Ⅱ组代谢型谷氨酸受体阻断剂对大鼠海马神经元凋亡的影响

目的观察Ⅱ组代谢型谷氨酸受体阻断剂对大鼠海马神经元凋亡的影响。方法 SD大鼠24只随机分为假手术组、痴呆组和阻断剂组,每组8只。大鼠脑室注射凝聚肽Aβ_(25-35)5建立痴呆大鼠模型,阻断剂组1周后行阻断剂脑室注射,另2组等量注射人工脑脊液4周行Morris水迷宫测试;测试1周后取材行病理观察,采用TUNEL法检测海马CA1区锥体细胞凋亡情况。结果与假手术组比较,痴呆组大鼠平均潜伏期明显延长,平台象限滞留时间明显缩短(P0.05);与痴呆组比较,阻断剂组大鼠上述指标明显提高(P0.05)。与假手术组比较,痴呆组大鼠海马CA1区可见大量的凋亡锥体细胞,阳性锥体细胞数、总面积、平均吸光度(A)值明显升高(P0.05);与痴呆组比较,阻断剂组大鼠海马CA1区可见明显的阳性细胞和核固缩,但其阳性染色锥体细胞数、总面积、平均A值明显降低(P0.05)。结论Ⅱ组代谢型谷氨酸受体阻断剂可明显抑制痴呆引起的海马CA1区锥体细胞的凋亡,提示其可能通过影响细胞凋亡,参与痴呆的发病过程。     

脑卒中后抑郁大鼠海马和丘脑神经生长因子及其受体的表达变化

目的探讨脑卒中后抑郁(post stroke depression,PSD)大鼠海马和丘脑神经生长因子(nerve growth factor,NGF)及其高亲和力受体TrkA mRNA和蛋白的表达变化。方法选择健康成年SD大鼠52只,随机分为对照组、抑郁组、脑卒中组和PSD组,每组13只。应用RT-PCR检测各组大鼠造模后第29天海马及丘脑NGF和TrkA mRNA的表达变化;利用免疫组织化学方法检测各组大鼠海马及丘脑NGF和TrkA免疫阳性细胞数的表达变化。结果各组海马及丘脑均有NGF和TrkA mRNA的表达。PSD组海马NGF mRNA表达较对照组明显降低(0.646±0.264 vs 0.956±0.263,P<0.05);各组TrkA mRNA在海马的表达无统计学差异(P>0.05);各组丘脑NGF和TrkA mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。PSD组海马NGF阳性细胞较对照组明显减少[(14.46±2.64)个vs(19.56±2.63)个,P<0.05];各组丘脑NGF阳性细胞差异无统计学意义(P>0.05);各组海马TrkA阳性细胞及丘脑TrkA阳性细胞数无统计学差异(P>0.05)。结论 PSD大鼠海马NGF mRNA及蛋白表达减少可能与PSD发病相关。     

脑卒中后抑郁大鼠额前皮质神经生长因子的表达变化

目的观察脑卒中后抑郁(PSD)大鼠额前皮质神经生长因子(NGF)及其高亲和力酪氨酸激酶受体A(Trk A)mRNA的表达变化。方法将32只健康成年雌性SD大鼠随机分为正常组、抑郁组、卒中组、PSD组,每组8只。卒中组采用线栓法制备局灶性脑缺血模型;抑郁组采用慢性不可预见的中等应激刺激结合孤养法制备大鼠慢性应激抑郁模型;PSD组采用线栓法制备局灶性脑缺血模型,术后1周加以中等应激刺激及孤养方法制备PSD模型。于造模后第29天各组取0.5 cm厚的大脑额前皮质约100 mg,采用RT-PCR法检测额前皮质组织NGF及Trk A mRNA的表达。结果各组额前皮质组织中均有NGF、Trk A的表达。PSD组NGF mRNA表达低于正常组(P<0.05),其余各组相比NGF mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。各组Trk A mRNA表达差异无统计学意义。结论 PSD大鼠额前皮质NGF mRNA的表达减少,可能与PSD发病有关。     

局灶性脑缺血大鼠海马Nogo-A受体的动态表达

目的 探讨局灶性脑缺血大鼠海马Nogo-A受体(Nogo-recepter,NgR)的动态表达.方法 电凝右侧大脑中动脉建立大鼠局灶性脑缺血模型,免疫组织化学染色检测脑缺血后不同时间点缺血侧海马CA1、CA2和CA3区NgR表达.结果 缺血侧海马CA1和CA2区在脑缺血后第1天NgR表达上调,CA3区在第2天表达上调；第5天CA1、CA2和CA3区NgR表达均降至最低；第28天CA1、CA2和CA3区NgR表达再次上调.结论 缺血侧海马NgR表达在不同区域呈现不同的变化特点,但总体变化趋势呈现出“两峰一谷”的现象,提示NgR在脑缺血后不同时期可能具备不同的功能.     

大麻素受体在海马CA1区锥体神经元的功能表达

目的观察大麻素受体在孤立的海马CA1区锥体神经元的功能表达。方法将出生15~20d的Wistar大鼠取脑,急性分离出单个CA1区锥体神经元,用膜片钳技术记录神经元电活动,观察非选择性大麻素受体激动剂Win55212-2(5μmol/L)对神经元静息电位、动作电位、自发发放频率的影响。根据Win55212-2对膜电位的影响分为超极化组(n=7)和去极化组(n=6)。组织切片活性用MTT染色法检测。结果与给药前比较,超极化组神经元给药中动作电位频率和膜电压显著降低[0Hz vs(4.3±3.2)Hz,P0.05;(-57.0±4.6)mVvs(-54.1±3.8)mV,P0.01];与给药中比较,给药后动作电位频率及膜电压显著升高,差异有统计学意义(P0.01)。与给药前比较,去极化组神经元给药中动作电位频率显著降低,膜电压显著升高(P0.01);与给药中比较,给药后动作电位频率显著升高,膜电压显著降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论 CA1区锥体神经元可能存在大麻素受体功能表达且不限于大麻素受体1;激活大麻素受体可能通过不同的机制起到抑制CA1区锥体神经元的作用。     

血管性痴呆大鼠海马神经元凋亡与乙酰胆碱含量变化

目的 探讨血管性痴呆(VD)大鼠海马神经元凋亡和乙酰胆碱(ACh)含量变化在VD发病过程中的作用.方法 将90只大鼠随机分为模型组、假手术组和正常组,每组30只.再将各组的30只大鼠根据造模后断头取脑时间随机分为3小组,即7、14、21 d组,每组10只大鼠.采用反复大鼠双侧颈动脉缺血再灌注,加剪尾放血法制备VD大鼠模型;用TUNEL法检测海马组织的凋亡细胞,用生化法检测ACh含量.结果 模型组大鼠海马组织在第7、14、21天均有大量凋亡神经元,且ACh含量持续降低,与假手术组及正常组相比差异显著(P<0.01).结论 脑海马组织神经元的大量凋亡和ACh含量持续降低可能在VD发病过程中起重要作用.     

脑卒中后抑郁大鼠海马小胶质细胞脑源性神经营养因子及酪氨酸激酶受体B蛋白的表达

目的研究脑卒中后抑郁(PSD)大鼠海马小胶质细胞脑源性神经营养因子(BDNF)及其高亲和力受体酪氨酸蛋白激酶受体B(TrkB)蛋白的表达情况。方法将40只健康成年SD大鼠随机分为正常组、抑郁组、脑卒中组及PSD组,每组10只。用线栓法建立局灶性脑缺血模型;用慢性不可预见的中等应激刺激结合孤养法建立大鼠慢性应激抑郁模型。各组造模后第29和57天用免疫荧光双标染色法测大鼠海马OX42标记的小胶质细胞BDNF及TrkB表达情况。结果造模后第29天PSD组海马BDNF和TrkB阳性细胞吸光度(A)值分别为83.35±5.74和82.35±5.74,显著低于正常组、抑郁组和脑卒中组(P0.05);抑郁组A值较脑卒中组增多(141.23±9.16 vs133.31±7.89;141.23±8.07 vs 128.62±6.92,P0.05)。造模后第57天PSD组海马BDNF和TrkB阳性细胞A值分别为81.63±7.19,74.43±7.42,显著低于正常组、抑郁组和脑卒中组(P0.05);脑卒中组A值较正常组及抑郁组低(93.36±7.56 vs 124.11±11.39、116.65±10.55,87.14±6.56 vs 112.58±10.99、108.05±10.57,P0.05)。结论海马小胶质细胞在PSD发病过程中有重要意义,可能通过减少BDNF及TrkB的表达发挥作用。     

NMDA受体激动剂对大鼠海马CA1区神经元膜电位影响的研究

缺血缺氧可引起神经元细胞膜电位发生改变，表现为缺血缺氧早期细胞膜超极化，随后细胞膜发生缓慢去极化及快速去极化，最终导致神经元细胞的膜电位维持或接近零水平，即持续去极化。1997年Tanaka等研究发现，大鼠离体海马脑片CAl区神经元一旦发生快速去极化，即使及时给予氧及葡萄糖，其膜电位也不能恢复至正常水平，     

右美沙芬对培养海马神经元缺氧损伤的保护作用及对Bcl-2表达的研究

目的　观察谷氨酸NMDA受体拮抗剂右美沙芬对体外培养海马神经元缺氧损伤的保护作用及对Bcl 2表达的影响。方法　以不同浓度 (10、5 0及 10 0 μmol L)的右美沙芬处理培养的大鼠海马神经元 ,10min后给予缺氧处理4h。停止处理后 2 4h ,以细胞存活率、乳酸脱氢酶 (LDH)流出量和Bcl 2免疫阳性细胞表达为指标进行观察。结果与正常对照组比较 ,缺氧损伤使细胞存活率下降、LDH流出量增加、Bcl 2免疫阳性细胞减少 (P <0 .0 5 ) ;而右美沙芬组与缺氧组相比细胞存活率改善、LDH流出量减少、Bcl 2免疫阳性细胞增加 (P <0 .0 5 )。结论　右美沙芬对体外培养海马神经元缺氧损伤具有保护作用 ,其机制可能与阻止由损伤引起的Bcl 2蛋白表达下调有关。     

快速眼动睡眠剥夺诱导大鼠皮质和海马及延髓caspase-12的表达

目的观察不同时间快速眼动睡眠剥夺(SD)对大鼠皮质、海马及延髓内质网凋亡因子caspase-12的表达影响。方法将80只雄性Wistar大鼠分为SD组(40只)、SD后恢复睡眠组(RS组,20只)、对照组(20只);其中SD组又分为SD1、3、5、7天亚组,RS组又分为RS6、12h亚组;对照组又分为实验环境对照组(TC组)和正常睡眠对照组(CC组)。采用改良多平台SD法、免疫组织化学法、Western blot及RT-PCR检测脑组织中caspase-12表达分布规律及时空变化;TUNEL法检测凋亡细胞分布。结果RT-PCR检测大鼠快速眼动SD1天caspase-12有表达并呈逐渐上升趋势,7天达高峰,RS6、12h及TC组和CC组无caspase-12表达。免疫组织化学及Western blot检测发现,SD1、3天激活的caspase-12表达增加(P<0.05),5、7天及RS组、TC组和CC组无激活的caspase-12表达。上述变化海马区最明显,皮质区次之,延髓区无改变。TUNEL检测SD1、3天凋亡细胞海马区最多(P<0.05),皮质和延髓区次之。结论SD启动了内质网凋亡通路,并随SD的终止而终止。SD可能是造成脑组织损害的机制之一,海马区对SD导致的脑损害最敏感。     

帕金森病模型大鼠海马mGluR5的表达变化及意义

目的探讨帕金森病(PD)模型大鼠海马mGluR5的表达变化及意义。方法将SD大鼠随机分为正常对照组(A组)、PD模型组(B组)和非竞争性NMDA受体拮抗剂D-AP-5+PD组(C组),通过免疫组织化学方法观察多克隆抗体mGluR5在大鼠海马的表达变化。结果正常对照组中大鼠海马有丰富的mGluR5表达;PD模型组中大鼠海马mGluR5表达明显下降;在非竞争性NMDA受体拮抗剂D-AP-5+PD组中,大鼠海马mGluR5表达又明显上调。结论帕金森病模型大鼠海马各区mGluR5表达下降,可能是神经细胞的一种自我保护作用。mGluR5可能与帕金森病认知和情感及记忆功能障碍有关。帕金森病模型大鼠海马各区经用非竞争性NMDA受体拮抗剂D-AP-5处理后,海马mGluR5表达明显上调,推测mGluR5表达下降可能在帕金森病长时程增强(LTP)诱导过程中具有重要作用,其作用机制可能为NMDA受体依赖性。     

脑缺血耐受模型中海马胰岛素受体的表达变化

目的 观察小鼠脑缺血耐受模型中胰岛素受体表达和认知功能变化.方法 取44只雄性CD1小鼠腹腔注射3-硝基丙酸(3-NP)建立动物模型,根据注射时间将18只小鼠分为未注射组、注射后1 h组和注射后12 h组,每组6只.采用免疫印迹方法观察3组小鼠海马胰岛素受体的表达.另将26只小鼠分为对照组(未注射3-NP)和模型组(注射3-NP),每组13只.采用Morris水迷宫观察两组小鼠记忆能力.结果 未注射组小鼠海马胰岛素受体表达为(0.48±0.14)U,注射后1 h为(0.28±0.1)U,12 h为(0.26±0.1)U.与未注射组比较,注射后1 h组和注射后12 h组胰岛素受体均显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05).模型组注射3-NP后6 h和相应时间点对照组小鼠寻找实台时间分别为(59.0±0.5)s和(40.5±0.1)s,注射3-NP后12 h和相应时间点对照组小鼠寻找实台时间分别为(42.0±0.3)s和(30.5±0.5)s,模型组高于相应时间点对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 脑胰岛素受体下调有可能是一个未被发现的脑缺血耐受的负面作用.     

快速眼动睡眠剥夺后大鼠皮质及海马神经元突触相关蛋白神经颗粒素表达的变化

目的:探讨不同时间的快速眼动(REM)睡眠剥夺对大鼠皮质及海马各区神经颗粒素分子表达变化的影响及意义。方法:Sprague-Dawley大鼠70只,随机分为睡眠剥夺组(SD)、实验环境对照组(TC)和空白对照组(CC)。其中SD组又分为12h、1d、3d、5d、7d共5个时点组。采用改良多平台(MMPM)睡眠剥夺法进行REM睡眠剥夺,运用免疫荧光染色共聚焦显微镜观察REM睡眠剥夺后不同时点大鼠皮质及海马各区的神经颗粒素表达的分布规律和时空变化;同时结合蛋白印迹(Western blot)技术对皮质及全海马神经颗粒素蛋白作选择性半定量分析。结果:神经颗粒素主要分布于正常大脑皮质Ⅱ、Ⅲ层的神经元胞体和树突、海马CA1～CA3锥体细胞层和齿状回颗粒细胞层内。REM睡眠剥夺12h后大鼠皮质神经颗粒素的表达即开始减少,与对照组比较有显著性差异,直至第7d均呈下降趋势;海马结构中神经颗粒素表达未见显著变化。蛋白印迹实验印证了这一结果。结论:REM睡眠剥夺能引起大鼠大脑皮质神经颗粒素表达减少,且随睡眠剥夺时间的延长而渐趋明显,这可能是REM睡眠剥夺引起大脑神经元突触可塑性改变,进而影响大鼠学习记忆功能损害的机制之一。     

NMDAR亚单位1在AD样大鼠海马的表达及其与细胞凋亡的关系

目的 探讨N-甲基-D-天门冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate receptor,NMDAR,NR)亚单位1在阿尔茨海默病(AD)样大鼠海马的表达及其与细胞凋亡的关系.方法 以Aβ1-40和AlCl3双干预的方法建立AD样大鼠模型.应用免疫组织化学法检测NR1在AD样大鼠海马的表达,TUNEL法检测AD样大鼠海马细胞凋亡情况,并观察二者的关系.结果 NR1在AD样大鼠海马各区的表达均升高,与对照组相比有显著性差异(P＜0.05),区间比较未见显著性差异.凋亡阳性细胞在AD样大鼠海马各区均显著增多尤以CA1区为甚、其次为齿状回,与对照组比,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 NR1在AD样大鼠海马表现为病理性的高表达且这种病理性高表达和AD样大鼠海马的细胞凋亡以及选择性易损伤现象之间可能存在着某种特定的关系.     

血清Apelin水平联合CVI对视网膜中央静脉阻塞患者雷珠单抗治疗后视力预后的预测价值

目的 探讨血清爱帕琳肽（Apelin）水平联合脉络膜血管指数（CVI）对视网膜中央静脉阻塞（CRVO）患者雷珠单抗治疗后视力预后的预测价值。方法 选择CRVO患者123例（观察组）、体检健康的志愿者45例（对照组），采集所有研究对象外周静脉血，离心留取血清，采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测血清Apelin。同时，接受光学相干断层扫描（OCT），评估脉络膜基质面积和脉络膜管腔面积，计算CVI。CRVO患者均接受2次雷珠单抗玻璃体腔内注射治疗，末次治疗后随访1年，按最佳矫正视力评估视力预后情况，其中视力预后良好（最佳矫正视力提高>0.2）86例、视力预后不良（最佳矫正视力提高≤0.2）37例。收集CRVO患者临床资料，采用多因素Logistic回归模型分析CRVO患者雷珠单抗治疗后视力预后的影响因素。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析血清Apelin水平和CVI对CRVO患者雷珠单抗治疗后视力预后不良的预测效能。结果 观察组血清Apelin水平和CVI均高于对照组（P均<0.05）。单因素分析显示，视力预后不良者年龄、CRVO病程、合并高血压比例、非缺血型CRVO比例、持续...     

大鼠脑缺血再灌注后海马CA1区超微结构及Apaf-1表达的变化

目的 观察大鼠脑缺血再灌注后海马CA1区超微结构及凋亡相关基因凋亡蛋白激活因子(Apaf)-1表达的变化.方法 健康雄性SD大鼠随机分为假手术组和模型组,其中模型组缺血30 min后再灌注,根据再灌注时间不同又分为2、24、72 h3个亚组.采用Pulsinelli四血管阻断法建立大鼠全脑缺血再灌注模型,透射电镜下观察海马CA1区神经元超微结构变化,免疫组织化学法和Western印迹法检测大鼠海马组织凋亡相关基因Apaf-1蛋白表达的变化.结果 透射电镜结果显示:假手术组海马CA1区神经元胞核较大,呈圆形或椭圆形,核膜清晰完整,常染色质呈细颗粒状均匀分布,胞浆内可见丰富的细胞器.模型2h组海马CA1区神经元核膜凹陷,核染色质密度增高,线粒体轻微肿胀;模型24 h组海马CA1区神经元核膜邹缩严重,核仁物质增多、偏移,线粒体结构松散、空泡状,线粒体嵴断裂,粗面内质网脱颗粒;模型72 h组海马CA1区神经元核固缩,核染色质呈团块状边集于核膜下,线粒体不同程度脱空.免疫组化和Western印迹结果显示:假手术组Apaf-1蛋白仅有少量表达,模型组各时间点Apaf-1蛋白表达均增高(P＜0.05).结论 大鼠脑缺血再灌注可导致海马CA1区神经元的凋亡,这可能与凋亡相关基因Apaf-1的激活有关.     

大鼠海马认知障碍对糖脂代谢的影响及其与海马神经元凋亡的关系

目的探讨大鼠海马认知障碍对糖脂代谢的影响及其与海马神经元凋亡的关系。方法采用Aβ1~42海马注射构建认知障碍大鼠模型,利用全自动生化分析仪检测大鼠血糖血脂水平,TUNEL法检测大鼠海马神经元凋亡。结果 1实验组大鼠FPG为(7.83±0.31)mmol/L、TG为(2.30±0.14)mmol/L、TC为(4.55±0.15)mmol/L、LDL为(2.39±0.08)mmol/L,均明显高于假手术组和对照组(P0.05)。2实验组大鼠海马神经元凋亡指数为71.37%±3.15%,假手术组和对照组分别为18.66%±3.20%、15.36%±4.25%,组间比较有显著性差异(P0.05)。结论海马认知障碍可引起血糖血脂水平升高,其机制可能与海马神经元凋亡有关。     

超声心动图联合血清β1-ARAb、Galectin-3及Apelin诊断肥厚型心肌病的临床价值

目的:分析超声心动图联合血清β₁-肾上腺素能受体抗体(β₁-ARAb)、重组人半乳糖凝集素3(Galectin-3)及爱帕琳肽(Apelin)诊断肥厚型心肌病(HCM)的临床价值。方法:选取2019年7月—2022年6月我院收治的HCM病人50例作为观察组,选取同期于我院体检且无室壁增厚及其他心脏疾病病人50例作为对照组。两组均行超声检查,并检测血清β₁-ARAb、Galectin-3及Apelin。观察两组左射血分数(LVEF)、左室收缩末期容积(LVESV)、左室舒张末期容积(LVEDV)及每搏输出量(SV)等心功能指标;血清β₁-ARAb、Galectin-3及Apelin水平;观察组病人左室壁肥厚分度情况;观察组左室壁不同厚度病人心功能指标及血清β₁-ARAb、Galectin-3、Apelin水平。分析观察组心功能指标及血清β₁-ARAb、Galectin-3、Apelin水平与左室壁厚度的相关性。结果:观察组LVEF、LVESV、LVEDV、S...     

三七总皂苷对老年大鼠学习能力、记忆力及海马神经元凋亡的影响研究

目的探讨三七总皂苷(PNS)对老年大鼠学习能力、记忆力及海马神经元凋亡的影响。方法选择22月龄雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠45只,随机分为低剂量组15只、高剂量组15只、老年对照组15只;另选择2月龄雌性SD大鼠15只作为青年对照组。低剂量组大鼠每天注射1次PNS,剂量为50μg/kg;高剂量组大鼠每天注射1次PNS,剂量为100μg/kg;青年对照组和老年对照组大鼠均注射等量0.9%氯化钠溶液。各组大鼠均连续注射30 d。对各组大鼠进行学习能力、记忆力测试,计算其正确反应率;采用TUNEL法检测海马CA1区神经元凋亡情况。结果青年对照组、低剂量组、高剂量组学习能力及记忆力测试正确反应率高于老年对照组,高剂量组学习能力及记忆力测试正确反应率高于低剂量组(P0.05)。青年对照组、低剂量组、高剂量组海马CA1区TUNEL阳性细胞数低于老年对照组,高剂量组海马CA1区TUNEL阳性细胞数低于低剂量组(P0.05)。结论 PNS能改善老年大鼠的学习能力和记忆力,减少海马神经元凋亡,大剂量应用时效果较好。     

葛根素对去卵巢大鼠认知功能及海马神经元超微结构的影响

目的 观察不同浓度葛根素对去卵巢大鼠认知功能及海马CA1区、CA3区神经元电镜下形态的影响.方法 SD大鼠72只,随机分为葛根素高、中、低剂量组、阳性对照组(倍美力组)、模型组、假手术组,每组12只,除假手术组外,均摘除大鼠卵巢造成去势模型.灌胃30 d后,用Morris水迷宫检测大鼠认知功能的变化,用透射电镜观察海马CA1区、CA3区神经元形态变化.结果 在训练第6天,Morris水迷宫试验测试大鼠第一次经过平台的时间(潜伏期)与模型组比较,假手术组、阳性对照组和葛根素高剂量组有统计学意义(P＜0.05);大鼠在120 s内经过平台的次数与模型组比较,假手术组、阳性对照组和葛根素高剂量组有统计学意义(P＜0.01);与低剂量组比较,葛根素高剂量组有统计学意义(P＜0.05).透射电镜结果表明,葛根素在不同浓度(30～ 120 mg/kg)范围内,随着浓度的增大,抑制海马神经元细胞凋亡的作用越强,并有一定的剂量依赖关系.结论 葛根素可以促进去卵巢大鼠学习、记忆功能的恢复,减轻因雌激素缺乏而引起的大鼠海马神经元凋亡作用.