疏肝健脾活血方对大鼠肝星状细胞TGF-β1Smads信号通路的影响

目的探讨疏肝健脾活血方含药血清对活化的大鼠肝星状细胞(HSC)的转化因子β1(TGF-β1)/Smads信号通路相关基因表达的影响。方法利用病毒转染得到沉默Smad4基因(Smad4 RNAi)的HSCs-T6细胞株(Smad4 RNAi HSCs-T6)。HSCs-T6细胞株随机分为空白对照组、TGF-β1模型组、TGF-β1+含药血清组;Smad4 RNAi HSCs-T6细胞株随机分为Smad4 RNAi组、Smad4RNAi+TGF-β1模型组、Smad4 RNAi+TGF-β1+含药血清组。各组干预后酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠肝星状细胞Ⅰ型胶原含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测HSC-T6细胞Smad2、Smad3、Smad4、Smad7 mRNA相对表达量。结果 TGF-β1促进HSC的I型胶原表达[(40.88±5.49)pg/mL比(26.42±3.33)pg/mL,P0.05]及Smad2、Smad3、Smad7表达[TGF-β1模型组:(1.51±0.10)、(1.27±0.21)、(3.76±0.59);空白对照组:(1.07±0.10)、(1.00±0.09)、(1.00±0.09),P0.05],含药血清干预下HSC的I型胶原表达下调[(26.40±3.30)pg/mL比(40.88±5.49)pg/mL,P0.05]及Smad2、Smad3、Smad4、Smad7表达下调[TGF-β1+含药血清组:(0.31±0.02)、(0.16±0.09)、(0.31±0.30)、(0.38±0.30);TGF-β1模型组:(1.51±0.10)、(1.27±0.21)、(1.28±0.26)、(3.76±0.59),P0.05],沉默Smads4基因后得到相同结果(P0.05)。结论疏肝健脾活血方在离体条件下可以延缓肝纤维化的进程,其机制可能与阻断TGF-β1/Smads信号通路有关。     

TGF-β／Smads信号转导通路的研究进展

转化生长因子β（transforming growth factor beta,TGF-β）是一类多功能的细胞因子,由多种组织细胞合成,调控着细胞周期,影响细胞的增殖、分化、黏附、转移和凋亡,与人类多种疾病,尤其是肿瘤的发生发展密切相关。TGF—β超家族与其相应的受体、胞内信号转导分子（主要是Smad蛋白家族）组成一个影响肿瘤发生和发展的信号通路,调节靶基因的转录。     

补肾祛毒汤对肾衰竭大鼠TGF-β1/Smads信号转导通路的影响

<正>补肾祛毒汤是本院肾内科治疗慢性肾功能衰竭的经验方,全方以健脾益肾、祛湿泄浊、活血化瘀为法,临床治疗效验颇丰。在临床观察及前期实验中发现其具有明显改善肾功能,抑制TGF-β1表达,促进肾组织肝细胞生长因子的表达,抗肾间质纤维化,延缓肾脏病进展的作用[1]。本实验运用本方干预慢性肾功能衰竭大鼠,观察补肾祛毒汤对大鼠TGF-β1/Smads信号转导通路的影响机制。1材料与方法     

基于TGF-β1/Smads信号通路中医药抗纤维化研究进展

组织器官纤维化是多种细胞因子、多条信号通路共同作用的产物,转化生长因子β1(TGF-β1)几乎参与了纤维化发生进展的全过程,是当前最强促纤维化细胞因子之一.TGF-β1主要通过TGF-β1/Smads信号通路发挥促纤维化作用,近年来关于该信号通路的研究成果不断增多.中医药因其成分复杂、靶点多样、不良反应少等优势被广泛应...     

基于TGF-β1/Smads通路治疗心肌纤维化的研究进展

心肌纤维化是全身多种疾病破坏心脏组织和结构的病理表现,可导致最终进展为心力衰竭.因此,抑制心肌纤维化,对于改善心脏结构、保护心脏功能意义重大.影响心肌纤维化的信号通路众多,但转化生长因子(TGF)-β1/Smads信号通路却是影响心肌纤维化的经典通路.近年来,对其抑制心肌纤维化的各种研究非常广泛,本文结合近年来国内外最...     

姜黄素对急性肺损伤大鼠肺组织转化生长因子-β_1/Smads信号通路的影响

目的探讨姜黄素在大鼠急性肺损伤中早期应用对转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smads信号通路的影响。方法健康雄性Sprague Dawley大鼠36只,随机分为空白对照组、模型组和姜黄素组,每组12只。采用博来霉素气管内一次性滴注给药建立模型,造模第2天开始姜黄素组大鼠给予100 mg·kg-1·d-1姜黄素灌胃,模型组和空白对照组大鼠以等体积生理盐水灌胃,用药第3、7天分批将大鼠处死,采集肺组织标本,采用免疫组织化学法观察肺组织TGF-β1以及胞内信号转导蛋白Smads(Smad2/3、7)的表达变化。结果空白对照组大鼠第3、7天时肺组织结构未见异常。模型组大鼠第3天肺组织以肺泡急性炎症为主,毛细血管充血扩张,肺泡腔内可见大量炎性渗出;第7天部分肺泡间隔增厚,管壁增厚,肺泡间隔及肺泡腔内炎性细胞浸润增多,较第3天严重。姜黄素组大鼠第3、7天肺组织部分细支气管及肺泡腔内可见少量散在分布炎性细胞,与同期模型组比较炎症和损伤程度均有所减轻。模型组大鼠肺组织中TGF-β1、Smad2/3蛋白的表达水平与空白对照组比较均显著升高(P<0.01),姜黄素组大鼠肺组织TGF-β1、Smad2/3表达较模型组显著降低(P<0.01)。模型组和姜黄素组大鼠肺组织Smad7表达水平与空白对照组比较均显著降低(P<0.01,P<0.05),且姜黄素组显著高于模型组(P<0.01)。结论姜黄素对大鼠急性肺损伤的早期干预和治疗可能是通过下调Smad2/3蛋白和上调Smad7蛋白,进而影响TGF-β1/Smads信号通路。     

基于Nrf2/HO-1信号通路探讨艾灸对卵巢储备功能减退大鼠的炎性调控机制

目的 探索艾灸对卵巢储备功能减退(DOR)大鼠模型卵巢的保护作用是否与核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶1(HO-1)信号通路介导的炎性调节有关.方法 将50只雌性大鼠随机分为空白组、雷公藤多苷(GTW)组、艾灸组、全反式维甲酸(ATRA)组和二甲基亚砜(DMSO)组,每组10只.GTW组、艾灸组、ATRA...     

TGF-β/Smads信号通路在常见妇科疾病中的研究进展

转化生长因子-β(TGF-β)/Smads信号通路是细胞内重要的信号转导通路,参与细胞增殖、分化、凋亡和识别等过程.此外,TGF-β/Smads信号通路还是机体内极其重要的信号通路,在人体发育及机体调节过程中具有一定的调控作用,其异常激活与疾病的发生发展密切相关,在宫颈癌、卵巢癌、盆底器官脱垂、多囊卵巢综合征等女性常见...     

大蒜素对大鼠肾间质纤维化的干预作用及对TGF-β1/Smads信号通路的影响[*]

目的 观察大蒜素对大鼠肾间质纤维化的干预作用，探究其作用与TGF-β1/Smads信号通路的关系。方法 将SD雄性大鼠随机分为3组，采用单侧输尿管结扎术（UUO）建立肾间质纤维化模型，造模后24h予大蒜素组大鼠大蒜素60mg/(kg?d)灌胃，予假手术组和模型组等量生理盐水灌胃。造模后第15日检测3组大鼠的血清肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）及24h尿蛋白（U-TP），并处死大鼠，留取肾组织，包埋切片后行Masson染色，观察肾组织的病理结构，运用免疫组化法检测大鼠肾组织中TGF-β1及α-SMA的表达，Western Blot法测定肾组织中p-Smad2和p-Smad3的表达。结果 与模型组相比，大蒜素组大鼠的体质量显著增高［（298.52±14.82）g比（275.53±23.92）g，P<0.05］，肾脏指数显著下降［（0.53±0.15）%比（0.84±0.25）%，P<0.01］，肾脏组织病变程度有所改善，SCr、BUN及U-TP均显著低于模型组［SCr：（48.54±5.03）μmol/L比（55.10±7.50）μmol/L，BUN：（5.56±0.43）mmol/L比（6.25±0.51）mmol/L，U-TP：（1009.87±105.02）mg/L比（1300.57±229.65）mg/L ，P<0.05］，肾组织中TGF-β1、α-SMA、p-Smad2和p-Smad3蛋白的表达均有下调［TGF-β1：（0.227±0.011）比（0.282±0.020），α-SMA：（0.326±0.009）比（0.471±0.012），p-Smad2：（0.195±0.011）比（0.279±0.016），p-Smad3：（0.220±0.020）比（0.699±0.076），P<0.01］。结论 大蒜素能够通过调节TGF-β1/Smads信号通路，从而改善大鼠的肾间质纤维化程度，对肾功能起到一定的保护作用。     

TGF-β_1/Smads信号转导通路在慢性阻塞性肺疾病中的研究进展

TGF-β1/Smads通路对呼吸系统疾病有重要影响,可引发一系列与气道重塑相关的病理反应。慢性阻塞性肺疾病(COPD)的发生、发展与气道重塑密切相关,成纤维细胞增生、杯状细胞增生、胶原与氨基聚糖沉积、黏液腺增生及肥大均与COPD的气道重塑相关,TGF-β1参与并调节了这些病理过程。Smad2、Smad3、Smad4也参与了COPD的气道重塑过程。目前国内关于TGF-β1/Smads与COPD相关性的实验研究较少,尚未见临床观察。TGF-β1/Smads信号转导通路在COPD发生、发展中的作用还有待进一步阐明,中医药在COPD临床与实验研究中显示良好作用及应用前景,但目前研究主要还集中在单一因子或单一作用环节,对TGF-β1/Smads等其他信号转导通路作用的研究尚少。     

补肾活血方对薄型子宫内膜干细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的探讨补肾活血方对薄型子宫内膜干细胞Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路的影响。方法选取薄型子宫内膜患者在确定排卵日后第7~9天,用一次性子宫内膜取样器吸取子宫内膜组织约100 mg,生理盐水冲洗干净后,投入4%多聚甲醛中固定。将取得的内膜组织分离培养子宫内膜干细胞,制备药物血清。将子宫内膜干细胞分为对照组、补肾活血方高、中、低剂量组、西药组。给予药物干预后双荧光素酶报告系统检测β-catenin/T细胞因子(TCF)转录活性,免疫荧光法检测CD34/CD117蛋白的表达,RT-PCR法检测Oct-4基因,蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测腺苷三磷酸结合转运蛋白(ABCG2)的表达。结果转染相同量的质粒,补肾活血方中、高剂量组和西药组与对照组比较有显著性差异(P0.05)。CD34/CD117、Oct-4基因、ABCG2蛋白在子宫内膜干细胞中均呈阳性表达,CD34蛋白的表达补肾活血方中剂量组与对照组比较有显著性差异(P0.05),补肾活血方高剂量组、西药组与对照组比较有极显著性差异(P0.01),CD117蛋白的表达补肾活血方中剂量、高剂量组与对照组比较有显著性差异(P0.05),西药组与对照组比较有极显著性差异(P0.01)。RT-PCR检测结果显示,Oct-4 mRNA的表达率各给药组与对照组存在显著性差异(P0.05);Western blot检测结果显示,ABCG2蛋白的表达率各给药组与对照组比较均存在显著性差异(P0.05)。结论补肾活血方可以增加薄型子宫内膜干细胞的荧光活性,从而促进Wnt/β-catenin信号通路的激活,并可以不同程度的增加CD34/CD117、Oct4基因及ABCG2蛋白的表达。     

TGF-β/Smads信号通路及其在肿瘤中的作用

活化的转化生长因子β(TGF-β)通过与其受体及胞质蛋白Smads结合转入细胞核内,调节应答基因的转录,TGF-β/Smads信号通路能调节细胞的生长、发育和凋亡。该信号通路在恶性肿瘤的发生、发展过程中起到双重作用,在生理状态下,TGF-β/Smads信号通路具有抑制恶性肿瘤发生的作用;在肿瘤的进展期,反而会促进恶性肿瘤的侵袭和转移。     

熊去氧胆酸通过调控TGF-β1/Smads信号通路对博来霉素诱导大鼠肺纤维化的影响

目的 基于转化生长因子-β1(Transforming growth factor beta1,TGF-β1)/Smads信号通路探讨熊去氧胆酸(Ursodeoxycholic Acid, UDCA)调控通过博来霉素诱导的大鼠肺纤维化的作用机制。方法 选取100只成年健康雄性Wistar大鼠作为研究对象,采用随机数表法进行分组,分为空白组、模型组、低剂量熊去氧胆酸+博来霉素组、中剂量熊去氧胆酸+博来霉素组、高剂量熊去氧胆酸+博来霉素组,每组各20只。除空白组大鼠外,其余各组均给予大鼠单次气管内滴注博来霉素来建立实验性的肺纤维化动物模型。于造模当天开始给予低剂量熊去氧胆酸+博来霉素组、中剂量熊去氧胆酸+博来霉素组、高剂量熊去氧胆酸+博来霉素组大鼠熊去氧胆酸(剂量分别为50 mg/(kg·d)、100 mg/(kg·d)、200 mg/(kg·d))1次/d灌胃。实验第1、7、14、21天所有各组分别抽取4只大鼠,采用酶联免疫吸附剂测定法(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay, ELISA)检测大鼠血清中TGF-β1的表达水平。第21天采用苏木素-伊红染色(H...     

实验性大鼠肝脏癌变过程中转化生长因子-β1/Smads信号通路系列变化的研究

目的 本研究通过大鼠肝癌模型的建立,观察正常肝脏发展成肝癌过程中转化生长因子β1(TGF-β1)/Smads信号通路变化,对肝癌形成的机制进行一定的探索.方法 用二乙基亚硝胺溶液(DENA)诱导大鼠肝癌模型,免疫组化的方法检测不同时期TGF-β1、磷酸化Smad2、Smad4和Smad7蛋白的表达,半定量RT-PCR检测Smad4 mRNA的表达.结果 正常细胞时TGF-β1和Smad4很少表达,随着肝硬化的发展,两者的表达均明显增强,但DENA处理22周后的肝组织中Smad4表达明显下降,肝癌降低更显著;正常细胞可有较多磷酸化Smad2的表达,DENA处理8周时表达明显减少,后逐渐增多,DENA处理16周、22周时磷酸化Smad2的表达接近正常水平,但肿瘤内表达明显减少,并显著低于DENA处理8周时;正常肝细胞可见Smad7的表达,随着肝硬化的发展而加重,DENA处理22周时的肝组织达到最高,肝癌的表达仅略低于22周时的肝组织.结论 肝癌的发生机制非常复杂,大鼠肝硬化晚期Smad4表达的减少、甚至消失,TGF-β1和Smad7的过高表达,磷酸化Smad2的减少,在大鼠肝癌的发生、发展中都起着非常重要的作用.     

滋阴补阳序贯法联合西药对卵巢储备功能下降排卵障碍性不孕大鼠TGF-β1/Smads信号通路的影响

目的：探讨滋阴补阳序贯法联合西药对卵巢储备功能下降(diminished ovarian reserve,DOR)排卵障碍性不 孕大鼠的TGF-β1/Smads信号通路的影响。方法：SD雌性大鼠40只,随机分为空白组、模型组、西药组(人工周期+促 排卵)、滋阴补阳序贯组、联合用药组共5组,每组8只。用雷公藤多苷片50 mg/(kg.d)灌胃连续2周,建立DOR大鼠模 型。空白组、模型组用生理盐水灌胃,连续10日;西药组予人工周期加促排卵治疗;滋阴补阳序贯组在动情前期予 滋阴方,动情后期予补阳方灌胃;联合用药组在西药组的基础上动情前期予滋阴方,动情后期予补阳方。HE染色 观察大鼠卵巢组织形态变化,免疫组织化学检测大鼠卵巢转化生长因子β1受体(transforming growth factor β1 receptor, TGF-β1R)的水平,Western印迹检测大鼠卵巢Smad2,Smad3,Smad7蛋白的表达。结果：与空白组比较,DOR模型组 大鼠卵巢黄体数、成熟卵泡数、生长卵泡数显著减少,闭锁卵泡数升高(P<0.01);TGF-β1R表达升高,Smad2和Smad3 蛋白水平显著降低,Smad7蛋白显著升高(P<0.01)。与模型组比较,各治疗组黄体数、成熟卵泡数、生长卵泡数增 多,闭锁卵泡数减少,Smad2和Smad3蛋白水平升高,Smad7蛋白水平降低(P<0.05或P<0.01)。联合用药组与西药组 比较,黄体数及生长卵泡数增加,TGF-β1R表达升高,Smad2和Smad3蛋白水平升高,Smad7蛋白水平降低(P<0.05或 P<0.01)。结论：滋阴补阳序贯法联合西药能够上调DOR大鼠卵巢TGF-β1R,Smad2,Smad3表达,降低Smad7表达,改 善DOR大鼠卵巢储备功能。     

miR-215-5p调控YY1通过TGF-β1/Smad信号通路对PCOS大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响

目的 探究MicroRNA-215-5p(miR-215-5p)在多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠中的表达及其对卵巢颗粒细胞(GC)凋亡的影响,并分析潜在机制。方法 采用脱氢表雄酮(DHEA)建立PCOS大鼠模型,分离并培养原代PCOS大鼠卵巢GC,分为对照组(control组)、sh-NC组、sh-YY1组、sh-YY1+LY2109761组、miR-NC组、miR-215-5p mimic组、miR-215-5p mimic+pc-NC组、miR-215-5p mimic+pc-YY1组。TUNEL法检测PCOS大鼠卵巢组织GC凋亡;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测卵巢组织/GC中miR-215-5p、阴阳-1(YY1)mRNA表达;CCK-8法和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot检测PCOS大鼠卵巢组织/GC中YY1、转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad4蛋白表达。结果 miR-215-5p在PCOS大鼠卵巢组织中低表达,YY1 mRNA和蛋白水平在PCOS大鼠卵巢组织中显著升高(P<0.05);敲低YY1或上...     

CO中毒合并肺部感染患者血清TGF-β1/Smads信号通路的表达及其相关性

目的 探究一氧化碳（CO）中毒合并肺部感染患者血清转化生长因子-β(TGF-β1)/果蝇抗生物皮肤生长因子（Smads）蛋白家族信号通路的表达及其相关性。方法 选取张家口市第二医院2018年6月-2021年3月收治的CO中毒患者336例,并发肺部感染患者80例设为感染组;无肺部感染的患者256例为对照组。采用酶联免疫吸附法测定血清中白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C反应蛋白（CRP）表达水平。检测血清Smad 2/3/6/7、TGF-β1表达水平。比较两组患者上述指标的差异。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析TGF-β1预测CO中毒患者并发肺部感染的效能。采用Pearson线性相关分析CO中毒合并肺部感染患者血清Smad2、Smad3、Smad6、Smad7及TGF-β1与IL-8、TNF-α、CRP的相关性。结果 感染组患者共80例,送检痰液标本检出病原菌98株,其中革兰阴性菌71株（72.45%）,革兰阳性菌20株（20.41%）,真菌7株（7.14%）。革兰阴性菌主要是铜绿假单胞菌,占27.55%,其次分别为鲍氏不动杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌。革...     

补肾活血方对卵巢储备功能低下患者中医症候积分及卵巢功能的影响

目的探讨补肾活血方对卵巢储备功能低下患者中医症候积分及卵巢功能的影响。方法选择2017年3月至2019年8月民权县中医院收治的卵巢储备功能低下患者作为研究对象,共70例,按照治疗方案分为两组,各35例。对照组采用常规药物治疗,观察组采用补肾活血方治疗,记录两组中医症候积分和卵巢功能水平,并进行对比。结果治疗后,观察组中医症候积分低于对照组,血清卵泡刺激素、黄体生成素水平低于对照组,雌激素水平高于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论补肾活血方可调节卵巢储备功能低下患者内环境,改善临床症状,维持卵巢功能,值得临床推广应用。     

TGF-βSmads信号通路调控增生性瘢痕影响机制研究

增生性瘢痕的修复与成纤维细胞增殖与凋亡和胶原蛋白合成与降解以及细胞外基质的沉积与分解密切相关,成纤维细胞增殖与凋亡和胶原蛋白合成与降解以及细胞外基质的沉积与分解都受TGF-β1/Smads信号转导通路的调节,本文对TGF-β及其下游Smads信号转导通路之间的关系,以及该信号通路调控增生性瘢痕影响机制的内在联系进行综述...     

宫腔粘连内膜纤维化进展与TGF-β1/Smads信号通路的相关性研究*

目的 通过对宫腔粘连（IUA）患者子宫内膜病理切片进行回顾性分析,明确IUA内膜纤维化进展与TGF-β1/Smads信号通路的相关性。方法 随机调取2018年1月至2019年5在云南中医药大学第一附属医院(云南省中医医院)妇科就诊的IUA患者子宫内膜内膜组织病理切片30例（轻、中、重各10例）;非粘连子宫内膜病理切片10例,为同期因宫内膜增厚行宫腔镜刮宫术,且内膜组织病检证实为子宫内膜单纯性增生10例。采用HE染色进行腺体计数,Masson染色评估胶原纤维面积明确IUA纤维化程度;免疫组化法检测与TGF-β1/Smads信号通路相关的TGF-β1、Smad2、 Smad3、Smad7表达水平,证实TGF-β1/Smads信号通路与IUA发生发展的相关性。结果 HE染色显示,IUA组较非IUA组腺体明显减少,差异显著（P<0.001）,且与粘连程度呈负相关。Masson染色显示,IUA组较非IUA组胶原纤维面积广泛,差异显著（P<0.001）,且与粘连程度呈正相关。IHC检测结果显示,IUA组TGF-β1、Smad3、Smad2表达明显上调,Smad7表达明显下调,差异显著（P<0.01）,且其中TGF-β1、Smad3与粘连程度呈正相关,Smad7与粘连程度呈负相关,而Smad2与粘连程度无明显相关（P>0.05）。结论 子宫内膜纤维化进展参与了IUA的发生、发展,且子宫内膜组织TGF-β1/Smads信号通路激活可能参与了这一过程。调节TGF-β1/Smads信号通路相关分子表达可作为防治IUA内膜纤维化进展的靶点之一。