乌梅丸治疗乳腺癌肺转移的药理机制

目的:通过对乌梅丸进行网络药理学分析和实验验证,探讨该方治疗乳腺癌肺转移的潜在靶点及作用机制.方法:通过TCMSP数据库建立乌梅丸有效成分和靶点数据集,GeneCards数据库及OMIM数据库建立乳腺癌肺转移相关靶点数据集,并将中药靶点和疾病靶点数据相匹配.通过Cytoscape 3.6.0软件进行中药-活性成分-治疗...     

乌梅丸对小鼠乳腺癌增殖转移及Fas、FasL分子表达的影响

目的：观察乌梅丸及其拆方抑制小鼠乳腺癌增殖和转移的作用,并探讨其作用机制与调控肿瘤细胞凋亡相关因子Fas、FasL的关系.方法：采用小鼠乳腺癌4T1细胞接种的原位移植瘤模型,通过计算瘤重、抑瘤率及肺癌转移灶数,观察药物抑制肿瘤增殖和转移的作用;通过免疫组织化学方法,初步研究了药物对乳腺癌细胞Fas、FasL分子的表达情况.结果：乌梅丸及其拆方可以减轻接种原发瘤灶的瘤重,其抑制肿瘤增殖的作用以乌梅组、乌梅丸组和去乌梅组的顺序递减;在抑制肿瘤肺部转移中,乌梅丸及其拆方均有一定的作用,但以全方乌梅丸组最为显著;乌梅丸及其拆方各组能提高肿瘤细胞Fas分子的表达,降低FasL分子的表达,但各组间无明显差异.结论：乌梅丸及拆方均可以一定程度上抑制乳腺癌的增殖和转移,其转移机制可能与调控Fas、FasL分子的表达有关.但这些作用是否与酸敛熄风的乌梅有直接关系还需要进一步的探讨.     

乳移平调控前转移微环境抑制乳腺癌肺转移的实验研究

目的观察抗乳腺癌复发转移方剂乳移平对乳腺癌前转移肺微环境的影响,探讨其可能机制。方法动物实验分两部分,第一部分是乳腺癌前转移时间的确定,第二部分是乳移平对前转移微环境的影响。第一部分实验24只BALB/c小鼠,取对数生长期4T1细胞配成细胞悬液,血细胞计数板计数,细胞浓度调至1×106细胞/m L,无菌条件下接种于24只BALB/c小鼠胸壁右侧第四乳头的脂肪垫上,每只0.1 m L。第二部分动物实验60只BALB/c小鼠,采用随机数字表法分成5组,分别为空白组、模型组、乳移平低、中、高剂量组,每组12只。造模方法同上,各组于接种次日开始给药。乳移平低、中、高剂量组给予5.13、10.26及20.52 g/(kg·d)生药量灌饲,每天给药1次,连续14天。空白组和模型组等体积生理盐水灌饲。动物实验第一部分于10、14、18、22天,每次脱颈处死6只,观察肺转移情况。动物实验第二部分观察各组肺组织的镜下形态(光镜)和肺血管超微结构(电镜),测定各组血管的通透性(依文思蓝法),研究乳移平对前转移微环境形成的影响。通过Western blot和Real time PCR法测定乳移平对前转移因子血管生成素(angiogenin,Angpt)2、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、白介素(Interleukin,IL)-6和IL-1β表达的影响。结果肺转移还未发生的乳腺癌前转移时期的建模时间定为14天。与模型组比较,乳移平中、高剂量组对瘤重、瘤体积都有显著的抑制作用(P0.05,P0.01),乳移平对肿瘤的重量和体积的抑制作用随着乳移平剂量的增加而增加,呈现明显的剂量依赖关系(P0.05,P0.01)。模型组与乳移平低剂量组都有淋巴细胞浸润的发生,而乳移平中、高剂量组光镜结果发现肺组织形态与空白组无区别。肺部的血管网是由连续的、密集的毛细血管组成。空白组肺脏毛细血管结构正常。模型组血管壁不像空白组平整、规则,毛细血管扩张明显。乳移平给药后,血管的损伤情况得到改善,血管形态基本和空白组无异。与空白组比较,模型组肺组织中依文思蓝渗出量明显增加,Angpt2、VEGF、IL-6、IL-1β蛋白及mRNA表达明显升高(P0.05,P0.01)。与模型组比较,乳移平各剂量组依文思蓝的渗出量均显著降低,且中药剂量越高,降低越明显,呈现剂量依赖关系(P0.01),乳移平中剂量组VEGF、乳移平高剂量组Angpt2、VEGF、IL-6、IL-1β的蛋白及mRNA表达明显降低(P0.05,P0.01),乳移平中剂量组IL-6蛋白表达降低(P0.01)。结论乳移平对肿瘤的生长和前转移微环境的形成都有很好的调节作用,它可能通过抑制Angpt2、VEGF、IL-6、IL-1β表达、保护脉管系统的完整性、阻碍前转移微环境的形成,最终抑制肺转移的发生。     

鳖甲煎丸对肝癌皮下转移瘤小鼠肿瘤新生血管及微环境的影响

目的研究鳖甲煎丸对肿瘤新生血管结构及功能、肿瘤微环境的影响。方法建立Hepa1-6小鼠肝癌皮下转移瘤模型,将造模成功小鼠随机分为鳖甲煎丸组、贝伐单抗组和对照组,每组15只。鳖甲煎丸组按6 g/(kg·d)予鳖甲煎丸混悬液灌胃,贝伐单抗组腹腔注射贝伐珠单抗注射液5 mg/(kg·d),对照组腹腔注射等量生理盐水,各组连续干预14天。14天后剥取肿瘤组织,免疫组织化学染色法检测肿瘤组织微血管密度计数、周细胞覆盖率和血管基底膜面积,Evans blue法检测血管通透性,免疫荧光检测肿瘤组织的乏氧区域面积。结果与对照组比较,贝伐单抗组和鳖甲丸组微血管密度计数、Evans blue染料含量及乏氧区域面积均降低,周细胞覆盖及基底膜面积均升高(P<0.05或P<0.01)。鳖甲煎丸组Evans blue染料含量及乏氧区域面积较贝伐单抗组高(P<0.01)。贝伐单抗组和鳖甲丸组微血管密度计数、周细胞覆盖及基底膜面积差异均无统计学意义(P>0.05)。结论鳖甲煎丸对Hepa1-6小鼠肝癌皮下转移瘤具有促使血管结构和功能正常化作用,能够改善肿瘤组织的乏氧状态。     

人工牛黄对小鼠乳腺癌肺转移的影响

目的 研究人工牛黄单用或与环磷酰胺合用对小鼠乳腺癌肺转移的影响.方法 采用BALB/c小鼠乳腺癌细胞系4T1,制备稳定表达荧光素酶基因的小鼠乳腺癌细胞系4T1 -Luc,每只小鼠尾iv 2×105 4T1-Luc细胞,制备小鼠乳腺癌肺转移模型.注射后将小鼠随机分为模型组、环磷酰胺组、人工牛黄组、人工牛黄与环磷酰胺联合用药组,每组9只.人工牛黄组每天ig人工牛黄120 mg/kg 1次,连续给药4周;环磷酰胺组每天ip环磷酰胺30 mg/kg 1次,连续给药1周;每组选取3只小鼠监测肿瘤转移情况.4周后将小鼠断颈处死,肺脏经Bowin氏液固定,计数肺部转移瘤数目;HE染色观察肺内转移灶大小.结果 与模型组相比,肿瘤细胞接种21 d后,人工牛黄与环磷酰胺联合用药组小鼠肺部发光强度降低,但差异不显著;接种肿瘤细胞28d后,人工牛黄组、人工牛黄与环磷酰胺联合用药组肺部转移瘤数目均显著减少(P＜0.05、0.01),且联合用药组小鼠肺部转移灶数目明显少于模型组.结论 人工牛黄具有抑制小鼠乳腺癌细胞肺转移的潜在作用,并与环磷酰胺有一定协同作用.     

乌梅丸治疗糖尿病性腹泻50例

糖尿病性腹泻由糖尿病自主神经障碍引起,属于胃肠系统功能异常疾病,临床治疗颇为棘手.若治疗不及时,可引起内脏器官功能紊乱.笔者2000年7月～2007年10月采用中药乌梅丸加味治疗糖尿病性腹泻50例,并设西药对照组50例进行对比.现将结果报告如下.     

活血化瘀药调控肝细胞癌微环境细胞因子影响肿瘤转移复发机制初探

肝癌转移复发是影响患者长期生存的关键因素,肝癌微环境对其产生重要影响。其中血管生成是决定肿瘤生长、转移、复发及预后的关键重要因素之一,微环境中细胞因子可引起血管新生加速肝癌细胞侵袭和转移。对与血管生成相关的疾病—肝癌,中医认为其发病机理与络病的络脉亢进理论有一致性,络道亢进、络脉生成乃其主要的机制。活血化瘀类中药一方面通过调控细胞因子,抑制肝癌血管新生,另一方面通过抗凝、抗纤溶、降低血液黏稠度的作用改善血流微环境影响肿瘤转移复发。     

乌梅丸对乳腺癌MDA-MB-231-GFP细胞小鼠移植瘤的作用及其机制研究

目的 探讨乌梅丸对乳腺癌MDA-MB-231-GFP细胞小鼠移植瘤的作用及其可能机制。方法 选择SPF级雌性小鼠为试验动物,建立人乳腺癌MDA-MB-231-GFP细胞小鼠移植模型,随机分为模型组（灌胃口服0.9%氯化钠溶液）、阳性对照组（腹腔注射紫杉醇20 mg/kg）、乌梅丸组（灌胃乌梅丸颗粒剂药液）,每日1次,连续30 d。观察小鼠一般情况,利用荧光成像系统采集肿瘤图像,以系统自带软件计算肿瘤面积;称取小鼠肿瘤质量和肺癌转移灶数;q PCR检测小鼠肿瘤组织中Fas、Fas L mRNA水平;Western blotting检测小鼠肿瘤组织MDA-MB-231细胞中Fas相关死亡域蛋白（FADD）、活性半胱天冬酶8(cleaved caspase-8）、Fas、Fas L蛋白表达。结果 模型组、乌梅丸组和阳性对照组小鼠肿瘤面积持续增大,呈时间依赖性（P<0.05）;与模型组比较,乌梅丸组与阳性对照组小鼠肿瘤面积较小,肿瘤质量较低,肺癌转移灶数量较少（P<0.05）;与乌梅丸组比较,阳性对照组小鼠瘤面积较小,肿瘤质量较低,肺癌转移灶数量较少（P<0.05）。与模型组...     

乌梅丸治疗小儿肺系疾病脏腑相关理论探讨

乌梅丸为《伤寒论》厥阴病之主方,清代以来,《汤头歌诀》、《医方集解》及现代通用的《方剂学》教材都将其列为"杀虫剂"驱虫剂"的首方。然而,乌梅丸的功效并不仅限于此,在临床上可广泛应用于呼吸、消化、神经、泌尿等系统的疾病。文章就乌梅丸治疗小儿呼吸系统疾病、肝脾肺脏腑相关理论进行探讨。     

乌梅丸治疗糖尿病性腹泻50例临床观察

目的：观察乌梅丸治疗糖尿病性腹泻的临床疗效。方法：将入选的糖尿病性腹泻患者100例按随机、单盲的原则,分为治疗组和对照组各50例。治疗组予乌梅丸汤剂口服,对照组予思密达口服,疗程15d,观察2组临床疗效。结果：治疗组疗效明显高于对照组（P〈0．05）,且未见明显不良反应。结论：乌梅丸治疗糖尿病性腹泻安全、有效,值得临床推广应用。     

乌梅丸加减治疗糖尿病性腹泻52例

2005年9月-2007年2月，笔者采用乌梅丸化裁治疗糖尿病性腹泻患者52例，疗效满意，现报道如下。     

乌梅丸加减治疗变态反应性鼻炎举隅

乌梅丸是仲景治厥阴病厥热胜复、寒热错杂证的主方。盖厥阴为阴尽阳生之脏，阳气来复则热，阴气内盛则厥，故厥热更迭是厥阴病的特点之一。乌梅丸证的病机为肝阳虚，阳气不能升发敷布，阴寒内盛；又肝中内寄相火，相火不得敷布，相火内郁。笔者从事耳鼻喉科临床多年，在临证中体会到某些变态反应性鼻炎发作也是寒热更迭错杂的一种表现，用乌梅丸加减治疗，效果显著。     

乌梅丸对小鼠巨噬细胞吞噬功能等项实验的观察与分析

乌梅丸是《伤寒论》厥阴篇的一首名方,主治蛔厥及久利,实针对厥阴气火失调,寒热丛生,阴阳失和之证,其功能是疏柔厥阴、温清并施以调阴阳。在治肝方剂中乌梅丸的配伍用药是独特的,刚柔相济,补泄同施、寒温并用,不同于一般的疏肝、补肝、泻肝之剂。故我们对乌梅丸进...     

加减乌梅丸配合化疗治疗晚期乳腺癌疗效观察

目的：探讨化疗配合加减乌梅丸对晚期乳腺癌患者疗效。方法：将60例晚期乳腺癌患者随机分成2组,治疗组32例采用化疗合加减乌梅丸,对照组28例应用单纯化疗方案,2个疗程结束后观察近期疗效、HER-2/neuECD下降水平、KPS评分及中医症状疗效的变化。结果：治疗组与对照组均无完全缓解（CR）病例,治疗组部分缓解（PR）与对照组组比较差异无显著性（P〉0.05）,治疗组稳定期（SD）高于对照组（P〈0.05）,治疗组病变进展（PD）明显低于对照组,差异有显著性（P〈0.05）;治疗组经治疗后血清HER-2/neu ECD下降水平（5.80±0.22）ng/L明显高于对照组（2.94±0.35）ng/L（P〈0.05）;治疗组化疗后生活质量明显优于对照组（P〈0.05）。结论：化疗合加减乌梅丸可稳定晚期乳腺癌的病情及改善生活质量、提高KPS评分,同时可显著降低乳腺癌患者血清HER-2/neuECD水平,对晚期乳腺癌患者远期生存具有一定价值。     

黄连解毒汤等对乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤酸性微环境pH值的影响

目的:研究中医药对乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤微环境p H值的影响。方法:测量并比较乳腺癌荷瘤小鼠单纯荷瘤组与中药干预组的肿瘤上清液p H值,分析结果并探讨中医药对于乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤酸性微环境p H值的影响。结果:黄连解毒汤组乳腺癌肿瘤组织p H值(7.0400±0.8732)与单纯荷瘤组乳腺癌肿瘤组织p H值(6.8625±0.5620)相比上升,统计学差异显著(p0.05);四君子汤组乳腺癌肿瘤组织p H值(6.9525±0.2217)与单纯荷瘤组乳腺癌肿瘤组织p H值(6.8625±0.5620)相比上升,统计学差异显著(p0.05);其中黄连解毒汤组与单纯荷瘤组之间统计学差异非常显著(p0.01)。结论:黄连解毒汤、四君子汤加减可以明显增高乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤组织的p H值,而这种调节作用的产生机制及对于肿瘤侵袭转移能力的具体影响仍需要对后续试验结果进行分析以补充。     

崔红生巧用乌梅丸治疗肺系病医案3则

正崔红生教授为北京中医药大学第三附属医院呼吸科主任,博士研究生导师,全国第3批优秀中医临床人才,从事中医内科临床、教学、科研工作近30年,发表论文100余篇。崔教授学贯中西,医术精湛,临床经验丰富,主张将中医经典与现代医学紧密结合,采多家所长,灵活运用经方,在长期临床工作中对呼吸系统疾病中西医结合诊疗有着自己独到见解。笔者跟师随诊,受益匪浅,现结合3则医案,介绍崔教授巧用乌梅丸治疗肺系病经验。     

乌梅丸对免疫损伤性肝纤维化大鼠肝组织细胞因子TGF-β1及其mRNA的影响

目的探求乌梅丸抗肝纤维化的作用机理。方法选用猪血清诱导免疫损伤性肝纤维化模型,观察经方乌梅丸对免疫损伤性肝纤维化模型大鼠肝组织TGF-β1及其mRNA表达的影响,分析乌梅丸的治疗作用,并以秋水仙碱、小柴胡汤作对照。结果乌梅丸能够明显减少TGF-β1及其mRNA的表达,作用优于秋水仙碱及小柴胡汤。结论乌梅丸具有明显的抗纤维化作用。     

“肝主疏泄”与肿瘤转移前微环境

免疫抑制是肿瘤转移前微环境得以形成的重要因素,在肿瘤转移中扮演重要角色。通过对“肝主疏泄”调畅气机以调控免疫功能,疏泄胆汁促脾运化以维持肝-肠免疫屏障正常,调畅情志改善压力应激增强免疫的论述,认为“肝主疏泄”为调控免疫功能的核心,基于此探析肝失疏泄、免疫抑制在肿瘤转移前微环境形成中的关联性,提出“肝失疏泄-免疫抑制-肿瘤转移前微环境”病机关联假说。并探讨风药畅达肝木、健脾扶土抑木、养肾滋水涵木、调肺佐金平木在恢复肝主疏泄上的运用,以期切断“肝失疏泄-免疫抑制-肿瘤转移前微环境”的病机关联,为中医药防治肿瘤转移提供新思路。     

清热解毒法对乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤转移的影响

目的:建立乳腺癌荷瘤动物模型,使用黄连解毒汤作为干预,通过观察4T1乳腺癌细胞荷瘤小鼠肺转移灶数目,侵袭迁移实验,检测肿瘤组织中肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)的表达情况,探讨黄连解毒汤对乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤生长与转移的影响。方法:选用健康8周龄、清洁级雌性Balb/c小鼠,按随机数字表法分为单纯荷瘤组、清热解毒组。分笼饲养。造模:取Luc-4T1乳腺癌细胞(浓度:5×106/ml),分别于小鼠乳腺脂肪垫进行接种,0.1ml/只。接种后24h给药:单纯荷瘤组:以饮用水灌胃,0.2ml/10g;清热解毒组:以黄连解毒汤灌胃,0.2ml/10g。观察小鼠一般情况,接种后7d于接种原位可触及瘤体,提示造模成功,观察肿瘤生长状况,小鼠处死后剥离出瘤体,进行Tanswell侵袭及迁移实验,HE染色计数右肺转移结节灶及流式细胞分析。结果:①清热解毒组小鼠肺转移灶较单纯荷瘤组有所减少(P>0.05)。②侵袭实验中,清热解毒组小鼠肿瘤细胞的侵袭能力较单纯荷瘤组明显减弱(P<0.05);迁移实验中,清热解毒组小鼠肿瘤细胞的迁移能力较单纯荷瘤组明显减弱(P<0.05)。③HE染色计数转移灶:与单纯荷瘤组相比,清热解毒组转移灶有所减少,差异无统计学意义(P>0.05)。④流式细胞分析:与单纯荷瘤组相比,清热解毒组中M1、M2含量明显增多(P<0.05、P<0.01)。结论:①黄连解毒汤可在一定范围内减少肺转移的趋势,在一定程度上控制肿瘤远处转移。②黄连解毒汤可显著抑制乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤细胞的侵袭与迁移能力,并在一定程度上控制肿瘤的生长与转移。③黄连解毒汤同时增加小鼠TAMs中M1型、M2型巨噬细胞的含量,考虑为黄连解毒汤对小鼠肿瘤的生长和转移的抑制作用不是完全通过调控TAMs的表达来实现的,可能更多是通过直接影响肿瘤细胞侵袭和迁移能力及其他作用实现的。     

西黄丸对乳腺癌肿瘤微环境调控作用的研究进展

西黄丸是治疗乳腺癌的传统名方。近年来研究发现西黄丸可以通过干预免疫细胞和炎症因子,调节雌激素及其受体水平,抑制VEGF和MMP-9表达等途径来调控乳腺癌的肿瘤微环境。但目前有关西黄丸调控乳腺癌肿瘤微环境的研究还存在诸多不足,今后需进一步多靶点、多角度探讨西黄丸调控肿瘤微环境的作用机制,为临床应用提供有力的依据。