肿瘤浸润CD4+T淋巴细胞的抗肿瘤免疫机制

肿瘤浸润CD4+T淋巴细胞是一群从肿瘤组织中发现的具有抗原特异性CD4阳性的T淋巴细胞。肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocyte,TIL)包括CD4+T细胞亚群和CD8+特异性T细胞亚群。通过体外大量培养TILs再将其回输至患者体内的过继性细胞治疗(adoptive cell therapy,ACT)可有效杀伤肿瘤细胞,且其中CD8+T细胞起到直接杀伤肿瘤的作用。CD4+T细胞通过识别MHC/肽段复合物杀伤肿瘤,在抗肿瘤免疫反应中也起到重要的作用。但有关CD4+T细胞在肿瘤免疫反应中作用的研究相对较少。本文主要就肿瘤浸润性CD4+T细胞的主要分子特征及研究进展作一综述。     

肿瘤浸润淋巴细胞及其亚群在肿瘤免疫中的作用

肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)在宿主抗原特异性肿瘤免疫应答中具有关键的作用,可通过直接的细胞毒性T淋巴细胞和分泌细胞因子产生高效、特异性强的抗肿瘤杀伤效应。TILs包括T细胞,少量的B细胞、NK细胞、巨噬细胞和树突状细胞等,其中效应细胞包括细胞毒性T淋巴细胞,如CD8~+T细胞、部分CD4~+T细胞;多种调节型淋巴细胞,如巨噬细胞、髓源性抑制细胞(MDSC)和Tregs等。多种细胞在肿瘤微环境中共同发挥作用。该文就TILs及其亚群的作用机制、研究进展等作一综述。     

CD4+CD25highTr细胞在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的:比较非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血和肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)中CD4+CD25highTr细胞比例的变化与肺癌分期的关系,探讨患者局部肿瘤微环境和全身免疫状态与CD4+CD25+Tr细胞的关系.方法:分离NSCLC患者和健康人外周血单个核细胞(PBMC),取NSCLC患者新鲜肺癌组织抽提TIL.用流式细胞仪检测CD4+T细胞和CD4+CD25highTr细胞.结果:NSCLC患者PBMC中CD4+CD25highTr/CD4+T细胞比例较健康人显著升高(P<0.01).Ⅱ～ⅢA期NSCLC患者PBMc和TIL中CD4+CD25highTr/CD4+T细胞比例较Ⅰ期患者显著升高.结论:CD4+CD25highTr细胞可能参与肿瘤产生的宿主免疫抑制反应及其发展.     

胃癌患者肿瘤浸润淋巴细胞CD28表达的检测及临床意义研究

检测TIL(肿瘤浸润淋巴细胞)CD28在胃癌患者中表达及临床意义。选取我院2013年1月~2015年1月收治的43例胃癌患者,标记、检测边缘及肿瘤组织中TIL,并比较43例患者切缘与肿瘤组织中TIL CD8、CD28表达及临床各分期TIL CD8、CD28表达。与切缘组织相比,肿瘤组织CD8~-CD28~+、CD8~+CD28~+明显较低,差异有统计学意义(P<0.05);CD8~-CD28~+、CD8~+CD28~+随着胃癌分期进展,逐渐减少,与Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期相比,Ⅰ期CD8~-CD28~+明显较高,差异有统计学意义(P<0.05);与Ⅲ期、Ⅳ期相比,Ⅰ期、Ⅱ期CD8~+CD28~+显著较高,差异有统计学意义(P<0.05)。检测胃癌患者TIL中CD28表达,便于掌握患者疾病进展及免疫情况,指导临床治疗。     

原发性肝癌来源的肿瘤浸润淋巴细胞的生物学特性分析

目的：通过对肝癌来源的肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）生物学特性的分析,了解肝癌与机体之间的相关性,为进一步增强TIL的抗肿瘤作用提供一定的实验依据。材料与方法：取我所26例肝癌手术切除标本,分离培养淋巴细胞,用流式细胞仪对细胞表型进行测定,并以裸鼠为实验动物,观察TIL的抗肿瘤作用。结果：经rIL－2体外扩增后,大多为成熟的CD3 T细胞,百分比为86.31％±13.08％,CD4 ／CDS 的比率小于1。TIL中CDlla阳性细胞比例为7454％±16,93％,而LAK细胞的CD11a阳性细胞比例为26.72％±15.73％,两者差异有显著性。在体内外实验中均观察到TIL的抗肿瘤作用。结论：1）肝癌TIL有肿瘤导向的相对特异性,细胞毒作用参与TIL杀伤肿瘤细胞;2）TIL易与靶细胞密切接触为TIL杀伤活性强的因素之一。     

肝细胞肝癌肿瘤微环境中功能耗竭CD8+T细胞脂代谢特征的观察

目的:探讨肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)肿瘤微环境中CD8~+T细胞耗竭与脂代谢的关系。方法:利用流式细胞分析、实时细胞能量代谢检测仪、实时PCR等方法检测HCC和癌旁组织中CD8~+T细胞脂代谢及功能相关蛋白或基因的表达;在此基础上分析其功能和脂代谢的关系。结果:HCC浸润的CD8~+T细胞具有以下特征:功能耗竭(干扰素-γ减少、程序性死亡分子-1表达升高);多个脂肪酸合成酶表达下调,脂肪酸含量下降;线粒体结构、功能受损(P0.05)。结论:HCC中浸润的功能耗竭CD8~+T细胞具有脂肪酸代谢异常特征。     

白介素12诱导肝癌肿瘤浸润淋巴细胞的实验研究

目的比较IL-12诱导肝癌肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)与常规用IL-2诱导的肿瘤浸润淋巴细胞的特异性杀伤力、增殖能力、细胞因子和细胞表型的改变.方法将20例原发性肝癌手术切除的癌瘤进行体外分离,分别用常规含IL-2的培养液和含IL-12的培养液以及IL-12+IL-2的培养液培养,诱导TIL的生长.培养10～14d测定细胞杀伤率、细胞因子、增殖能力及用流式细胞仪检测淋巴细胞亚群CD+3、CD+4、CD+8、CD+56的表达.结果①IL-12+IL-2组和单用IL-12组对自体肝癌细胞的细胞杀伤率比IL-2组明显增高(P＜0.001;P＜0.01),均具有极显著差异;②IL-12+IL-2组较IL-2组表达CD+3、CD+4、CD+8明显升高(P＜0.01);CD+56增多不明显,无显著差异(P＞0.05).③IL-12+IL-2组比IL-2组扩增能力明显增强(P＜0.05).④IL-12+IL-2组或IL-12组较IL-2组细胞因子IFN-γ和TNF-α水平明显增高.(P＜0.05).结论白介素12作为诱导剂诱导肝癌TIL可明显增强TIL细胞的特异性细胞毒作用且增殖能力明显增强.     

术前介入治疗对肝癌肿瘤浸润淋巴细胞生物学行为的影响

目的 探讨术前介入治疗对肝癌肿瘤浸润淋巴细胞的影响。方法 13例肝癌患者分成2组，7例接受术前介入治疗者为实验组，6例未接受术前化疗者为时照组。体外培养，检测TIL细胞、抗肿瘤活性、表型。结果 实验组TIL细胞在第2周达到高峰，至第3周平均扩增52倍，而对照组在第3周扩增达到高峰，平均扩增了12倍。术前介入化疗患者TIL细胞肿瘤杀伤活性增强。CD3^ 、CD4^ 、CD8^ 不同程度的增加。结论 术前介入化疗可缩短肝癌患者TIL细胞增殖时间，提高肿瘤杀伤活性。     

细胞因子诱导的杀伤细胞

正常人或患者外周血、骨髓单个核细胞/淋巴细胞中定期加入γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-2(IL-2)、抗CD3抗体(CD3mAb)经2～4周的诱导可获得大量的新型肿瘤杀伤细胞——细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer,CIK),增殖旺盛及肿瘤杀伤活性高,包含大量CD3~+CD56~+细胞。有关基础及临床研究证明,CIK细胞较细胞毒性T淋巴细胞(CTL)、淋巴细胞因子活化的杀伤细胞(lymphokine-activated killer,LAK)、肿瘤细胞浸润的淋巴细胞(tumer infiltrating-lym-phocyte,TIL)更适用于肿瘤的生物治疗。本文就CIK细胞的来源与生物学特征、对肿瘤细胞的杀伤及临床应用进行综述。     

晚期肺癌患者化疗后外周血T细胞CD_8~+CD_(28)~-的表达及意义

细胞免疫是机体抗肿瘤免疫的主要方式,而T淋巴细胞是细胞免疫中的主要效应细胞.宿主免疫功能下降,受抑制或免疫缺陷时,肿瘤的发病率就明显增高,而恶性肿瘤患者的免疫功能则往往受到抑制.本文采用流式细胞技术对晚期肺癌患者外周血中CD8+CD28- T细胞、CD8+CD28+ T细胞的表达情况进行检测,旨在探讨此类细胞在肺癌细胞免疫中所发挥的作用.     

肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群和自然杀伤细胞数目的变化及其临床意义

目的研究肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群和自然杀伤(NK)细胞数目的变化及其临床意义。方法采用流式细胞仪测定了52例不同类型肿瘤的患者外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞数目,与健康对照组相比较,同时测定88例肿瘤患者分为早、中期肿瘤患者与晚期肿瘤患者进行比较。结果与健康对照组相比,肺肿瘤患者CD3+T淋巴细胞、CD4+Th淋巴细胞、CD4+/CD8+(Th/Ts)均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);CD8+(Ts)显著增多,差异有统计学意义(P<0.05)。胃肿瘤患者NK细胞数明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。乳腺肿瘤免疫功能差异无统计学意义(P>0.05)。晚期肿瘤患者与早、中期肿瘤患者相较,CD3+T淋巴细胞、CD4+Th淋巴细胞、CD4+/CD8+(Th/Ts)均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论肺肿瘤患者细胞免疫功能低下,乳腺肿瘤的免疫功能没什么改变,胃肿瘤患者的抗肿瘤免疫力下降;肿瘤患者的机体免疫功能随肿瘤病情的发展逐渐下降。     

乳腺癌切片CD8+T细胞表达水平及肿瘤浸润淋巴细胞与患者病理特征的关系

目的 检验乳腺癌切片CD8⁺T细胞的表达水平,探讨肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)与乳腺癌患者病理特征之间的关联。方法 选取2020年10月至2022年10月陇南市第一人民医院收治的84例乳腺癌确诊患者为研究对象,所有患者均顺利完成手术治疗,且术后石蜡标本保存完好。采用免疫组化法检测乳腺癌切片中CD8⁺T细胞表达情况,对切片进行伊红染色(HE)法并检测TIL水平,分析CD8⁺T细胞表达水平、TIL检测结果与患者病理特征之间的关系。结果 TIL高水平、低水平患者的肿瘤分化程度、TNM分期、肿瘤大小、淋巴结转移、人表皮生长因子受体2(HER-2)受体阳性等指标差异均无统计学意义(均P>0.05),CD8⁺T阳性与CD8⁺T阴性患者的肿瘤分化程度、TNM分期、肿瘤大小差异有统计学意义(均P <0.05)。经Logistic回归分析,CD8⁺T细胞表达水平与乳腺癌患者的肿瘤分化程度、TNM分期之间存在关联(均P <0.05)。结论 TIL检测结果与乳腺...     

胰腺癌患者手术前后外周血淋巴细胞亚群和血小板变化

目的测定胰腺癌患者手术前后外周血淋巴细胞亚群和血小板(PLT)水平,并探讨其与胰腺癌患者临床病理参数的相关性。方法选取66例胰腺癌患者(胰腺癌组),以64名体检健康者作为对照组。检测所有对象淋巴细胞亚群[CD3~+T细胞、CD3~+CD4~+T细胞、CD3~+CD8~+T细胞、B细胞和自然杀伤(NK)细胞]及PLT水平,分析其与胰腺癌临床病理参数的相关性。结果与对照组相比,胰腺癌组术前外周血CD3~+T细胞和CD3~+CD4~+T细胞水平明显降低(P0.05),CD3~+CD8~+T细胞和PLT水平明显升高(P0.05);胰腺癌组术后CD3~+T细胞和CD3~+CD4~+T细胞水平较术前明显升高(P0.05),PLT较术前明显降低(P0.05);胰腺癌组术后与对照组之间CD3~+T细胞、CD3~+CD4~+T细胞、CD3~+CD8~+T细胞、B细胞、NK细胞和PLT水平差异均无统计学意义(P0.05);胰腺癌组术前外周血CD3~+T细胞、CD3~+CD4~+T细胞、CD3~+CD8~+T细胞、B细胞、NK细胞、PLT水平与患者年龄、肿瘤大小、肿瘤部位、有无神经浸润、分化程度无关(P0.05);外周血CD3~+CD4~+T细胞、PLT水平与胰腺癌不同组织分级、有无淋巴结转移有关(P0.05)。胰腺癌组术前外周血CD3~+CD4~+T细胞水平与PLT水平呈负相关(r=-0.44,P0.01)。结论胰腺癌患者细胞免疫功能术前处于被抑制状态,术后可基本恢复正常。胰腺癌患者术前淋巴细胞免疫异常与PLT水平、胰腺癌组织分级和淋巴结转移相关。     

消化系统肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞分析与临床意义

目的通过观察外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞活性在消化系统肿瘤患者中的表达,探讨消化系统肿瘤患者的细胞免疫功能状况及临床意义。方法采用流式细胞分析法对123例消化系统肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞进行检测,并与35例健康对照组比较。结果与健康对照组比较,消化系统各肿瘤组患者外周血总T细胞(CD3+)、T4细胞(CD3+CD4+)、NK细胞(CD3-CD16/56+)百分率下降(P<0.01);T4/T8(CD3+CD4+/CD3+CD8+)比值降低(P<0.05);T8细胞(CD3+CD8+)百分率明显升高(P<0.05);消化系统各肿瘤组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论消化系统肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞活性表达较健康对照组显著降低,表明消化系统肿瘤患者细胞免疫功能低下。检测消化系统肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞水平对评估患者的细胞免疫功能、监测抗瘤疗效和判断预后均具有一定的临床意义。     

肾癌TIL荧光-花环双标记研究

目的了解肾癌浸润淋巴细胞的类型、活化状况及机体抗瘤免疫状况。方法采用荧光-花环双标记和免疫组织化学法对肾癌TIL中CD3、CIM、CD8及反映活化的和HLA—DR抗原表达进行研究，同时取患者自身外周血（20例）及正常献血员（20例）作为对照。结果，TIL中主导细胞是T细胞（CD3＋），在TIL、A—PBL和N—PBL三者无差异；而CD4＋、CD8＋细胞二：者间有显著性差异。TIL中表达活化的DR＋CD3＋、CD25＋CD3＋、DR＋CD8＋、CD25＋CD8＋明显高于N—PBI，；和A—PBL无差异性。TIL中CD25＋CD3-、CW25＋CD4-、CD25＋CD8-及A—PBL中DR＋CD3-、DR＋CD4-、DR＋CD8-三组间均有差异。肾癌TIL原位组化显示，TIL呈弥散性浸润，缺乏典型的癌巢。结论荧光一花环双标记法，简单易行，是一种较具实用价值的淋巴细胞检测方法。     

胃癌组织中驻留CD8+T细胞的浸润程度及其意义

目的研究组织驻留CD8~+T细胞(CD103~+CD8~+T细胞)在胃癌组织中的浸润程度及分布特征,并分析其浸润程度与患者临床病理特征及预后的关系。方法采用组织芯片技术和免疫荧光染色法分别检测90例胃癌及相应癌旁正常组织中CD8~+T细胞及CD103~+CD8~+T细胞的浸润分布特征及程度,采用Wilcoxon秩和检验比较胃癌及癌旁正常组织中CD8~+T细胞、CD103~+CD8~+T细胞浸润程度及CD103~+CD8~+T细胞占CD8~+T细胞比率的差异,χ~2检验分析胃癌组织中CD8~+T细胞、CD103~+CD8~+T细胞浸润程度及CD103~+CD8~+T细胞占CD8~+T细胞比率与患者临床病理特征的关系,采用Kaplan-Meier生存分析法分析CD8~+T细胞、CD103~+CD8~+T细胞浸润程度及CD103~+CD8~+T细胞占CD8~+T细胞比率与患者预后的关系,拟合Cox模型评价不同指标与患者预后的关系。结果胃癌组织CD103~+CD8~+T细胞浸润程度与癌旁正常组织比较,差异无统计学意义(P0.05)。Ⅲ～Ⅳ期胃癌患者中CD103~+CD8~+T细胞高度浸润的比率(69.09%,38/55)显著低于Ⅰ～Ⅱ期胃癌患者(91.43%,32/35),差异有统计学意义(χ~2=6.175,P=0.013)。CD103~+CD8~+T细胞浸润程度与患者其他临床病理特征相关性无统计学意义(P0.05)。Kaplan-Merier生存分析显示,CD103~+CD8~+T细胞高度浸润的患者总生存期较CD103~+CD8~+T细胞低度浸润的患者显著延长(HR=2.187,95%CI:1.062～4.500,P=0.033 6);多因素Cox比例风险模型显示,肿瘤直径(HR=2.031,95%CI:1.163～3.546,P=0.013)和CD103~+CD8~+T细胞浸润程度(HR=0.516,95%CI:0.285～0.934,P=0.029)均可作为胃癌患者的独立预后因素。结论 CD103~+CD8~+T细胞在胃癌组织中与良好预后有关,提示其在抑制胃癌发生发展过程中发挥重要作用,可作为胃癌患者预后评估的指标。     

人直肠癌组织中肿瘤浸润淋巴细胞的形态学观察

目的 :探讨人胃癌组织中肿瘤浸润淋巴细胞 (TIL )的形态学特征。方法 :采用免疫组织化学 ,光镜和电镜方法观察人直肠癌组织中肿瘤细胞浸润淋巴细胞的分布和形态学变化。结果 :肿瘤浸润淋巴细胞主要分布在癌周区 ,在病变早期 ,肿瘤浸润淋巴细胞数量较多 ,分布集中 ;在病变晚期 ,淋巴细胞数量较少 ,分布均匀。病变早期 TIL数量明显高于病变晚期 (P<0 .0 1)。电镜下 ,TIL大体可分为两种形态 :一种具有一般淋巴细胞的典型构造 ,核大 ,胞浆少 ,细胞器也较少 ;另一种 TIL核较圆 ,胞浆较多 ,内有丰富内质网、溶酶体、线粒体及颗粒。 TIL与肿瘤浸润树突状细胞 (TIDC)有接触。结论 :本试验提示直肠癌组织中 TIL数量多少与肿瘤的进展有关。 TIL与 TIDC关系密切。     

肿瘤浸润淋巴细胞过继免疫治疗肺癌

近年来,恶性肿瘤的过继免疫治疗有飞跃的发展,其中肿瘤浸润的淋巴细胞(Tumor Infiltrating Lymphocytes,TIL)作为一种新的抗肿瘤效应细胞,由于其抗肿瘤特异性强,被认为代表了机体对肿瘤的特异性免疫,研究表明:TIL是继淋巴因子激活的杀伤细胞(Lymphokine activedkiller cell,LAK)之后发现的又一重要免疫活性细胞,较LAK细胞作用强50～100倍,因而TIL在肿瘤的过继免疫治疗中的作用日益受到重视,在肺癌治疗方面有成功报道,本文对此作一简述。     

桂北地区恶性肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群和淋巴细胞亚群的相关性研究

目的探究桂北地区恶性肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群和淋巴细胞亚群的数值及其临床意义。方法选取184例肿瘤患者,分别设有鼻咽癌组94例,乳腺癌组32例,宫颈癌组36例,肺癌组22例,并选取了40例符合性别年龄区间的健康体检人员作为正常对照组,运用流式细胞仪检测肿瘤各组和正常组的T淋巴细胞亚群表面因子CD3~+、CD4~+、CD8~+细胞绝对计数和CD4~+/CD8~+比值,淋巴细胞亚群表面因子相对计数CD3~+%、CD56~+%、CD19~+%,并进行统计学分析,比较肿瘤组和正常组之间的差异。结果肿瘤组患者T淋巴细胞亚群细胞绝对计数CD3~+、CD4~+、CD8~+和正常组对比有显著差异(P=0.000),CD4~+/CD8~+比值,鼻咽癌有显著差异(P=0.000),乳腺癌(P=0.634)、宫颈癌(P=0.409)、肺癌(P=0.629)差异无统计学意义。淋巴细胞亚群相对计数与正常组对比,乳腺癌、肺癌差异无统计学意义,鼻咽癌CD3~+%(P=0.000)、CD56~+%(P=0.001)有显著差异,CD19~+%差异无统计学意义;宫颈癌CD3~+%(P=0.000)有显著差异,CD56~+%(P=0.094)差异无统计学意义,CD19~+%(P=0.235)差异无统计学意义。结论恶性肿瘤患者免疫功能异常,通过流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群、淋巴细胞亚群项目,对患者病情评估、身体免疫情况实时监测、后期治疗指导用药具有一定的临床应用价值。     

胃癌患者肿瘤浸润淋巴细胞CD28表达的检测及临床意义

目的探讨胃癌患者肿瘤浸润淋巴细胞CD28的表达及其临床意义。方法用三色荧光标记流式细胞术检测48例胃癌患者肿瘤组织及切缘组织的肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）。结果肿瘤组织TlLCD8＋CD28＋细胞、CD8-CD28＋细胞明显低于切缘组织（P〈0．01），CD8＋CD28-细胞则无统计学意义。肿瘤患者淋巴结转移后肿瘤组织TILCD8＋CD28＋细胞、CD8-CD28＋细胞明显低于未转移组（分别为P〈0．01，P〈0．05），CD8＋CD28-细胞差异无统计学意义。随着临床分期的进展，CD8＋CD28＋细胞、CD8-CD28＋细胞逐渐减少，其中CD8-CD28＋细胞临床期明显高于临床Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期（P〈0．05）；CD8＋CD28＋细胞临床Ⅰ期、Ⅱ期明显高于Ⅲ期、Ⅳ期（P〈0．05）；而CD8＋CD28-细胞差异无统计学意义。结论检测胃癌患者的TIL中的CD8和CD28的表达，对了解患者的免疫状况、疾病进展和指导临床对患者进行免疫调节治疗方面有一定的价值。