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抗-HIV(1+2)初筛试验大多采用间接ELISA方法,但存在部分假阳性反应。笔者以确证试验蛋白印迹法(WB)结果作对照,采用双抗原夹心法检测抗-HIV(1+2)确证阳性和初筛试验结果灰区标本,结果显示,双抗原夹心法检测抗-HIV(1+2)比间接ELISA法具有更好的准确性,更适用于抗-HIV(1+2)的初筛检测,缩短了窗口期,提高了对感染后的检出率,对于HIV感染者的早期发现,鉴别诊断具有重要的意义。现报告如下。
1 材料与方法
1.1 标本取自1995年以来本站初筛阳性的标本,其中结果不确定标本60份,确证阳性结果14份;总后卫生部及卫生部临床检验中心抗-HIV(1+2)室间质评血清40份(预期结果阳性22份,阴性18份);抗-HIV(1+2)4Ncu/ml定值血清,由卫生部临床检验中心提供。
1.2 检测试剂间接ELISA初筛采用K、X、J 3个厂家的试剂;双抗原夹心ELISA初筛采用W及A厂家试剂。确证试验由江苏省AIDS确认中心实验室采用蛋白印迹方法(WB)检测。
1.3 实验方法各项实验均严格按照操作说明书进行。对于初筛阳性的样本,再次进行重复检测,复检时除原检测试剂外,尚需同时选择另一种初筛试剂予以复检,如均呈阳性或有一份阳性,该标本送确证实验室进一步做确证实验。
1.4 仪器设备 Perkin Elmer960型PCR分析仪(U.S.A),GBS 全自动洗板机(U.S.A),CliniBio 128型全自动绘图酶标仪(Australia)。 相似文献
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抗-HIV(1/2)EIA双抗原夹心法与间接法检测结果的分析比较 总被引:2,自引:1,他引:1
随着艾滋病在全球蔓延,我国的HIV感染者也日益增多[1],到目前为止,对艾滋病尚无有效的治疗措施,因此建立灵敏、特异的诊断方法尤为重要.诊断HIV感染最常用的方法为检测病毒特异性抗体[2], 而抗-HIV(1/2)EIA间接法试剂在特异性、敏感度方面均存在着一些问题.国外已广泛使用双抗原夹心试剂,使检测的准确性、可靠性有了很大提高.我国已有一些厂家开始研制抗-HIV(1/2)EIA双抗原夹心法试剂.笔者用自制的抗-HIV室内质控参考品对国内外部分厂家的EIA间接法、双抗原夹心法检测试剂进行了质量评价,报告如下. 相似文献
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随着艾滋病在全球的迅速蔓延以及我国已进入艾滋病快速增长期 ,对输血安全构成了严重威胁。据报告[1] ,我国艾滋病 /HIV感染的传播途径目前仍以血液传播为主 ,注射吸毒占 6 8% ,经采血 (血浆 )途径感染占 9 7% ,血液和血液制品感染占 1 5 % ,这三种途径共占 79 2 %。所以 ,加强对献血者血液的检测 ,阻断血液途径传播就十分重要。目前大多数血站已采用双抗原夹心法试剂 (第 3代 )检测抗HIV ,但也有少数血站采用部分抗 HIV间接法试剂 (第 2代 )作献血者初筛。笔者将检测抗 HIV的两种模式的检测效果作一比较 ,报告于下。1 材料与方法1 1… 相似文献
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近年来,国产抗人类免疫缺陷病毒抗体(抗-HIV)第3代双抗原夹心法酶免诊断试剂的生产,使检测的灵敏性和特异性有了很大改善,但因生产厂家工艺不同,抗原组选择包被板的差异,以及试剂的贮存运输过程的损坏,使其在应用过程中的质量有所不同。我们对5个厂家抗-HIV试剂进行了质量分析,以选择适合本实验室的试剂。 相似文献
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目前国内检测抗—HIV多数是采用第二代ELISA间接法试剂盒,在灵敏度和特异性上存在不足,会有一定的假阴性漏检或假阳性而导致的血液资源浪费^[1]。国外早已使用双抗原夹心法试剂检测抗—HIV,我国也有部分试剂厂家研制出第三代双抗原夹心法试剂盒,且通过国家批批检定。笔者应用国内四个厂家生产的双抗原夹心法抗—HIV试剂盒检测标本88份,其中66份为抗—HIV间接法试剂检测阳性标本,22份为正常阴性标本,并对间接法和双抗原夹心法试剂检测结果进行比较。现将结果报告如下。 相似文献
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溶血对双抗原夹心法检测HIV抗体的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨溶血对双抗原夹心法检测HIV抗体的影响.方法:制备HIV抗体阴性非溶血和配对溶血(Hb 2~7 g/L)血清48份.另制备HIV抗体阴性非溶血和重度溶血(Hb 80 g/L)血清1份、HIV抗体阳性非溶血和重度溶血(Hb 108 g/L)血清1份,用HIV抗体阴性血清对HIV抗体阴性重度溶血血清、HIV抗体阳性非溶血和配对重度溶血血清进行倍比稀释,得到不同溶血程度的样品.测定HIV抗体,检测溶血及不同溶血程度对HIV抗体的影响.结果:48份HIV抗体阴性非溶血和溶血血清比较,差异无统计学意义(t=0.078,P=0.938);对HIV抗体阴性重度溶血倍比稀释血清的A值和Hb浓度做相关性分析,两组间无相关性(r=-0.382,P=0.221);对HIV抗体阳性溶血、非溶血倍比稀释血清的A值进行比较,差异无统计学意义(t=0.236,P=0.817).△A(溶血血清A-非溶血血清A)与Hb浓度作相关性分析,两组间无相关性(r=0.149,P=0.644).结论:溶血对双抗原夹心法检测HIV抗体无影响.但是如果试剂反应孔包被、封闭的质量差可能引起Hb的非特异吸附而造成假阳性,故日常工作中要尽量避免样品溶血,严格按照全国艾滋病检测技术规范操作. 相似文献
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双抗原夹心与间接ELISA法检测抗HCV对比研究 总被引:4,自引:0,他引:4
[目的]用研制的双抗原夹心ELISA法试剂与间接ELISA法试剂对比检测抗HCV。[方法]利用基因重组技术表达的HCV多表位抗原分别包被和标记,收集献血员样本,二种国产(试剂A,B)及雅培间接抗HCV试剂同时检测,对一种试剂单独阳性和3种试剂检测均为阳性的样本,再用研制的双抗原夹心法进行检测。[结果]试剂A检测单独阳性的样本12份,试剂B单独检测阳性20份样本中,双抗原夹心检测为阴性 ;而三家试剂检测均为阳性9份样本,双抗原夹心检测均为阳性。[结论]双抗原夹心检测抗HCV特异性较间接法好,灵敏度二者相当。 相似文献
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梅毒是由梅毒螺旋体 ( Treponema Pallidum,TP)感染引起的性传播性疾病 ,可侵犯全身多种器官 ,产生多种症状和体征 ,危害程度极高。梅毒可通过性传播、胎盘传播 ,也可经血液传播 ,因此 ,做好血液的梅毒安全性检查 ,提高梅毒的检出率对于控制梅毒蔓延极为重要。本站应用 EL ISA双抗原夹心法试剂作为血液梅毒抗体的检测试剂 ,使检出率作者单位 :32 30 0 0 浙江省丽水市中心血站大为提高 ,现以 TPHA确诊试剂为参考 ,将 ELISA双抗原夹心法试剂与 TRUST法试剂检测梅毒及非梅毒血清标本的结果报告如下。材料与方法1 材料1 .1 试剂 :E… 相似文献
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梅毒是由密螺旋体属苍白球细菌引起的传染性疾病 ,可经血液途径传播。梅毒螺旋体侵入机体后 ,产生两种抗体 :一种是特异性抗体 ,另一种是非特异性抗体。目前 ,国内各采供血机构大多采用血清学非特异性试验检测献血者梅毒抗体 ,主要有 TRUST法和RPR法。由于非特异性试验检测结果敏感性高而特异性较低 ,常出现假阳性和漏检[1] 。本站于 2 0 0 1年 6月~ 2 0 0 2年 1 0月 ,对 1 3465例街头无偿献血者应用 ELISA双抗原夹心法作为献血者血液的梅毒抗体复检试剂 ,初检试剂仍用TRUST法 ,并以梅毒螺旋体血凝试验 ( TPHA)作为确证试验 ,现将… 相似文献
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近年来,国产抗人类免疫缺陷病毒抗体(抗 HIV)第3代双抗原夹心法酶免诊断试剂的生产,使检测的灵敏性和特异性有了很大改善,但因生产厂家工艺不同,抗原组选择包被板的差异,以及试剂的贮存运输过程的损坏,使其在应用过程中的质量有所不同。我们对5个厂家抗HIV试剂进行了质量分析,以选择适合本实验室的试剂。一、材料和方法1.试剂 5个厂家抗HIV酶免双抗原夹心法试剂盒,分别用代号I1、I2 、I3 、I4、I5表示,批号分别为:2 0 0 2 0 813、2 0 0 2 0 70 1、2 0 0 2 0 710、2 0 0 2 0 80 1、2 0 0 2 0 6 2 0。2 .参考品 抗 HIV国家参考品阴性… 相似文献
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目的建立检测抗念珠菌烯醇化酶(Eno)特异性抗体的双抗原夹心ELISA法,并进行临床应用评价。方法用基因工程制备的重组Eno作为包被抗原和酶标抗原,通过棋盘滴定法对双抗原夹心ELISA法的反应条件进行优化,对方法的敏感性、特异性和精密度进行考察。用双抗原夹心ELISA法测定291例住院患者(侵袭性念珠菌病114例,念珠菌定植82例,细菌感染患者95例)以及200名健康人血清,并与本实验室前期自建的间接ELISA法检测抗Eno抗体的结果进行比较。结果双抗原夹心ELISA法工作条件为:Eno抗原包被浓度为0.5μg/m L,酶标抗原1∶4 000稀释;封闭液为含50 g/L脱脂奶粉的PBS-T,待测血清稀释度为1∶100。患者血清检测结果显示,批内变异系数(CV)分别为6.8%、7.4%和5.9%;不同批次重复测定15次,其批间CV分别为10.1%、9.6%和12.4%。重组抗原对血清中相应抗体的阻断率为92.2%。通过ROC曲线确定cut off值吸光度(A)为0.209。检测侵袭性念珠菌病(invasive candidiasis,IC)的敏感性和特异性分别为81.6%(93/114)和94.4%(356/377),敏感性高于检测抗Eno抗体的间接ELISA法(81.6%vs 76.1%)。结论建立了双抗原夹心ELISA法检测抗念珠菌Eno特异性抗体,可提高IC的诊断率,具有临床应用价值。 相似文献
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目的:对四种常用的国产HIV(1+2)Ab的初筛试剂假阳性率做一比较,看哪种试剂的特异性更好,准确度更高。方法:酶联免疫吸附试验(ELISA)。结果:广州丽珠试剂的特异性较高,准确度较高。 相似文献
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目的 评估检测HIV抗原/抗体的电化学发光免疫分析法(ECLIA)在献血者血液筛查中的应用效果。方法 选取本站2016年9月~2020年9月采用ELISA法抗-HIV反应性的献血者标本128(人)份[双试剂反应性7份(其中WB确认抗-HIV阳性6份、NAT确认抗-HIV阴性1份),单试剂反应性121份(均经WB确认为阴性)]以及从本站2020年6~9月以ELISA法筛查和NAT检测均为非反应性的献血者留存标本中随机选取1 360(人)份,用ECLIA法对这2类献血者标本做HIV抗原/抗体检测;比较2种方法的检测结果,包括HIV阳(阴)性符合率、敏感性与特异性。结果 对于1 360份ELISA和NAT检测均为非反应性的标本,用ECLIA检测亦均为非反应性。ECLIA法对于ELISA法检测和确认试验均为献血者HIV反应性标本的检测结果符合率100%(6/6);对于ELISA法抗-HIV检测反应性但确认试验阴性的122份标本的HIV抗原/抗体检测反应(性)率3.28%(4/122)、非反应(性)率96.72(118/122)ECLIA法与ELISA法的总体符合率为96.88%(124/128... 相似文献
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有部分病毒性肝炎、酒精性肝炎、非酒精性脂肪肝的患者久治不愈,还有一些不明原因、具有相似临床症状的慢性肝病,出现肝功能异常、肝细胞破坏长期用药医治无效,究其原因是由于患者肝脏本身的免疫耐受性减退,不能识别肝组织(抗原)成份而产生免疫反应引起一种非自限性肝炎称为自身免疫性肝炎(AIH).自身免疫性肝炎只要早期确诊,是能够得到有效治疗、控制疾病的进展,甚至达到治愈.为使自身免疫性肝炎患者得到早期确诊我们开展了间接免疫荧光法检测自身抗体包括抗核抗体(ANA)、抗平滑肌抗体(ASMA),抗线粒体抗体(AMA)、抗肝特异性蛋白抗体(LSP)、抗肝细胞膜抗原抗体(LMA)、可溶性肝抗原抗体(SLA)、肝肾微粒体抗体(LKM-I)等项目.报告如下. 相似文献
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血液感染性疾病标志物筛检中应重视的若干问题 总被引:24,自引:1,他引:24
李金明 《中华检验医学杂志》2005,28(6):569-571
血液筛查质量的高低,直接关系到受血者的安全。目前,国内采供血机构针对感染性疾病病原体筛检的标志物共有4种,即乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎病毒抗体(抗HCV)、人免疫缺陷病毒抗体(抗HIV)和梅毒抗体。主要采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测,方法模式有一步双抗体夹心法、间接法和一步或两步双抗原夹心法等。 相似文献
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