海南粗榧新碱衍生物HH07A对体外L1210细胞的杀伤作用

体外培养的小鼠L1210细胞被HH07A2μg·ml^-1作用24h后,与对照组细胞相比,其细胞数不再增长,有丝分裂数及集落形成率下降,细胞形态及细胞周期动力学均发生一定的变化。且HH07A大剂量短期作用抑制Ll210细胞集落形成的效率高于低剂量持续作用。     

从海南哥纳香中分离的一种新化合物──海南哥纳香醇甲的抗肿瘤作用

体外用细胞生长曲线测定法、MTT试验、软琼脂集落形成分析法,及体内对移植性肿瘤实验,研究了海南哥纳香醇甲(GHM-10)的抗肿瘤作用,结果表明:GHM-10对肿瘤细胞有较强的抑制作用,IC₅₀在2μg·ml^-1左右;对正常细胞影响较小,骨髓祖细胞的敏感性则更低;耐药的KB/VCR200细胞及其亲本KB细胞具有相似的敏感性。GHM-10对HL-60细胞无分化诱导作用。GHM-10对实体型肝癌H22小鼠、Lewis肺癌小鼠及腹水型S180小鼠均有明显的治疗作用。     

海南粗榧新碱衍生物HH07A对肿瘤细胞内DNA拓扑异构酶Ⅱ和蛋白激酶C活性的影响

HH07A 5.5 μmol·L^-1作用L1210细胞24 h后, 可使细胞的DNA拓扑异构酶Ⅱ活性下降; 在无细胞系统, HH07A 0.55 mmol·L^-1也能直接促进DNA拓扑异构酶Ⅱ引起的DNA链断裂. 经HH07A (L1210细胞5.5 μmol·L^-1, HL-60细胞8.25 μmol·L^-1)作用24 h后, L1210及HL-60细胞的胞浆蛋白激酶C(PKC)活性升高, 胞膜PKC活性下降, 而全细胞PKC活性变化不大. 在无细胞系统中, HH07A 1.1 mmol·L^-1能明显抑制PKC的活性.     

海南哥纳香醇甲(GHM-10)对体外L1210细胞的抗肿瘤活性

用体外培养法研究GHM-10对L1210细胞生长的抑制作用和作用机制。结果表明,L1210细胞在用GHM-10处理1h,24h和7d后,IC₅₀依次为6.85,3.32和1.59μg·ml^-1,提示GHM-10有非时相特异性细胞毒药物的特性。在用GHM-10 1～2μg·ml^-1作用24h后,L1210细胞的增长率和有丝分裂指数下降,细胞核形态发生变化,但活细胞率仍保持在96%以上,提示GHM-10主要抑制细胞的增殖。用流式细胞计对L1210细胞进行细胞周期动力学的分析表明,GHM-10可在一定程度上阻断G₁期细胞向S期移行,还可增加L1210细胞的膜流动性。     

环孢菌素A阻断人HL-60抗药性细胞于G1期而诱导敏感细胞凋亡

进一步研究了抗三尖杉酯碱的HL-60细胞(HR20)抗细胞凋亡的机制及该抗性和抗药性的关系。结果表明,环孢菌素A(CsA)20,10μg·ml^-1诱导HL-60细胞发生凋亡,而阻断HR20细胞于G₁期,就不能诱导细胞发生凋亡。低浓度的CsA明显增加柔红霉素在HR20细胞内的积聚,其逆转抗药性作用与阻断细胞周期运行无关。CsA10μg·ml^-1处理HR20细胞,可引起50kDa的蛋白质高度磷酸化。结果提示:环孢菌素A阻断抗三尖杉酯碱的HL-60细胞于G₁期,而诱导敏感的HL-60细胞发生凋亡,其阻断作用与抗药性无关。     

海南哥纳香醇甲(GHM-10)对L1210细胞生物大分子合成的抑制作用

目的旨在研究GHM-10对L1210细胞生物大分子合成的影响。用[³H]标记前体参入试验。结果表明,GHM-104～12μg·ml^-1作用6h,可使L1210细胞的DNA,RNA及蛋白质的生物合成发生明显抑制,其中以抑制DNA合成的作用最强。用[³H]TdR参入曲线法、紫外吸收光谱移动法和荧光光谱移动法研究了GHM-10抑制DNA生物合成的机制。结果表明,GHM-10 6～8μg·ml^-1作用L1210细胞1h后,DNA合成的抑制已不可逆。提示GHM 10可能引起DNA分子结构的损伤,但GHM-10不能嵌入DNA分子或直接破坏DNA的结构。     

商陆多糖Ⅱ体外对小鼠脾细胞增殖及产生集落刺激因子的影响

用[³H]TdR参入法检测小鼠脾细胞增殖能力及产生集落刺激因子(colony stimulating factor. CSF)含量.证明商陆多糖Ⅱ(PAP-Ⅱ)在31～500 μg·m^-1范围内显著促进小鼠稗细胞增殖。PAP-Ⅱ,31～125 μg·ml^-1可剂量依赖性地促进Con A(1,2.8μg·ml^-1),LPS(3,10,30 μg·ml^-1)诱导的淋巴细胞细咆增殖,随着PAP-Ⅱ剂量加大,对丝裂原诱导的淋巴细胞增殖反呈抑制作用。PAP-Ⅱ。10～500μg·ml^-1呈剂量及时间依赖性地促进脾细胞产生CSF,其最适剂量为100 μg·ml^-1。最佳时间为5 d,提示PAP-Ⅱ能增强免疫及促进造血功能。     

商陆多糖Ⅰ联合白细胞介素2对小鼠脾细胞杀瘤活性的影响

商陆多糖Ⅰ(PAP-I),0.3～3μg·ml^-1和小鼠脾细胞培养3～5d可显著增强其杀伤P815肿瘤细胞活性及IL-2(250～500IU·ml^-1)诱导的LAK细胞活性,最适浓度为1μg·ml^-1。PAP-I及IL-2和脾细胞培养的上清液对P815肿瘤细胞无细胞毒作用,但能增强脾细胞及LAK细胞杀瘤活性。PAP-I,5,10及50mg·kg-1,ip可增强脾细胞杀伤P₈₁₅和L₉₂₉细胞的活性及IL-2诱导的LAK细胞活性。     

人参皂甙Rh2体外对小鼠黑色素瘤细胞的分化诱导作用

体外实验证明人参皂甙Rh₂在10μg·ml^-1的浓度下能明显抑制B₁₆细胞的生长,并呈浓度依赖性,其IC₅₀为4.1μg·ml^-1。Rh₂在10μg·ml^-1浓度下对B₁₆细胞有较强的分化诱导作用,表现为黑色素生成能力明显增加;形态向上皮样细胞分化;细胞呈网状结构;黑色素颗粒增多,生长变缓慢。细胞动力学研究结果表明,Rh₂可使B₁₆细胞阻断在G₁期。提示Rh₂对B₁₆细胞具有分化诱导作用。     

二甲双胍缓释片人体药代动力学及其相对生物利用度

目的 研究国产盐酸二甲双胍缓释片在人体药代动力学行为并与普通片进行等效性评价比较,并估算其药代动力学参数。方法 20名受试者分两组交叉服用缓释片和普通片,用RP-HPLC法测定血浆中药物浓度,并估算相应的药动学参数。结果 单剂量口服1000mg缓释片和普通片后估算的AUC_0-24分别为11.95±2.62μg·h^-1·ml^-1和10.72±2.23μg·h^-1·ml^-1;C_max分别为1.50±0.22μg·ml^-1和2.34±0.30μg·ml^-1;T_max分别为3.38±0.8h和1.61±0.32h;t_1/2分别为4.94±0.47h和3.20±0.38h;多剂量1000mg·d^-1时AUC_ss分别为15.04±3.01μg·h^-1·ml^-1和14.51±2.69μg·h^-1·ml^-1;C_max分别为1.68±0.25μg·ml^-1和1.60±0.26μg·ml^-1;C_min分别为0.15±0.03μg·ml^-1和0.12±0.04μg·ml^-1;Cav分别为0.62±0.13μg·ml^-1和0.61±0.11μg·ml^-1;T_max分别为3.61±0.60h和1.88±0.38h;AUC_0-24和AUC_ss经对数转换后方差分析和双单侧t检验，显示两制剂吸收程度生物等效。结论受试制剂和参比制剂吸收程度生物等效，但具有缓释特性。盐酸二甲双胍缓释片的相对生物利用度单剂量时为（111.5±8.3）%，多剂量时为（103.6±9.2）%。     

(+),(-)和(±)棉酚在雌大鼠抗早孕作用的研究

妊娠第6～9天大鼠,分别ig(±)和(-)棉酚80mg·kg^-1·d^-1和40mg·kg^-1·d^-1,结果有明显的抗早孕作用。然而(+)棉酚40mg·kg^-1·d^-1对大鼠生育无明显影响。(-)棉酚30μg·ml^-1能抑制体外培养黄体细胞孕酮的分泌。(+)棉酚10μg·ml^-1能促进黄体细胞分泌孕酮。hCG1IU·ml^-1能明显刺激体外培养颗粒细胞孕酮的分泌。(±)棉酚10和30μg·ml^-1皆能明显降低颗粒细胞对hCG的反应性。     

蛋白激酶抑制剂staurosporine增强抗癌药对肿瘤细胞的杀伤

蛋白激酶抑制剂staurosporine 5 ng·ml^-1阻断人胚肺2BS细胞于G₁/S边界,而不影响人胃癌BGC-823细胞的周期运行。细胞周期时相特异药物阿霉素、阿糖胞苷或博莱霉素A₅与staurosporine合用,2BS细胞和BGC-823细胞的IC₅₀均发生改变,显示低剂量staurosporine增强抗癌药对肿瘤细胞的杀伤。用谷胱甘肽(GSH)的荧光探针mBCL测定不同细胞周期时相的GSH,发现staurosporine使2BS细胞中GSH含量显著增高,而使BGC-823细胞中GSH含量显著下降。Staurosporine对正常和肿瘤细胞周期行进及胞内GSH水平的不同影响,可能是它增强抗癌药物对肿瘤细胞杀伤作用的原因。     

吡罗昔康两种给药途径的血药浓度与局部浓度比较

探讨和比较了吡罗昔康以口服和透皮两种途径给药后的血药浓度与局部浓度。将小鼠随机分组,分别给予口服混悬剂0.072mg·ml^-1或透皮凝胶剂1mg·g^-1(或2mg·g^-1)。以HPLC法测定小鼠的血药浓度(C_s)和局部浓度(C₁)。结果表明,透皮给药以血药浓度计算凝胶剂的相对生物利用度仅为口服混悬剂的10%。但是透皮给药的C₁/C_s=0.13,远远大于口服给药的C₁/C_s(0.01)。透皮给药后,局部药物浓度—时间曲线下面积为15.85μg·h^-1·ml^-1,远远高于口服给药相应值(1.93μg·h-1·ml^-1)。揭示单纯以血药浓度作为局部作用透皮制剂的生物利用度评价标准是不全面的,应同时考察作用部位的药物浓度。     

高效液相色谱法测定4-[4″-(2″,2″,6″,6″-四甲基哌啶氮氧自由基)氨基]-4'-去甲表鬼臼毒素大鼠血浆浓度及药代动力学参数

建立了大鼠血浆中4-[4″-(2″,2″,6″,6″-四甲基哌啶氮氧自由基)氨基]-4'-去甲表鬼臼毒素(GP-7)浓度的HPLC测定方法。用ODS柱分离,甲醇-水-冰醋酸(59:41:0.6)为流动相,检测波长285nm。血浆甲乙醚-二氯甲烷混合液萃取,45℃水浴蒸干,残渣用流动相溶解进样,内标法定量;血药浓度在2～200μg·ml^-1范围内呈线性关系,r=0.9997,血浆最低检测浓度0.2μg·ml^-1,方法回收率94%～100%,日内、日间RSD2.29%～7.70%。大鼠ivGP-710,20,30mg·kg^-1,药代动力学过程符合二室开放模型,消除半衰期为39.8±10.8min。     

腺嘌呤衍生物的合成及体外抗疱疹病毒活性

以腺嘌呤为母体,在其9位引入活性基团N-取代缩氨基硫脲(TSC),设计合成了12个6-氨基-9(N^4'-取代乙醛缩氨基硫脲)嘌呤衍生物(4a～1),并进行了体外抗单纯疱疹病毒I型(HSV-1),II型(HSV-2),水痘-带状疱疹病毒(VZV)活性试验及细胞毒性试验。结果表明,除化合物4e及4f对HSV-1及VZV有较高活性外,其余化合物对上述两种病毒的活性均不明显。另外,将4e与4f分别与无环鸟苷(ACV)联合用药,其最小抑制浓度(MIC)及细胞毒性(MCC)均显著下降。     

光纤化学传感器—流动注射分析联用技术在线监测兔尿中呋喃妥因浓度

用光纤化学传感器-流动注射分析联用技术,以固定了荧光分子探针芘丁酸的醋酸纤维素膜作为分析物识别器,在线监测兔尿中呋喃妥因浓度。方法的回收率为96.5%～102.9%。日内、日间RSD为1.5%～3.8%。尿药浓度在2～100μg·ml^-1范围内呈线性关系,相关系数0.9983。当信噪比为3时,最低检出限为0.74μg·ml^-1。应用该法测定了6只家兔口服呋喃妥因后的尿药一时间曲线,并据此提取了药代动力学参数。同时用高效薄层色谱法对该法的选择性进行了验证。