是获得理想的临床结局的关键.     

人类胚胎冷冻复苏影响因素分析

目的：观察患者年龄、促排卵方案、受精方式、胚龄及冻胚移植周期方案对于冷冻胚胎复苏和移植后临床妊娠的影响。方法：慢速冷冻体外受精周期中剩余的质量良好的胚胎，随后于不同周期用快速融解法复苏后进行移植。根据上述因素将患者分组，对复苏后胚胎质量和临床妊娠率进行比较。结果：126例患者中，融解胚胎总数445个，复苏后成活368个(82．7％)。获得临床妊娠48例(38．1％)。年龄对冷冻胚胎复苏率和移植后临床妊娠率的影响比较明显。随着年龄增加，冻胚移植的妊娠率下降，尤其是在35岁以后，下降更为明显。促排卵方案、受精方式、冷冻时胚胎的培养天数和移植周期方案均对冷冻胚胎复苏率和移植后临床妊娠率没有明显影响。结论：在诸多因素中，只有患者年龄会影响冻胚移植的结果。     

卵巢高反应临床结局及其卵母细胞超微结构分析

目的 探讨控制性超促排卵周期中卵巢高反应对卵母细胞、胚胎质量及妊娠结局的影响.方法 回顾性分析因输卵管因素和(或)男方因素初次行体外受精-胚胎移植/卵胞浆单精子注射(IVF-ET/ICSI)周期治疗的326例不孕患者的临床资料.根据人绒毛膜促性腺激素(HCG)日血清雌二醇(E2)水平、获卵数不同分为卵巢高反应组(HCG日血清E2＞3 000 pg/ml或获卵数＞15个,n=146)和正常反应组(HCG日血清E2500～3 000 pg/ml或获卵数5～15个,n=180),分析两组间的MII卵率、受精率、卵裂率、优质胚胎率、种植率、临床妊娠率和流产率.并通过透射电子显微镜下观察两组卵母细胞透明带、卵母细胞卵周隙、卵母细胞细胞器等超微结构的变化.结果 卵巢高反应组获卵数、优质胚胎数和移植周期取消率均显著高于正常反应组(P＜0.05),MII卵率、受精率、优质胚胎率、可利用胚胎率、种植率和临床妊娠率均显著低于正常反应组(P＜0.05).两组间卵裂率、流产率和中重度卵巢过度刺激综合征(OHSS)发生率差异均无统计学意义(P＞0.05).高反应组的超微结构分析显示,部分卵母细胞胞质中出现大量异常线粒体.结论 卵巢高反应影响卵母细胞质量及胚胎发育潜能,最终降低临床结局.     

不同受精方式对临床结局的影响

目的 比较常规体外受精(IVF)和卵泡浆内单精子注射(ICSI)受精对牺床结局的影响.方法 选取在我中心进行治疗的674病例共726周期(IVF 648周期,ICSI 78周期),比较两组不同受精方式获得的正常受精率、卵裂率、优胚率、冷冻事、平均移植胚胎散、妊娠率.结果 ICSI组的正常受精率、卵裂率、优胚率、冷冻率、妊娠率、平均移植胚胎数分别为80.88%,93.80%,56.98%,56.32%,34.48%,2.00 ±0.53个,而IVF组为67.52%,97.71%,51.75%,60.65%、41.2%,2.04±O.73个.ICSI组正常受精率、优胚率较IVF组高,但IVF组卵裂事较ICSI高,并且有统计学意义(P＜0.05),而冷冻率、妊娠率、平均移植胚胎数两组无统计学意义(P＞0.05).结论 ICSI治疗严重男性不育症可获得与IVF治疗女性不孕症相近的临床效果.     

对单个卵子不同授精方式的妊娠结局分析

目的探讨常规体外受精（IVF）和单精子卵胞浆内显微注射（ICSI）两种不同授精方式对仅获得单个卵子周期的临床结局分析。方法回顾性分析接受治疗并仅获得单个卵子的525对不孕夫妇的777个周期的病例资料。根据精液质量分为3组：IVF组（563个周期）,严重男性因素SMF-ICSI组（151个周期）,非严重男性因素NSMF-ICSI组（63个周期）。比较各组间正常受精率、可利用胚胎率、优质胚胎率、每周期临床妊娠率。结果IVF组、SMF-ICSI组和NSMF-ICSI组的正常受精率分别为70.3%、81.4%和80.7%,差异有统计学意义（P<0.05）;可利用胚胎率分别为81.6%、84.8%和87.0%;优质胚胎率分别为42.2%、53.3%和34.8%;每周期临床妊娠率分别为19.8%、12.5%和11.1%;可利用胚胎率、优质胚胎率和每周期临床妊娠率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论对每周期只获得单个卵子的患者应严格根据男方精液质量及过往病因选择授精方式。     

卵母细胞浆内单精子显微注射技术的临床应用

目的:研究卵母细胞浆内单精子显微注射(ICSI)技术的临床应用价值及影响ICSI成功率的因素。方法:对接受ICSI技术治疗的69例男性因素不育、不明原因不孕及体外受精失败患者75个周期的病例资料进行回顾分析。结果:对750个成熟卵母细胞进行ICSI操作,正常受精530个,受精率70.67%;25例临床妊娠,临床妊娠率33.33%。2003～2004年ICSI的受精率和卵裂率均显著高于2001～2002年(68.53%Vs75.86%;89.19%Vs95.45%)。女方三个不同年龄组间的受精率、种植率及临床妊娠率存在显著性差异。体外受精失败组受精率显著下降。结论:ICSI技术是治疗不孕不育症的有效方法,其治疗结局受卵子质量、女方年龄及ICSI操作技术等因素的影响。     

人卵子玻璃化冷冻原因及其技术在辅助生殖中的应用

目的探讨人卵子玻璃化冷冻的原因及其技术在辅助生殖中的可行性和临床应用价值。方法回顾性研究2008年1月~ 2018年10月在南方医科大学南方医院生殖医学中心行卵子玻璃化冷冻的26例患者共27个取卵周期,分析卵子玻璃化冷冻原 因、卵子解冻后受精情况及临床妊娠结局。结果26例患者27个取卵周期共冷冻卵子274枚,卵子冷冻原因主要包括取卵日男 方精子数量及质量差无可用精子、男方处于各种疾病急性期不适宜取精及男方因各种原因未能到场取精等。共19个周期行卵 子解冻,该19个周期共冻存卵子217枚,解冻后存活176枚,卵子解冻存活率81.11%,其中131枚卵子解冻后行卵胞浆内单精子 注射,正常受精98枚,正常受精率74.81%;卵裂88枚,卵裂率89.80%（88/98）;共形成可移植胚胎53枚,其中优质胚胎36枚,优 质胚胎率36.73%（36/98）。15个移植周期共移植胚胎27枚,临床妊娠率为53.33%（8/15）,活产率为33.33%（5/15）。随患者年龄 增加,与<35岁组相比,≥35岁组患者卵子复苏率（82.76% vs 74.42%,P=0.211）、临床妊娠率（77.78% vs 16.67%,P=0.041）及活 产率（55.56% vs 0,P=0.044）均呈下降的趋势。结论卵子玻璃化冷冻可作为不孕夫妻取卵当日因男方因素不能提供精子患者 的临床补救措施;卵子玻璃化冻融后的受精率、临床妊娠率结局良好,卵子复苏率与年龄存在相关性,女性≤35岁者冻卵能够获 得满意的临床妊娠结局。     

短时IVF联合早期补救ICSI与half-ICSI预防初次助孕周期受精低下的比较

目的 对比分析短时体外受精(IVF)或短时IVF联合早期补救卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)与部分卵胞浆内单精子显微注射(half-ICSI)两种授精方式在首次助孕周期对预防IVF受精率低下的疗效.方法 回顾性分析2015年5月1日-2016年12月31日初次助孕周期中因存在精卵结合障碍高危因素而接受短时IVF(或短时IVF联合联合早期补救ICSI)或half-ICSI预防IVF受精率低下患者的病例资料.根据授精方式分为短时IVF助孕组(A组,n=192)和half-ICSI助孕组(B组,n=85),比较两组患者的一般情况、受精情况、胚胎发育以及接受新鲜胚胎移植后的妊娠结局.为进一步分析受精情况,筛选A、B两组中IVF受精率低下周期(受精率≤30％)的患者,分别设为A1组(n=20)和B1组(n=9),比较A1、31两组的卵子受精情况.结果 与B组相比,A组不存在过度ICSI(0.0％ vs89.8％,x2=479.888,P＜0.01).A组正常受精率低于B组(73.3％ vs 79.6％,x2=14.780,P＜0.01),但两组可用胚胎率、优质胚胎率、囊胚形成率以及接受新鲜胚胎移植后临床妊娠率、胚胎着床率、流产率差异均无统计学意义(P均＞0.05).IVF受精率低下周期中,短时IVF联合早期补救ICSI可提高正常受精率(A1组77.9％,B1组49.4％,x2=28.833,P＜0.01).结论 相比half-ICSI,短时IVF联合早期补救ICSI可避免过度ICSI、提高IVF受精率低下周期的正常受精率,预防IVF受精率低下更加精确、有效.     

常规IVF不受精周期行补救卵母细胞单精子注射

 【目的】探讨常规体外受精胚胎移植（in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET）不受精时,应用卵母细胞单精子显微注射（intracytoplasmic sperm injection,ICSI）技术进行补救授精的临床意义。【方法】2001年8月～2005年8月,在499个常规IVF-ET周期中有25个周期完全不受精,进行补救ICSI,并与同期实施的179个正常ICSI周期进行比较。【结果】补救ICSI组与正常ICSI组比较,HCG日平均血清雌二醇水平、每个成熟卵泡平均血清雌二醇量、每个周期的获卵数无明显差别,补救ICSI受精率为57.7%,低于正常ICSI组（67.8%）,补救ICSI组平均每个周期获得胚胎数（7.8±3.9）比正常ICSI（10.0±4.9）组少,且有统计学意义（P〈0.01）。补救ICSI组≥4细胞的胚胎占总胚胎数的54.5%,低于正常ICSI组（87.5%）,有统计学意义（P〈0.01）。正常ICSI组妊娠率为38.5%,补救ICSI组无一例妊娠。补救ICSI组中有8例在下一周期行ICSI,有2例妊娠并分娩2个健康女婴。【结论】补救ICSI虽可以避免取消IVF周期，但其受精率和妊娠率低，其临床应用价值还有待于进一步探讨。对于常规IVF不受精的患者，再次治疗时可考虑行ICSI助孕。     

两种补救性ICSI在常规体外受精中的应用

目的探讨在常规体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期中不受精及受精率低的情况下,应用卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)进行补救后获得胚胎移植的临床应用价值。方法选择IVF周期中发生完全不受精及受精率<30%的病例97个周期,其中57个周期行晚期补救ICSI,40个周期行早期补救ICSI,两种补救ICSI在完全不受精组和受精率低组中分别进行比较。结果在不受精组中,早期补救的2PN受精率、种植率和妊娠率分别为69.44%、28.00%、30.77%,明显高于晚期补救ICSI的56.23%、1.00%、2.50%(P<0.05或P<0.01),在低受精率组中两者的累计妊娠率、种植率差异无显著性(P>0.05),但受精率、优质胚胎率、胚胎冷冻率差异有高度显著性(P均<0.01)。结论早期补救ICSI较晚期ICSI的2PN受精率、胚胎种植率高,能更好地改善补救ICSI的妊娠结局。     

卵泡液中VEGF水平对卵母细胞成熟及早期胚胎发育的影响

目的:探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)和卵母细胞胞质内单精子注射(ICSI)周期中血管内皮生长因子(VEGF)水平与卵母细胞成熟及早期胚胎质量的关系。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测78例接受IVF和ICSI助孕治疗的患者采卵日卵泡液中VEGF的水平,实验室观察同一卵泡腔内对应的卵母细胞的成熟度及其受精后胚胎发育情况,并结合临床上患者的年龄、促排卵方案等情况,分析两者之间的关联。结果:①卵泡液中VEGF的水平与卵母细胞成熟度研究表明:中间型及成熟型卵母细胞与未成熟型比较,差异有显著性(P<0.05),而其它型之间差异没有显著性差异(P>0.05)。②卵泡液中VEGF的水平与早期胚胎发育研究表明:优质胚胎(Ⅰ、Ⅱ级)与非优质胚胎(Ⅲ、Ⅳ级)差异有显著性(P<0.05)。③卵母细胞成熟度处于中间型和成熟型组,年龄>35岁接受治疗的患者卵泡液中VEGF水平相比于年龄低于35岁的患者,差异有显著性(P<0.05)。结论:①卵泡液中VEGF浓度在一定范围内对卵母细胞成熟有促进作用,可作为评估卵母细胞质量、胚胎质量的有效指标之一。②在IVF和ICSI周期中,卵泡液中VEGF的水平可以作为筛选优质卵母细胞质量的参考指标,并可以作为指导及预测妊娠结局的有效指标之一,但是要注意患者年龄的因素。     

冻融胚胎移植的临床应用

目的探讨冻融胚胎移植的临床应用,提高体外受精一胚胎移植成功率。方法对49例在体外受精形成的多个胚胎在移植后将剩余胚胎全部冷冻保存,采用胚胎慢速冷冻和快速解冻法。结果49例进行53个周期的冻融胚胎移植,获临床妊娠11例,临床妊娠率为20．8％。其中自然周期移植32例获临床妊娠7例,妊娠率为21．9％;激素替代周期5例,获临床妊娠1例,妊娠率为20％,克罗米芬,尿促性素（hMG）刺激周期16例,获临床妊娠3例,妊娠率18．8％。结论采取冻融胚胎移植可提高累积妊娠率,并可减少卵巢过度刺激综合征及多胎妊娠的发生。     

体外受精-胚胎移植周期中卵巢反应不良患者受精方式的选择

目的： 通过分析体外受精-胚胎移植周期中,非男性因素的卵巢反应不良患者受精情况及临床结局,探讨这类患者合适的受精方式。方法：回顾性分析体外受精胚胎移植周期中获卵数≤4个周期共103个,按受精方式分为常规IVF组（46周期）与ICSI组（57周期）,分析比较两组间受精率、正常受精率、卵裂率、受精失败发生率及临床妊娠率的差异。结果：IVF组受精率、正常受精率和卵裂率分别为78.7 %、72.6%和95.1 %,ICSI组受精率、正常受精率和卵裂率分别为72.0 %、66.4 %和96.8 %,两组间差异无统计学意义（P＞0.05）; IVF组受精失败发生率为15.56%,高于ICSI组的1.75%(P＜0.05）;IVF组获卵周期妊娠率为27.27%,移植周期妊娠率为33.33%,均高于ICSI组的9.09%与11.11%(P＜0.05）。 结论：对于无明确男性因素的卵巢低反应IVF周期,行ICSI并不能提高其受精率和临床妊娠率。 【关键词】IVF-ET;卵巢反应不良;受精方式