大鼠局灶性脑缺血再灌注后iNOS的表达时程及行为学变化

目的观察大鼠局灶性脑缺血再灌注后不同时间点iNOS表达及行为学变化。方法线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞再灌注模型,术后不同时间点进行神经功能缺损评分,并动态检测iNOS活性变化。结果缺血后6h大鼠神经功能缺损程度最严重,iNOS表达在缺血后6h开始出现,缺血后48h达峰,7d时基本降至基线水平。结论由iNOS产生的NO参与了脑缺血再灌注后的迟发性病理损伤过程。     

亚低温对大鼠局灶性脑缺血再灌注后不同脑区iNOS表达的影响

目的 探讨亚低温对大鼠局灶性脑缺血再灌注后不同脑区诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响.方法 雄性SD大鼠,随机分为假手术组、常温缺血组和亚低温组.采用线栓法制作大脑中动脉闭塞再灌注模型,于缺血后48h,观察不同组间组织形态学变化,检测不同脑区iNOS蛋白表达、iNOS活性和产物NO含量.结果 常温缺血后48h,纹状体和皮质均检测到iNOS活性升高和免疫阳性反应,且皮质缺血半暗带区iNOS免疫反应明显强于纹状体和皮质缺血核心区.亚低温明显缩小梗死面积,抑制皮质和纹状体iNOS活性,明显下调半暗带区iNOS蛋白表达,减少NO产生.结论亚低温可能通过减少半暗带区iNOS蛋白表达,抑制iNOS活性,减少NO产生而起到脑保护作用.     

PPARγ激动剂对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察PPARγ激动剂对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤(I/R)的保护作用,并对其作用机制进行初步探讨。方法复制大鼠大脑中动脉阻塞再灌注模型(MCAO/R),分别采用TTC染色法、神经功能缺损评分法观察PPARγ激动剂对大鼠脑梗死体积和行为学评分的影响,同时观察PPARγ激动剂对脑组织形态学和丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活化和一氧化氮(NO)含量的影响。结果PPARγ激动剂能够降低I/R大鼠脑梗死体积和行为学评分,减轻受损大鼠皮层脑组织的病理改变,抑制脑组织中MDA的生成、提高SOD的活性、抑制iNOS活性、降低NO含量。结论PPARγ激动剂对大鼠脑缺血再灌注损伤有一定保护作用,其作用机制与增强SOD活性,抑制脑组织中iNOS活性、降低NO和MDA含量及减轻I/R中氧化损伤有关。     

人工合成E-选择素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后脑组织一氧化氮合酶表达的影响

目的 探讨人工合成E-选择素对大鼠局灶性脑缺血/再灌注（I/R）损伤后脑组织一氧化氮合酶（NOS）及血清一氧化氮（NO）含量的影响.方法 采用改良的Zea Longa法建立脑I/R损伤模型.66只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和人工合成E-选择素治疗组（治疗组）.治疗组大鼠采用股静脉注射人工合成E-选择素10 mg·kg-1.应用硝酸盐还原法测定血清中NO含量和免疫组化法检测缺血区脑组织神经型一氧化氮合酶（nNOS）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）阳性细胞数.结果 ①NO：以对照组NO含量为正常生理数据,模型组脑缺血2h/再灌注2～24h NO含量呈上升趋势,24 h时达高峰,72 h有所降低但仍高于对照组,各时间点与对照组比较明显增高（P＜0.01）;治疗组NO变化趋势同模型组,NO含量较模型组减少（P＜0.05）,较对照组增多（P＜0.01）.②NOS：以对照组nNOS、iNOS阳性细胞数为正常生理数据,模型组nNOS阳性细胞在脑缺血2h/再灌注2h后开始表达,12h达高峰,至24h开始降低,各时间点与对照组比较明显增高（P＜0.01）;模型组iNOS阳性细胞在脑缺血2h/再灌注2h开始出现,并持续增多,随时间延长呈上升趋势,24h达高峰,至72 h出现下降,各时间点与对照组比较明显增多（P＜0.01）;治疗组各时间点nNOS、iNOS阳性细胞变化趋势同模型组,但较模型组减少（P＜0.05）,较对照组增多（P＜0.01）.结论 大鼠脑I/R损伤后脑组织NOS活性表达增多,NO浓度升高导致脑组织损伤;人工合成E-选择素通过降低NOS表达,减少NO释放、减轻炎症反应和脑I/R损伤,起脑保护作用.     

大鼠急性局灶性脑缺血再灌注脑组织NO含量和NOS活性的变化

目的探讨一氧化氮（ＮＯ）和神经元型ＮＯ合酶（ｎＮＯＳ）是否参与急性局灶性脑缺血再灌注的发病机理。方法采用栓红法建立大鼠大脑中动脉阻塞（ＭＣＡＯ）模型,观察脑组织ＮＯ含量和一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性的变化及ｎＮＯＳ抑制剂７－硝基吲唑（７－ＮＩ）对再灌注期两者的影响。结果缺血３０分种ＮＯ含量和ＮＯＳ活性显著升高,缺血３小进两者下降;再灌注３０分种ＮＯＴ和ＮＯＳ再次升高,而再灌注３小时两者又下降。７－Ｎ     

亚低温对大鼠局灶性脑缺血再灌注后半暗带区iNOS诱导细胞凋亡的影响

目的通过研究亚低温对大鼠局灶性脑缺血再灌注后诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达和细胞凋亡的影响，探讨亚低温脑保护的可能机制。方法雄性SD大鼠54只随机分为假手术组、常温缺血组和亚低温组。线栓法制备大脑中动脉闭塞再灌注模型。于缺血后48h取脑组织，邻片行HE染色，检测各组不同脑区iNOS蛋白表达和细胞凋亡情况，免疫双重染色研究iNOS蛋白表达与细胞凋亡间的关系，同时行NO含量测定。结果常温缺血组皮质缺血半暗带（IP）区iNOS免疫反应较强，TUNEL阳性细胞也主要位于皮质IP区，免疫双重染色发现TUNEL阳性细胞中存在着iNOS蛋白表达。亚低温组IP区iNOS蛋白表达明显下调，NO产生减少．IP区细胞凋亡的数目也减少。结论亚低温可能通过抑制IP区iNOS蛋白表达，减少NO产生．阻遏细胞凋亡，从而起到脑保护作用。     

颈交感神经干离断对局灶性脑缺血再灌注后大鼠海马iNOS表达的影响

目的采用颈交感干离断（TCST）模拟星状神经节阻滞，观察其对局灶性脑缺血再灌注损伤（CIRI）大鼠脑梗死容积及海马诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达等的影响，并探讨其脑保护作用的机制。方法将大鼠随机分成实验组（A组）、对照组（B组）和假手术组（C组）；采用线栓法行大脑中动脉栓塞（MCAO）制作大鼠局灶性CIRI模型，A组于TCST后即行MCAO，2h后再恢复灌注；B组为单纯CIRI组；C组仅完成与A组相似的手术步骤但不造成MCAO、不行TCST；再灌注24h后观察各组大鼠神经行为学评分、脑梗死容积及海马iNOs的表达变化。结果A组大鼠脑梗死容积和神经行为学评分均低于B组（P〈0．05）；与A组、C组相比，B组大鼠海马iNOS的表达增加（P〈0．05），而A组与C组间无显著差异（P〉0．05）。结论TCST可通过下调大鼠海马iNOS的表达而对局灶性CIRI发挥脑保护作用。     

七叶皂苷钠对脑缺血再灌注损伤大鼠MG、iNOS表达的影响

目的观察七叶皂苷钠对大鼠脑缺血再灌注损伤后小胶质细胞(MG)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响,探讨其脑保护作用的可能机制。方法将SD大鼠随机分为假手术组、对照组、七叶皂苷钠组。改良线栓法制备建立局灶性脑缺血-再灌注动物模型(MCAO模型),分别于手术后1d、3d、7d免疫组化法观察大鼠海马一区OX-42及iNOS的表达情况。结果对照组、七叶皂苷钠组3d时OX-42达峰,7d时明显降低;iNOS 1d达峰,3d明显下降,7d时接近正常。七叶皂苷钠组优于对照组(P<0.05)。结论七叶皂苷钠可能通过抑制小胶质细胞的活化和iNOS的表达,对大鼠脑缺血再灌注损伤发挥脑保护作用。     

脑缺血再灌注损伤后一氧化氮合酶表达变化及知母总皂苷对其影响

目的观察脑缺血再灌注损伤后3型—氧化氮合酶(NOS)在脑内表达的变化,了解知母总皂苷(SAaB)对它们表达的影响。方法大鼠灌胃给药7d,采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,观察大鼠神经功能损害,利用免疫组织化学法观察脑组织中3型NOS表达。结果缺血再灌注组大鼠表现出明显神经功能障碍,神经元型NOS(nNOS)含量明显升高,内皮型NOS (eNOS)仅轻度升高。SAaB低、高剂量治疗组大鼠神经功能障碍较轻,同时脑组织中nNOS表达明显降低,而eNOS的表达增强,经图像分析比较后显示各组表达强度差异具有统计学意义(P＜0．05)。结论各型NOS的表达变化在脑缺血再灌注损伤的机制中起着重要作用,推测SAaB因其减低nNOS表达同时增加eNOS表达的作用,而表现出一定的神经保护作用。     

环孢素A对大鼠急性脑缺血再灌注损伤小胶质细胞的活化及iNOS表达的影响

目的 观察环孢素A(Cyclosporin,CSA)对大鼠脑缺血再灌注损伤后小胶质细胞(microglia,MG)活化及诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)表达的影响,探讨其脑保护作用的可能机制.方法 将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、环孢素A组.改良线栓法制备建立局灶性脑缺血-再灌注动物模型,即大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,分别于手术后1 d,3 d,7 d,14 d免疫组化法观察大鼠海马一区OX-42及iNOS的表达情况,同时对大鼠神经行为学进行评分.结果 模型组、环孢素组1 d即有OX-42的大量表达,3 d时OX-42达到高峰,14 d时接近正常;iNOS 1 d达峰,7 d及14 d时接近正常.环孢素组OX-42、iNOS较模型组减少(P<0.05),且神经行为学评分优于模型组(P<0.05).结论 小胶质细胞的激活及iNOS大量表达和脑缺血-再灌注损伤密切相关,环孢素A可显著减少脑缺血再灌注损伤后小胶质细胞的激活和iNOS的表达,对大鼠脑缺血再灌注损伤有一定的保护作用.     

Changes in oxidative stress,iNOS activity and neutrophil infiltration in severe transient focal cerebral ischemia in rats

Oxidative stress, inducible nitric oxide synthase (iNOS) and neutrophils all contribute to post-ischemic brain damage. This study has determined the time courses of these three phenomena after ischemia in parallel with histological and functional outcomes. Ischemia was produced in rats by occluding the left middle cerebral artery and both common carotid arteries for 20 min. Regional cerebral blood flow (rCBF) rapidly decreased to 20% of its preischemic value during occlusion and stabilized at 60% following reperfusion. The striatal infarction was maximal 15 h after reperfusion (50+/-3 mm(3)), whereas the cortical infarction reached its maximum at 48 h (183+/-10 mm(3)). This drastic decrease in rCBF followed by incomplete reperfusion and massive infarction is, thus, extremely severe. The cortical infarction was strongly correlated with the neurologic deficit and loss of body weight. Oxidative stress, evaluated by the decrease in glutathione concentrations, appeared in the striatum at 6 h after reperfusion and in the cortex at 15 h. Calcium-independent NOS activity, considered as inducible NOS activity, was significantly enhanced at 24 h in the striatum and at 48 h in the cortex. Myeloperoxidase activity, a marker of neutrophil infiltration, was significantly increased at 48 h in both the striatum and cortex. These time courses show that the delayed iNOS activity and neutrophil infiltration that occur after the maturation of infarction in severe ischemia may not contribute to ischemic brain damage. By contrast, early oxidative stress may well be implicated in cerebral injury.     

二甲胺四环素对顺铂作用后耳蜗神经元中iNOS表达的影响

目的探讨二甲胺四环素对顺铂耳蜗神经元毒性的拮抗作用。方法体外培养出生3d的大鼠耳蜗基底膜,分别以顺铂以及顺铂联合二甲胺四环素作用耳蜗基底膜,应用免疫荧光染色方法观察螺旋神经节的变化及免疫蛋白印记方法检测iNOS蛋白表达情况。结果顺铂能够引起耳蜗神经元数目减少约30%,部分神经元形态变小并且不规则。预先应用二甲胺四环素,存活的耳蜗神经元数目明显多于单纯顺铂组;顺铂作用后耳蜗组织中的iNOS蛋白表达和NO含量明显增高(P<0.01),而联合应用二甲胺四环素,耳蜗组织中的iNOS蛋白表达和NO含量明显降低。结论二甲胺四环素可以通过抑制iNOS蛋白表达而减轻顺铂所致的耳蜗神经元损害。     

急性脊髓损伤后诱生型一氧化氮合酶免疫组化分析

目的探讨大鼠急性脊髓损伤后诱生型一氧化氮合酶(iNOS)活性表达变化的规律及其意义. 方法按改良的Gruner法将大鼠作成T9脊髓损伤模型,分别于伤后4 h、1、3、7、14 d取出损伤段脊髓,采用免疫组化法和免疫印迹分析检测iNOS活性的变化. 结果免疫组化显示:正常脊髓组织内iNOS的表达为(4.34±1.15)%,脊髓损伤后24 h表达上升为(9.03±3.73)%(P<0.05),伤后7 d表达最强为(47.57±8.62)%(P<0.01).免疫印迹结果显示正常脊髓组织扫描条带微弱,伤后24 h逐渐增强,伤后7 d扫描最强.结论 iNOS不参与正常脊髓组织的生理调节,而与脊髓损伤后的继发性炎症反应相关.     

Decreased neuronal nitric oxide synthase expression and cell migration in the peri-infarction after focal cerebral ischemia in rats

Neuronal nitric oxide synthase (nNOS) regulates neurogenesis in the normal developing brain, but the role of nNOS in neurogenesis of the adult ischemic brain remains unclear. The aim of this study was to investigate the temporal and spatial relationship between cell migration from the ependymal/subventricular zone (SVZ) to peri-infarction and nNOS expression in the rat. Ependymal/subventricular zone cells were prelabeled with fluorescence dye DiI. Focal cerebral ischemia was induced by occlusion of the left middle cerebral artery. At 1, 3, 7, 14 and 21 days after ischemia, the rats were killed in order to determine the number of migrating cells, the colocalization of DiI and nNOS as well as nNOS quantity in specific regions. Compared to non-ischemic control and 1 day post-ischemia, the number of DiI-labeled cells in the selected regions increased at 3 days and peaked 14 days following ischemia. During 3–7 days post-ischemia, none of the migrating cells expressed nNOS and decreased nNOS expression was observed in the regions where migrating cells passed through. These results suggest the possible association between ependymal/SVZ cell migration and decreased nNOS expression within the areas including the migrating routes towards the peri-infarction.     

垂体腺苷酸环化酶激活肽对大鼠脑缺血再灌注后诱导性一氧化氮合酶表达的影响

目的 探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注时氧化氮合酶(iNOS)在PACAP脑保护机制中的作用.方法 采用大脑中动脉线栓法建立局灶性脑缺血再灌注模型,对36只大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组和PACAP组,在大鼠脑缺血2h后进行24h、48h再灌注,应用免疫组化法检测脑组织iNOS的表达.结果 脑缺血再灌注后,与假手术组比较,iNOS的表达量显著增加,阳性细胞数分别为60.02±4.23、80.36±6.24,P<0.01;应用PACAP后与缺血再灌注组比较,iNOS表达的峰值明显降低,分别为30.47±5.24、40.56±4.84,P<0.01.结论 PACAP能抑制大鼠局灶性脑缺血再灌注时iNOS的表达,这可能是其脑保护作用之一.     

16Hz 130dB次声预处理对大鼠局灶性脑缺血的保护作用

目的观察次声预处理对大鼠大脑中动脉阻闭（MCAO）模型致脑缺血的保护作用。方法SD雄性大鼠随机分为三组（每组10只）：对照组、假次声预处理组和次声预处理组。次声预处理组大鼠行16 Hz 130 dB的次声作用2 h/d,连续作用7 d;假次声预处理组大鼠每日放入次声仓但不接受次声,亦连续7 d;对照组大鼠正常饲养。最后一次预处理后24 h时,三组大鼠分别做MCAO模型,再灌注24 h后处死动物,观察脑梗死容积及神经功能学评分。结果与对照组相比,次声预处理组大鼠脑梗死容积明显减小（P〈0.05）,神经功能学评分明显提高（P〈0.05）。而假次声预处理组大鼠脑梗死容积和神经功能学评分与对照组相比无明显差异（P〉0.05）。结论16 Hz 130 dB次声预处理可明显减轻大鼠脑梗塞的容积,改善神经功能学评分。     

VEGF和诱导型一氧化氮合酶在脑AVM中的表达

目的研究诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和血管内皮生长因子(VEGF)在脑动静脉畸形(AVM)中的表达;探讨一氧化氮(NO)在脑AVM发生发展中的作用。方法应用免疫组化的方法对36例脑AVM及其周围脑组织,8例正常脑血管及脑组织中的VEGF、iNOS的表达进行检测,并采用医学图像分析系统对其进行图像分析。结果①在脑AVM及其周围脑组织标本中VEGF、iNOS均呈阳性表达,与其在正常脑血管标本及脑组织中的低表达相比相差显著(P<0.01)。②VEGF和iNOS在脑AVM中表达呈正相关(P<0.01)。结论NO在VEGF介导的血管生成中起作用,iNOS可能和VEGF一起参与了AVM的发生、发展。