维甲酸诱导BALB／c近交系小鼠腭裂动物模型的实验研究

目的分析维甲酸（RA）在胚胎发育期间对胎鼠的致畸作用,建立维甲酸诱导腭裂动物模型的最佳剂量。方法将特定妊娠期BALB／c近交系小鼠分为对照组和实验组。实验组小鼠一部分在妊娠8d,10d,12d管饲RASOmg／kg,一部分在妊娠10d给予40mg／kg、50mg／kg和60mg／kg三种不同剂量RA;对照组小鼠在妊娠8d,10d,12d管饲等剂量玉米油。观察胎鼠腭裂比率,确定诱导腭裂形成的最佳作用条件。结果RA在不同的发育阶段均可诱导腭裂,妊娠第10天50mg／kgRA诱导腭裂的比率为93．75％（P〈0．05）,诱导腭裂形成的比率最高。结论RA诱导BALB／c近交系小鼠腭裂是一种较为理想的腭裂动物模型,其最佳剂量为妊娠第10天给予50mg／kgRA。     

Hp感染实验胃溃疡BALB／c小鼠动物模型

为了建立幽门螺杆菌（Hp）感染BALB／c小鼠动物模型,在小鼠胃大弯窦部粘膜下埋上带腐蚀性药物的丝线致胃溃疡,或用2号手术针穿过小鼠胃大弯致假溃疡,随后灌服经微生物酶学和PCR鉴定为Hp的菌液。结果,在灌服Hp后的17,65,72天,取小鼠胃粘膜做Hp条件培养,见有乳白色菌落生长。表明通过这两种方法均可使Hp定植于BALB／c小鼠胃粘膜上。     

清洁级BALB/c近交系小鼠常规生物学特性研究

目的建立BALB/c近交系小鼠常规生物学特性指标.方法采用日本光电MEK-5126血球计数仪、荷兰半自动生化仪、流式细胞仪及常规的实验方法检测.结果血液细胞计数、血液生化指标、体重、脏器重量、脏器指数等常规生物学指标结果比较均一;清洁级BALB/c近交系小鼠的血液细胞计数和血液生化指标同普通级BALB/c近交系小鼠比较差异显著;普通级的CD4^＋/CD8^＋指标雌雄之间及普通级与清洁级的CD4^＋/CD8^＋差异显著.结论清洁级BALB/c近交系小鼠具有比较稳定的生物学特性.     

放疗诱导BALB/c小鼠肾癌细胞的凋亡

目的研究放射治疗诱发BALB/c小鼠Renca肾癌细胞凋亡的特点及其调控机制,为肿瘤放射治疗提供实验依据。方法采用Annexin-V-FITC/PI法流式细胞仪检测不同剂量放疗后细胞凋亡率,建立BALB/c小鼠肾癌细胞肿瘤种植模型,采用PV免疫组织化学法检测肿瘤石蜡切片P53的表达及ELISA试剂盒检测细胞因子IL-2、IFN-γ的表达。结果①在一定照射剂量范围内,Renca细胞的凋亡率随剂量的增加而升高。②放疗组突变型P53蛋白表达率为(30.17±0.88)%,肿瘤组为(24.22±0.68)%,两组间有显著的统计学差异。③放疗组小鼠脾细胞分泌IL-2为(167.56±13.13)pg/mL,为肿瘤组小鼠分泌量(83.69±1.37)pg/mL的2倍,两组间有显著的统计学差异。放疗组小鼠脾细胞分泌IFN-γ为(1482.47±47.91)pg/mL,约为肿瘤组小鼠分泌量(211.02±35.98)pg/mL的7倍,两组间有显著的统计学差异。结论放疗可诱发Renca细胞凋亡,P53蛋白可能涉及本实验中的细胞凋亡通路。     

维甲酸诱导腭裂小鼠舌发育异常研究

目的：通过检测生肌决定因子基因家族成员Myf5和MyoD在维甲酸诱导腭裂小鼠舌肌发育中的表达,探究维甲酸是否在舌肌发育早期影响其肌向分化。方法建立维甲酸诱导腭裂小鼠模型,利用免疫组化染色法和实时定量PCR法,检测胚胎13天即舌肌发育早期实验组和对照组小鼠舌肌中Myf5和MyoD的分布和表达水平。结果免疫组化结果显示Myf5和MyoD在舌肌细胞的细胞核中表达,实验组Myf5和MyoD的蛋白表达均低于对照组,且差异有显著性意义（P＜0．01）。实时定量PCR结果显示实验组Myf5和MyoD的mRNA表达水平均低于对照组,且差异有显著性意义（ P ＜0．01）。结论 Myf5和MyoD的异常低表达提示了维甲酸可能直接导致舌肌发育和分化的延迟,进而导致腭裂的发生或使其表型加重。     

Pristane诱导BALB/c小鼠系统性红斑狼疮模型的建立

目的:建立Pristane诱导的BALB/c小鼠系统性红斑狼疮(SLE)模型。方法:雌性BALB/c小鼠随机分成2组,模型组单次腹腔注射0.5 ml Pristane,对照组注射等量的0.9%氯化钠注射液,注射前及注射后每月ELISA法检测血清抗dsDNA抗体和抗Sm/RNP抗体含量,Albustix试纸法检测尿蛋白含量,每月定期观察小鼠症状和体征。6个月后处死全部小鼠后解剖,肉眼观察腹腔脏器组织病变,并取病变组织及肾脏做病理学检查,观察其组织病理变化(HE染色法)及肾脏免疫复合物(IC)沉积情况(直接荧光染色法)。结果:模型组小鼠造模2个月后,血清抗Sm/RNP抗体和抗dsDNA抗体开始出现,并逐月增高,与同期对照组小鼠比较,3～6个月时血清抗Sm/RNP抗体和4～6个月时血清抗dsDNA抗体均明显增高(P0.01),且血清抗Sm/RNP抗体的增高较抗dsDNA抗体更为显著;尿蛋白(≥+)于造模后3个月时开始出现,6个月时显著高于对照组小鼠(P0.01);3个月时模型组小鼠开始出现关节病变,6个月时其阳性率达55%,明显高于对照组小鼠(P=0.004)。6个月后处死动物,解剖发现模型组大多数小鼠腹腔可见多少不等的脂肪肉芽肿结节;肾脏病理检查50%的模型组小鼠出现不同程度肾小球肾炎病变伴毛细血管壁大量IC沉积。对照组除1只小鼠在造模6个月时出现轻度蛋白尿(+)外,未见其他病变。结论:Pristane能成功诱发BALB/c小鼠SLE,且建立的SLE模型稳定可靠。     

乙肝病毒核酸疫苗诱导BALB/c小鼠特异性免疫应答

目的 现察舍乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)preS2S基因的核酸疫苗免疫小鼠后的特异性免疫应答.方法 将BALB/c小鼠随机分为4组分别肌肉接种pCMV-S2S、乙肝表面抗原(HBsA8)、空载质粒(pCMV)及生理盐水(NS).免疫组织化学法检测接种局部组织preS2S抗原的表达,乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测特异性CTL活性,ELISA法检测小鼠血清特异性抗体Anti-HBs.结果 pCMV-S2S组小鼠肌肉细胞中有较多量的preS2S蛋白表达,其它小鼠肌肉细胞中均未检出preS2S蛋白表达.pCMV-S2S组小鼠CTL活性为(32.10±1.93)%,明显高于各对照组(P＜0.05).pCMV-S2S组小鼠8周后Anti-HBs阳性率最高为42.9%.HBsAg组小鼠4周时Anti-HBs阳性率即达到100%.pCMV组及NS组小鼠血清中均未检测出Anti-HBs.结论 乙肝核酸疫苗pCMV-S2S能在小鼠体内表达preS2S蛋白,并能在小鼠体内诱生较强的特异性CTL活性,也能诱生一定程度的特异性体液免疫应答.     

免疫抑制BALB/c小鼠侵袭性白念珠菌感染动物模型的建立

目的 建立免疫抑制BALB/c小鼠侵袭性白念珠菌感染的动物模型.为研发新型靶向抗真菌药物提供依据.方法 对BALB/c小鼠腹腔注射环磷酰胺200 mg/kg,每日1次,连续2次,第4天经鼻腔灌注白念珠菌菌悬液50μl(107 cfu/ml),第7天取肺组织标本进行真菌直接镜检、培养、病理检查、(1,3)-β-D-葡聚糖...     

芥菜籽抑制DNFB诱导BALB/c小鼠变应性接触性皮炎的实验研究

研究芥菜籽对小鼠变应性接触性皮炎 (ACD)的抑制作用,探讨其可能的作用机理。方法将18只BALB /c小鼠随机分为模型组、芥菜籽组、正常组,模型组和正常组喂养普通饲料,芥菜籽组喂养含5%芥菜籽饲料。3周后,以2.4-二硝基氟苯(DNFB)诱导小鼠ACD模型,耳部激发24 h后,观察芥菜籽对小鼠耳肿胀度,组织病理改变,皮损处朗格汉斯细胞（LC）浸润、局部促炎细胞因子及血清IFN-γ等因子的水平。结果 芥菜籽能抑制 ACD 小鼠的耳肿胀度、降低皮损处LC浸润、降低IL-1β、TNF-α、IL-6 等炎症因子的表达（P<0.05）,但对血清 IFN-γ、IL-4、IL-17 水平没有影响（P>0.05）。 结论 芥菜籽对小鼠 ACD 有抑制作用,可能与其抑制LC的迁移及降低炎症因子有关。     

Pristane诱导BALB/c狼疮鼠模型的实验研究

目的建立系统性红斑狼疮小鼠模型,探讨环境因素在发病机制中的地位。方法雌性BALB／c小鼠30只,分为两组,造模组一次性腹腔注射Pristane 0．5mL,对照组一次性腹腔注射0．5mL生理盐水,注射前及注射后每月定期检测抗核抗体（ANA）、抗双链DNA（dsDNA）抗体,及随机尿蛋白定量,8个月时处死动物,观察肾脏HE染色及直接免疫荧光染色后镜下变化。结果造模组ANA和抗dsDNA抗体分别于造模3个月和4个月时开始出现18个月时,阳性率分别为87．5％和47．8％;62．5％的小鼠出现≥＋（300mg／L）蛋白尿;肾脏组织HE染色及直接免疫荧光染色见肾小球肾炎表现。对照组中各有1只小鼠分别为ANA、抗dsDNA抗体低滴度阳性;随机尿蛋白定量均≤＋;肾脏组织未见病理改变。抗dsDNA抗体与蛋白尿之间存在一定相关性（r=0．538,P=0．003）。结论Pristane成功诱导系统性红斑狼疮动物模型。     

球形幽门螺杆菌感染BALB/c小鼠动物实验研究

目的建立球形幽门螺杆菌(Hp)感染BALB/c小鼠的疾病模型并进行初步研究。方法禁食12 h后,分别于第0,3,6,9 d共4次以抗生素诱变后的球形Hp对SPF级BALB/c小鼠给予灌胃处理。于末次灌胃4周后禁食36 h取胃组织作细菌学(组织尿素酶试验、细菌培养)和病理学检测。结果球形Hp灌胃4周后,实验组BALB/c小鼠组织尿素酶试验阳性率达80%、Hp培养阳性率达100%,病理学检测结果显示70%实验组小鼠胃黏膜出现糜烂,与生理盐水对照组比较均有显著意义(P<0.05)。结论成功建立了球形Hp-BALB/c小鼠感染的疾病模型,证实了其在实验动物体内的可致病性。     

禽流感H5N1亚型病毒感染BALB/c小鼠的疾病动物模型

【目的】建立H5N1禽流感病毒感染BALB/c小鼠的疾病动物模型。【方法】将100μLH5N1禽流感病毒原液(ELD50为10-9/0.2mL)鼻腔接种BALB/c小鼠,设正常尿囊液组对照,接毒后14d内每隔24h观察一次,主要观测指标有:临床症状、体质量和体温变化、死亡率、病理变化、病毒分离。【结果】被感染的BALB/c小鼠的病程可以划分为前驱期(1～2d)、发作期(第3～7天)、恢复期(第8～14天),发作期接毒小鼠出现各种严重的临床症状,表现出极度消瘦,触之发凉,闭目,鼠尾苍白,出现大批死亡;接毒后第1d体温开始下降,第3～7天体温低于34℃,第8天体温开始缓慢恢复;接毒后第1天体质量开始下降,第6天体质量停止下降,开始缓慢增加;接毒组BALB/c小鼠累计的死亡率为73%;发作期接毒BALB/c小鼠病变最严重,小鼠各个脏器(肺、脑、心、肝、肾)出血、淤血、水肿、坏死等病理改变严重,同时伴有大量炎性细胞浸润,;接毒后可在小鼠的肺、心、肝、脾分离到病毒。【结论】本实验室建立的H5N1禽流感病毒感染BALB/c小鼠的模型在临床症状、体质量变化、死亡率、病理变化、病毒复制指标能达到禽流感病毒疾病模型的造模要求,...     

大蒜油抑制幽门螺杆菌感染BALB/c小鼠实验研究

目的：研究大蒜油对BALB／c小鼠感染H．pylori根除治疗作用，探索新的理想的抗H．pylori药物。方法：将建立H．pylori感染BALB／c小鼠模型60只分成3组，阴性药物对照组（20只）、大蒜油治疗组（20只）和感染模型对照组（20只）；另取无H．pylori感染BAIB／c小鼠20只为正常对照组，治疗1、4周后分别抽取10只剖杀，取其胃粘膜组织进行快速尿素酶实验、细菌学培养和组织病理学Warthin-Starry银染，观察小鼠H．pylori感染率、根除率和胃内定植情况。结果：大蒜油治疗组1周后有6只小鼠胃内的H．pylori被根除，根除率为60％（6／10），1个月后有7只小鼠胃内的H．pylori被根除，根除率为70％（7／10），两批小鼠总的根除率为65％（13／20），阴性药物对照组及感染模型对照组的小鼠胃内均有H．pylori生长；而无H．pylori感染的正常对照组未见H．pylori生长。结论：大蒜油治疗H．pylori感染小鼠疗效显著（根除率为65％）。无明显毒副反应。     

H9N2亚型猪流感病毒感染BALB/c小鼠动物模型的建立

目的建立H9N2亚型猪流感病毒感染BALB/c小鼠动物模型,为研究病毒致病机制提供模型动物。方法通过滴鼻的方法将H9N2亚型猪流感病毒感染BALB/c小鼠,观察小鼠的症状和组织病理变化。结果BALB/c小鼠的临床症状明显,病理变化典型。结论H9N2亚型猪流感病毒感染BALB/c小鼠的疾病模型成功建立。     

多肽诱导BALB/c小鼠自身免疫性心肌炎模型及鉴定

目的:以包含心肌球蛋白致病性抗原表位的人工合成多肽免疫BALB/c小鼠,建立实验性自身免疫性心肌炎动物模型。方法:FMOC法人工合成含心肌肌球蛋白抗原表位长度为14个氨基酸残基的多肽,经HPLC法纯化至纯度达95%以上并以质谱分析法鉴定。纯化多肽皮下免疫遗传易感BALB/c系小鼠,建立自身免疫性心肌炎模型。结果:88.9%(32/36)的实验组小鼠第14天出现心肌损伤,至第21天心肌损伤达高峰。心肌病理切片可见心肌层充血,间质单核细胞浸润明显并伴心肌细胞肿胀、坏死。血清抗心肌肌球蛋白自身抗体阳性,并伴肌钙蛋白I水平升高。结论:应用本方法可成功诱导BALB/c系小鼠发病,建立实验性自身免疫性心肌炎动物模型。     

DNCB致敏诱导BALB/c小鼠特应性皮炎模型的建立

目的探索建立1-氯-2,4-二硝基苯（DNCB）经皮肤致敏诱导BALB／c小鼠特应性皮炎（AD）模型的方法。方法将6只7周龄BALB／c小鼠随机分为3组（n=2）,常规饲养。3组小鼠分别接受1％＋0．2％DNCB溶液（A组）、1％＋0．1％DNCB（B组）和基质（橄榄油：丙酮=4：1）溶液（正常对照c组）处理。用上述溶液反复刺激小鼠的背部和耳廓皮肤,观察皮炎症状和皮肤病理等指标,并检测血浆总igE浓度。结果在首次致敏后的4周中,B组小鼠出现明显皮炎症状,A组小鼠出现轻微皮炎症状后恢复正常,C组无明显皮炎症状。B组小鼠的抓挠动作次数、皮炎症状评分显著高于A组和c组。皮肤病理观察显示B组棘层细胞增厚、炎症细胞浸润,其嗜酸性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞、中性粒细胞和肥大细胞较其它两组有显著差异。B组血浆总IgE浓度高于A、c两组,但样本例数过少,尚未得到统计学支持。结论先后用含1％和0．I％DNCB的丙酮一橄榄油溶液涂拭BALB／c小鼠皮肤能够成功建立AD模型。     

BALB/c近交系小白鼠冷适应过程中细胞免疫的动态变化

在BALB/c近交系小鼠冷适应过程中,以[~3H]-TdR参入为指标的脾淋巴细胞转化实验表明,低温对细胞免疫作用表现为规律性的动态变化,即波动期(1～3d)→稳定期(1～2wk)→免疫增强期(2wk以后)。     

BALB/c小鼠结肠癌肝转移模型建立

目的建立BALB/c小鼠结肠癌肝转移模型。方法以BALB/c小鼠为对象,随机分为3组,分别经腹腔脾脏内（分为保脾组和切脾组）、直肠粘膜内注射小鼠结肠癌CT-26细胞0.2ml（浓度为1×107 ml）,观察小鼠平均生存期、成瘤情况、肝转移率、肝脏转移肿瘤大小和其他脏器的转移情况。结果这3种方法均能建立大肠癌肝转移模型,切脾组小鼠平均生存期为（28±5）d,肝转移率为100%,均有肺、胃、膈肌转移及腹水形成,保脾组小鼠平均生存期为（30±5）d,肝转移率为95%,均有肺、胃、膈肌转移及腹水形成;直肠黏膜内注射组小鼠平均生存期为（20±5）d,肝转移率为30%,无肺、胃、膈肌转移及腹水形成。结论保脾组和切脾组比直肠黏膜注射组的成瘤率、转移率更高,小鼠平均生存期较长,同时也增加了其他脏器的肿瘤转移率,建模更稳定,观察期能更好地完成各项指标的评价。     

心肌肌凝蛋白诱导BALB/c小鼠发生自身免疫性心肌炎

目的:建立BALB/c小鼠实验性自身免疫性心肌炎模型.方法:采用差速离心、分级饱和硫酸铵沉淀和DEAE-Sephadex A-50离子交换层析纯化等方法自猪心中提取并纯化心肌肌凝蛋白,经SDS-PAGE和Western印迹方法鉴定.以此蛋白免疫遗传易感的BALB/c小鼠,建立自身免疫性心肌炎模型.结果:97％(35/36)小鼠在免疫后第14天出现不同程度的心肌炎病理改变,主要表现为心肌间质单个核细胞浸润、肌纤维排列紊乱和肌浆溶解.免疫鼠血清肌钙蛋白I水平升高,并出现较高滴度的抗肌凝蛋白自身抗体.结论:猪心肌肌凝蛋白可以诱导BALB/c小鼠出现典型的自身免疫性心肌炎.     

BALB/c小鼠遗传质量检测的新方法

目的比较随即扩增多态性方法（RAPD）、微卫星方法（STR）与生化标记方法对近交系小鼠遗传质量检测的差异,为近交系动物遗传质量控制提供一种分子生物学方法。方法提取近交系小鼠BALB/c基因组DNA,用6条RAPD引物和20对STR引物对其进行PCR扩增,用生化标记法检测13个位点。结果在6条RAPD引物中,引物2（p2）、引物3（p3）、引物5（p5）和引物6（p6）这四条引物扩增的条带出现差异,表现为不同的RAPD图谱;在20对STR引物中,引物2、4、10和11,这四对引物扩增的条带出现差异,表现为不同的STR图谱;13个生化标记位点中,过氧化氢酶-2（Ce-2）等6个生化位点发现杂合基因。结论RAPD和STR可用于验证生化标记方法的实验结果,并用于保证近交系动物的遗传质量。