苦参碱通过HMGB1/TLR4/NF-κB通路对胃溃疡大鼠溃疡修复的影响

目的:探讨苦参碱对胃溃疡(GU)大鼠炎症反应和溃疡修复的影响及对高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的调控作用。方法:取SD雄性大鼠随机分为假手术对照组、模型对照组、苦参碱0.1、0.2 g/kg组、甘草酸(HMGB1抑制剂)0.03 g/kg组、苦参碱0.2 g/kg+甘草酸0.03 g/kg组,每组12只;除假手术对照组外,其余各组均用乙酸烧灼法建立GU大鼠模型,并于造模成功后灌胃给药,1次/d,连续给药28 d。观察大鼠一般行为变化;检测大鼠溃疡指数、溃疡抑制率;透射电镜观察大鼠胃黏膜组织形态变化;TUNEL法检测大鼠胃黏膜上皮细胞凋亡率;免疫荧光检测TLR4在胃黏膜组织中阳性表达水平;免疫组化法检测HMGB1、NF-κB在胃黏膜组织中阳性表达水平;蛋白印迹法检测白细胞介素-6(IL-6)、环氧合酶-2(COX-2)、髓样分化因子88(MyD88)、DNA损伤标记蛋白-磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)、修复关键蛋白-羧基末端连接蛋白反应蛋白(CtIP)和Rad51蛋白表达情况。结果:与假手术对照组比较,模型对照组大鼠...     

白藜芦醇对脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用及对HMGBl及TLR4mRNA表达的影响

目的:研究白藜芦醇(Resveratrol,Res)对脓毒症大鼠急性肺损伤(Acute lung injury,ALI)的保护作用及对ALI大鼠肺组织中高迁移率族蛋白(high mobility group box 1 protein,HMGBl)及Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)mRNA表达的影响。方法:将大鼠随机分为假手术组(Sham组)、脓毒症组(Sep组)和白藜芦醇组(Res组),采用盲肠结扎穿刺术(Cecal ligation and puncture,CLP)制备脓毒症相关性ALI大鼠模型,造模1 h后,Res组给予40mg/kg,Sham和Sep组给予等量生理盐水,均经股静脉注射。各组分别于2、6、12和24h,取大鼠肺组织,HE染色观察病理形态学变化,RT-PCR检测脓毒症大鼠各器官组织HMGB1及TLR4的mRNA的动态表达变化。结果:Res组在造模后12 h,肺组织病理变化与Sep组相比有所减轻,24 h Res作用达到最强,各种病理改变明显减轻,部分肺组织开始接近正常形态;Res组与Sepsis组比较,肺组织HGMB1及TLR4 mRNA表达明显下调。结论:Res可以通过下调肺组织HGMB1及TLR4 mRNA表达减轻脓毒症诱导的肺损伤。     

三黄茵赤汤通过调节HMGB1信号通路防治急性小鼠肝损伤

目的:探究三黄茵赤汤通过调控高迁移率族蛋白B1(HMGB1)信号通路对四氯化碳(CCl4)致小鼠急性肝损伤的防治作用及机制。方法:随机将48只KM小鼠分为正常组,模型组,三黄茵赤汤低、中、高剂量组及促肝细胞生长素组,建立四氯化碳(CCl4)诱导小鼠急性肝损伤模型。三黄茵赤汤低、中、高剂量组分别以剂量为16,32,48 g·kg~(-1)·d~(-1)的药物灌胃,促肝细胞生长素组给予促肝细胞生长素20 mg·kg~(-1)·d~(-1)腹腔注射。小鼠肝组织切片病理学变化用苏木精-伊红(HE)染色观察;相关酶试剂盒测定小鼠血清中肝功能指标-丙氨酸氨基转移酶(AST)和天冬氨酸氨基转移酶(ALT)的活性;酶联免疫吸附测定(ELISA)测定小鼠血清中白细胞介素6(IL-6)的表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠组织中HMGB1,天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3),凋亡相关分子B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关x蛋白(Bax)和Toll样受体4(TLR4)的蛋白表达情况。结果:与正常组比较,模型组明显升高血清中AST,ALT(P 0. 05)和IL-6的水平(P 0. 05)以及增加肝组织中HMGB1,TLR4和Caspase-3表达(P 0. 05)并下调Bcl-2/Bax(P 0. 05);与模型组比较,三黄茵赤汤各剂量组均能有效减轻小鼠肝脏的病理损害,降低血清中AST,ALT水平和降低IL-6的表达(P 0. 05),不同程度降低降低肝组织匀浆中HMGB1,TLR4和Caspase-3蛋白的表达(P 0. 05),并提高Bcl-2/Bax(P 0. 05),呈剂量依赖性。结论:三黄茵赤汤可能通过调控HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路,减轻细胞炎症反应,抑制细胞凋亡达到防治小鼠急性肝损伤的作用,HMGB1可能成为防治急性肝损伤的新靶点。     

白芍总苷对NAFLD大鼠HMGB1，TLR4通路的干预作用

目的:探讨白芍总苷(TGP)对高脂-果糖诱导非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝组织中高迁移率族蛋白1(HMGB1),Toll样变体4(TLR4)信号通路的影响及其作用机制。方法:用高脂-高果糖餐诱导NAFLD大鼠模型,除设正常组外,将模型大鼠随机分为模型组,水飞蓟宾组,二甲双胍组(200 mg·kg~(-1)·d~(-1)),TGP高、低剂量组(200,100 mg·kg~(-1)·d~(-1))。用药6周后观察各组大鼠空腹血糖(FBG),餐后2 h血糖(2 hBG),胰岛素(Fins),总胆固醇(TC),低密度脂蛋白胆固醇(LDLC),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),甘油三酯(TG),游离脂肪酸(FFA),丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和肝脏指数;并以免疫蛋白印迹法(Western blot)检测肝组织中HMGB1,TLR4蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组转氨酶,肝脏指数,血脂,2 hBG,Fins,HOMA-IR及TLR4,HMGB1蛋白均明显升高(P0.05,P0.01);与模型组比较,TGP高、低剂量组2 hBG,Fins,HOMA-IR,LDL-C,TG,TC,FFA,ALT,AST均明显降低(P0.05,P0.01),高、低剂量TGP在拮抗胰岛素抵抗、降糖降脂,改善肝功能有较显著的作用,TGP高、低剂量组均可下调HMGB1,TLR4蛋白的表达(P0.01)。结论:在NAFLD病程进展中,HMGB1,TLR4是导致炎症的其中一条通路,TGP通过下调HMGB1,TLR4信号通路的表达而起到抑制大鼠NAFLD炎症发展的作用。     

黄连乌梅提取物联合使用抑制脂多糖诱导的细胞炎症反应及机制研究

目的:探讨黄连乌梅提取物联合使用对脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7炎症反应的影响及作用机制。方法:采用LPS诱导RAW264.7细胞炎症模型,试验分为空白对照组、模型对照(LPS)组、二甲基亚砜(DMSO)组、黄连乌梅提取物89、178、343μg/mL组。采用CCK-8法检测细胞增殖率;流式细胞术检测细胞凋亡率、活性氧(Reactive oxygen species, ROS)水平和细胞表面分子CD80、CD83、CD86的水平;ELISA法检测其对细胞分泌炎症因子的影响;Western blot法检测细胞中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、P65、Toll样受体4(TLR4)蛋白的表达。结果:与空白对照组比较,LPS模型组细胞HMGB1、TLR4蛋白表达明显上调(2.05±0.05、2.56±0.63,P<0.05或P<0.01),细胞表面分子CD80、CD83、CD86显著增多(19.81±1.85、3.81±0.40、3.23±0.40,P<0.01),细胞上清中TNF-α、IL-6和IL-1β含量显...     

生姜通过TLR4/NF-κB信号通路对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用

目的：探讨生姜醇提液对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用及作用机制。方法：将Balb/c小鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组、生姜低、高剂量组，每组10只，正常组小鼠经鼻滴入生理盐水，其余各组经鼻滴入含LPS(50μg)的生理盐水。造模30 min后，地塞米松组灌胃5 mg·kg^-1醋酸地塞米松溶液，生姜低、高剂量组分别灌胃不同剂量(7、14 g·kg^-1)的生姜醇提液，正常组及模型组灌胃等体积纯水。造模24 h后取材，细胞计数仪检测肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数，酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、超氧化物歧化酶(SOD)、髓过氧化物酶(MPO)水平，苏木素-伊红(HE)染色法观察各组肺组织病理学变化，蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肺组织核转录因子-κB p65(NF-κB p65)、磷酸化(p)-NF-κB p65及Toll样受体4(TLR4)蛋白表达。结果：与正常组比较，模型组小鼠BALF白细胞...     

大承气汤通过抑制HMGB1及NLRP3炎症小体治疗重症急性胰腺炎的研究

目的 探讨大承气汤对重症急性胰腺炎（SAP）模型小鼠高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、NOD样受体蛋白3(NLRP3炎症小体表达的影响。方法 雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组,以及大承气汤低、中、高剂量组,每组6只。对照组腹腔注射0.9%NaCl注射液,其余小鼠腹腔注射雨蛙素、脂多糖诱导SAP模型,大承气汤低、中、高剂量组分别在造模成功后0 h、8 h、16 h给予大承气汤灌胃。造模18 h后,试剂盒检测小鼠血清髓过氧化物酶（MPO）、乳酸脱氢酶（LDH）、胰蛋白酶水平,ELISA法检测血清HMGB1、白介素-1β(IL-1β)、白介素-18(IL-18)水平,HE染色后光镜下观察胰腺组织形态学变化,免疫组化、Western blot法检测胰腺组织中嘌呤能离子通道型受体7(P2X7)、NLRP3、凋亡相关的斑点样蛋白（ASC）、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1(Caspase-1)表达水平。结果 (1)与对照组比较,模型组小鼠血清HMGB1、IL-1β、IL-18、胰蛋白酶、LDH、MPO水平升高（P<0.05）;与模型组比较,大承气汤低剂量组血清胰蛋白酶水平降低（P&...     

基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路探讨积雪草酸对急性肺损伤大鼠氧化应激和NLRP3炎症小体的影响

目的 观察积雪草酸对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤大鼠氧化应激和核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体相关蛋白的影响,并探讨其相关分子机制。方法 将60只SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组、积雪草酸低剂量组、积雪草酸高剂量组和地塞米松组,每组12只。除对照组外,其余组大鼠均采用LPS气管滴注法建立急性肺损伤模型。模型建立成功后第2天,积雪草酸低、高剂量组大鼠分别腹腔注射25 mg/kg和75 mg/kg积雪草酸溶液,地塞米松组大鼠腹腔注射2 mg/kg地塞米松注射液,对照组和模型组大鼠腹腔注射等量生理盐水,均1次/d,连续注射8周。HE染色观察大鼠肺组织病理形态,称重法计算肺组织湿/干重比值,TUNEL染色检测大鼠肺组织细胞凋亡情况,试剂盒检测大鼠支气管肺泡灌洗液中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量,Western blot法检测肺组织中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、Toll样受体4(TLR4)、髓样分化蛋白88(MyD88)、核转录因子-κB(NF-κB)...     

灵芝多糖对脓毒症急性肺损伤大鼠肺功能及TLR4/NF-κB通路的影响

目的探究灵芝多糖对盲肠结扎穿孔导致的脓毒症急性肺损伤大鼠肺功能及肺组织炎症的影响。方法 SD大鼠随机分成对照组、模型组及灵芝多糖低、中、高剂量(50、100、200 mg/kg)组和乌司他丁组,除对照组外,其余各组大鼠均采用盲肠结扎穿孔法制备脓毒症模型。给予灵芝多糖和乌司他丁进行干预,采用全自动血气分析仪检测大鼠O₂分压[p(O₂)]和CO₂分压[p(CO₂)];取大鼠右肺中叶计算肺组织湿/干质量;采用ELISA法检测大鼠肺泡灌洗液中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)水平;采用苏木素-伊红(HE)染色法检测大鼠肺组织病理变化;采用Western blotting法检测大鼠肺脏组织中Toll样受体4(toll like receptor 4,TLR4)、p65、磷酸化p65(p-p65)蛋白表达水平。结果与对照组比较,模型组大鼠...     

平喘方对哮喘小鼠HMGB1/TLR4/NF-κB通路及IKKs、TGF-β1的影响

目的 研究平喘方对哮喘小鼠高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)及气道重塑相关因子IκB激酶家族（IKKs）、转化生长因子-β1(TGF-β1)的影响。方法 将32只雄性Balb/c小鼠随机分为空白组、模型组、地米组、平喘方组,每组8只。采用卵清白蛋白（OVA）联合氢氧化铝腹腔注射和5%OVA雾化吸入激发的方法建立哮喘模型,当日雾化结束1 h后灌胃给药14 d。各组于最后一次给药后收集小鼠血清、肺泡灌洗液（BALF）及肺组织。采用HE染色法观察小鼠肺组织病理改变,免疫组化染色法观察HMGB1、TLR4、NF-κB表达,ELISA法检测BALF及外周血中HMGB1、TLR4、TGF-β1、IKKs含量,RT-PCR检测肺组织中HMGB1、TLR4、NF-κB及IKKs mRNA表达,Western blot法检测肺组织中HMGB1、TLR4蛋白表达。结果 与空白组比较,模型组气道重塑严重,HMGB1、TLR4及NF-κB表达明显增强,HMGB1、TLR4、TGF-β1及IKKs含量升高（P<0.05）,HMGB1、TLR4、NF-...     

基于HMGB1/TLR4/NF-κB通路探讨桃仁承气汤调节肠源性脓毒症大鼠肠道肌电活动及微环境稳态的作用机制

目的:基于高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)通路研究桃仁承气汤调节肠源性脓毒症大鼠肠道肌电活动及微环境稳态的作用机制。方法:60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、甘草酸(HMGB1抑制剂,0. 03 g·kg~(-1))组、桃仁承气汤(10 g·kg~(-1))组、甘草酸+桃仁承气汤(0. 03 g·kg~(-1)+10 g·kg~(-1))组,每组12只。除假手术组外,其余各组建立肠源性脓毒症大鼠模型,各组分别以药物处理后,采用苏木素-伊红(HE)染色检测各组大鼠小肠黏膜组织病理改变,比较黏膜厚度、绒毛高度变化;采用试剂盒检测各组大鼠小肠黏膜组织分泌型免疫球蛋白A(sIgA)含量,血清二胺氧化酶(DAO)及D-乳酸水平;检测各组大鼠肠道肌电活动,比较小肠平滑肌慢波频率、慢波振幅;检测各组大鼠肠道菌群,比较大肠埃希菌、双歧杆菌和乳酸杆菌含量;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小肠组织中HMGB1/TLR4/NF-κB通路蛋白HMGB1,TLR4,MyD88,NF-κB p65表达情况。结果:与假手术组比较,模型组大鼠小肠黏膜组织绒毛高度、黏膜厚度,sIgA含量,平滑肌慢波频率及振幅、肠道双歧杆菌及乳酸杆菌含量显著降低,血清DAO及D-乳酸水平、肠道大肠埃希菌含量、小肠组织HMGB1,TLR4,MyD88及NF-κB p65蛋白表达明显升高(P0. 05);与模型组比较,桃仁承气汤组、甘草酸组、甘草酸+桃仁承气汤组大鼠小肠黏膜组织绒毛高度、黏膜厚度,sIgA含量、平滑肌慢波频率及振幅、肠道双歧杆菌及乳酸杆菌含量升高,血清DAO及D-乳酸水平、肠道大肠埃希菌含量、小肠组织HMGB1,TLR4,MyD88及NF-κB p65蛋白表达降低(P0. 05);与桃仁承气汤组、甘草酸组分别比较,甘草酸+桃仁承气汤组大鼠小肠黏膜组织绒毛高度、黏膜厚度,sIgA含量、平滑肌慢波频率及振幅、肠道双歧杆菌及乳酸杆菌含量升高,血清DAO及D-乳酸水平、肠道大肠埃希菌含量、小肠组织HMGB1,TLR4,MyD88及NF-κB p65蛋白表达降低,差异均有统计学意义(P0. 05)。结论:桃仁承气汤可减轻小肠黏膜损伤,调控肠源性脓毒症大鼠肠道肌电活动及微环境稳态,恢复肠道功能,保持菌群平衡,可能是通过下调HMGB1/TLR4/NF-κB通路实现的。     

喘可治对小鼠急性肺损伤TLR4/NF-κB/NLRP3通路的影响

目的:研究喘可治注射液对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)的防治效果及作用机制。方法:SPF级雌性C57BL/6J小鼠48只,随机分为正常组、模型组、地塞米松组、喘可治组,每组12只。喘可治组每只小鼠腹腔注射0.2 m L·d-1,1次/d,连续7 d;地塞米松组造模前3 d按1 mg·kg~(-1)腹腔注射,1次/d,连续3 d;模型组注射等剂量的生理盐水,正常组不作处理。除正常组外,第8天腹腔注射LPS 0.1 m L(0.5 g·L~(-1)),乙醚吸入麻醉后,各小鼠滴鼻LPS 25μL(0.5 g·L~(-1)),制作ALI模型。24 h后取材检测。酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL~(-1)β),IL~(-1)8的含量;免疫组织化学染色检测核转录因子-κB(NF-κB)p65的蛋白表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肺组织p65,Toll样受体4(TLR4),Nod样受体蛋白3(NLRP3),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase)-1蛋白表达;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测肺组织p65和TLR4的mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠血清TNF-α,IL~(-1)β,IL~(-1)8含量升高(P0.01),肺组织p65,TLR4,NLRP3,Caspase-1蛋白表达升高,p65和TLR4 mRNA的表达升高(P0.05);与模型组比较,喘可治组小鼠血清TNF-α,IL~(-1)β,IL~(-1)8含量降低(P0.01),肺组织p65,TLR4,NLRP3,Caspase-1蛋白表达降低,p65和TLR4 mRNA的表达降低(P0.05)。结论:喘可治注射液能有效改善LPS诱导的急性肺损伤小鼠肺组织的损伤程度,其机制可能通过抑制TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路进而对肺组织起到保护作用。     

针刺对穴“后溪-环跳”对腰椎间盘突出症大鼠HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的：观察针刺对穴“后溪-环跳”对LDH大鼠HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路及通路相关炎症因子的影响,探讨对穴治疗LDH的潜在机制。方法：将大鼠随机分成假手术组、模型组、对穴组与普通针刺组(即普针组)4组,每组10只。根据自体髓核移植法造模,造模3 d后,对普针组、对穴组行针刺干预,普针组选取双侧“肾俞”“大肠俞”“委中”穴;对穴组取双侧“后溪穴”“环跳穴”。两组均干预1次/d, 30 min/次,共28 d。于造模前1 d、造模3 d后与干预28 d后测定大鼠痛阈值,HE染色观察大鼠L₅脊神经干组织病理学改变;ELISA测定血清TLR4、NF-κB、IL-1β、TNF-α与IL-8等含量;Western Blot及免疫荧光技术(IF)检测HMGB1蛋白在脊神经干中的表达。结果：针刺干预后,普针组、对穴组大鼠的痛阈均显著提高;与模型组比较,普针组与对穴组脊神经干中HMGB1蛋白表达及血清中TLR4、NF-κB、IL-1β、TNF-α与IL-8等含量均明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论：针刺能有效缓解LDH大鼠的痛觉敏感,改善脊神经干组...     

鹰嘴豆芽素A通过调节TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路减轻卵清蛋白诱导哮喘大鼠的气道炎症

[目的] 探讨鹰嘴豆芽素A（BCA）通过调节Toll样受体4（TLR4）/核因子-κB（NF-κB）/NOD样受体蛋白3（NLRP3）信号通路对卵清蛋白（OVA）诱导哮喘大鼠气道炎症的影响。[方法] 将SD大鼠分为对照（CK）组、模型（Model）组、低剂量BCA组（BCA-L组,25 mg/kg）、高剂量BCA组（BCA-H组,100 mg/kg）、地塞米松阳性对照组（Dex组,1 mg/kg）、BCA-H+LPS（TLR4激活剂）组（100 mg/kg+0.1 mg/kg）,每组12只。除CK组,其他组均通过OVA诱导构建哮喘大鼠模型。建模成功24 h后,进行给药处理,给药每日1次,持续10 d。利用动物肺功能测定仪检测大鼠吸气阻力、呼气阻力、肺通气顺应性的变化;吉姆萨（Giemsa）染色检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞总数、淋巴细胞数、嗜酸性粒细胞数、中性粒细胞数;酶联免疫吸附剂测定（ELISA）检测BALF中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、干扰素-γ（IFN-γ）水平;苏木精-伊红染色法（HE）染色检测大鼠肺组织病理变化;免疫组化检测大鼠肺组织中嗜酸性粒细胞趋化因子（Eotaxin）表达;蛋白质印迹法（Western Blot）检测大鼠肺组织中TLR4、p-NF-κB p65、NLRP3蛋白表达。[结果] 与CK组比较,Model组大鼠吸气阻力、呼气阻力、BALF中细胞总数、淋巴细胞数、嗜酸性粒细胞数、中性粒细胞数、TNF-α、IL-1β、IFN-γ水平升高,肺组织中的支气管及血管周围炎性细胞浸润明显,肺组织中Eotaxin阳性染色面积百分数、TLR4、p-NF-κB p65、NLRP3蛋白表达升高,肺通气顺应性降低（P<0.05）;与Model组比较,BCA-L组、BCA-H组、Dex组对应指标变化趋势与上述相反（P<0.05）;LPS减弱了高剂量BCA对哮喘大鼠气道炎症的改善作用。[结论] BCA可能通过抑制TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路减轻OVA诱导哮喘大鼠的气道炎症。     

益气活血中药对急性肺损伤大鼠炎症因子及Toll样受体4 mRNA表达的影响

目的:观察和探讨益气活血中药对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)大鼠支气管肺泡灌洗液中(BALF)炎症因子及肺组织中Toll样受体4(TLR-4)mRNA表达的影响。方法:SD雄性大鼠72只,随机分成正常组、模型组、地塞米松组、益气活血中药组4组,每组18只;除正常组气管内滴注生理盐水,其余各组滴注LPS(5 mg·kg~(-1))制备ALI模型,造模前后3 d各组予以相应药物或生理盐水灌胃;每组分别于造模后8,24,72 h各处死6只,苏木素-伊红(HE)染色光镜下观察各组大鼠肺组织病理学改变,酶联免疫(ELISA)法检测BALF中炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL~(-1)β),IL-6的浓度,实时荧光定量PCR(Real-time PCR)测定肺组织中TLR-4 mRNA的表达。结果:肺组织病理学评分:与正常组比较,同时相的LPS各组均显著升高(P0.01);与模型组比较,地塞米松组和中药组均降低(P0.05,P0.01),且72 h组降低最为明显。大鼠BALF中TNF-α,IL~(-1)β,IL-6浓度:LPS造模各组均明显高于同时相的正常组(P0.01),模型组均高于中药组和地塞米松组(P0.01),且随着时间的延长,模型组逐渐上升,而药物干预组逐渐降低(P0.05,P0.01)。肺组织TLR-4mRNA相对表达量:与正常组比较,LPS造模各组同时相肺组织TLR-4 mRNA的相对表达量均显著升高(P0.01),以模型组8 h点为最高;与模型组比较,中药组各时间点表达均降低(P0.05,P0.01)。结论:益气活血中药能够降低急性肺损伤大鼠BALF中TNF-α,IL~(-1)β,IL-6的水平,减轻肺组织的病理损伤,其防治ALI的作用机制可能与抑制TLR-4 mRNA的表达有关。     

三七总皂苷通过TLR4/NF-кB信号通路抑制异丙肾上腺素诱导的心肌细胞肥大

目的 :探讨三七总皂苷(PNS)在异丙肾上腺素(ISO)诱导心肌细胞肥大中的保护作用及其机制。方法:离体培养SD乳鼠心肌细胞,用10μmol/L异丙肾上腺素诱导心肌细胞肥大,观察5μmol/L BAY11-7082(核因子-кB特异性抑制剂)及不同剂量三七总皂苷(12.5 mg/L,25 mg/L,50 mg/L)对肥大心肌细胞的影响。采用计算机图像分析系统测量细胞体积;考马斯亮蓝法测心肌细胞总蛋白含量;酶联免疫吸附法检测细胞外液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;反转录-PCR法检测ANP mRNA的表达;蛋白质印迹法检测心肌细胞TLR4和IκBα蛋白的表达。结果:与正常对照组相比,异丙肾上腺素模型组心肌细胞体积、总蛋白含量、ANP mRNA的表达、炎症因子TNF-α的含量及TLR4蛋白的表达均明显增高,而IκBα蛋白表达明显降低。三七总皂苷和BAY11-7082均能有效抑制异丙肾上腺素诱导的肥大反应及炎症反应,表现为细胞体积、总蛋白含量、ANP mRNA表达、细胞外液中TNF-α含量、TLR4蛋白表达均明显降低,IκBα蛋白含量显著增高。结论 :三七总皂苷对异丙肾上腺素诱导乳鼠心肌细胞肥大具有保护作用,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路,减少炎症反应有关。     

电针对脊髓损伤小鼠炎性因子高迁移率族蛋白B1及Toll样受体4表达的影响

目的:观察电针对脊髓损伤小鼠急性期运动功能及高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、Toll样受体4(TLR4)等因子表达水平的影响,探讨电针在小鼠运动功能修复中的抗炎机制.方法:将C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组及电针组,每组16只,再分为5 d和14 d两个亚组,每个亚组8只.采用钳夹法制备脊髓损伤小鼠模型.电...     

阳和平喘颗粒对哮喘大鼠HMGB1相关信号通路蛋白及炎症因子的影响

目的 探讨阳和平喘颗粒对哮喘大鼠相关炎症因子及高迁移率组蛋白（HMGB1）、Toll样受体4(TLR4)、核因子-κB(NF-κB)信号通路调控的影响。方法 60只SD雄性大鼠按随机数字表法分为正常组，模型组，地塞米松组（0.25 g/kg），阳和平喘颗粒（简称阳和）低（3.87 g/kg）、中（7.74 g/kg）、高（15.48 g/kg）组，每组10只。联合应用氢氧化铝和卵蛋白致敏诱发大鼠，建立哮喘的动物模型，药物干预4周。采用HE染色观察肺组织病理炎症评分和形态学变化；吉姆萨染色计肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞（Eos）、中性粒细胞（Neu）、淋巴细胞（Lym）数量；动物肺功能仪检测各组大鼠肺功能；免疫组化法检测肺组织HMGB1、TLR4、NF-κB蛋白表达量；酶联免疫吸附测定法检测大鼠血清中IL-5、IL-4、IL-13含量；Western Blot法检测各组大鼠肺组织HMGB1、TLR4、磷酸化核因子-κB(p-NF-κB)、磷酸化核因子-κB抑制蛋白（p-IκB）蛋白表达情况；实时荧光定量聚合酶链式反应（qPCR）检测各组大鼠肺组织HMGB1、TLR4、NF-κB、核因子-κB...     

小青龙汤通过TLR4/MyD88/NF-κB信号通路抑制LPS诱导慢性肾小球肾炎的机制研究

目的 探究小青龙汤通过TLR4/MyD88/NF-κB信号通路抑制LPS诱导的慢性肾小球肾炎的机制。方法 24只健康Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、小青龙汤组。对照组切片在DMEM基础培养基中培养80min, LPS模型组将10μg/mL浓度的LPS加入基础培养基中,切片在基础培养基中培养30min,转入含有LPS的基础培养基中培养50min。小青龙汤组：将含药血清溶解于基础培养基中,继续培养LPS模型组。造模成功后,取出切片进行指标检测。观察肾组织形态学变化;用ELISA检测肾组织中IL-1β、IL-4、TNF-α等含量;RT-qPCR和Western blot检测肾组织TLR4、MyD88、NF-κB mRNA及蛋白表达水平。结果 与对照组相比,模型组大鼠肾组织中可见明显的炎性细胞浸润,偶见肾小球体积增大,增生的肾小球内细胞数量增多,肾小管的管腔扩张且内有明显的透明管型,肾组织中IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-8的含量显著升高,IL-4显著下降(P<0.01);Western blot检测结果显示,与对照组比较,模型组大鼠肾组织TLR4、MyD88和P-NF-...