食品中肠球菌的检测分析

肠球菌是人类和温血动物肠道内的正常菌群 ,以前一般都认为该属菌对人类无害 ,但近年研究已证实它可引起多种感染 ,属医院感染的主要病原之一。该菌属的某些生化型也可引起食物中毒〔5〕。由于肠球菌在外界环境中抵抗力较强 ,即使在冷冻、干燥、加热食品、环境水中大肠菌群死亡     

粪肠球菌和屎肠球菌的耐药特征

目的了解粪肠球菌和屎肠球菌在临床标本中的分布及对常用抗菌药物的耐药性,比较不同标本中两种肠球菌的耐药性,为临床治疗提供参考。方法常规法进行菌种鉴定,纸片扩散法进行药物敏感试验。结果420株肠球菌属,来源于尿液、脓液分泌物、痰液,分别占43%、20%、14%位居各类标本中的前3位,粪肠球菌对青霉素、氨苄西林和哌拉西林/他唑巴坦的耐药率分别为23.0%、17.6%和21.2%,明显低于屎肠球菌对这3种抗菌药物的耐药率(90.0%、87.0%和87.7%),而屎肠球菌对氯霉素和四环素的耐药率分别为7.9%和24.6%,明显低于粪肠球菌对这两种抗菌药物的耐药率(43.8%和74.4%),两种肠球菌中,未发现万古霉素耐药株;尿液标本中粪肠球菌对呋喃妥因的耐药率明显低于屎肠球菌。结论临床标本中,肠球菌属在尿液中的分布最高;粪肠球菌和屎肠球菌的耐药谱明显不同,在治疗时,应根据不同的菌种选择用药,由于肠球菌属对万古霉素的耐药率极低,在重症感染时,可选用万古霉素进行治疗。     

屎肠球菌与粪肠球菌的耐药性分析

目的了解医院屎肠球菌和粪肠球菌的耐药性,为临床治疗和防止医院感染提供依据。方法回顾性分析2012年1-12月临床分离的184株屎肠球菌和147株粪肠球菌对抗菌药物的耐药性,菌株经WalkAway 96PLUS自动化微生物鉴定仪PC20复合板进行鉴定和药敏试验,数据采用WHONET5.6软件进行统计处理。结果 2012年1-12月临床共分离5 813株病原菌,其中分离出屎肠球菌184株占3.2%,粪肠球菌147株占2.5%;尿液中粪肠球菌检出75株占51.0%,屎肠球菌检出101株占54.9%;屎肠球菌对青霉素G、氨苄西林、环丙沙星、红霉素、左氧氟沙星、四环素、庆大霉素、利福平、链霉素、氯霉素、喹奴普汀/达福普汀、呋喃妥因、万古霉素和利奈唑胺的耐药率依次为95.1%、94%、94%、93.5%、88.6%、80.4%、72.8%、69.6%、65.8%、40.8%、38%、35.9%、1.6%和0.5%;粪肠球菌对喹奴普汀/达福普汀、红霉素、四环素、链霉素、利福平、庆大霉素、氯霉素、环丙沙星、左氧氟沙星、青霉素G、呋喃妥因、氨苄西林、万古霉素和利奈唑胺的耐药率依次为90.2%、87.1%、78.2%、55.8%、53.1%、52.4%、50.3%、46.9%、39.5%、17%、16.3%、15%、1.4%和0.7%。结论屎肠球菌和粪肠球菌对临床大部分抗菌药物的耐药性相差很大,主要引起泌尿道感染,临床必须根据药敏结果选用抗菌药物。     

2013-2015年医院感染粪肠球菌和屎肠球菌的调查分析

目的了解粪肠球菌和屎肠球菌临床分离情况,分析不同标本来源的细菌耐药性,为临床治疗相关感染提供依据。方法回顾性分析医院2013-2015年临床分离的422株粪肠球菌和362株屎肠球菌,对菌株进行细菌鉴定和药物敏感性检测,并进行数据分析。结果 2013-2015年医院不同标本分离的粪肠球菌和屎肠球菌分别为422株和362株,其中主要来源于尿液标本,检出的粪肠球菌和屎肠球菌分别占70.2%和64.7%;粪肠球菌科室来源主要为泌尿外科、普通外科和干部保健科分别占21.1%、17.1%和14.5%;屎肠球菌科室来源主要为ICU、儿科和普通外科分别占19.6%、16.6%和12.7%;粪肠球菌对氨苄西林、呋喃妥因、万古霉素、利奈唑胺和替加环素都保持着很高敏感性,敏感率分别为99.8%、96.7%、99.8%、91.5%和99.8%;屎肠球菌对喹奴普汀/达福普汀、万古霉素、利奈唑胺和替加环素的敏感性仍较好,敏感率分别为92.3.%、97.2%、95.0%和98.6%。结论粪肠球菌和屎肠球菌主要引起泌尿道感染,多来自于病情危重、免疫力低下、留置导尿管,腹腔手术操作以及老年患者;两者对万古霉素、利奈唑胺和替加环素的敏感性仍保持较好的敏感性;临床应根据具体药敏结果进行治疗。     

肠球菌属感染的临床分布及耐药性分析

目的了解肠球菌属在临床感染标本中的分布趋势及对抗菌药物的耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供参考依据。方法应用全自动微生物分析仪(VITEK-2 COMPACT)鉴定到种,同时采用K-B纸片琼脂扩散法进行药物敏感试验,试验结果采用WHONET5.5和SPSS 10.0软件进行统计分析。结果 383株肠球菌属中,屎肠球菌180株,占47.0%,粪肠球菌148株,占38.6%,铅黄肠球菌29株,占7.6%,鹑鸡肠球菌22株,占5.7%,其他肠球菌4株,占1.1%;感染标本主要为尿液,其次是分泌物及痰液,所占比例分别为32.9%、15.9%和14.9%;除对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺的耐药率较低外,对大多数常用抗菌药物的耐药率均>40.0%,粪肠球菌和屎肠球菌的耐药谱明显不同。结论医院肠球菌属感染以屎肠球菌为主,粪肠球菌次之;以泌尿系统感染最为常见;多药耐药和高耐药现象相当严重,监测肠球菌属的耐药状况对指导临床治疗具有重要意义。     

肠球菌属耐药基因检测

目的了解临床分离的肠球菌属抗菌药物耐药基因存在状况。方法采用聚合酶链反应(PCR)检测7种耐药相关基因。结果 20株粪肠球菌中,tetM基因阳性为40.0%,ermB基因为60.0%,aac(6′)/aph(2′)为75.0%,ant(6)-Ⅰ为50.0%,TEM为5.0%,aph(3′)-Ⅲ为50.0%;20株屎肠球菌tetM基因阳性为40.0%,ermB为65.0%,aac(6′)/aph(2′)为90.0%,ant(6)-Ⅰ为70.0%,TEM为25.0%,aph(3′)-Ⅲ为70.0%。结论临床分离的肠球菌属耐药相关基因携带率高,肠球菌属对多种抗菌药物耐药率高,注意消毒隔离。     

201株肠球菌属的临床分布及耐药分析

目的 了解肠球菌属的临床分布特点及耐药状况.方法收集医院2005年7月-2008年6月常规培养检出的201株肠球菌属,分析其在各种临床标本中的分布特征、耐药状况、高浓度氨基糖苷类耐药状况及β-内酰胺酶检测结果.结果检出粪肠球菌106株(52.7%)、屎肠球菌76株(37.8%)、其他19株(9.5%),其中尿液102株(50.8%)、痰液46株(22.8%);粪肠球菌对红霉素、四环素、利福平、环丙沙星的耐药率均>75.0%,屎肠球菌对青霉素、氨苄西林、红霉素、利福平,环丙沙星、呋喃妥因耐药率均>93.0%;万古霉素和替考拉宁的耐药率分别为14.4%和10.4%;筛选出高浓度氨基糖苷类药物耐药株1 51株(75.1%);检测出β-内酰胺酶阳性株74株(36.8%).结论肠球菌属感染以粪肠球菌和屎肠球菌为主,可引起泌尿和呼吸系统等多部位感染;多药耐药和高耐现象相当严重.     

156株肠球菌ATB的鉴定和耐药性监测

[目的]了解本地区肠球菌的分布和耐药情况,为临床治疗提供参考。[方法]对近3年临床标本中分离的156株肠球菌用自动分析系统ATB鉴定并作耐药性监测。[结果]标本来自15个病房,感染部位以泌尿生殖系统为主。共分离出5种肠球菌(株)：粪肠球菌95、屎肠球菌38、乌肠球菌11、坚韧肠球菌8、铅黄肠球菌4。13种抗生素耐药性实验显示多重耐药,青霉素、氧苄青霉素的耐药率为47．2％和55．3％,庆大霉素、链霉素为39．6％和43．3％;屎肠球菌耐药率高于粪肠球菌;粪肠球菌对万古霉素的耐药率2．1％,其他4种肠球菌呈高度敏感。[结论]肠球菌种间鉴定非常重要,可避免无效用药而导致的耐药性增长;须关注万古霉素耐药株的出现频率。     

2012 - 2017年开封市粪肠球菌和屎肠球菌耐药性变迁分析

目的 了解粪肠球菌及屎肠球菌对常用抗菌药物的耐药变迁情况,为临床合理用药提供依据。方法 对2012 - 2017年间临床分离的397株粪肠球菌和497株屎肠球菌的药敏试验结果进行分析。结果 屎肠球菌对红霉素、利福平、环丙沙星、左氧氟沙星、青霉素、氨苄西林、庆大霉素、呋喃妥因和四环素等9种抗菌药物的平均耐药率均高于60%,对庆大霉素、呋喃妥因和链霉素3种抗菌药物耐药率不同年份呈上升趋势,对氯霉素耐药率呈下降趋势。粪肠球菌对红霉素、利福平、四环素和喹奴普汀 - 达福普汀等4种抗菌药物的平均耐药率高于60%,对氨苄西林和青霉素2种抗菌药物耐药率不同年份呈上升趋势,对环丙沙星、左氧氟沙星和庆大霉素3种抗菌药物耐药率呈下降趋势。屎肠球菌及粪肠球菌对替考拉宁和万古霉素2种抗菌药物平均耐药率均低于1%。结论 屎肠球菌和粪肠球菌对14种常用抗菌药物的耐药性变迁总体呈上升趋势,且屎肠球菌对常用抗菌药物的耐药性较高,故临床治疗应根据药敏结果选择合适的抗菌药物。     

致病性大肠杆菌和出血性大肠杆菌研究进展

肠致病性大肠杆菌(EPEC)是导致婴幼儿腹泻的主要病原菌,肠出血性大肠杆菌(EHEC)引起急性肾功能衰竭和溶血性尿毒综合症(HUS).近年来,国内外学者致力于EPEC和EHEC大肠杆菌的研究,并在分子生物学和细胞生物学方面取得了显著的进展.本文就EPEC和EHEC的流行病学及临床表现、重要特征、基因诊断、血清学检验、致病性及其联系进行综述.     

不同地理来源的食品中大肠埃希氏菌eBURST分析

目的 研究不同地理来源的食品中大肠埃希氏菌的群体进化关系,为流行病学调查及有效控制食源性大肠埃希氏菌导致的食品安全事件提供理论支持.方法 按照大肠埃希氏菌多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)规则,根据地理溯源研究中遴选的4个持家基因测序数据,利用数据库查询每株食品分离株的序列类型(sequence types,ST),再对所有食品分离株进行eBURST(enhanced based upon related sequence types)分析.结果 得到了食品中大肠埃希氏菌分离株群体的遗传关系.eBURST分析显示不同地理来源菌株存在相同起源株,不仅在同一大洲相邻国家或地区之间,而且在不同大洲非相邻国家或地区之间都存在着同质性的克隆株复合体.结论 大肠埃希氏菌在具有相同起源的基础上存在丰富的遗传多样性;eBURST分析更擅于揭示不同地理来源大肠埃希氏菌株之间的进化关系.     

食品中多重耐药大肠埃希氏菌和沙门氏菌质粒图谱分析

目的：对自深圳市自由市场生肉类食品中分离得到的30株对3种和3种以上抗生素耐药的大肠埃希氏菌和31株对3种以上抗生素耐药的沙门氏菌进行质粒图谱分析，探讨质粒与耐药性的关系。方法：碱裂解法。结果：耐药谱不同的大肠埃希氏菌的质粒分子分型结果可以相同，31株多重耐药沙门氏菌有25种不同的分型结果。结论：细菌的耐药性与其携带的质粒的多少和大小没有直接的关系。     

某院2007～2009年大肠埃希菌耐药性调查

[目的]分析2007年1月～2009年12月某院大肠埃希菌的耐药性变化趋势,为临床治疗提供依据。[方法]药物敏感性试验采用K-B法。[结果]分离出的大肠埃希菌及产ESBLs株有逐年增高的趋势。大肠埃希菌对亚胺培南普遍敏感,对复合磺胺、庆大霉素耐药率较高。产ESBLs菌株对17种临床常用抗生素的耐药率除亚胺培南外均较不产ESBLs菌株的高。[结论]及时有效的细菌鉴定及药物敏感性试验,可尽早发现大肠埃希菌特别是产ESBLs株的院内感染情况,对指导临床的抗感染和合理用药具有重要意义。     

某军队医院临床送检标本中大肠埃希菌的耐药性

目的对某军队医院临床送检标本中大肠埃希菌耐药现状进行分析,为指导医院对提高耐药菌治疗效果和院内感染防控工作提供依据。方法对该院2013年7-9月间所有临床送检的各类标本103份进行分离培养鉴定,对确定为大肠埃希菌的75株阳性菌进行药敏试验,检测其对临床常用20种抗生素的耐药性。结果 75株大肠埃希菌中,敏感株11株,其余均表现出了不同程度的耐药,耐药谱广,且多表现为多重耐药。其中对氨卞西林的耐药率最高,达到80%。大肠埃希菌对常用抗生素的耐药以β内酰胺类抗生素为主,对碳青霉烯类抗菌药物亚胺培南敏感率为100%。结论该院大肠埃希菌耐药问题比较严重,必须加强抗生素的使用管理,严格控制耐药菌的产生和院内感染。     

环介导等温基因扩增技术快速检测不耐热型肠毒素大肠杆菌反应条件的优化

[目的]建立环介导等温基因扩增技术快速检测食源性致病菌不耐热型肠毒素大肠杆菌的方法。[方法]基于产肠毒素大肠杆菌的LT基因序列设计1套(共4条)能识别6个区域的特异性LAMP引物,优化引物加入量、反应温度以及反应时间等反应条件,最终评估该方法的特异性和灵敏性。[结果]引物加入量对扩增影响较大;在扩增温度为63℃时扩增最明显;扩增反应进行到45min后即有扩增产物产生。[结论]该方法检测不耐热型肠毒素大肠杆菌具有耗时短、操作简捷、特异性较好、灵敏性高等优点。     

263株大肠埃希菌的耐药性分析

目的：了解大肠埃希菌对常用抗菌药物的耐药性及不同标本中大肠埃希菌的耐药性差异，为临床选择抗菌药物提供依据。方法：用VITEK32型全自动细菌分析系统对我院2002年元月至2004年7月临床分离的263株大肠埃希菌进行鉴定，药敏试验采用K-B法，判断标准按．NCCIS2000年版进行。结果：大肠埃希菌对头孢哌酮／舒巴坦和亚胺培南的耐药率分别为2．3％和0；对头孢3代和4代抗生素、头霉素类、氨曲南、阿米卡星、呋喃妥因、哌拉西林／三唑巴坦的耐药率为8．7％-21．3％；对青霉素类、喹诺酮类、磺胺类的耐药率为61．6％-83．3％；痰标本中大肠埃希菌的耐药率明显高于血液和尿液及其他标本的分离株。结论：大肠埃希菌对青霉素类、喹诺酮类、磺胺类的耐药性较高；对头孢3代和4代抗生素、头霉素类、氨曲南、阿米卡星、呋喃妥因和哌拉西林／三唑巴坦的耐药性较低；目前对亚胺培南和头孢哌酮／舒巴坦敏感；不同标本中大肠埃希菌对同种抗菌药物的耐药性存在着差异。     

健康人群肠道耐药大肠埃希菌质粒图谱分析

目的：对深圳地区健康人肠道分离的150株大肠埃希菌进行质粒图谱分析,探讨质粒谱与耐药性的关系.方法：碱裂解法.结果：耐药谱不同的大肠埃希氏菌的质粒分子分型结果可以相同.结论：细菌的耐药性与其携带的质粒的多少和大小没有直接关系.     

产肠毒素大肠杆菌基因工程疫苗在小鼠中的免疫原性

目的观察肠毒素大肠杆菌(ETEC)基因工程疫苗的抗原性效果,筛选有效的防治ETEC腹泻病基因工程疫苗株。方法将表达ETEC抗原成分的重组质粒pZCF16和pZHY22分别转化入载体痢疾福氏2a菌株FWL01中,构成含不同ETEC抗原成分的工程疫苗株FE3和FE16。分别用FE3与FE16活菌和灭活菌制成的疫苗以同等剂量梯度,通过口服和鼻饲途径免疫小白鼠,经过一定时间检测2组小白鼠的免疫效果。结果在免疫后的小白鼠血液中均产生了特异性抗IgG抗体,在活菌免疫组肠道内也产生了特异性分泌型抗体IgA;抗体IgG 1周后开始升高,且在8周后达到高峰。抗体IgA的产生规律与IgG相似。结论肠毒素大肠杆菌载体菌苗FE3和FE16有较强的免疫原性,作为多价疫苗的构建是有效的,从而为ETEC腹泻的特异性免疫防治提供了可能。     

健康人肠道大肠埃希菌整合子和耐药基因盒的研究

目的：研究健康人肠道大肠埃希菌的整合子携带情况与整合子携带的基因盒种类及其与耐药性之间关系.方法：PCR检测Ⅰ类整合子,确定细菌携带整合子的情况.整合子阳性菌株进一步检测整合子的可变区,分析插入基因盒的序列.结果：150株大肠埃希菌中有38株携带Ⅰ类整合子,集中分布在对3种以上抗生素耐药的菌株中.插入基因盒集中在甲氧苄氨嘧啶耐药基因（dfr）和氨基糖甙类抗生素耐药基因（aadA）.结论：细菌的多重耐药性与整合子携带高度一致,但是细菌耐药谱和其整合子无对应关系.