亚低温对脑梗死后AQP4表达及血脑屏障通透性的影响

目的 观察脑梗死后亚低温干预对大鼠水通道蛋白4(aquaporin 4,AQP4)表达及血脑屏障(blood brain-barrier,BBB)通透性的影响,探讨亚低温对缺血性脑水肿的作用机制.方法 线栓法制造大鼠局灶性脑缺血模型,同时给予亚低温治疗.用免疫组织化学方法检测AQP4和IgG的表达.用干湿重法检测脑水含量.结果 再灌注损伤后脑内AQP4蛋白水平迅速降低,至再灌注后12h达最低水平,至再灌注7d时接近正常水平.亚低温组AQP4、IgG表达及脑水含量均明显低于常温组.结论 ①脑梗死后,AQP4表达水平迅速下降,可能是机体的一种保护性反应;②亚低温能有效抑制脑梗死后AQP4的表达和血脑屏障通透性的增加.     

糖尿病对大鼠局部脑缺血再灌注损伤后血脑屏障通透性的影响

目的研究糖尿病对大鼠局部脑缺血再灌注损伤后血脑屏障通透性的影响。方法雄性SD大鼠120只,随机分为脑缺血组和糖尿病伴脑缺血组,每组60只大鼠。糖尿病模型用链脲佐菌素腹腔内注射制备,用线栓法制作局灶性脑缺血模型。观察各组大鼠神经行为学缺陷;分别用TTC染色法和伊文思蓝注射法检测大鼠脑梗死体积及BBB破坏的程度。结果糖尿病伴脑缺血组大鼠脑梗死体积及BBB开放程度均明显大于其他各组(P<0.05),神经功能损伤也较其他各组明显。结论糖尿病可引起血脑屏障通透性增加,可作为糖尿病对微血管损伤的一个敏感性指标。     

缺血后处理对大鼠脑缺血/再灌注后血脑屏障通透性的影响

目的 研究缺血后处理对大鼠脑缺血/再灌注后血脑屏障通透性的影响及可能机制.方法 大脑中动脉线栓法制作大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型.36只大鼠随机分为假手术组(Shame),单纯脑缺血/再灌注模型组(middle cerebral artery occlusion,MACO),缺血后处理模型组(MACO+postconditioning),每组12只大鼠.检测术后24 h各组大鼠脑组织含水量、伊文思蓝含量.结果 缺血后处理组在缺血/再灌注后24 h脑组织含水量、伊文思蓝含量均显著低于单纯缺血/再灌注组(P<0.01).结论 缺血后处理可以有效降低脑缺血/再灌注后血脑屏障破坏的程度,减轻血管源性脑水肿.     

局部亚低温对大鼠脑出血后血脑屏障的影响

局部亚低温疗法是一种运用物理降温方法将患者治疗区体温降到预期水平,从而治疗疾病的一种临床方法。由于脑出血致残率和病死率极高,严重影响患者的预后和生活质量且尚无有效的治疗措施,因此越来越受到临床医师的关注。近几年国内外动物实验都证实,局部亚低温对于减轻脑水肿、保护血脑屏障的完整性是一种有效的治疗方法,它可以通过增加紧密连接蛋白的表达、抑制炎性因子的释放而起到保护作用。     

亚低温对鼠脑缺血再灌注损伤保护作用的研究

在复制鼠脑缺血再灌注损伤模型的基础上，利用亚低湿作为治疗手段，观察亚低温对鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其对氧自由基的影响。结果发现：亚低温度（３３℃、３３℃）能降低脑缺血再灌注性损伤脑皮质的水肿程度，减少ＭＤＡ产生，保护ＳＯＤ活力，且以３０℃低温作用更为显著。结果提示：亚低湿对鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用，且随低温程度加深而增加；同时提示，抑制自由基产生，保护ＳＯＤ活力可能为亚低温保护作用机制     

沙土鼠脑缺血后早期亚低温对行为学及组织学损害的保护作用

目的 探讨沙土鼠脑缺血后早期亚低温干预对认知行为学及组织学损害的保护作用。方法 采用沙土鼠双侧颈总动脉无损伤扎闭法制作前脑缺血再灌注损伤模型，观察缺血后时程3h的亚低温对认知行为学及组织学损害的保护作用。结果 缺血后早期亚低温对脑缺血造成的认知功能障碍有保护作用，特别是对近期记忆功能的改善有帮助，组织学检查见海马CA1区锥体细胞损害明显减轻。结论 缺血后早期亚低温对脑缺血造成的认知功能障碍及组织学损害有保护作用，可以明显改善脑缺血造成的近期记忆障碍。     

亚低温复合山莨菪碱颈动脉灌注对大鼠脑缺血再灌注自由基的影响

探讨亚低温复合山莨菪碱颈动脉灌注对大鼠脑缺血再灌注损的影响。方法利用前脑缺血模型及动脉灌注技术，观测缺血再灌注后不同时间点ＳＯＤ、ＭＤＡ、ＮＯ、ＮＯＳ变化。结果亚低温及静脉复合用药能显著促进ＳＯＤ活性恢复、抑制ＮＯＳ活性与ＭＤＡ、ＮＯ值的升高；以亚低温复合大剂量山莨菪碱颈动脉灌注疗最佳。     

病变侧亚低温对大鼠局脑缺血再灌注后认知障碍及自噬蛋白表达的影响

目的 研究发现脑缺血再灌注后继发神经损伤与自噬系统密切相关,采用实验鼠进行对照研究观察亚低温对大鼠局脑缺血再灌注后认知障碍的影响。 方法 对36只雄性SD大鼠参照Longa线栓法制作大鼠左侧MCAO模型。设Control组、亚低温组各16只,另4只为假手术组,亚低温组于脑缺血后13~14 min给予亚低温,假手术组不干预;进行行为学检测;免疫组化检测各组脑内的BACE-1、LC-3表达;用SPSS 19.0统计软件行统计分析,P<0.05为差异有统计学意义。 结果 免疫组化结果:BACE-1在缺血再灌注24 h表达显著增高,至72 h左右达高峰(P<0.05),其后又随之下降,亚低温干预组各时间点表达与Control组差异无统计学意义(P>0.05);LC-3的表达:再灌注4 h增多,随再灌注时间的延长,其表达逐渐增多(P<0.05),亚低温干预组各时间点表达明显高于Control组(P<0.05);神经功能缺陷评分:假手术为0分,对照组再灌注24 h及再灌注1周差异无统计学意义(P>0.05),其余时间点差异均有统计学意义(P<0.05);Y迷宫结果显示:各个时间点与假手术组差异均有统计学意义(t=6.752,P<0.05)。 结论 亚低温对脑缺血后神经细胞的存活具有一定的保护作用,有利于缺血后认知障碍的恢复,这种保护作用的产生与亚低温促进半暗带区LC-3及BACE-1的表达有关。      

亚低温对脑缺血／再灌注大鼠皮质内氨基酸和自由基系统的影响

采用大脑中动脉线栓模型,将36只Wistar大鼠随机分为假手术组、缺血组、亚低温组,后两者含缺血3h组及分别再灌注1h、2h、3h组。可见低温组谷氨酸（Glu)、天门冬氨酸（Asp）、丙二醛（MDA）的含量较缺血组明显减少,而超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、r-氨苦丁酸（GABA）的含量明显增加。提示亚低温对氨基酸和自由基系统的影响是缺血脑保护的重要机制。     

亚低温对鼠脑梗塞灶周边葡萄糖利用率的影响

目的 :观察亚低温治疗对大鼠局灶性脑缺血再灌注模型梗死灶周边葡萄糖利用率 (localcerebralglucoseutilization ,LCGU)的影响 ,探讨其脑保护机制。方法 :8只大鼠随机分为对照组、亚低温组。采用大鼠大脑中动脉脑缺血 (middlecerebralarteryocclusion ,MCAO)再灌注模型 ,缺血 3h再灌注 2 1h。缺血 2 4h后处死动物 ,采用定量放射自显影技术测定各组缺血侧大脑半球缺血中心、梗死灶周边区及对侧大脑半球同源区的LCGU。结果 :与对侧同源区比较 ,两组皮质梗死灶周边LCGU未见升高 ,而两组皮质下梗死灶周边均有一LCGU升高区 (P <0 .0 5 ) ,但亚低温组LCGU升高显著低于对照组 (P <0 .0 5 )。与对照组比较 ,亚低温组对侧大脑同源区的LCGU明显低 (P <0 .0 5 )。结论 :再灌注期亚低温降低葡萄糖代谢率 ,减少能量消耗。     

灯盏花素对脑缺血再灌注小鼠明胶酶及血脑屏障通透性的影响

目的：通过检测脑缺血再灌注小鼠明胶酶A（MMP-2）、明胶酶B（MMP-9）的活性及脑组织中伊文思蓝的含量，探讨灯盏花素对脑缺血再灌注小鼠明胶酶及血脑屏障（BBB）通透性的影响。方法：复制脑缺血再灌注模型，并于术前15min腹腔注射灯盏花素注射液10mg／kg，采用明胶酶谱分析法检测脑组织海马区明胶酶的活性，同时经尾静脉注射2％伊文思蓝，检测脑组织伊文思蓝含量。结果：脑缺血再灌注后明胶酶（A、B）活性增加；灯盏花素组MMP-9活性明显低于脑缺血再灌注组，而灯盏花素对MMP-2作用不显著。脑缺血再灌注后4h起脑组织伊文思蓝渗出逐渐增多，48h达高峰，以后有下降趋势。灯盏花素组于术后伊文思蓝渗出明显低于相应时间的脑缺血再灌注组（P〈0．05）。结论：灯盏花素具有降低脑缺血再灌注小鼠明胶酶B的活性、降低血脑屏障通透性的作用。     

尼莫地平对脑缺血再灌注后大鼠血脑屏障通透性的影响

目的 研究尼莫地平对脑缺血再灌注后大鼠离屏障（ＢＢＢ）通透性的影响。方法 采用线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞的局灶性脑缺血模型。缺血１ｈ后再灌注,分别于血前及再灌注后静脉注射尼莫地平。采用免疫组织化学ＳＡＢＣ法,观察再灌注１２ｈ时,内生免疫球收Ｇ（ＩｇＧ）在脑组织中的表达,比较缺血前注射尼莫地平组,未注射尼莫地平组及再灌注后注射尼莫地平组三组大鼠脑组织中ＩｇＧ的表达水平,结果 未注射尼莫地平组大鼠,     

溶血磷脂酸对体外血脑屏障模型通透性的影响

目的 探讨溶血磷脂酸(LPA)对血脑屏障通透性影响及其可能机制.方法 将体外建立的血脑屏障模型随机分为空白对照组、LPA组和蛋白激酶C抑制剂(Ro31-8220)+LPA组.γ计数仪检测模型对125I-BSA的通过率;流式细胞仪检测PKC-α表达阳性的微血管内皮细胞(BMEC)比例;类鬼笔环肽染色观察BMEC的F-肌动蛋白变化;电子显微镜观察血脑屏障-紧密连接(BBB-TJ)改变;Western印迹法检测BBB-TJ内闭合蛋白5表达.结果 LPA组125I-BSA通过率(364 cmp±15cmp)和PKC-α阳性细胞率(77%±7%)均高于空白对照组和Ro31-8220+LPA组(184 cmp±10 cmp、223 cmp±9 cmp,42%±4%、52%±3%,均P＜0.01);闭合蛋白5表达则低于空白对照组和Ro31-8220+LPA组(0.353±0.04、1.00±0.03、0.574±0.07,均P＜0.01),同时LPA使BBB-TJ开放、F-肌动蛋白重组.结论 LPA可促使BBB-TJ开放,增加血脑屏障通透性,其机制可能与PKC-α信号途径激活进而促使闭合蛋白5表达下调以及F-肌动蛋白重组有关.     

Effect of anisodamine on changes of blood-brain barrier permeability following brain injury in rabbits

The changes of blood-brain barrier(BBB)permeability following brain injury werestudied quantitatively by using colloidal gold(CG)particles of various sizes as tracers in 57 rab-bits.In addition,water content in brain tissues was determined.The brain-injured rabbits re-ceived intravenous injection of anisodamine in a dose of 0.3 mg/kg BW at 5rain or 3h after braininjury,and the effect of anisodamine on aherations of BBB permeability and water content of thebrain tissue after brain injury was investigated.The results indicated that an increase of BBBpermeability began at 30min after injury with only a few of 5nm CG tracers present in the endo-cytic pits and endothelial microvilli,and there were 10nm CG tracers passing through the BBB at3 h after brain injury.The increase of BBB permeability reached its peak at 6 h after brain in-jury.More 15nm CG tracers penetrated the BBB by way of pinocytotic vesicule transportationand opening of tight junctions between endothelial cells.The water content in the brain tissueincreased,which was closely correlated to the above-mentioned EBB permeability and giving ad-vantages to the treatment of traumatic brain edema in the present study.     

山莨菪碱对脑损伤后血脑屏障通透性变化的影响

选用57只家兔,采用各种不同大小的胶体金(CG)微粒示踪,研究脑损伤后血脑屏障(BBB)通透性变化,并检测脑组织水含量。同时给予脑损伤兔静脉注射山莨菪碱(654—2).剂量为0.3mg/kg.观察其对脑损伤BBB通透性及脑组织水含量变化的影响。实验结果表明,脑损伤后30min BBB通透性已升高,有5nmCG微粒进入内皮小凹和微绒毛;伤后3h,10nmCG透过BBB.伤后6h.BBB通透性增高达高峰,较多15nmCG以胞饮转运或经开放的内皮细胞紧密连接处透过BBB入脑.脑组织水含量明显升高。与BBB通透性变化直接相关。山莨菪碱具有显著地降低BBB通透性的作用.有利于外伤性脑水肿的治疗。     

中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂对颅脑创伤大鼠血脑屏障通透性和脑水肿的影响

目的：探讨中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）抑制剂对颅脑创伤（TBI）大鼠血脑屏障（BBB）通透性改变和脑水肿的影响。方法将99只大鼠分为对照组、TBI组和干预组（分为6、24、48、72、168 h亚组）,复制大鼠液压打击模型,干预组给予西维来司钠,分别测定各组脑组织NE的浓度、BBB通透性和脑组织含水率,并进行比较分析。结果 TBI组和干预组大鼠脑组织NE浓度、BBB通透性和脑组织含水率在各时间点都高于对照组,干预组的NE浓度在24、48、72、168 h低于TBI组,BBB通透性和脑组织含水率在48、72、168 h低于TBI组（P＜0．05）。结论西维来司钠能抑制TBI大鼠脑组织NE的释放,降低BBB的通透性并减轻脑水肿发生,表明西维来司钠对大鼠TBI继发性损伤有保护作用。     

低灌注时水通道蛋白-4在血脑屏障通透性升高中的作用

目的 探讨慢性低灌注时,水通道蛋白-4(aquaporin-4, AQP4)的表达与构型变化在血脑屏障(blood-brain barrier, BBB)通透性增高中的作用。方法 Wistar大鼠采用双侧颈总动脉结扎术(2-vessel occlusion, 2VO)建立慢性低灌注模型,测定2VO术后不同时间点脑组织伊文思蓝(evans blue, EB)含量,评价BBB通透性,RT-PCR和Western印迹法测定不同时间点AQP4 mRNA及蛋白水平表达,免疫荧光双标法观察AQP4的构型变化。结果 2VO术后早期,BBB通透性迅速升高,AQP4 mRNA和蛋白表达水平与BBB通透性变化趋势一致,均在术后3d时达到高峰,1、2周时仍显著升高(P<0.01),随着慢性缺血时间的延长,无论是BBB通透性还是AQP4 mRNA和蛋白表达水平均逐渐降低,至3个月时与假手术组相比,差异无统计学意义。而AQP4的功能构型OAPs与BBB通透性变化趋势呈负相关,2VO术后早期AQP4与GFAP共定位明显减少,随后逐渐增多,术后3个月时恢复至正常水平。结论 慢性低灌注状态可引起BBB通透性升高,AQP4的表达与构型改变与BBB通透性密切相关。     

化痰通络法对急性脑梗死大鼠溶栓后血脑屏障通透性及海马内皮细胞超微结构的影响

目的 观察化痰通络法对急性脑梗死大鼠重组组织型纤溶酶原激活物( rt-PA)溶栓后神经功能缺损评分、血脑屏障通透性及海马内皮细胞超微结构的影响,为化痰通络法防治急性脑梗死溶栓后出血转化提供实验依据.方法 选择健康雄性SD大鼠120只分为6组,即假手术组、模型组、rt-PA组、低剂量中药组、中剂量中药组、高剂量中药组(每组又分为6h、24h、3d、7d四个时相),采用自身栓子法制备大脑中动脉栓塞(MCAO)模型大鼠,rt-PA组及中药组分别给予尾静脉注入rt-PA及联合3种不同剂量化痰通络中药干预.根据不同观察时相对大鼠进行神经功能缺损评分(Bederson's评分),采用依文思蓝染色(EB染色)检测血脑屏障(BBB)通透性,并通过电镜对大脑海马缺血区内皮细胞超微结构进行观察.结果 1.Bederson's评分:与模型组相比,rt-PA组、低剂量中药组、中剂量中药组、高剂量中药组神经功能缺损评分明显降低(P＜0.01);与rt-PA组相比,以rt-PA联合化痰通络法中剂量组、高剂量组神经功能缺损评分降低最为明显(P＜0.05).2.EB染色:与模型组相比,rt-PA组、低剂量中药组、中剂量中药组、高剂量中药组EB含量均明显减低(P＜0.01);与rt-PA组[6h:(236.72±79.79) ng/g;24h:(229.72±22.18) ng/g;3d:(163.34±24.45)ng/g;7d:( 133.21±25.09) ng/g]相比,以化痰通络法联合rt-PA中剂量组[6h:(121.63±33.27) ng/g;24h:(153.78±60.67) ng/g;3d:(76.05±27.11 )ng/g;7d:(72.97±25.81) ng/g]、高剂量组[6h评分( 123.11±23.65) ng/g;24h评分(138.36±52.36) ng/g;3d评分(83.00±32.00) ng/g;7d评分(75.06±13.97) ng/g]EB含量降低最为明显(P＜0.01).3.电镜观察:与模型组相比,治疗组均起到保护内皮细胞的作用,其中以rt-PA联合化痰通络法高剂量组24h时相内对内皮细胞的保护作用最好,rt-PA联合化痰通络法中剂量组对3d和7d的内皮细胞形态保护为最佳.结论 rt-PA联合化痰通络法溶栓可以保护溶栓后血脑屏障完整性及海马缺血区微血管内皮细胞,针对溶栓后不同时相调整中药的用药浓度,可以起到更好的效果.     

亚低温对大鼠急性脑损伤后凝血功能的影响

目的: 探讨急性脑损伤亚低温治疗对凝血功能的影响. 方法: 观察大鼠脑损伤亚低温治疗后凝血酶原时间(PT)、部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)和纤维蛋白原(FIB)的变化. 结果: 亚低温组在6 h内PT、APTT、TT较其他组延长, 6 h后快速复位;而脑损伤组PT、APTT及TT在6 h后呈现降低趋势,随后逐渐升高. 亚低温组FIB值于伤后6 h内呈下降趋势,6 h后回升. 脑损伤组FIB值在6 h内呈升高趋势,6 h后下降. 结论: 颅脑损伤早期可致机体的高凝状态,亚低温是颅脑损伤后高凝状态的有效治疗手段.