高血压大鼠红细胞膜钙泵功能障碍机理的初步分析

本工作比较自发性高血压大鼠(SHR)和肾性高血压大鼠(RHR)及对照大鼠红细胞膜Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶(钙泵)活性及其对CaM、TFP、川芎嗪和硝苯吡啶(Nifedipine、Nif)等的反应,目的是分析高血压时钙泵功能障碍的机理,并寻找能有效提高钙泵活性的药物,为高血压防治提供有效措施。 结果表明SHR及RHR基础钙泵活性明显低于相应对照大鼠钙泵活性;原因之一可能与高血压动物质膜钙泵对钙泵抑制剂TFP的敏感性增加有关,对RHR,川芎嗪作用很类似TFP。提示此药有CaM拮抗作用。Nif除了公认为钙通道阻断剂外,本实验表明对RHR它还有激活钙泵的作用。     

抗高血压因子对大鼠血管平滑肌钙内流的影响

实验观察了从原发性高血压病患者红细胞中提取的抗高血压因子(AHF)对自发性高血压大鼠(SHR)、肾性高血压大鼠(RHR)和正常血压的WKY大鼠和Wistar大鼠主动脉和肠系膜动咏平滑肌Ca~(2+)内流的影响。结果表明,SHR和RHR的肠系膜动脉Ca~(2+)内流显著高于主动脉;AHF可显著抑制SHR和RHR主动脉和肠系膜动脉Ca~(2+)内流,抑制作用呈剂量依赖性,且对肠系腆动脉Ca~(2+)内流抑制作用更明显;AHF也可抑制正常动物血管平滑肌Ca~(2+)内流。本工作提示,AHF的降压机制可能与其抑制血管平滑肌特别是小动脉血管平滑肌Ca~(2+)内流有关。     

细胞钠／钙交换可能参与高血压的发病机制

当前不论从组织水平,细胞水平还是亚细胞水平均证实血管平滑肌(VSM)细胞膜上存在着Na/Ca交换这一胞内Ca~(2+)调节机制。它可以利用Na~+的跨膜电化学梯度(g_(Na~+)来逆向转运Ca~(2+)。视Na~(2+)与Ca~(2+)电化学梯度的不同,它既可以介导Ca~(2+)进入细胞也可以将Ca~(2+)转运出细胞。 VSM细胞Ca~(2+)代谢的异常是高血压发病的一个重要原因。那么这一异常是否与Na/Ca交换有关呢?答案似乎是肯定的。在高血压病人的红细胞,自发性高血压大鼠(SHR)的红细胞或VSM细胞中Na~+与Ca~(2+)的含量均比正常对照明显增高。后者看来与Na~+,K~+-ATPase的抑制有关,因为不少证据显示高血压病人或动物血液中一种可以抑制Na~+,K~+-ATPase的内源性洋地黄类物质(endogenous digitalis)的水平升高。用高血压患者去蛋白     

食盐及钙对大鼠血压和红细胞膜ATP酶活性的影响

细胞膜各种离子在血压调节中的作用早被人们重视。有关红细胞膜Na~+、K~+、Ca~(2+)和Mg~(2+)等许多重要离子转运与高血压的关系,已成为80年代高血压研究的最新进展之一。     

细胞膜上钙转运分子机制的研究进展

Ca~(2+)浓度与细胞的代谢和细胞的功能具有密切的关系。在通常情况下,细胞外游离的Ca~(2+)浓度为10~(-3)M,细胞内游离的Ca~(2+)则为10~(-8)～10~(-7)M。为了维持细胞内如此之低的Ca~(2+)浓度,质膜上Ca~(2+)转运以及细胞内Ca~(2+)转运系统具有重要的作用。在10~3～10~4化学梯度(Ca_0~(2+)/Ca_i~(2+))范围和     

心房肽对高血压模型鼠（SHR）免疫细胞内钙离子浓度的影响

本文探讨了心房肽对自发性高血压大鼠免疫细胞内钙离子浓度的影响,结果表明,心房肽可直接促进大鼠胸腺、脾及淋巴结细胞内的钙离子浓度,亦能协同ConA促进大鼠脾细胞及T细胞内Ca~(2+)浓度的增加,但却不能影响B细胞的Ca~(2+)含量.心房肽还能协同IL-2促进经ConA诱导的大鼠淋巴母细胞内Ca~(2+)浓度的增加。同时发现自发性高血压大鼠免疫细胞心房肽所增加的Ca~(2+)浓度较正常血压对照鼠为低.     

腺嘌呤核苷酸对大鼠心脏肌浆网(SR)中钙的结合作用

肌浆网(SR)是控制肌肉收缩和舒张的重要环节。已知大鼠的心肌收缩和舒张特性不同于其它哺乳动物,据报道大鼠心肌SR转运钙的速度也比狗、兔、豚鼠的SR为慢,这究竟是动物种属差异还是方法学问题呢?为此,本文研究了ATP、ADP与大鼠心肌SR中钙的结合之间的关系和从新估价钙结合的测定方法。微孔过滤法是研究钙结合和转运的常用方法,以往文献报道的方法各不相同,作者发现在孵育时Ca~(2+)和ATP加入的次序会影响实验结果。若先与ATP孵育再加Ca~(2+)开始反应,则Ca~(2+)的结合偏低。大鼠心脏SR具有很高的由Mg~(2+)激活的ATP酶(1.37±0.16μMol.Pi/min/mg在25℃)的活     

高血压病家族史儿童血浆钙调素含量的变化

许多实验表明胞膜钙转运功能障碍与高血压发病密切相关,且这种障碍具有遗传倾向。程淮勇等发现有高血压病家族史儿童红细胞膜Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶活性较无高血压病家族史者明显低。为探讨红细胞膜Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶活性变化的原因,本实验测定了有和无高血压病家族史儿童血浆钙调素(CAM)含量。 观察对象 采用整群调查方法从北京石景山区二所小学5～6年级共262名(男115名,女147名)学生中选出有及无高血压病家族史儿童二组各15名,年龄11～13岁,男女之比     

两种新的血压调节物质—高血压因子与抗高血压因子研究进展

血压调节是一个十分复杂的生理过程,它除了有快速而短暂的神经调节和缓慢而持久的体液调节外,血管还始终发挥着自身的调节作用。高血压病的发生和发展主要是血压长期调节的紊乱,致使小动脉张力持续升高所致。其中体液因素具有重要作用。其证据是:(1)交叉灌流实验发现高血压动物的体液中存在着可以使正常动物血压升高的物质,例如将高血压动物的血浆注射到正常动物,可使后者许多组织细胞内钙离子(Ca~(2+)浓度升高,胞膜Na~+,K~+-ATP酶活性降低;(2)与自发性高血压大鼠(SHR)联体并生的正常大鼠也出现了在SHR观察到的许多现象,如血管反应性升高等;(3)近年来Wright及McCumbee等从SHR的红细胞及其他组织中提取出高血压因子及随后发现的抗高血压因子更证明了这一点。本文简要综述这两种新发现的血压调节物质的研究进展。     

红细胞抗高血压因子对大鼠红细胞膜Ca~(2+)·Mg~(2+)-ATP酶活性的影响

近年来本实验室从大鼠和人的红细胞中提取并基本上纯化了一种降压物质—抗高血压因子(Antihypertensive factor,AHF),对其理化特性、生理功能和作用机制进行了较深入和系统的研究。结果表明AHF的降压机制与抑制血管平滑肌(VSM)Ca~(2+)内流、降低胞内Ca~(2+)浓度和呈内皮依赖性的舒张VSM有密切关系。本文观察AHF对自发性高血压     

应用Fura-2/AM和Sulphinpyrazone测定大鼠海马细胞胞浆游离C~(2+)浓度

本研究进行了Fura-2/AM和Sulphinpyrazone测定大鼠海马细胞胞浆游离Ca~(2+)浓度([Ca~(2+)]i)的方法学探索,发现海马细胞可将Fura-2/AM外排和房室化,质膜有机阴离子转运抑制剂Sulphinpyrazone能阻断这些过程,且对细胞Ca~(2+)应答无不良影响,提高了检测的灵敏度。结论,Sulphinpyrazone可做为海马细胞[Ca~(2+)]_1测定的常规试剂。     

缺血等因素对大鼠心肌线粒体Ca^2＋转运的影响

本研究检测了体外缺血等因素对心肌线粒体Ca~(2+)转运的影响。结果表明,缺血明显抑制线粒体Ca~(2+)-ATP酶活性及~(45)Ca摄取率。缺血10分钟时,线粒体Ca~(2+)-ATP酶活性开始下降,40分钟时显著降低,~(45)Ca摄取率的变化也呈类似趋势。去甲肾上腺素及cAMP对线粒体Ca~(2+)-ATP酶活性,~(45)Ca摄取率无任何影响。无机磷对线粒体Ca~(2+)-ATP酶有轻微的抑制作用,二磷酸腺苷对谚酶活性有明显抑制作用,其IC_(50)值为2.5mmol/L。     

H_2S抑制ATP诱导的大鼠小胶质细胞活化及IL-1β的释放

目的:观察硫化氢(H_2S)供体硫氢化钠(Na HS)对三磷酸腺苷(ATP)损伤的大鼠小胶质细胞通透性、胞内Ca~(2+)浓度([Ca~(2+)]_i)及IL-1β释放的影响,探讨H_2S对ATP-P2X嘌呤信号通路的作用及其神经保护的分子机制。方法:取对数期形态结构及生长分化良好的大鼠小胶质细胞用于实验。Fura-2/AM荧光染料检测各组[Ca~(2+)]_i,细胞内YO-PRO-1荧光强度检测以反映膜的通透性,ELISA检测ATP-细菌脂多糖(LPS)激活的大鼠小胶质细胞IL-1β的释放水平。结果:随着ATP浓度的增加,大鼠小胶质细胞内YO-PRO-1的荧光强度显著增加,而给予Na HS预处理后细胞膜通透性明显降低,对YO-PRO-1的摄取明显减少(P0.05),胞内荧光强度明显减弱(P0.05)。ATP处理大鼠小胶质细胞引起[Ca~(2+)]_i迅速升高后缓慢下降形成持续时间较长的平台期。Na HS预处理虽不能改变[Ca~(2+)]_i的峰值,但可抑制平台期的形成(P0.05)。ATP与LPS联合作用可促进大鼠小胶质细胞IL-1β的生成和分泌,而Na HS预处理可明显逆转这一效应(P0.05)。结论:Na HS可降低ATP诱导的大鼠小胶质细胞膜通透性、Ca~(2+)内流和IL-1β释放,抑制该细胞的激活,提示嘌呤信号通路可能介导H_2S的细胞保护作用。     

川芎嗪对环核苷酸磷酸二酯酶的抑制作用

实验利用Ca~(2+)依赖性环核苷酸磷酸二酯酶(PDE)测定方法,观察川芎嗪拮抗钙调素(CaM)的作用。当川芎嗪浓度大于0.3mM时,能明显抑制CaM激活的PDE活性,其半抑制浓度(IC_(50))为6.5mM。在浓度大于4mM时,川芎嗪开始抑制PDE的基础活性。咪唑能减弱川芎嗪对PDE的抑制作用。     

三磷酸肌醇亦可使三磷酸肌醇敏感性钙通道失活

许多细胞外信号通过1,4,5-三磷酸肌醇(IP_3)激活细胞钙贮池膜钙通道使内钙释放和胞浆游离钙浓度[Ca~(2+)]i增加。生理条件下[Ca~(2+)]i不会持续升高,其机制除有细胞膜钙ATP酶作用外,同钙通道失活也有关。曾认为,Ca~(2+)-钙调蛋白复合物及Ca~(2+)可致通道失活,但本实验提示:IP_3本身也     

哌唑嗪对原发性高血压病人红细胞Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶和钙调素的影响

本实验观察了原发性高血压(EH)病人红细胞Ca~(2+)Mg~(2+)-ATP酶活性,红细胞和血浆钙调素(CaM)的变化及哌唑嗪对其影响。结果表明:EH病人红细胞基础和最大Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶活性显著下降,并与血压呈显著负相关;红细胞CaM活性也显著降低并与最大Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶活性呈显著正相关;经哌唑嗪治疗后,EH病人红细胞Ca~(2+),Mg~(2+)-ATP酶活性和CaM变化不显著,但血浆CaM有所降低。提示EH病人红细胞钙代谢异常与外周阻力增高有密切关系,哌唑嗪对细胞和体液CaM有不同影响。     

冻存对自发性高血压大鼠精子结构和顶体反应的影响

自发性高血压大鼠(spontaneous hypertension rat，SHR)作为公认的研究人类高血压病的动物模型，对其保种技术的要求越来越高。其中精子的冻存是极有前途的保种技术。但大鼠的精子冻存成功的报道几乎没有。本研究旨在探索冷冻对SHR精子结构和顶体反应的影响。目的：选择适合SHR大鼠精子的冻存保护剂，探讨冷冻对大鼠精子细胞膜完整性，     

降钙素基因相关肽对大鼠胃平滑肌的调控作用

目的:探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对大鼠胃平滑肌的调控作用。方法:贴块法原代培养大鼠胃平滑肌细胞,特异性平滑肌肌动蛋白α-actin免疫细胞化学鉴定。实验分CGRPⅠ组(10~(-7)mol/LCGRP)、CGRPⅡ组(10~(-8)mol/L CGRP)、CGRPⅢ组(10~(-9)mol/L CGRP)和干预组(10~(-6)mol/LCGRP 8-37)与空白对照组。图像分析系统测定大鼠胃平滑肌细胞长度;Ca~(2+)荧光指示剂测定细胞内Ca~(2+)浓度;CellTiter-Glo~试剂盒检测细胞内ATP含量。结果:CGRP可舒张胃平滑肌细胞,降低胃平滑肌细胞游离Ca~(2+)浓度及ATP含量。结论:CGRP通过受体介导直接参与胃平滑肌细胞松弛;CGRP可能通过降低胃平滑肌细胞游离Ca~(2+)浓度、ATP含量而发挥其调控作用。     

Thapsigargin在离体大鼠肠系膜血管平滑肌上对[Ca~(2+)]i的作用

作者研究了thapsgargin (Tg)对来自大鼠肠系膜动脉侧分枝的离散的单细胞的作用。Tg 150nM便产生短暂的[Ca~(2+)],增加。这种短暂的[Ca~(2+)],上升不受外Ca~(2+)离子的去除之影响。     

异莲心碱对小鼠离体气管平滑肌的舒张作用

目的:研究异莲心碱对高K~+预收缩小鼠离体气管平滑肌(ASM)的舒张作用及其机制。方法:利用张力换能器检测异莲心碱对高K~+诱导的ASM预收缩和Ca~(2+)内流的影响;利用膜片钳技术和钙成像系统分别检测异莲心碱对ASM细胞膜L型电压依赖性Ca~(2+)通道(LVDCC)电流以及细胞内Ca~(2+)浓度([Ca~(2+)]_i)的影响。结果:异莲心碱可显著舒张高K~+预收缩的ASM,且其舒张作用呈现浓度依赖性,当浓度为100μmol/L时最大舒张比达到(95.3±3.9)%。此外,利用膜片钳全细胞记录技术测量LVDCC电流,电流可被异莲心碱完全阻断;在高K~+诱导下气管平滑肌细胞中Fura-2的340/380 nm荧光比值稳定在0.63±0.10,而异莲心碱加入后比值显著下降至0.36±0.05(P0.01);在[Ca~(2+)]_i峰点加入异莲心碱,340/380 nm荧光比值从0.74±0.02迅速降至0.42±0.05(P0.01);异莲心碱抑制高K~+诱导的Ca~(2+)内流引起的ASM收缩。结论:异莲心碱可阻断小鼠离体气管平滑肌细胞LVDCC电流,LVDCC介导的Ca~(2+)内流停止,[Ca~(2+)]_i降低,导致ASM舒张,提示异莲心碱可能是潜在的气管舒张剂。