维甲酸对脂肪源干细胞中生殖标记表达的影响

目的探索脂肪源干细胞(ADSCs)在维甲酸(RA)诱导下是否表达原始生殖细胞标记碱性磷酸酶(ALP)及生殖标记基因vasa。方法分离培养2个月龄SD雌性大鼠ADSCs,传至第3代进行成脂、成骨诱导和表面标记鉴定。将第3代ADSCs分别用10-5、10-6、10-7mol/L RA诱导7 d和14 d,采用ALP检测试剂盒检测各组ALP的活性水平。用RT-PCR方法检测10-5mol/L RA组Vasa mRNA表达。结果将第3代ADSCs分别用10-5、10-6、10-7mol/L RA诱导7 d的D520 nm值分别为0.59±0.04,0.27±0.07,0.15±0.03,对照组为0.07±0.01,诱导14 d的OD值分别为0.42±0.02,0.34±0.01,0.19±0.02,对照组为0.07±0.01,说明RA能显著性促进ADSCs碱性磷酸酶的表达(P<0.01)。第3代ADSCs用10-5mol/L RA诱导7 d Vasa mRNA的表达为阴性。结论第3代ADSCs在维甲酸诱导下能够表达原始生殖细胞标记碱性磷酸酶,但用10-5mol/L RA诱导7 d不能表达生殖标记基因Vasa。     

富血小板纤维蛋白对人牙髓干细胞增殖、凋亡 及碱性磷酸酶活性的影响

目的 探讨富血小板纤维蛋白（PRF）对人牙髓干细胞增殖、凋亡及碱性磷酸酶活性的影响及机制。 方法 从人牙髓组织中分离出人牙髓干细胞（hDPSCs）,hDPSCs 随机分为对照组及实验组,CCK8 实验检测PRF 刺激hDPSCs 第0、1、3、5 及7 天时细胞增殖情况;RT-PCR 检测PRF 刺激hDPSCs 第0、3、7 及14 天时 碱性磷酸酶（ALP）的mRNA 表达情况;流式细胞仪检测PRF 刺激hDPSCs 7 d 后细胞的凋亡情况,Western blotting 检测活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Cleaved Caspase-3）、p38、p-p38 蛋白表达。结果 实验组第1 天时细胞的增殖与对照组比较,差异无统计学意义（P >0.05）,第3、5、7 天时细胞的增殖均高于 对照组,差异有统计学意义（P <0.05）;实验组第3 天时ALP mRNA 表达与对照组比较,差异无统计学意义（P > 0.05）,第7 和14 天时ALP mRNA 表达均高于对照组,差异有统计学意义（P <0.05）;细胞的凋亡率及 Cleaved Caspase-3 蛋白、p-p38 蛋白表达实验组与对照组比较,差异有统计学意义（P <0.05）,实验组细胞的 凋亡率及Cleaved Caspase-3 蛋白表达均下降,p-p38 蛋白表达上调,p38 蛋白表达两组间比较差异无统计学意 义（P >0.05）。结论 PRF 可促进hDPSCs 的增殖,上调ALP 的mRNA 表达,抑制其凋亡,其机制与激活p38 信号通路有关。     

碱性磷酸酶在脓毒症中的临床意义

碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)是Suzuki等在1907年首先发现的,生理作用是非特异性水解磷酸单酯键,最适pH值为8.6￣10.3,因此称为碱性磷酸酶,临床上长期用作诊断肝、胆和骨组织疾病的实验室参数之一[1,2]。近年来研究发现,ALP在脓毒症患者发病机制和治疗方面有新的作用。本文就此方面的研究进行综述。     

白细胞增多的不同疾病患者NAP积分的检测与意义

目的探讨白细胞增高的疾病患者的中性粒细胞碱性磷酸酶（NAP）积分的变化及其临床意义。方法采用Kaplow偶氮偶联法对140例外周白细胞增高患者的EDTA抗凝血,其中包括32例感染性疾病患者、34例手术后患者、25例肿瘤患者（使用集落刺激因子后）、24例妊娠妇女以及25例危重患者,对他们进行中性粒细胞碱性磷酸酶染色,并显微镜镜检计算其积分。另外,选择25例健康体检者作为对照组。结果中性粒细胞碱性磷酸酶染色在感染性疾病患者、手术后患者、肿瘤患者、妊娠妇女积分均高于正常,而在危重患者积分却低于正常。结论在不同疾病患者中性粒细胞碱性磷酸酶积分是不同的,可以将其作为病情观察及疗效的判断指标。     

妊娠期血清碱性磷酸酶活性的变化和意义

目的探讨女性妊娠各期血清碱性磷酸酶(ALP)活性的变化及临床意义。方法检测1362例不同孕期女性的血清ALP活性(实验组)和150例育龄健康未孕女性的血清ALP活性(对照组),对两组数据进行统计学分析。结果早孕组与对照组比较,ALP活性差异无统计学意义(P>0.05),中孕组与对照组ALP活性差异有统计学意义(P<0.05),晚孕组与对照组ALP活性差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论正常妊娠女性的血清ALP活性在中孕后随着孕周的增加而上升,可能和骨代谢、胚胎的发育、母体肝脏代谢和胎盘功能有关系。     

钙营养不良患儿骨源性碱性磷酸酶活性的变化

1　临床资料　钙营养不良和缺钙患儿 87(男 38,女 4 9)例 ,年龄 0 .5～ 12 .0 (平均 6 .2 )岁 .取末梢或静脉血进行骨源性碱性磷酸酶活性 (NBAP)、血清总钙 (Ca)、ALP测定 .小儿型骨源性碱性磷酸酶活性试剂盒 (NBAPKIT) ,由北京中生生物工程高技术公司提供 .以NBAP >4 μkat·L-1为阳性 .血钙测定为比色法 ,以Ca <2 .7mmol·L-1为阳性 ;ALP测定为动力学法以ALP >2 .2 1μkat·L-1为阳性 ;二者均采用Hitachi70 6 0型全自动生化分析仪 ,试剂由上海复星长征医学科学有限公司提供 .发现血钙减少 33例 (38.5 % ) ,ALP增高 5 9例 (6…     

碱性磷酸酶(ALP)试剂对血清镁测定的影响

目的 探讨在使用日立7060A型全自动生化分析仪时,碱性磷酸酶试剂对镁离子测定的影响情况及解决办法.方法 采用不同的测试方式、两种剂型、两种含镁离子浓度的碱磷酶试剂来研讨对两种方法检测血清镁的影响情况.结果 含镁浓度越高的ALP试剂对血清镁测定影响越大,对两种方法测定血清镁的影响程度不一样.结论 可使用不含或少含镁离子的ALP试剂、清洗试剂针、设置合理的通道和选择适当测定方法来消除或减少ALP试剂对血清镁测定的影响.     

E.coli DH10B碱性磷酸酶基因的克隆、表达及活性研究

目的：克隆并表达E.coli DH10B碱性磷酸酶（AKP）成熟肽基因（phoAm）,为AKP的定向改构及应用奠定基础。方法：采用PCR法从E.coli DH10B基因组扩增phoAm;将phoAm克隆入表达载体pET28a,再转入E.coli BL21（DE3）进行表达;用免疫金层析法和SDS-PAGE法检测表达的重组rAKP;采用对硝基酚磷酸（pNPP）法测定rAKP的活性。结果：rAKP单体分子量约47 K,活性分析比对照菌提高21.5倍。结论：获得AKP成熟肽基因并得了到具有较高活性的重组rAKP。     

兔支气管败血波氏杆菌PCR检测方法的建立及应用

目的建立一种简便、快速、敏感、特异的适用于支气管败血波氏杆菌的PCR检测方法。方法根据兔支气管败血波氏杆菌（Bordetella bronchiseptica）的fim2基因序列设计了一对特异性引物，进行PCR扩增、特异性和敏感性试验，并将其应用于临床样品的检测。结果利用该PCR方法扩增出425bp的目的基因片段，该产物序列与GeneBank上公布的基因序列同源性为100％。特异性试验表明，该方法对大肠埃希氏菌、多杀性巴氏杆菌、魏氏梭菌和金黄色葡萄球菌均无交叉性反应；并且最小可检出菌液浓度为3．6CPU。用该PCR方法检测了从江苏、山东等地采集的146份兔鼻拭子，结果检出支气管败血波氏杆菌阳性92例，阳性率为63．01％。结论建立了快速检测支气管败血波氏杆菌的PCR方法。     

The effects of zinc supplementation on serum zinc, alkaline phosphatase activity and fracture healing of bones

OBJECTIVE: To determine the effect of zinc supplementation on callus formation, serum zinc and alkaline phosphatase activity in humans. METHODS: This randomized, double-blind, placebo controlled clinical trial was conducted on 60 patients with traumatic bone fracture referred to Shohada Hospital of Tabriz, Iran from August to December 2007. Subjects were randomly divided into 2 groups: cases (n=30), receiving one capsule of zinc sulfate consists of 50 mg zinc each day and the controls (n=30), receiving placebo for 60 days. Individual and clinical information was determined by a questionnaire: nutritional intake by 3 days food records at the beginning and the end of trial. Serum zinc and alkaline phosphatase was measured by atomic absorption spectroscopy, and by enzymatic method. Callus formation during fracture healing was evaluated by radiography of the bone. RESULTS: There was no significant difference in physical activity, gender, age, type of fractures, and nutrient intake, between the 2 groups. The administration of zinc caused a significant elevation of serum zinc and alkaline phosphatase activity. Assessment of bone x- rays showed a significant progress in callus formation in cases compared to the controls. CONCLUSION: This study shows that zinc supplementation can stimulate fracture healing, however, it needs further study.     

压力环境对人牙周膜成纤维细胞碱性磷酸酶活性的影响

目的探讨不同压力环境对人牙周膜成纤维细胞碱性磷酸酶活性的影响。方法采用酶动力学方法,比较不同压强的压力在不同的作用时间下对人牙周膜成纤维细胞碱性磷酸酶活性的影响。结果压力增加导致牙周膜成纤维细胞碱性磷酸酶活性降低。结论颌力过大将造成牙周膜成纤维细胞碱性磷酸酶活性降低,可能影响牙周组织健康。     

五藤二草汤对类风湿关节炎骨特异性碱性磷酸酶和抗酒石酸酸性磷酸酶的影响

目的观察五藤二草汤对活动期类风湿关节炎（RA）骨特异性碱性磷酸酶（BAP）和抗酒石酸酸性磷酸酶（TRACP5b）的影响。方法将61例RA患者随机分为对照组（30例）和治疗组（31例）。对照组给予甲氨蝶呤片10 mg,口服,每周1次;来氟米特片10 mg,口服,每日1次;醋氯芬酸片100 mg,口服,每日2次。治疗组在对照组的基础上加用五藤二草汤,口服,每日3次。连用3个月为1个疗程。观察治疗前后两组主要疗效指标及骨代谢指标（BAP、TRACP5b）。结果治疗后治疗组BAP、TRACP5b较治疗前明显下降（P〈0.05）,BAP较同期对照组显著改善（P〈0.05）,TRACP5b较同期对照组明显下降（P〈0.05）。结论五藤二草汤能降低活动期RA患者BAP、TRACP5b水平,改善骨代谢。     

机械压力对兔髁突软骨碱性磷酸酶活性及细胞增殖的影响

目的：探讨不同作用时间及不同液压力值对髁突软骨细胞碱性磷酸酶活性及细胞增殖的影响．方法：消化法培养2wk新西兰白兔的髁突软骨细胞，用自行设计制作的可控液压细胞加载装置在30，60，90kPa压强下加载60，360，720min，用酶动力学方法检测细胞ALP活性，MTT法检测细胞增殖水平．结果：正常髁突软骨细胞随体外培养时间的延长，ALP活性持续增加．30kPa组ALP活性与相应时间点的对照组相比无显差别，但在加压720min后细胞增殖显受到抑制；60kPa组在加压至360min时ALP活性较对照组显升高，同时细胞增殖速率显降低；90kPa组从加压60min起ALP活性就有显升高，但当加力时间延长至720min时，ALP活性反而稍有下降，但仍明显高于对照组，该组持续受压360min及720min细胞的细胞增殖速率均较对照组显降低．结论：60kPa持续加压360min或90kPa持续加压60min以上可使髁突软骨细胞的ALP活性显升高，而细胞增殖受到抑制．     

TGF和bFGF对牙周膜细胞ALP活性及Fn合成的影响

目的探讨转化生长因子α,β(TGFα,β)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人牙周膜(PDL)细胞碱性磷酸酶(ALP)活性及纤维结合蛋白(Fn)合成的影响。方法体外培养人PDL细胞,与一定浓度的TGFα,β或bFGF作用后,用ELISA法检测Fn含量,用酶动力学方法检测ALP活性。结果TGFα使PDL细胞合成Fn的水平(0.937±0.036)比对照组(0.687±0.023)增加了136.4%(P<0.05),TGFβ使Fn的水平(2.885±0.052)明显提高(P<0.001),bFGF组(0.738±0.041)则没有明显影响(P>0.05)。与对照组(2.431±0.051)相比,TGFβ(1.748±0.042)可抑制PDL细胞的ALP活性(P<0.05),bFGF(1.138±0.046)显著抑制PDL细胞的ALP活性(P<0.01),TGFα(0.331±0.022)的抑制作用更强(P<0.01)。结论TGFα,β和bFGF可能通过调节PDL细胞的ALP活性和合成Fn的水平,发挥PDL细胞在牙周组织的再生中的作用。     

骨碱性磷酸酶活性测定在营养性维生素D缺乏症防治中的临床价值

目的总结儿童保健工作中骨碱性磷酸酶（BALP）活性测定在营养性维生素D缺乏症防治中的临床价值,防止滥用维生素D制剂/钙剂和对营养性维生素D缺乏症的合理干预。方法回顾性分析2003年度我院100例3月大婴儿根据BALP活性检测结果指导维生素D补充的临床资料。结果除6例失访（随父母迁居外地）,其余均未出现佝偻病体症和滥用维生素D制剂/钙剂。结论BALP在营养性维生素D缺乏性佝偻病的防治中有较高的临床应用价值。     

髁突软骨细胞碱性磷酸酶活性及体外矿化能力的检测

0　引言　髁突软骨细胞 (m andibular condylar chondrocyte,MCC)体外培养时存在细胞形态变化、 型和 型胶原表达的更迭等表型变化特征 [1 ] ,但还不清楚 MCC碱性磷酸酶 (al-kaline phosphatase,AL P)活性的变化特点 .本实验采用 AL P活性测定和 Von Kossa染色法对兔 MCC进行检测 ,以补充对 MCC这方面生物学特征的认识 .1　材料和方法1.1　 MCC的原代培养和鉴定　解剖显微镜下取 1～ 2 wk的收稿日期 :2 0 0 1-0 1-0 1;　修回日期 :2 0 0 1-0 2 -2 1作者简介 :毛　勇 ( 1964 -) ,男 (汉族 ) ,浙江宁波人 .主治医师 ,讲师 .Tel.( 0…     

DEX和rhBMP2对体外培养人牙髓细胞碱性磷酸酶活性的影响

目的 探讨不同浓度地塞米松(Dexamethasone,DEX)、重组人骨形态发生蛋白2(recombinant human bone morphogenetic protein 2,rhBMP2)及两者联合应用对体外培养的人牙髓细胞(human dental pulp cells,HDPCs)碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,ALP)活性的影响.方法 组织块法培养HDPCs并进行鉴定;采用酶动力学的方法,观察 DEX、rhBMP2及二者联合应用对HDPCs的ALP活性的影响.结果 单独应用DEX时ALP活性明显增高,且在生理浓度范围内当浓度为0.01 nmol/ml时,对HDPCs的ALP活性达到最大的刺激作用,rhBMP2对HDPCs的ALP活性呈浓度依赖性增强;当联合应用DEX和rhBMP2,ALP活性比单独应用相应浓度的rhBMP2明显增高.结论 DEX、rhBMP2对HDPCs的ALP活性均有增强作用,同时二者对HDPCs的ALP活性有显著的功能放大性协同增强作用.