己酮可可碱对人精子获能和顶体反应的影响

目的　探讨不同浓度的己酮可可碱对人精子获能和顶体反应的影响。方法 　在体外培养的精子悬液中加入不同浓度的己酮可可碱和孕酮处理 ,通过 CTC染色 ,镜检计数各型精子的百分率。结果 　与空白组比较 ,己酮可可碱处理组的获能型精子的百率明显增加 ,终浓度 8mmol·L- 1各处理组顶体反应型的精子百分率不增加 ,而终浓度为 16mmol·L- 1的处理组顶体反应型的精子百分率不明显增加。 结论 　己酮可可碱可以促进精子获能 ,在终浓度 8mmol· L- 1 时 PF不诱导精子发生顶体反应 ,但终浓度为 16mmol· L- 1 可促进精子发生顶体反应 (AcrosomeReaction,AR)     

人精子中Slo1和Slo3钾离子通道共同参与调控精子获能过程

目的 Slo家族钾离子通道Slo1和Slo3都已证实在人精子中表达,但它们在精子中的功能作用和分子机制尚不清楚。因此本文研究人精子中Slo1和Slo3钾离子通道是否参与调控精子获能过程。方法收集10例健康生育的男性精子,在体外模拟女性生殖道环境进行精子获能培养。将精子分为对照组、Slo1抑制组、Slo3抑制组和Slo1、Slo3共同抑制组,在精子获能培养过程中,利用Slo1特异性抑制剂Ib TX(200μmol·L~(-1))、Slo3特异性抑制剂Clofilium(50μmol·L~(-1))单独或同时抑制两种通道;培养结束后应用计算机辅助精液分析仪(CASA)检测各组精子运动情况,并计算各组精子获能后超激活运动精子的比例;用异硫氰酸荧光素标记的豌豆凝集素(PSA-FITC)对获能后的精子进行染色,计数各组精子中发生顶体反应的精子数量和未发生顶体反应的精子数量,并计算发生顶体反应的精子比例;应用数据统计软件SPSS分析实验结果,单因素方差分析比较各组精子超激活运动情况和顶体反应发生的情况,P<0.05为统计学差异显著。结果精子获能培养后,对照组精子超激活运动比例为(17.88±0.83)%,Slo1抑制组为(15.17±0.87)%,Slo3抑制组为(7.00±0.63)%,Slo1,Slo3共同抑制组为(5.83±0.70)%,对照组与其他各组间统计学差显著;Slo1和Slo3单独抑制时均能减少精子获能后超激活运动的比例,Slo1、Slo3共同抑制后超激活运动比例最低。对照组精子顶体反应发生比例为(30.32±2.97)%,Slo1抑制组为(20.86±2.42)%,Slo3抑制组为(21.87±3.08)%,Slo1、Slo3共同抑制组为(15.31±2.33)%,对照组与其他各组间统计学差显著;Slo1和Slo3单独抑制时均能减少精子获能后顶体反应发生的比例,Slo1,Slo3共同抑制后顶体反应发生率最低。结论人精子中Slo1和Slo3钾离子通道共同调控精子获能过程,可能发挥协同作用。     

降钙素对人精子体外获能的影响

近年来,人类的精液质量明显下降,男性不育的发生率有增加趋势,而相关基础研究明显滞后[1],严重地阻碍了临床诊治水平的提高,男性不育成为一个迫切需要深入研究的问题[2],而精子的获能与活动能力是其受精能力的一个重要体现,绝大多数的男性不育患者表现为精子难以获能及活力低下。血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和降钙素(CT)均是在精液中可检测到的小分子肽类物质,研究发现人类精液中的AngⅡ浓度     

己酮可可碱对体外精子活力的影响

目的：研究己酮可可碱（Pentoxifyline,PTF)对弱精患者精子活力的影响,探讨PTF提高精子活力的作用机理。方法：采用计算机辅助精子分析（CASA）系统,以同一份精液标本为自身对照,测定PTF处理前后精子活力参数值,结果：PTF处理后精子活力（a b级）显著提高（P＜0．01）,对提高快速前向运动精子活力（a级）有极显著意义（P＜0．005）,而对精子活动率的提高不显著（P＞0．05）,PTF对活动力较好精子活力的提高活力的提高不及活动力差的明显（P＜0．05）,结论：PTF能有效提高弱精患者精子活力。     

校正的BO液培养法对牛精子体外获能的影响

本试验校正了利用肝素和咖啡因使牛精子体外获能的传统的BO液配方及培养方法;利用去透明带仓鼠卵的穿透试验和顶体的台盼兰——姬姆萨双重染色技术检查了该方法对获能的影响,发现校正的BO液培养法缩短了预培养时间,增强了获能效果。     

南蛇藤中扁塑藤素对照品的制备及鉴定

目的 建立从南蛇藤(Celastrus orbiculatus Thunb.) 根皮中制备扁塑藤素(pristimerin)对照品的方法.方法 采用溶剂提取、硅胶柱层析和重结晶等方法对南蛇藤根皮丙酮提取物进行分离纯化,通过MS、IR、1H-NMR和13C-NMR进行结构鉴定,通过薄层色谱(TLC)和高效液相色谱(HPLC)对对照品进行纯度检测.结果 从南蛇藤根皮中分离纯化出扁塑藤素对照品,质量分数＞99.0%.结论 该方法制备的扁塑藤素对照品符合中药化学对照品的相关要求,可作为南蛇藤及其制剂质量控制用的化学对照品.     

精加力复合肉碱在精子体外处理中的应用

目的探讨精子体外处理中,精加力复合肉碱的应用方法及对精子动力的影响。方法选取我院接诊弱精症男性35例,随机分为5组,分别设为空白组,A组(1 mg/mL精加力复合肉碱溶液,30 min),B组(2 mg/mL精加力复合肉碱溶液,30 min),C组(1mg/m L精加力复合肉碱溶液,60 min),D组(2 mg/mL精加力复合肉碱溶液,60 min),比较各组精子活动率、精子前向运动率。结果 A组精子活动率、精子前向运动率均高于B、C、D组、空白对照组(P<0.05)。结论运用精加力复合肉碱对精子体外处理,可有效提高精子活力。     

蛋白激酶C在孕酮激发的豚鼠精子顶体反应中的作用(英文)

目的:研究蛋白激酶C(PKC)在孕酮激发豚鼠精子顶体反应中的作用.方法:豚鼠精子在Ca~(2 )缺乏MCM培养液中,38.5℃5％CO_2/空气获能培养(6-6.5)h然后经Percoll密度梯度离心,再混悬于MCM中,调数至5×10~9个/升.加入PKC激活剂或抑制剂以及相关试剂15分钟后,用相差显微镜评价AR(以AR％表示).结果:在钙离子存在下,PDB或OAG可激发豚鼠精子AR,并可显著提高孕酮激发豚鼠精子AR的作用.然而,STA不仅可抑制AR,也可阻止孕酮激发豚鼠精子AR.同时,依他酸和硝苯地平均可阻断P_4以及P_4和PDB激发豚鼠精子AR.此外,新霉素可抑制P_4激发豚鼠精子AR,而且PDB可部分逆转这种作用.结论:激活或抑制PKC可明显增加或降低P_4激发的豚鼠精子AR,表明PKC在生理性AR的信号转导通路中起重要作用.     

Matrine compromises mouse sperm functions by a [Ca2+]i-related mechanism

Matrine, a bioactive alkaloid widely used in Chinese medicine, inhibits mouse sperm functions in vitro. In this study, we investigated the reproductive toxicity of matrine to male mice in vivo. C57BL/6J mice were administered with daily doses of 0, 1, 10 and 50 mg/kg matrine by intraperitoneal injection for 30 days. The results showed that matrine did not affect testis size, testis weight, sperm count and sperm viability, but it significantly inhibited total motility, progressive motility, linear velocity, capacitation and the progesterone-induced acrosome reaction of mouse sperm. Furthermore, the intracellular Ca²⁺ concentration ([Ca²⁺]_i), a key regulator of sperm function, was reduced in sperm of matrine-exposed mice. The current and gene expression of the sperm specific Ca²⁺ channel, CatSper, which modulates Ca²⁺ influx in sperm, were decreased in testes of matrine-exposed mice. These results indicate that matrine inhibits mouse sperm functions by a [Ca²⁺]_i-related mechanism via CatSper channel.     

L-四氢巴马汀对离体豚鼠心房的作用

THP和Ver均能对抗CaCl_2所致离体豚鼠右房正性频率作用,非竞争性拮抗CaCl_2左房正性肌力作用以及Iso右房正性频率和左房正性肌力作用。THP和Ver浓度依赖性和频率依赖性地抑制左房收缩中的阶梯现象,使正阶梯翻转为负阶梯。而对休息后加强影响较小。结果提示THP对心房的抑制作用与Ver相似,与拮抗Ca~(2+)有关,可能主要通过抑制心肌细胞外Ca~(2+)内流所致。     

甲基黄酮醇胺对豚鼠单个心室肌细胞膜钙通道电流的影响

用蛋白酶Ｅ急性分离豚鼠心室肌细胞，采用先进的膜片钳技术，观察甲基黄酮醇胺对心室肌细胞膜钙离子通道的影响，结果发现：甲基黄酮醇胺１μｍ、５０μｍ及１００μｍ剂量依赖性地抑制心室肌细胞膜钙离子电流，进而从细胞膜通道水平直接证实了甲基黄酮醇胺的钙拮抗作用。     

黄连素对豚鼠心肌钾离子通道的抑制作用

利用膜片钳全细胞记录的方法研究了黄连素对豚鼠心肌钾离子通道亚型的作用。结果表明,黄连素可延长心室肌细胞动作电位时程,抑制内向整流钾通道及延迟整流钾通道,并能对抗ATP敏感钾通道开放剂cromakalim(BRL-34915)引起的K^aTP电流升高及动作电位时程缩短。表明黄连素可抑制ATP敏感钾通道,提示其降血糖和抗心律失常作用与钾通道抑制有关。     

辐射灭菌的肠线在豚鼠组织内吸收的观察

研究了经γ射线灭菌的肠线被豚鼠肌组织吸收时的形态学变化,分别在埋藏后第8、15、30及60d取材,进行大体和显微镜检查,并与蒸汽灭菌肠线进行对比观察。结果表明:两者的吸收情况基本一致,未引起实验动物的异常反应。     

关附甲素对豚鼠心室肌细胞延迟整流钾电流的抑制作用

用全细胞膜片钳制技术研究关附甲素对豚鼠心室肌细胞延迟整流钾电流的作用。结果表明,关附甲素100μmol·L^-1对延迟整流钾电流有明显的抑制作用。去极化2200和3850ms时,I_k分别由293±90和290±90pA减小至227±59和231±66pA,这种抑制作用与去极化持续时间无关。关附甲素对内向整流钾电流无影响。提示关附甲素延长心肌复极化时间似与抑制延迟整流钾电流的作用有关。     

Xenoestrogenic chemicals effectively alter sperm functional behavior in mice

Xenoestrogenic compounds (XCs) can disrupt endogenous hormone function and affect sperm function by binding to receptors on sperm membrane. Albeit spermatozoa are potentially a useful model for screening estrogenic activities of endocrine disruptors, high-quality in vitro test system that examination of the XCs effects on sperm function is required. The objective of this study was to compare the effects of XCs (genistein and 4-tert-octylphenol) to those of steroids (estrogen and progesterone) and heparin on in vitro capacitation and acrosome reaction (AR) in mouse spermatozoa. Mouse spermatozoa were incubated with various concentrations (0.001–100 μM) of each chemical for 15 or 30 min, and then capacitation and AR were assessed using chlortetracycline. All chemicals studied effectively alter capacitation and/or AR in mouse spermatozoa with different manner. Therefore, we believed that our system will provide a good in vitro model system to characterize the physiological effect of XCs especially when compared with steroids.     

青藤碱对豚鼠心室乳头状肌慢反应动作电位的效应

用细胞内微电极技术,观察青藤碱对几种慢反应活动的影响,发现青藤碱82 μmol降低高K⁺除极化慢反应动作电位幅度(APA)和(V)_max,同时延长APD₉₀。进一步的研究发现,青藤碱对V_max的抑制呈频率依赖性,频率愈高,抑制作用愈强。小剂量青藤碱抑制Ba²⁺诱发的乳头状肌自发电活动,大剂量可以取消此种自发电活动。对Mg²⁺引起的Mg²⁺/Ca²⁺混合电位,青藤碱有非选择性抑制作用。结果提示青藤碱对钙通道具有阻滞作用,其抗心律失常作用也可能与此有关。     

巴马汀对离体乳头肌电生理特性的影响

巴马汀(Pal,50μmol/L)可使离体豚鼠右心室乳头肌的自律性降低、功能不应期(FRP)延长,但对兴奋性和收缩力无明显影响。Pal(10～100μmol/L)是浓度依赖性地延长动作电位时程(APD),其中APD_(90)延长比较显著。100μmol/L时,还使V_(max)降低。