5-脂氧合酶与消化系肿瘤的关系

5-脂氧合酶是催化花生四烯酸代谢产生5-OH-6,8,11,14-廿碳四烯酸和白三烯等类花生酸产物的重要酶类。近年来研究发现5-脂氧合酶与人类多种肿瘤的发生发展有关。本文主要综述5-脂氧合酶及其抑制剂与消化系肿瘤的关系。     

5-脂氧合酶激活蛋白在介导细胞因子诱导血管内皮细胞黏附分子表达中的作用

目的研究5-脂氧合酶激活蛋白（FLAP）在细胞因子诱导血管内皮细胞表达黏附分子中的介导作用,以及MK886对血管内皮细胞表达黏附分子的抑制作用。方法分离并原代培养人脐静脉血管内皮细胞,用FLAP微小强有力RNA（small interfering RNA,siRNA）抑制FLAP的表达,或用MK886抑制FLAP的活性,采用肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素1β（IL-1β）刺激血管内皮细胞,通过Western杂交和酶联免疫吸附检测血管细胞黏附分子-1（VCAM-1）、细胞间黏附分子- 1（ICAM-1）和E选择素的表达。结果人脐静脉血管内皮细胞能表达低水平的黏附分子,在细胞因子的刺激下黏附分子的表达水平提高。FLAP表达抑制后,细胞因子诱导黏附分子表达的作用降低。细胞因子刺激12 h后,同未处理细胞表达的黏附分子比较,不同黏附分子表达分别增加了6～51倍;用不同浓度MK886处理后,细胞表达的黏附分子水平明显下降,并呈MK886剂量依赖性。结论FLAP介导了细胞因子诱导血管内皮细胞表达黏附分子的作用,MK886具有抑制血管内皮细胞表达黏附分子的作用。     

环氧合酶-2及5-脂氧合酶与肝脏疾病

体内花生四烯酸 (arachidonic acid,AA) 主要经环氧合酶 (cyclooxygenase,COX)及5-脂氧合酶 (5-lipoxy-genase,LOX) 两条途径代谢,代谢产物为主要包括前列腺素 (prostaglandins,PGs)、血栓素 (thromboxanes,TXs) 和白三烯 (leukotrienes,LTs) 在内的二十碳不饱和脂肪酸.     

花生四烯酸5-脂氧合酶激活蛋白基因多态性与急性冠状动脉综合征的易感性

目的探讨花生四烯酸5脂氧合酶激活蛋白(ALOX5AP)基因SG1 3S114T/A多态性与急性冠状动脉综合征(ACS)的易感性。方法选择住院的胸痛患者714例,将确诊为ACS的患者377例作为ACS组,非ACS患者337例作为对照组,采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性方法检测ALOX5AP基因SG13S114T/A多态性,并进行logistic回归分析。结果 ACS组患者AA、AT和TT基因型频率分别为1 3.79%、50.93%和35.28%,对照组患者分别为12.76%、38.58%和48.66%,2组AT和TT基因型频率差异有统计学意义(P=0.041,0.020);ACS组男性AT基因型频率高于对照组(P=0.040),女性TT基因型频率低于对照组(P=0.013)。SG13S114T/A位点AT和TT基因型以及T等位基因是所有ACS(P=0.004、0.001和0.013)和男性ACS(P=0.014、0.005和0.020)发病的危险因素。结论 ALOX5AP基因SG1 3S114T/A多态性AT和TT基因型以及T等位基因可能与老年人,特别是老年男性ACS的易感性相关。     

5-脂氧合酶激活蛋白基因多态性增加阿司匹林抵抗易感性

目的探讨5-脂氧合酶激活蛋白(ALOX5AP)基因单核苷酸多态性与中国汉族人群阿司匹林抵抗(AR)的相关性。方法纳入450例持续服用阿司匹林(100mg,≥7d)的缺血性心脑血管病中的高危患者,血栓弹力图检测花生四烯酸途径的血小板聚集率,依据诊断标准分为AR组110例,阿司匹林敏感(AS)组340例。聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术分析SG13S32、SG13S89和SG13S114单核苷酸多态性。应用Haploview软件构建单倍型,并进行分析。结果 AR组与AS组SG13S114T/A突变A等位基因频率分布(40.5%vs 31.3%,P=0.01)和AA/TA基因型及TT基因型比较,差异有统计学意义(35.5%vs 46.2%,P=0.03)。而2组SG13S89、SG13S32基因型和等位基因分布频率比较,差异无统计学意义(P0.05)。logistic回归分析显示,携带SG13S114AA/TA基因型的人群发生AR的风险是携带TT基因型的3.241倍(95%CI:1.552~6.767,P=0.002)。单倍型分析显示,TG是1种危险单倍型,携带TG单倍型的人群AR发生风险是不携带TG单倍型人群的1.490倍(95%CI:1.088~2.040,P=0.014),AG是1种保护单倍型,可以减少AR发生的风险(OR=0.691,95%CI:0.502~0.952,P=0.029)。结论 ALOX5AP rs10507391与汉族人群AR相关;危险单倍型TG可增加AR发生风险。     

5-脂氧合酶与脑缺血再灌注

5-脂氧合酶(5-lipoxygenase，5-LO)是催化花生四烯酸转化为白三烯的关键酶：研究表明，5-LO参与了Alzheimer病、脑血管病、癫痫和脑肿瘤等多种神经系统疾病的发生和演变过程。脑缺血再灌注时，5-LO的表达增加可能促进了神经细胞死亡。     

12-脂氧合酶在糖尿病及其并发症中的作用

花生四烯酸是人体内重要的不饱和脂肪酸,花生四烯酸及其活性代谢产物在调节细胞的生长、增殖、生存和凋亡方面发挥了重要作用。其主要通过环氧合酶、脂氧合酶和细胞色素P450途径进行代谢,在哺乳动物体内,脂氧合酶又可以分为5-脂氧合酶、12-脂氧合酶和15-脂氧合酶,目前发现它们可能参与了糖尿病及其慢性并发症的发生和发展。     

5脂氧合酶激活蛋白基因单核苷酸多态性与冠心病的关联研究

目的探讨5-脂氧合酶激活蛋白基因2354T/A和16699G/A多态性与冠心病的关系。方法采用聚合酶链反应—限制片长多态性技术,对282例经冠状动脉造影证实的冠心病患者和79例对照者进行检测,分析5-脂氧合酶激活蛋白基因2354T/A和16699G/A多态性的基因型和等位基因频率分布情况,检验多态位点与冠心病的关联。结果 5-脂氧合酶激活蛋白基因2354T/A和16699A/G多态性在病例组和对照组均以TT、GG基因型为主。A等位基因为少见型。连锁不平衡分析显示2354T/A,16699G/A间不存在连锁不平衡(D’=0.798,r2=0.037)。单因素分析显示以上2个多态未显示与冠心病的相关性,应用Logistic回归模型将混杂因素矫正后进行分析单个多态位点与疾病的关系时,以上2个多态同样未显示与冠心病的相关性。将以上多态全部纳入构建单体型,有两种单体型频率较高分别为:AG28.6%、TG68.9%,单体型分析显示,两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 5-脂氧合酶激活蛋白基因2354T/A和16699G/A多态性与中国天津汉族人群冠心病易感性无明显关联。     

5-脂氧合酶特异性抑制剂对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响

流行病学和动物研究表明，胰腺癌的发生发展与亚油酸、花生四烯酸（AA）等多聚不饱和脂肪酸的摄人有关。5-脂氧合酶（5-lipoxygenase，5-LOX）是催化AA转化为5-羟二十碳四烯酸（5-HETE）和白三烯（Ⅱ）的关键酶。齐留通（zileuton）其化学名为N-[1-（苯并[b]噻吩基）-2-乙基]-N-羟基，通过抑制5-LOX活性而抑制AA转化为LTB4，是特异性5-LOX抑制剂。我们应用齐留通阻断5-LOX代谢途径，研究对胰腺癌细胞SW1990凋亡及凋亡相关基因bcl-2 mRNA和bax mRNA的影响，从而为胰腺癌的治疗寻找一种新的有效途径。     

联合抑制环氧合酶-2与5-脂氧合酶对胃癌细胞增殖凋亡的影响

目的:通过单独及联合应用选择性COX-2抑制剂尼美舒利和5-LOX抑制剂AA861处理胃癌细胞系AGS,比较各实验组的增殖凋亡率,探讨联合抑制COX-2和5-LOX两条通路对胃癌细胞系AGS增殖凋亡的影响.方法:AGS细胞在含100 mL/L小牛血清 100kU/L青、链霉素的RPMI1640培养基中培养,取对数生长期细胞做为实验组.以相差显微镜观察药物处理前后的细胞形态改变;设立AA861(25,50,100 μmol/L)组,尼美舒利(50,100,200 μmol/L)组,及AA861联合尼美舒利处理组(50 μmol/L AA861 100 μmol/L尼美舒利),用四氮唑蓝(MTT)法在24,48,72 h测量细胞吸光度,以此检测单用及联用AA861与尼美舒利对细胞生长增殖的影响;实验通过脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)和吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)染色法检测细胞凋亡率,以DNA-LADDER法观察凋亡.结果:相差显微镜观察,药物处理组细胞与对照组相比,形态发生明显改变.MTT显示,除尼美舒利200μmol/L的24,48 h处理组及AA861 25 μmol/L的24 h处理组外,尼美舒利和AA861基本呈时间、剂量依赖性抑制AGS细胞增殖.TUNEL染色法表明,尼美舒利或AA861处理组的细胞凋亡率随着剂量的增加而升高.药物处理48 h后,MTT法表明,细胞增殖在AA861组和尼美舒利组与两药联用组间相比差异显著(0.240±0.002 vs 0.207±0.001,P＜0.01;0.211±0.002 vs 0.207±0.001,P＜0.05);TUNEL染色法表明,单药组与两药联用组细胞凋亡率相比差异明显(AA861组:1 8.67%±0.03%,尼美舒利组:20.94%±0.48%vs两药联用组:23.76%±0.92%,P＜0.01);AO/EB染色法也同时表明,细胞凋亡单药组与两药联用组相比差异明显(AA861组:18.17%±0.28%、尼美舒利组:19.35%±0.74% vs两药联用组:23.78%±0.04%,P＜0.01).DNA琼脂糖凝胶电泳法显示,两药联合处理AGS细胞组与单药处理组比较,癌细胞增殖被抑制,凋亡明显增加.结论:COX-2抑制剂尼美舒利和5-LOX抑制剂AA861对胃癌AGS细胞的增殖抑制以及促凋亡作用基本呈时间浓度依赖性.联用尼美舒利和AA861抑制COX-2与5-LOX两条通路,与单独抑制其中一条通路比较,能更有效抑制胃癌细胞增殖,促进凋亡.     

选择性环氧合酶-2抑制剂与COX-2/5-脂氧合酶双酶抑制剂对食管鳞状细胞癌细胞增殖的影响

目的比较选择性环氧合酶-2（COX-2）抑制剂与COX-2/5-脂氧合酶（5-LOX）双酶抑制剂对食管鳞状细胞癌（ESCC）细胞增殖的影响,探讨单一抑制COX-2对抑制ESCC细胞增殖可能存在的局限性。方法 COX-2/5-LOX双抑制剂licofelone和选择性COX-2抑制剂NS-398分别作用于ESCC细胞株TE-1,设药物处理组、溶媒（DMSO）对照及空白对照组。两种药物分别以25μmol/L、50μmol/L、75μmol/L和100μmol/L浓度作用24 h及48 h。四唑单钠盐（CCK-8）法检测细胞增殖;RT-PCR和W esternb lot检测mRNA及蛋白表达;ELISA法检测PGE2和LTB4含量;流式细胞术检测细胞周期。结果 TE-1细胞的浓度及时间依赖性增殖抑制只出现于licofelone处理组。licofelone及NS-398对COX-2 mRNA、蛋白及下游产物PGE2表达均有时间、浓度依赖性抑制作用（P〈0.05）,但仅licofelone处理组出现5-LOX mRNA、蛋白及下游产物LTB4的时间、浓度依赖性表达抑制。100μmol/L licofe-lone及50μmol/L NS-398作用24 h后TE-1细胞分别有67.1%、63.8%处于G0/G1期,显著高于对照组（P〈0.05）。结论单一抑制COX-2并不能稳定抑制TE-1细胞的增殖。较高浓度NS-398可增加5-LOX分流,减弱COX-2抑制对细胞增殖的负性影响。     

5脂氧合酶激活蛋白介导人脐静脉内皮细胞氧化损伤

目的探讨5脂氧合酶激活蛋白在人脐静脉内皮细胞氧化损伤中的机制。方法体外分离、培养人脐静脉内皮细胞,分别用10、50、100和200mg/L氧化型低密度脂蛋白处理细胞24h,采用酶联免疫吸附法检测细胞上清液白三烯C4水平,MTT法检测细胞活力,以及实时荧光定量PCR和Western blot检测细胞5脂氧合酶激活蛋白mRNA及蛋白表达的变化。结果100mg/L和200mg/L氧化型低密度脂蛋白作用人脐静脉内皮细胞24h细胞活力显著下降(P<0.01),白三烯C4分泌显著增加(P<0.01),回归分析显示白三烯C4释放量与氧化型低密度脂蛋白浓度显著相关(r=0.953,P<0.01)。PCR和Western blot分析发现,5脂氧合酶激活蛋白mRNA表达和蛋白表达均显著增强(P<0.01和P<0.05)。结论氧化型低密度脂蛋白促进人脐静脉内皮细胞分泌白三烯C4,导致人脐静脉内皮细胞氧化损伤可能与5脂氧合酶激活蛋白异常表达有关。     

5-脂氧合酶mRNA在食管鳞癌中的表达及与血管生成的关系

目的探讨5-脂氧合酶（5-LOX）和微血管密度（MVD）在食管鳞状上皮细胞癌（ESCC）组织中的表达及相关关系，及5-LOX与肿瘤浸润和转移的关系。方法用半定量RT-PCR法测定35例ESCC患者癌组织（T）和相邻癌旁组织（N）中5-LOX mRNA的表达，求得T／N值。同时用免疫组织化学法测定癌组织和癌旁正常组织中微血管密度（MVD）的T／N值。结果在35例ESCC患者中，33例5-LOX mRNA的T／N值〉1．0，占94．3％，34例MVD的T／N值〉1．0，占97．1％。5-LOX mRNA和MVD与食管鳞癌的肿瘤大小、浸润深度和淋巴结转移、肿瘤分化程度有关。5-LOX mRNA的T／N值与MVD的T／N值呈正相关。结论5-LOX与食管鳞癌血管生成和肿瘤浸润转移密切相关，其高表达可能促进肿瘤血管生成，从而促进ESCC的浸润和转移。     

雷公藤内酯醇诱导胰腺癌细胞凋亡及对5-脂氧合酶和凋亡基因表达的影响

目的 探讨雷公藤内酯醇(TL)在胰腺癌化学预防和治疗中的应用价值.方法 采用人胰腺癌细胞株SW1990作为研究对象,MTT法和吖啶橙(AO)染色分别检测SW1990细胞的增殖和凋亡,采用半定量RT-PCR法检测5-脂氧合酶(5-LOX) mRNA、bcl-2 mRNA和bax mRNA的表达.结果 10 μg/ml的TL对SW1990细胞生长的抑制率达30%以上,0.1 μg/ml TL处理24 h后,SW1990细胞凋亡指数达38.5%,显著高于对照组的14.97%.5-LOX、bcl-2、bax mRNA表达从0.7160 ± 0.0251,0.2446 ± 0.0311和0.0260 ± 0.0065分别变化为0.2400 ± 0.0316,0.0700 ± 0.0158和0.0700 ± 0.0158.结论 TL能抑制胰腺癌细胞增殖和诱导细胞凋亡,其凋亡机制可能与下调5-LOX mRNA和bcl-2 mRNA、上调bax mRNA基因表达有关.     

雷公藤内酯醇诱导胰腺癌细胞凋亡及对5-脂氧合酶和凋亡基因表达的影响

目的探讨雷公藤内酯醇(TL)在胰腺癌化学预防和治疗中的应用价值。方法采用人胰腺癌细胞株SW1990作为研究对象,MTT法和吖啶橙(AO)染色分别检测SW1990细胞的增殖和凋亡,采用半定量RT-PCR法检测5-脂氧合酶(5-LOX)mRNA、bcl-2 mRNA和bax mRNA的表达。结果10μg/ml的TL对SW1990细胞生长的抑制率达30%以上,0.1μg/mlTL处理24h后,SW1990细胞凋亡指数达38.5%,显著高于对照组的14.97%。5-LOX、bcl-2、bax mRNA表达从0.7160±0.0251,0.2446±0.0311和0.0260±0.0065分别变化为0.2400±0.0316,0.0700±0.0158和0.0700±0.0158。结论TL能抑制胰腺癌细胞增殖和诱导细胞凋亡,其凋亡机制可能与下调5-LOXmRNA和bcl-2mRNA、上调bax mRNA基因表达有关。     

5-脂氧合酶激活蛋白（ALOX5AP）基因单倍体型与心肌梗死易感性相关：人类基因组流行病学研究的荟萃分析

目的既往研究提示ALOX5AP基因变异与心肌梗死（Myocardial infarction,MI）相关,但这些研究大多样本较小,结论亦不一致。本文拟系统评价ALOX5AP基因变异与MI易感性的关系。对象与方法系统检索PubMed（1967．1—2009．5）、Embase（1967．1-2009．5）数据库及维普（1989．2009）、CNKI（1979—2009）中文期刊数据库,并通过阅读相关综述及文章的参考文献进一步获取信息。对目前已发表的评估ALOX5AP基因变异与MI关系的候选基因关联研究进行荟萃分析。应用固定效应模型（Fixed—effect models）计算比值比（Oddsratio,OR）及其95％可信限（CI）,用以描述ALOX5AP基因变异与MI的关系。结果共有5项探讨ALOX5AP基因HapA单倍体型（SG13S25G—SG13S114T．SG13S89G—SG13S32A）与MI关系的研究（合计MI病例2778人,对照2484人）及4项评估ALOX5AP基因HapB单倍体型（SG13S377A—SG13S114A—SG13S41A—SG13S35G）与MI关系的研究（合计MI病例1999人,对照1860人）纳入荟萃分析。5项关于HapA单倍体型的研究间无明显异质性（P=0．111,I^2=46．8％）。与非携带者相比,ALOX5AP基因HapA单倍体型携带者使MI的易感性增加24％（OR：1．24,95％可信限1．06—1．45,P=0．006）。4项关于HapB的研究亦无明显异质性（P=0．148,I^2=43．9％）;与非携带者相比,ALOX5AP基因HapB单倍体型携带者使MI的易感性增加31％（OR：1．31,95％可信限1．01—1．70,P=0．04）。结论本研究提示ALOX5AP基因HapA、HapB单倍体型与MI的易感性增加有关。     

血清白三烯B4水平、ALOX5AP基因SG13S89G/A多态性与急性心肌梗死的关联性研究

目的:探讨中国常州地区汉族人群血清白三烯(LT)B4水平、花生四烯酸5-脂氧合酶激活蛋白(ALOX5AP)基因SG13S89G/A多态性和急性心肌梗死(AMI)三者的相互关联性。方法:以262例AMI患者(AM I组)和132例非冠心病患者(对照组)作为研究对象,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测ALOX5AP基因SG13S89G/A多态性,同时采用酶联免疫吸附试验检测血清LTB4水平(以中位数/四分位数间距表示)。结果:对照组与AMI组ALOX4AP基因SG13S89G/A位点的(AA+GA)基因型(7.58%︰4.96%)、GG基因型(92.42%︰95.04%)以及A等位基因(4.17%︰2.67%)频率均差异无统计学意义;多变量Logistic回归分析显示,该位点多态性与AMI发病风险无显著相关性;AMI组血清LTB4水平显著高于对照组(477.97/370.52pg/ml︰200.57/236.65pg/ml,P<0.01);多变量Logistic回归分析显示,血清LTB4水平与AMI发病风险有显著相关性(P<0.01);AMI组和对照组的组内(AA+GA)基因型和GG基因型之间的血清LTB4水平比较差异无统计学意义。结论:中国常州地区汉族人群AMI患者血清LTB4水平显著升高,ALOX5AP基因SG13S89G/A多态性与AMI易感性无关,且不影响血清LTB4水平。     

糖耐量受损和2型糖尿病患者血清C反应蛋白与脂联素的水平及相关性

目的 探讨血清C反应蛋白(CRP)与脂联素在糖耐量受损(IGT)和2型糖尿病(T2DM)患者中的水平及其相关性.方法 选取56例IGT患者、55例T2DM患者及50例健康对照组人群作为研究对象,分别测定血清CRP、脂联素、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇、血糖、胰岛素,血压、身高、体重、腰围、臀围,计算体重指数,采用MINIMOD计算机软件包计算胰岛素敏感指数(SI)及急性胰岛素反应(AIR),并进行分析比较.结果 T2DM组、IGT组血清CRP分别为(2.46±0.25 )mg/L、(3.12±0.46 )mg/L,对照组为(0.46±0.21 )mg/L,前者显著高于后者;T2DM组、IGT组血清脂联素分别为(3.49±1.21) mg/L、(4.13±1.54) mg/L,对照组为(7.81±2.65) mg/L,前者显著低于后者.T2DM组和IGT组SI及AIR显著低于对照组,甘油三酯及低密度脂蛋白胆固醇显著高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05);CRP与脂联素、AIR和SI呈负相关,脂联素与AIR和SI呈正相关(P＜0.05).结论 血清CRP与脂联素在IGT和T2DM患者血清中表达发生异常改变,且与患者胰岛素抵抗密切相关,检测其血清水平对预测疾病预后及指导早期干预意义重大.     

2型糖尿病大血管病变与血清脂联素及C反应蛋白关系的研究

目的 探讨2型糖尿病患者血清脂联素及C反应蛋白水平与大血管病变的关系.方法 糖尿病患者63例,按颈动脉内膜中层厚度(CIMT)将其分为:CIMT≥1 mm者为A组;CIMT＜1 mm者为B组;健康体检者作为对照C组.分别检测身高、体重、血脂、血糖、空腹胰岛素、脂联素(APN)、C反应蛋白(CRP),计算体重指数及胰岛素抵抗指数(IRI),并进行统计学分析.结果 A组及B组血清APN水平低于C组(P<0.01),A组血清APN水平低于B组(P<0.01);A组及B组血清CRP水平高于C组(P<0.01),A组血清CRP水平高于B组(P<0.05).CIMT与APN、HDL呈显著负相关,与HOMA-IR、CRP呈显著正相关.进入回归方程的因素为CRP、APN、FBG、HDL、HOMA-IR.结论 血清APN水平降低、CRP水平升高是2型糖尿病患者颈动脉内膜增厚的主要危险因素,参与2型糖尿病大血管病变的发生和发展.