多重脑震荡大鼠脑干中缝核团内5-羟色胺免疫阳性表达变化的研究

为了探讨多重脑震荡(multiple cerebral concussion,MCC)后大鼠中缝核团内5-羟色胺(5-HT)能神经元的变化规律,本实验采用自制单摆式机械打击装置复制MCC大鼠模型,研究伤后大鼠脑干中缝核团内5-HT及5-HT合成过程中的限速酶-色胺酸羟化酶(TPH)的表达。将56只大鼠随机分为7组:对照组、伤后1、2、4、8、16和24d组(n=8)。用免疫组织化学染色技术及图像分析法定量分析伤后大鼠脑干中缝核团内5-HT和TPH的表达变化。结果显示:(1)TPH免疫反应阳性产物在中缝背核、正中中缝核的表达在伤后2d时达到高峰,与正常对照组相比有显著性差异(P<0.05);中缝大核和中缝苍白核分别以伤后1d组和4d组阳性反应最强;(2)5-HT免疫反应阳性产物在中缝背核、正中中缝核的表达也在伤后2d时达到高峰,16、24d组基本恢复至正常水平;而中缝大核和中缝苍白核内5-HT的免疫反应性在各损伤组与正常对照组之间均无显著性差异(P>0.05)。以上结果表明,多重脑震荡后中缝核团内TPH和5-HT的表达增高,这为研究5-HT对MCC后认知障碍的影响提供了形态学依据。     

P物质和亮-脑啡肽样免疫反应神经元在鼠中脑中缝核的分布

本实验采用PAP免疫细胞化学技术,观察P物质和亮-脑啡肽样免疫反应神经元在鼠中脑中缝核的分布并作了计数。1.含P物质样免疫反应神经元胞体仅见于中缝背核最尾侧部,含P物质阳性胞体数平均167个/只;而亮-脑啡肽样免疫反应胞体几乎遍于中缝背核全长,其阳性胞体数平均132个/只。2.亮-脑啡肽样免疫反应胞体主要定位于中缝背核中线区;而P物质样免疫反应胞体除分布于中缝背核中线区以外,也定位在其两侧的延伸。3.亮-脑啡肽样免疫反应胞体恒定地出现在中缝正中核内,平均199个/只;而P物质样免疫反应胞体仅见于2例动物。4.中缝背核内有些含P物质样免疫反应阳性胞体或突起,紧邻血管壁排列,未观察到亮-脑啡肽样免疫反应神经元有类似现象。本实验观察到鼠中缝正中核内存在含P物质样免疫反应神经元胞体。     

PTSD样行为异常大鼠中缝背核5-HT1A受体的改变

目的观察创伤后应激障碍(PTSD)样行为异常大鼠中缝背核(DRN)神经元5-HT1A受体表达变化,为探讨PTSD的发病机制提供资料。方法成年健康雄性Wistar大鼠60只,随机分为连续单一刺激(SPS)模型1d、4d、7d组及正常对照组,采用免疫组化、Western blot方法检测PTSD样行为异常大鼠中缝背核神经元5-HT1A受体表达变化。结果 SPS刺激后1d大鼠中缝背核神经元5-HT1A受体表达水平开始逐渐升高,第4天高于第1天,第7天高于第4天。结论 PTSD样大鼠中缝背核神经元5-HT1A受体呈规律性过表达。     

经鼻给予丙酸睾丸酮增加大鼠中脑5羟色胺能神经元的表达

目的:观察经鼻给予丙酸睾丸酮(TP)后大鼠中缝背核色氨酸羟化酶(TPH)及中缝背核、尾壳核与伏核5羟色胺(5-HT)和5羟色胺转运体(SERT)表达的改变.方法:对正常成年雄性及去势大鼠经鼻给予TP 21 d,利用免疫组织化学观察给药后大鼠中缝背核TPH及巾缝背核、尾壳核与伏核5-HT和SERT的免疫反应强度变化.结果:大鼠去势处理降低中缝背核TPH及中缝背核、尾壳核与伏核5-HT和SERT的表达;去势大鼠经鼻给予TP则可提高巾缝背核TPH及巾缝背核、尾壳核与伏核5-HT和SERT的表达,但未达到假手术水平;正常大鼠鼻腔给予TP后,中缝背核TPH及中缝背核、尾壳核与伏核5-HT和SERT的表达也显著增加.结论:经鼻给予TP增加大鼠中缝背核TPH及中缝背核、尾壳核与伏核5-HT和SERT的表达,为经鼻给予TP辅助治疗衰老过程中出现的运动相关行为障碍及抑郁症状提供实验依据.     

左旋多巴对大鼠中脑5羟色胺能神经元的影响

目的:观察左旋多巴对大鼠脑内5羟色胺(5-HT)能神经元的影响.方法:左旋多巴大鼠灌胃,以免疫细胞化学和流式细胞术显示5-HT及色氨酸羟化酶(TPH)免疫反应物质或含量的变化.结果:免疫细胞化学显示左旋多巴组大鼠中缝背核5-HT能神经元细胞直径明显小于对照组;中缝背核5-HT和TPH免疫反应物质灰度值比对照组分别增高了7.72%和16.57%.流式细胞术显示左旋多巴组5-HT的表达量比对照组减少了18.45%,TPH表达量比对照组减少了19.90%.结论:左旋多巴降低脑内5-HT能神经元5-HT和TPH的表达.     

5-羟色胺转运体在酗酒人脑干头侧中缝核群的表达

目的:观察酗酒人脑标本脑干头侧中缝核群5-羟色胺转运体(SERT)的表达变化。方法:应用免疫放射自显影的方法,显示SERT免疫反应强度在酗酒人脑标本脑干头侧中缝核群的变化,并与健康人脑标本比较。结果:健康组SERT免疫反应强标记信号在脑桥头侧和中脑主要集中分布在与中缝核群相同的区域。在酗酒人脑标本,正常分布于脑干头侧中缝核群的SERT免疫反应标记信号减弱;中缝正中核、中缝背核尾侧部、中缝背核束间部、中缝背核腹侧部、中缝背核背侧部的SERT免疫反应含量强度与健康组相应区域比较显著降低。结论:酗酒者头侧中缝核群SERT蛋白表达降低。     

丙酸睾丸酮早期处理对大鼠脑内5-羟色胺及其转运体的影响

目的:观察丙酸睾丸酮(TP)早期处理对大鼠脑内5-羟色胺(5-HT)及其转运体(SERT)的影响.方法:对生后第7天(PND7)的雄性Wistar乳鼠皮下注射TP至生后第21天(PND21),利用免疫组织化学和免疫印迹法观察生后第49天(PND49)实验大鼠中缝背核和尾壳核5-HT及SERT表达的变化.结果:免疫组织化学结果显示TP早期处理增加大鼠中缝背核和尾壳核处5-HT和SERT的免疫反应强度,中缝背核和尾壳核5-HT的灰度值比对照组分别降低了11.38%和7.90%,SERT的灰度值比对照组分别降低了6.79%和8.81%;免疫印迹结果显示TP早期处理增加大鼠脑内中缝背核和尾壳核处SERT的表达,中缝背核和尾壳核处SERT与β-actin相对吸光度比值比对照组分别升高了86.06%和26.29%.结论:TP早期处理影响大鼠脑内5-HT能神经,导致中缝背核和尾壳核5-HT和SERT增加.     

大鼠终纹床核5-羟色胺免疫阳性神经纤维和终支的起源

本文用WGA-HRP逆行束路追踪结合免疫酶组织化学双标记法,对大鼠终纹床核5-羟色胺(5-HT)免疫阳性神经纤维和终支(5-HT纤维)的起源进行了研究。结果如下,终纹床核主要区域的5-HT纤维,除主要起源于中缝背核和中央上核外,尚有部分纤维源自B_9组细胞群和尾侧线形核;在这些发出纤维支配终纹床核的中缝核神经元中,约有1/3为5-HT免疫阳性且主要为同侧;除少数区域外,这些核群内所有类型的5-HT免疫阳性神经元均有部分发出纤维投射到终纹床核。     

大鼠脑干5-羟色胺神经元的分布——免疫细胞化学研究和定量分析

应用免疫细胞化学卵白素-生物素-过氧化物酶复合体(Avidin-Biotin-peroxidase Complex, ABC)法研究了大鼠脑干含5-羟色胺(5-Hydroxytryptamine,5-HT)的神经元的分布。证实5-HT神经元广泛分布于中缝核群和网状结构。在延髓表面弓状细胞群、极后区、蓝斑复合体和脚间核中也含5-HT神经元。定量分析表明:①5-HT神经元在脑干各部的比例约为:中脑61％,延髓31％,脑桥8％;②中缝核群内5-HT神经元约占脑干5-HT细胞总数的60％,中缝以外约占40％;③5-HT细胞在各核的分布比例为:中缝苍白核6.15％,中缝隐核5.77％,中缝大核5.15％,中缝桥核2.09％,中央上核3.44％,中缝背核35.82％,线形头侧核1.76％,延髓网状结构13.99％,脑桥网状结构和第Ⅳ脑室室底灰质5.40％,中脑网状结构20.42％。本文对中缝各核的细胞密度和5-HT细胞密度进行了抽样分析,结果表明:含5-HT细胞较高的核团有:中缝苍白核56.36％,中缝隐核48.40％,中缝背核44.10％;其次为中央上核33.38％,中缝大核25.77％;线形头侧核和中缝桥含5-HT细胞较低,分别为18.19％和17.37％。     

大鼠中缝背核向缰核投射的5-羟色胺能神经元对躯体伤害性刺激的fos表达

用WGA-HRP逆行追踪与抗FOS和抗5-羟色胺免疫组化的三重标记方法,观察向大鼠一侧有前跖部皮下注射8%福尔马林50μl后,中缝背核至缰核5-羟色胺能神经元的FOS表达.光镜下发现中缝背核内有七种阳性神经元.即HRP、FOS、5-HT单标细胞;FOS/HRP、FOS/5-HT、HRP/5-HT双标细胞;FOS/HRP/5-HT三标细胞.结果表明中缝背核至缰核的5-HT能投射神经元对躯体伤害性刺激起反应.     

大鼠中缝背核三种递质传入纤维的脑干起源-免疫细胞化学和酶组织化学双重标记法

实验用HRP逆行追踪法和免疫细胞化学ABC法,研究了大鼠中缝背核内5-羟色胺、P物质以及亮脑啡肽三种传入纤维的脑干起源。发现中央上核,中缝大核,中脑导水管周围灰质,脚间核和第Ⅳ脑室中央灰质均有数量不等的5-羟色胺、P物质和亮脑啡肽能神经元向中缝背核投射。结果提示:中缝背核接受脑干许多核团不同性质神经元的调控。     

脑缺血时中缝背核5-HT变化的免疫组化观察

目的：探讨沙土鼠有离缺血时中缝背核神经元５－ＨＴ的变化。方法：用免疫组织化学ＡＢＣ法及图象分析对沙土鼠缺血不同时间以及缺血１０分钟后再灌不同时间其中缝背核神经元６－ＨＴ的变化进行研究。结果：脑缺血１０钟、３０分钟时,沙土鼠脑中缝背核５－ＨＴ阳性神经元的平均光密度值（ＯＤ）值与对照组比较无显著性差异;而缺血４小时时则明显降低,差异有显著性（Ｐ〈０．０５）,脑缺血１０分钟后,再灌流２０分钟,５－ＨＴ下     

白藜芦醇治疗POI大鼠药物浓度筛选

目的　通过观察不同浓度白藜芦醇治疗早发性卵巢功能不全（POI）成模大鼠的疗效，确定其治疗早发性卵巢功能不全大鼠的最佳药物浓度。 方法　将90只5周龄SPF级SD健康雌性大鼠按随机数字表分为低剂量白藜芦醇灌胃治疗组(a组18只)、中剂量白藜芦醇灌胃治疗组(b组18只)、高剂量白藜芦醇灌胃治疗组(c组18只)、模型对照组(d组18只)、空白对照组(e组18只)。e组从造模前的动物中随机抽取；a、b、c、d组从成功造模（72只给予雷公藤多苷片50 mg·kg-1·d-1 灌胃14 d，根据观测指标确定早发性卵巢功能不全成模）的动物中随机分组获得。a、b、c组分别采用每日20、50、80 mg/kg 灌胃剂量，模型对照组采用0.5％羧甲基纤维素钠溶液灌胃。42 d后采用ELISA法检测大鼠血清性激素：抗苗勒管激素（AMH）、黄体生成素（LH）、卵泡刺激素（FSH）、雌二醇（E2）水平，HE染色镜检大鼠单位卵巢面积内成熟卵泡、闭锁卵泡和黄体数，评价其疗效。 结果　不同浓度白藜芦醇灌胃治疗组POI大鼠较0.5％羧甲基纤维素溶液灌胃组POI大鼠血清中AMH、E2水平高（P<0.05），LH、FSH水平低（P<0.05）。不同浓度白藜芦醇灌胃治疗组POI大鼠较空白对照组大鼠血清中AMH、E2水平低（P<0.05），LH、FSH水平高（P<0.05）。与a、b、c、e组比较，d组卵巢内颗粒细胞层数，成熟卵泡数以及黄体数量少（P<0.05），闭锁卵泡数明显增加（P<0.05）。 结论　不同浓度白藜芦醇灌胃治疗POI大鼠均有一定的疗效，50 mg/kg浓度效果最好，是最佳药物浓度。     

“更年健”对老年雌性大鼠中缝背核5—羟色胺的影响

应用免疫组织化学和计算机图像分析技术,观察中药“更年健”Ｃ地老龄雌性大鼠中缝背核５－ＨＴ的影响。结果表明：“更年健”和苯甲酸雌二醇用药后,中缝背核５－羟色胺含量明显增高,与用药相比,相关显著。提示“更年健”能增强老年雌性大鼠中缝背核５－ＨＴ神经元活性。     

雌二醇对去卵巢大鼠下丘脑5-HT_(1A)和5-HT_(2A)受体亚型mRNA表达的影响

观察17β-雌二醇(17β-estradioI,E2)对去卵巢大鼠下丘脑5-HT1A和5-HT2A受体mRNA表达的影响的时间效应。实验动物分为假去卵巢对照组(OVX+S组)和去卵巢组(OVX)。去卵巢组大鼠又分为雌激素处理组(OVX+E+组)和无雌激素处理组(OVX+E-组),分别在处理后3、6、9和12 d时,采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法观察5-HT1A和5-HT2A受体mR-NA在大鼠下丘脑的表达。结果显示:5-HT1A和5-HT2A受体mRNA在所有大鼠下丘脑均有表达;5-HT1A受体mRNA在3、6和9 d的OVX+E-组大鼠下丘脑的表达水平明显高于同时间点的OVX-E+组,而5-HT2A受体mRNA在6、9和12 d的OVX+E-组下丘脑的表达量也显著高于同时间点的OVX+E+组。本文结果表明去卵巢后大鼠下丘脑5-HT1A和5-HT2A受体亚型mRNA表达水平升高,17β-雌二醇可下调两种受体的表达。     

电针上调食源性肥胖致不孕大鼠下丘脑弓状核内GnRH的表达

目的 探讨电针对食源性肥胖致不孕大鼠中枢性作用中,能否上调下丘脑弓状核GnRH的表达.方法 将100只刚断乳雌性SD大鼠随机分为2组:①正常组20只,喂以普通饲料;②高能饲料组80只,给予高能饲料,筛选出肥胖不孕大鼠22只,并将其随机分成两组,即对照组和电针组.检测血清雌二醇(E2)、睾酮(T)、瘦素(leptin) ...     

胃癌患者性激素水平测定及临床意义

目的:探讨胃癌患者性激素水平变化及临床意义。方法:采用化学发光免疫分析法,测定134例胃癌患者血清睾酮(T)、雌二醇(E2)、催乳素(PRL)、黄体生成素(LH)及卵泡刺激素(FSH)水平,根据TNM分期对各期胃癌患者E2及T含量进行分析。结果:男性及女性胃癌患者E2、T含量明显低于对照组(P<0.05),女性患者E2水平较对照组下降更为明显(P<0.01);女性患者PLR水平显著性升高(P<0.01)、TNM各期胃癌患者E2、T水平变化为低分化者明显高于高分化者(P<0.01)。结论:了解胃癌患者血清性激素水平,对分析胃癌与性激素的关系有重要意义。     

大鼠中缝核5-HT能神经元向嗅结节的投射-HRP法与免疫组化法双标记研究

应用HRP逆轴突追踪法结合免疫组织化学法研究了大鼠中缝核内5-HT能神经元向嗅结节的投射,并对中缝核标记细胞的分布和形态特点进行了详细观察.当一侧嗅结节注射HRP后,在中缝背核(RD),中央上核(CS)规律地出现标记细胞,然后用Hank's方法稳定,继而用Sternberger的PAP法进行免疫组织化学反应,光镜下在RD和CS中观察到HRP、5-HT,5-HT/HRP三种标记细胞.     

痛抑郁二联征模型大鼠中缝背核不同水平5羟色胺表达差异

目的 探讨痛抑郁二联征模型大鼠中缝背核（DRN）5羟色胺（5-HT）阳性细胞的分布特点。 方法 20只雄性SD大鼠随机分为对照组和模型组。模型组大鼠连续3d皮下注射利血平,每日1次,以诱发痛抑郁二联征模型。模型制作后第1天和第2天检测左后足机械缩足阈观察大鼠痛阈变化,模型制作后第2天旷场实验和高架O迷宫实验检测大鼠情绪变化,免疫荧光技术观察DRN前囟后6.8mm、7.3mm和7.8mm水平的5-HT表达。 结果 模型组大鼠经利血平注射后机械痛阈显著下降,并产生抑郁样行为。对照组的DRN前囟后6.8mm、7.3mm和7.8mm水平的5-HT阳性细胞表达量分别为106.00±10.21、96.67±24.50和195.67±2.33。模型组相应的表达量分别为61.67±14.53,72.33±34.35和53.67±26.77。除前囟后7.8mm水平模型组与对照组相比有显著性差异（P<0.05）之外,其他两个水平5-HT阳性细胞表达量模型组和对照组之间差异无显著性（P>0.05）。 结论 利血平诱导的痛抑郁二联征大鼠模型以及中缝背核5-HT表达的降低,可能主要与DRN前囟后7.8mm水平的5-HT阳性细胞数变化有关,而与前囟后6.8mm和后7.3mm 水平无关。