联合检测7种自身抗体在非小细胞肺癌中的诊断价值

目的 探讨7种肿瘤相关抗原自身抗体在非小细胞肺癌诊断中的应用价值.方法 回顾性分析非小细胞肺癌患者443例、体检健康人群405例,采用ELISA法检测各组血清中7种自身抗体的水平,分析抗体水平组间及阳性率差异,绘制ROC曲线分析单个抗体和联合检测的诊断效能,结合病理诊断结果 分析联合检测的阳性率与肺癌临床病理特征的关系...     

肺癌单克隆抗体用于诊断和治疗的潜力

一、制备肺癌相关抗原的单抗 应用杂交瘤技术制备肺癌相关抗原单抗的先驱者是Minna博士。制备肺癌单抗有三种途径。(1)利用已建立的人肺癌细胞株和自身B淋巴瘤。用1～10×10~8癌细胞,有时并用佐剂,1～2周免疫1次。融合后,杂交瘤培养上清液与细胞株和自身淋巴细咆反应,选择不与共同抗原反应的抗体。Cutlita等用这种方法制备了主要与小细胞癌或非小细胞癌反应的抗体,有趣的是非小细胞癌单抗通常至少与数种非小细胞癌反应,而并非专一与某一类型反应。这提示了有关起源于细胞的重要生物学现象。根据这种方法,在抗体的结合方式定性后才确定     

非小细胞肺癌相关多肽IgY抗体的制备及其ELISA检测研究

目的 制备抗非小细胞肺癌(NSCLC)相关多肽的IgY抗体,并进行NSCLC酶联免疫吸附分析(ELISA)实验研究. 方法用人工自动合成仪合成2条肽段(长度分别为64 AA和36 AA),并分别偶联钥孔血蓝蛋白(KLH)作为抗原免疫鸡产生IgY抗体,水稀释-辛酸法结合硫酸铵沉淀法分离提取IgY,亲和层析进一步纯化特异性IgY,间接非竞争ELISA检测抗体效价,棋盘滴定法选择ELISA的最适工作条件.将抗64 AA肽IgY抗体(Ab1)和抗36 AA肽IgY抗体(Ab2)联合,用ELISA检测96例NSCLC患者和102例正常人的血清. 结果成功制备了NSCLC相关多肽IgY抗体,效价Ab1为1 ∶ 104,Ab2为1 ∶ 105.用Ab1和Ab2组合作联合检测,以临界值0.241为阳性判断标准,96例肺癌患者血清中,阳性58例,敏感度为60.4 %;102例正常人血清中,阳性19例,特异度81.4 %.结论 运用IgY技术可以高效、大量制备多肽抗体,NSCLC相关多肽IgY抗体的ELISA检测实验表明IgY技术可在肺癌诊断中有较好的应用前景.     

肺癌自身抗体在肿瘤早期诊断和治疗中的临床应用进展

肺癌是癌症相关性死亡的主要原因之一,对人群健康和生命具有极大的威胁。根据相关资料及统计学模型估计,在2012年全球约有1.41千万新发癌症病例,其中肺癌发病率为180万,占癌症发病率的13%,是癌症中诊断率最高的病种,也是全球男性、发达国家女性癌症死亡率最高的病种,在发展中国家女性死亡率仅次于乳腺癌。不同于西方发达国家,中国肺癌发病率从20世纪80年代初期开始一直呈现上升趋势,而西方工业发达国家自20世纪末期开始肺癌发病率便呈下降趋势或维持相对稳定的水平,而目前的检测手段对肺癌早期筛查的灵敏度、特异性不够,肺癌患者确诊时往往已经达到肺癌中晚期,使得肺癌的死亡率居高不下。近年来研究发现由肺癌自身抗原产生的相关抗体——肿瘤自身抗体对于肺癌的早期诊断和治疗有重大意义。我们针对自身抗体进行综述,以便于使得此技术能够更好地为临床利用。     

抗人小细胞型肺癌和抗CD3单克隆抗体的异质交联体的制备及其…

本文报道了用化学交联法制备同时识别人小细胞型肺癌表面相关抗原和人ＣＤ３抗体的双特异性抗体２Ｄ６－ＵＣＨＴ１的实验研究工作。＾５１Ｃｒ释放法测试结果表明：２Ｄ６－ＵＣＨＴ１可显著增强ＬＡＫ细胞对靶瘤细胞的毒性，而且这种增强效应与加入双特异性抗体的浓度相关。     

RA33/36抗原的提取、半纯化及 相应抗体的检测

目的　提取、半纯化RA33/ 36抗原 ,探讨RA33/ 36抗体对类风湿关节炎 (RA)诊断的特异性及敏感性。方法　以Ehrlich腹水癌细胞核提取物作粗抗原 ,采用肝素 琼脂糖凝胶CL - 6B层析柱对此粗抗原进行分离半纯化。分别用粗抗原和半纯化抗原作抗原 ,免疫印迹法检测 12 0例RA患者、40例红斑狼疮 (SLE)患者、35例干燥综合征 (SS)患者、2 5例系统性硬化症 (SSc)患者、10例混合性结缔组织病 (MCTD)患者和 30例正常对照血清中的RA33/ 36抗体。结果　①SDS -PAGE示 2种抗原在相对分子质量 (Mr)为 33× 10 3 和 36× 10 3 处均可见条带 ,半纯化抗原杂带较粗抗原明显减少。②与粗抗原相比 ,半纯化抗原免疫印迹反应条带明显减少 ,且特别清晰 ,但阴性和阳性结果相同。③RA36抗体并不总是与RA33抗体以 2条带的形式同时出现。④RA33抗体和RA36抗体对RA诊断的敏感性差异无显著性 ,而特异性RA36抗体优于RA33抗体。⑤RA36抗体与RF、APF、ESR、关节相X线分期、关节功能分级无明显相关性。结论　半纯化抗原可直接用于检测RA33/ 36抗体 ,或用其作质量控制 ;RA36抗体可能是RA的一种可作为标记的特异性抗体 ,应对此抗体进行更深入研究。     

血清p53抗体检测对肺癌诊断价值的探讨

p53基因突变是人类多种恶性肿瘤中最常发生的基因改变。近年研究发现,突变型p53蛋白作为免疫系统的靶抗原在细胞内积聚,使得机体免疫耐受丧失,而产生p53抗体。已有资料显示,血清p53抗体与p53基因突变在许多方面具有一致性,它的表达与肿瘤的发生、发展、疗效、肿瘤的复发及预后等密切相关。肺癌的死亡率居恶性肿瘤之首,肺癌组织p53基因突变率较高。本文通过对肺癌患者血清p53抗体的定量检测,探讨p53抗体对肺癌临床的应用价值。     

抗人肺鳞癌单克隆抗体的制备及其特性鉴定

目的:制备和鉴定抗人肺鳞癌单克隆抗体(mAb),为肺癌的早期诊断和靶向治疗提供候选抗体药物及为肺癌抗原的筛选提供工具。方法:用肺癌细胞株YTMLC-90做抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0融合,间接ELISA和有限稀释法筛选抗体阳性的杂交瘤细胞获得mAb。染色体计数法鉴定杂交瘤细胞,并进行mAb同种型鉴定;对细胞培养上清液和腹水中的mAb采用间接ELISA法进行初步特异性检测及效价测定;采用Western blot法鉴定其与不同组织抗原结合活性;采用免疫组化染色法鉴定其在肺癌组织中的分布。结果:筛选出5株可稳定分泌抗肺鳞癌mAb的杂交瘤细胞株E2、F9、E11、D5和C6,分泌的抗体均为IgG1亚类,κ亚型。C6染色体数目为89～112条,细胞培养上清和腹水效价分别为1∶1 004和1∶104,ELSA和Western blot结果显示其能特异性与肺癌细胞结合,未见与其他高发癌组织和正常组织结合。结论:成功地制备了能够特异识别肺癌组织的mAb。     

抗人小细胞型肺癌和抗CD3单克隆抗体的异质交联体的制备及其增强LAK细胞杀伤活性的实验研究

本文报道了用化学交联法制备同时识别人小细胞型肺癌表面相关抗原和人ＣＤ３抗体的双特异性抗体２Ｄ６－ＵＣＨＴ１的实验研究工作。（５１）Ｃｒ释放法测试结果表明：２Ｄ６－ＵＣＨＴ１可显著增强ＬＡＫ细胞对靶瘤细胞的毒性，而且这种增强效应与加入双特异性抗体的浓度相关。     

肺癌组织的HLA-I类分子表达与临床病理因素关系

目的 研究肺癌组织的人类白细胞抗原I类分子HLA-A,B,C,G的表达情况以及临床病理因素关系.方法 抗HLA-A,B,C单克隆抗体(mAb)W6 /32 ,抗HLA-G (mAb)GG11,以免疫组化S-P法检测49例肺癌中的HLA-A,B,C,G抗原表达情况, 同时收集肺癌患者临床特征.结果 小细胞肺癌、鳞癌和腺癌的HLA-A,B, C抗原表达有不同程度的下降或缺失,小细胞肺癌HLA-A,B,C抗原下降和缺失率最高(P ＜0.05);而不同病理分期、分级的肺癌HLA-A,B,C抗原表达并无差异(P＞0.05).H LA-G在49例原发肺癌癌细胞中均无阳性表达,但4例肿瘤组织旁的部分免疫细胞上有阳性表达.结论 肺癌HLA-A,B,C抗原表达下降与肺癌组织类型相关,而与临床病理因素无关;HLA-G在肺癌细胞无表达,而部分免疫细胞表达HLA-G.肺癌可通过HLA-I 类分子诱导免疫耐受逃避宿主的免疫监控     

纤支镜肺活检材料肿瘤标记物表达与预后的关系

目的：了解纤支镜活切肺癌小标本中肿瘤标记的表达及其与预后的关系。方法：应用ｒａｓｐ２１ｐ５３单克隆抗体和ｃ－ｅｒｂＢ－２多克隆抗体，对７１例肺癌的纤支镜活检标本和１０例正常肺组织进行免疫组化染色研究。结果：１０例正常肺组织为阴性表达。７１例肺癌中，ｒａｓｐ２１、ｐ５３、ｃ－ｅｒｂＢ－２抗体的阳性表达率分别为：８０．２８％；５６．３４％和８１．６９％。ｃ－ｅｒｂＢ－２与肺癌分型相关，其他两者与肺癌分     

戊型肝炎病毒各生物标志物之间关系分析

目的 分析戊型肝炎病毒(HEV)各生物标志物之间关系以及各标志物在早期诊断中的作用.方法 从临床收集急性散发性肝炎患者的血清,用酶联免疫(EIA)试剂检测HEV IgG抗体、IgM抗体和抗原,用实时荧光RT-PCR方法 检测核酸,比较其相关关系.结果 在121例急性散发性肝炎中,HEV IgM抗体阴性者为51例,其中抗原或/和核酸阳性者占45.1%;IgM抗体阳性者70份,其中抗原或/和核酸阳性者占67.1%.HEV IgG抗体在IgM抗体、抗原和核酸均阴性的患者中阳性率为53.6%;在IgM阴性而抗原或/和核酸阳性者中阳性率为73.9%;在IgM阳性的HEV感染者中阳性率为92.9%.HEV抗原与核酸的符合率为81.8%,抗原与IgM抗体的符合率为58.7%,而IgM抗体与核酸的符合率为53.7%.结论 在HEV感染的早期诊断中增加抗原和核酸的检测有助于提高检出率.     

白癜风患者血清抗黑素细胞抗体检测及相关抗原的鉴定

目的：检测白癜风患者血清抗黑素细胞胞质和胞膜蛋白质抗体,并鉴定高识别率的胞膜抗原;检测白癜风患者血清抗酪氨酸酶相关蛋白1（ TRP-1）抗体与热休克蛋白70（ HSP70）,并探讨二者的关系。方法体外培养高纯度正常人黑素细胞,间接免疫荧光法检测抗黑素细胞抗体并对相关抗原定位,裂解黑素细胞并抽提蛋白质,免疫印迹法检测50例白癜风患者血清（4例HBsAg阳性）,并用蛋白质谱分析技术鉴定相关胞膜抗原;ELISA法检测70例白癜风患者血清（10例HBsAg阳性）抗TRP-1抗体和HSP70。结果间接免疫荧光法显示白癜风相关抗原位于黑素细胞胞质及胞膜上。免疫印迹法检测显示,膜抗原阳性率为80％,相应膜抗原相对分子质量（ Mr ）大约为86×103、75×103、60×103、52×103、44×103,各条带阳性率分别为36％、58％、22％、2％、2％;胞质抗原阳性率为30％,其M r约为110×103、90×103、75×103、50×103、40×103,各条带的阳性率分别为12％、4％、12％、10％、2％。20例对照血清胞膜抗原和胞质抗原阳性率分别为15％和5％。白癜风组均明显高于对照组。蛋白质谱鉴定显示：Mr为86×103和75×103的膜抗原为Lamin A／C,Mr 为60×103的膜抗原为Vimentin X1。在合并乙型肝炎的白癜风患者血清中存在高水平的抗TRP-1抗体与HSP70,并且二者浓度呈显著正相关性（ r＝0．927,P＜0．01）。结论通过蛋白质谱鉴定,发现了一种新的白癜风相关黑素细胞膜抗原,对白癜风自身免疫机制的研究有重要意义。通过检测血清抗TRP-1抗体和HSP70,初步探讨了HBV感染与白癜风发病的关系。     

麦芽凝聚素层析柱纯化的肺癌相关抗原

纯化并分析肺癌相关怕的有关特性。方法采用商品化麦芽凝聚麦ＷｈｅａｔｇｅｒｍＬｅｃｔｉｎ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－６ＭＢ层析柱和自制抗人肺癌单克隆抗体Ｎ－３５－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－４Ｂ层析柱纯化肿瘤相关抗原，比较纯化结果；用免疫印技术测定肺癌相关抗原在肺癌、肝癌、宫颈癌、乳腺癌细胞及正常人心脏及肺组织的存在及分布情况，用差速离心技术分析肺癌相关抗原在亚细胞结构布状况；用免疫荧光技术探测肺癌相关抗原在肿瘤     

皖北地区1 025 例孕妇抗-HPA 抗体的初步研究

目的:探讨皖北地区孕妇血小板抗体的产生与基因型分布情况,为中国孕妇是否进行产前血小板抗体筛查提供基础数据和统计学依据。方法:选择2016年12月至2017年12月在本院进行产检的1 025例孕妇为研究对象,收集其外周血,用单克隆抗体特异性血小板抗原固定术对孕妇血清进行血小板抗体初筛,对于初筛阳性标本用二磷酸氯喹去除人类白细胞抗原(HLA)的作用后重复进行初筛实验,仍为阳性的标本利用抗原捕获酶联免疫吸附试验进行血小板抗体抗原特异性分析。对于抗-HLA抗体阳性标本用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)法进行HLA基因型检测,对人类血小板抗原(抗-HPA)抗体阳性标本用PCR-SSP法进行HLA和HPA基因型检测。结果:1 025例孕妇中血小板抗体阳性者共45例,总阳性率为4.39%,其中41例为抗-HLA抗体阳性,4例为抗-HLA抗体和抗-HPA抗体同时阳性;初次妊娠孕妇(410例)与多次妊娠孕妇(615例)比较,血小板抗体阳性者分别为6例和39例,阳性率分别为1.46%和6.34%,差异具有统计学意义(χ~2=13.95,P0.05);在多次妊娠孕妇中,有2次妊娠史(388例)、3次妊娠史(188例)、4次及以上妊娠史(89例)孕妇血小板抗体阳性者分别为18例、10例、11例,阳性率分别为4.64%、7.25%、12.36%,三组比较差异具有统计学意义(χ~2=7.51,P0.05)。结论:皖北地区孕妇血小板抗体阳性率为4.39%,其中抗-HLA抗体阳性率为4.39%,抗-HPA抗体阳性率为0.39%,且抗-HPA抗体阳性孕妇同时伴有抗-HLA抗体阳性;孕妇血小板抗体的产生与妊娠次数有着密切的关系,抗体阳性率随着妊娠次数的增加而增高;在皖北地区人群中致新生儿同种免疫性血小板减少症发生的致病抗体可能为抗-HPA-5b抗体;皖北地区血小板抗体阳性孕妇的基因分型中,频率较高的HLA-A特异性抗原有A2、A24、A11、A33,HLA-B特异性抗原有B46、B13、B60、B62、B58,HLA-DQ特异性抗原有DQ6、DQ2、DQ9、DQ5、DQ7,HLA-DR特异性抗原有DR9、DR4、DR15、DR7、DR12、DR13。     

326例孕妇HLA抗体检测结果分析

人类白细胞抗原（HkA）为移植抗原,具有高度多态性,分为HLA—Ⅰ、HLA-Ⅱ、HLA-Ⅲ三类,HIA为同种抗原,可以刺激机体产生HIA同种抗体。现代医学研究证明,HLA抗体与实体移植、输血、妊娠等密切相关,为探讨HLA抗体与妊娠的关系,笔者对326例孕妇进行HIA抗体检测,现将结果报告如下。     

人肺癌中CD_(44)的表达

作者通过流式微量荧光仪测定了12例肺癌细胞表面CD_(44)的相对含量。所有非小细胞肺癌细胞系中有5例结合有高水平的CD_(44)-特异性抗体,其中90％以上细胞的荧光强度均比本底至少高10倍。与此相对应,5例小细胞肺癌表型细胞系均有低的CD_(44)表达(<5％的细胞呈阳性)。其它肺癌细胞系则呈中等水平表达。7株CD_(44)阴性细胞株中6株呈聚体样生长。作者发现这些细胞株细胞表面CD_(44)的缺失可能是因这种抗体不与其相应抗原发生反应之     

BIRC5抗体在非小细胞肺癌血浆中的表达及其与预后的关系

目的:探讨凋亡抑制因子(BIRC5)抗体在非小细胞肺癌(NSCLC)患者血浆中的表达及其与预后的关系.方法:选取首次确诊未经治疗的NSCLC患者211例及健康对照者200例,收集血浆样本.基于BIRC5蛋白结构,运用抗原表位预测工具设计、合成2条线性抗原肽,即BIRC5a、BIRC5b,通过自行建立的ELISA法检测血...     

应用消减免疫法制备凋亡肝癌细胞相关蛋白的抗体

目的：探讨消减免疫法在分析肝癌细胞凋亡反应中瞬时表达的某些相关抗原分子的作用。方法：利用消减免疫法制备抗肝癌凋亡细胞相关抗原的抗体；用ＥＬＩＳＡ方法检测抗原、抗体反应。结果：应用消减免疫法制备的抗凋亡肝癌细胞相关抗原的多克隆抗体与肝癌凋亡细胞相关抗原的反应较强；与非凋亡肝癌细胞的抗原反应较弱。其抗原表位主要是蛋白质或多肽。结论：消减免疫法可用于分析肝癌细胞凋亡反应中瞬时表达的相关抗原分子；凋亡过程中有新的蛋白质表达，用该抗体可鉴定肝癌凋亡细胞新的表达蛋白     

肺癌单克隆抗体血清学诊断初探

本文应用自制的3株肺癌单克隆抗体(McAb),对40例肺癌及肺部良性疾患,20例正常人的血清标本,进行了肺癌血清相应抗原ELISA—间接法检测。结果表明,3组标本血清相应抗原检出率分别为:肺癌