结直肠癌患者术前区域动脉灌注化疗对癌细胞增殖的影响

目的 探讨术前区域动脉灌注化疗对人结直肠癌细胞增殖的影响。方法 选择术前临床病理证实的结直肠癌患者 20例,于术前选择肿瘤供应动脉行区域灌注化疗, 10 d后行根治手术。免疫组织化学法测定并比较癌组织增殖细胞核抗原（ PCNA）及细胞周期蛋白 D1（ cyclin D1）的表达水平。同时选择同期未行动脉灌注化疗的结直肠癌患者直接接受根治手术,作为对照组。结果 化疗组及对照组 PCNA标记指数 (LI)分别为 16. 4％± 15. 2％及 38. 1％± 17. 8％（ P=0.02） ; cyclin D1 LI分别为 8. 7％± 8. 0％ 及 27. 4％± 16. 5％（ P=0. 0002)。细胞增殖指标 PCNA及 cyclin D1的表达在化疗组显著低于对照组。结论 术前选择性区域动脉灌注化疗对结直肠癌细胞增殖可能有较明显的抑制作用,从而发挥抑制肿瘤生长的治疗作用。     

术前区域动脉灌注化疗对结直肠癌组织微血管计数及血管内皮生长因子表达的影响

目的探讨术前区域动脉灌注化疗对血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达及肿瘤血管生成的影响.方法通过免疫组织化学方法,检测术前区域动脉灌注化疗及根治手术的结直肠癌病例癌组织中微血管密度(MVD)和VEGF蛋白表达水平,并与同期未行术前动脉化疗而直接手术的31例病例作比较.结果术前动脉化疗组的MVD值为19 2±5 2,而对照组为42.4±1 8.4,两组间差异有显著性意义(P＜001).术前动脉化疗组VEGF表达亦明显低于非化疗组(P＜0.01).术前化疗组肿瘤的MVD与VEGF表达相关分析表明两者间存在正相关(r=0.788,P＜005),VEGF的表达与肿瘤Dukes分期相关且有统计学意义.结论结直肠癌术前区域动脉化疗可以通过抑制肿瘤细胞分泌VEGF蛋白,或直接作用于肿瘤血管,减少肿瘤的血管生成,减少肿瘤细胞的血供.从而改善结直肠癌患者的治疗效果和预后     

结直肠癌患者术前区域动脉灌注化疗对癌细胞增殖的影响

目的 探讨术前区域动脉灌注化疗对人结直肠癌细胞增殖的影响。方法 选择术前临闲是证实的结直肠癌患者２０例,于术前选择肿瘤供应动脉行区域灌注化疗。１０ｄ后行根治手术,免疫组织化学法测定并比较癌组织增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）及细胞周期蛋白Ｄ１（ｃｙｃｌｉｎＤ１）的表达水平,同时选择同期未行动脉灌注化疗的结直肠癌患者直接接受根治手术,作为对照组。结果 化疗组及对照组ＰＣＮＡ标记指数（ＬＩ）分别为１６．４％&;#177;１５．２％及３８．１％&;#177;１７．８％（Ｐ＝０．０２）;ｃｙｃｌｉｎＤ１ＬＩ分虽为８．７％&;#177;８．０％及２７．４％&;#177;１６．５％（Ｐ＝０．０００２）。细胞增殖指标ＰＣＮＡ及ｃｙｃｌｉｎＤ１的表达在化疗组显著低于对照组,结论 术前选择性区域动脉灌注化疗对结直肠癌细胞可能有较明显的抑制作用,从而发挥抑制肿瘤生长的治疗作用。     

结直肠癌术前区域动脉灌注化疗对肿瘤细胞凋亡及白细胞介素-1β-转化酶表达的影响

目的 探讨术前区域动脉灌注化疗对结直肠癌细胞凋亡及白细胞介素-1β-转化酶(ICE)表达的影响。方法 对30例术前区域动脉灌注化疗及20例术前未行任何化疗的结直肠癌患的病理标本．用DNA原位末端标记检测肿瘤细胞凋亡并应用LASB法进行ICE检测。结果 术前动脉化疗组与未化疗组肿瘤细胞凋亡数分别为(61．22±3．99)和(40．11±3.96)个／高倍视野,两间有显性差异(P<0．001)。术前动脉化疗组ICE阳性表达亦明显高于非化疔组(P<0.05)。术前化疗组内肿瘤细胞凋亡与ICE表达相关分析表明两间存在正相关(r=0．591,P<0．051．结论 术前区域动脉灌注化疗对结直肠癌细胞有明显促凋亡作用。     

结直肠癌术前区域动脉灌注化疗对肿瘤细胞凋亡及白细胞介素-1β-转化酶表达的影响

目的　探讨术前区域动脉灌注化疗对结直肠癌细胞凋亡及白细胞介素１β转化酶（ＩＣＥ） 表达的影响。方法　对３０ 例术前区域动脉灌注化疗及２０ 例术前未行任何化疗的结直肠癌患者的病理标本,用ＤＮＡ 原位末端标记检测肿瘤细胞凋亡并应用ＬＡＳＢ法进行ＩＣＥ检测。结果　术前动脉化疗组与未化疗组肿瘤细胞凋亡数分别为（６１－２２ ±３－９９） 和（４０－１１ ±３－９６） 个／ 高倍视野,两者间有显著性差异（ Ｐ＜ ０－００１） 。术前动脉化疗组ＩＣＥ阳性表达亦明显高于非化疗组（ Ｐ ＜０－０５）。术前化疗组内肿瘤细胞凋亡与ＩＣＥ 表达相关分析表明两者间存在正相关（ｒ＝０－５９１, Ｐ＜ ０－０５） 。结论　术前区域动脉灌注化疗对结直肠癌细胞有明显促凋亡作用。     

Rb蛋白在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的 分析Rb蛋白表达与结直肠癌临床病理特征的关系。方法 应用免疫组化SABC法，检测44例结直肠癌癌中心，癌旁（距肿瘤边缘1cm)，癌切缘（距肿瘤边缘3cm以上）Rb蛋白表达情况，并分析Rb蛋白表达与结直肠癌临床病理特征的关系。结果 44例结直肠癌癌中心Rb蛋白表达为61．4％（27／44），癌旁黏膜为90．9％（40／44），癌切缘为97．73％（43／44）；Rb蛋白表达与年龄，性别，肿瘤部位，大小及分化程度无显著相关，而与肿瘤临床分期，淋巴结转移显著相关。结论 Rb蛋白的表达与结直肠癌的部分临床病理特征密切相关，可能是判断结直肠癌预后的一项重要指标。     

肝硬化组织中p16INK4a和Rb的基因甲基化状态和蛋白表达

目的：探讨肝硬化组织中p16INK4a和视网膜母细胞瘤易感基因（Rb基因）启动子区域的甲基化状态与其蛋白的表达的关系。方法：分别采用PCR和免疫组织化学方法测定65例肝硬化患者和20例正常人肝组织中p16INK4a和Rb启动子区域甲基化状况和蛋白的表达。结果：20例正常肝组织（对照组肝组织）中均未检测到p16INK4a和Rb甲基化异常,肝硬化组肝组织中p16INK4a和Rb基因甲基化率分别为40.0%（26/65）和36.9%（24/65）;p16INK4a和Rb蛋白表达的积分光密度（IOD）在正常肝组织为225.7±27.4和254.7±34.8,在肝硬化组肝组织中为32.4±7.5和45.2±6.4,差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论：肝硬化组织中存在p16INK4a和Rb异常甲基化和p16INK4a和Rb蛋白的表达降低,由此导致的细胞周期失控可能参与了肝硬化的发生发展过程。     

结直肠癌术前区域动脉灌注化疗的临床病理研究

目的探讨结直肠癌术前区域动脉灌注化疗对临床病理特征的作用及其可行性。方法以Seldinger 方法插管,选择性区域动脉造影灌注化疗结直肠癌30例。结果所有病例(30/30)均发现沿血管周围的癌细胞发生核固缩、碎裂、胞浆凝固、坏死,细胞间质水肿、纤维增生、炎性细胞浸润,血管出现内膜增生、血管炎及血栓形成。结论术前选择性区域动脉灌注化疗对结直肠癌组织学改变显著,临床症状改善,对结直肠癌治疗具有积极的作用。     

结直肠癌术前区域动脉灌注化疗的临床病理研究

目的 探讨结直肠癌术前区域动脉灌注化疗对临床病理特征的作用及其可行性。方法 以Seldinger方法插管，选择性区域动脉造影灌注化疗结直肠癌30例。结果 所有病例(30／30)均发现沿血管周围的癌细胞发生接同缩、碎裂、胞浆凝固、坏死，细胞问质水肿、纤维增生、炎性细胞浸润，血管出现内膜增生、血管炎及血栓形成。结论 术前选择性区域动脉灌注化疗对结直肠癌组织学改变显，临床症状改善．对结直肠癌治疗具有积极的作用。     

Skp2、p27kip1蛋白在结直肠癌中的表达及其意义

目的 探讨Skp2蛋白在结直肠癌发生、发展中的作用及其与p27kip1蛋白表达的关系.方法 应用免疫组织化学法结合计算机图像分析检测结直肠癌(80例)、腺瘤(20例)、正常组织(20例)中Skp2蛋白和p27kip1蛋白的表达.结果 由正常结直肠黏膜、腺瘤到癌,Skp2阳性表达率为0%、55%、93.8%,呈上升趋势(P＜0.01);p27kip1阳性表达率为100%、95%、87.5%,呈下降趋势(P＜0.05).结直肠癌中Skp2表达与p27kip1表达呈负相关(r=-0.311,P＜0.01).Skp2蛋白在癌组织中的表达与结直肠癌的分化程度、淋巴转移有关(P＜0.05).结论 结直肠癌skp2蛋白过表达与p27kip1蛋白降解有关,Skp2蛋白过表达可能是结直肠癌发生、发展的原因之一.     

柴胡皂甙-d对人肝癌HepG2细胞周期的阻滞作用及p27表达的影响

目的 观察柴胡皂甙-d(SSd)对人肝癌HepG2细胞周期的阻滞作用及对其p27基因表达的影响.方法 常规培养人肝癌HepG2细胞至对数生长期,随机分为两组,实验组10 mg/L的SSd作用48 h,设空白对照;流式细胞术(FCM)检测细胞周期分布;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞p27基因mRNA表达;免疫组织化学SP法检测p27蛋白的表达.结果 实验组HepG2细胞G1期百分率为(69.43 ±3.01)％较对照组(62.83±2.72)％明显增加(P＜0.05),S期细胞百分率为(22.30±0.82)％较对照组(27.23±0.59)％明显减少(P＜0.01);p27基因mRNA相对表达量(0.566 ±0.001)较对照组(0.335±0.000)明显增多(P＜0.05);p27蛋白表达阳性率为(33.9±3.1)％较对照组(21.9±1.7)％亦明显增多(P＜0.01).结论 SSd可导致人肝癌HepG2细胞周期阻滞于G1期,其机制可能与上调p27基因表达有关.     

细胞S期激酶相关蛋白2、p16蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的 观察细胞s期激酶相关蛋白2(SKP2)、p16蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达,探讨它们之间的关系及其临床意义.方法 利用组织芯片和免疫组织化学技术检测SKP2、p16蛋白在89例非小细胞肺癌,10例肺良性病变组织中的表达.结果 NSCLC组织中SKP2、p16蛋白表达阳性率分别为(23.52±13.57)%、(44.72±15.97)%,均与肺良性病变组织差异有统计学意义(2.91±1.27)%、(91.13±6.57)%(P＜0.01).SKP2蛋白在NSCLC组织中的表达水平与细胞分化程度,病理类型,TNM分期密切相关(P＜0.01),而与淋巴结转移差异无统计学意义(P＞0.05).p16蛋白在NSCLC组织中的表达水平与细胞分化程度,病理类型,TNM分期,淋巴结转移密切相关(P＜0.01).NSCLC组织中SKP2、p16蛋白表达呈负相关(r=-0.309,P＜0.01).NSCLC组织中SKP2蛋白表达率与患者生存时间呈负相关(r=-0.241,P＜0.01),p16蛋白表达率与患者生存时间呈负正相关(r=0.144,P＜0.01).结论 SKP2蛋白表达增高与p16蛋白表达降低共同在NSCLC的发生发展中起促进作用,且它们对NSCLC患者的预后也有相反的影响.     

8-溴-环腺苷酸对人膀胱癌BIU-87细胞生长相关基因表达的影响

目的　探讨8-溴-环腺苷酸（8-Br-cAMP）对人膀胱癌BIU-87细胞生长相关基因表达的影响。方法　体外培育的人膀胱癌BIU-87细胞受终浓度为1×10-5mol/L的8-Br-cAMP处理后,用RNA斑点印迹技术研究与细胞生长相关的几种基因表达的变化。结果　实验组较对照组c-erbB-2基因表达减弱（478.50±221.64对1404.00±342.25,P＜0.005)、H-ras基因表达减弱(559.00±267.72对2363.25±324.00,P＜0.01)、突变型p53基因表达减弱(1444.83±353.70对365.0±52.13,P＜0.02);而野生型p53基因表达增强(853.33±73.31对1318.25±353.70,P＜0.001)。结论　8-Br-cAMP可通过影响有关信号传递和细胞周期进程基因的表达而抑制细胞生长。     

p16和nm23-H1蛋白的表达与胃癌生物学特性的关系

目的探讨p16和nm23-H1在胃癌组织中的表达及其与临床病理因素的关系。方法应用免疫组化标记链霉菌抗生物素-生物素(LSAB)方法,对65例胃癌患者癌组织中p16和nm23-H1蛋白的表达水平进行了检测,并对其结果与患者的临床病理资料进行了相关分析。结果p16和nm23-H1在胃癌组织中的阳性表达率分别为30.8%、41.5%;在分化好的癌组织,p16的阳性表达率高于分化差的癌组织(P＜0.05);p16和nm23-H1在无淋巴结转移患者的癌组织中阳性率高于有转移者(P＜0.05、P＜0.01);在Ⅰ、Ⅱ期患者癌组织中高于Ⅲ期患者癌组织,差异均有显著性意义(P＜0.05、P＜0.01)。p16蛋白表达阳性者3年生存率为45.0%,阴性者为28.9%;nm23-H1蛋白表达阳性者3年生存率为51.9%,阴性者为21.1%,阳性表达者与阴性表达者生存率差异有显著性意义(P＜0.05)。p16与nm23-H1蛋白的表达率呈正相关(r=0.0415,P＜0.05)。结论p16和nm23-H1参与了胃癌的发展过程,并与胃癌的部分生物学行为有关,可作为预测肿瘤转移和评估患者预后的指标。     

二氢青蒿素对胰腺癌生长的抑制作用

目的 探讨二氢青蒿素在体外、体内对胰腺癌的生长抑制作用.方法 通过MTT法检测二氢青蒿素对胰腺癌细胞株生长的抑制作用,Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测BxPC-3细胞中增殖、凋亡相关蛋白的表达.监测给药后胰腺癌裸鼠移植瘤体积的变化,并通过对肿瘤组织标本Ki-67染色和TUNEL染色检测肿瘤细胞增殖和凋亡情况.结果 MTT结果显示,二氢青蒿素可抑制体外培养的胰腺癌细胞BxPC-3和AsPC-1的增殖,诱导细胞凋亡,且呈剂量依赖性.二氢青蒿素亦可通过抑制增殖和诱导凋亡而抑制胰腺癌的体内生长.Western blot检测BxPC-3细胞中蛋白的表达水平,结果显示二氢青蒿素上调增殖相关蛋白p21WAF1、下调PCNA的表达;上调凋亡相关蛋白Bax、下调Bcl-2的表达,且可增加caspase-9的活化水平.结论 二氢青蒿素在体内外对胰腺癌均有抗肿瘤作用,是胰腺癌治疗的潜在药物.     

糖皮质激素受体对内毒素性急性肺损伤大鼠的保护作用及机制

目的 探讨糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)在内毒素急性肺损伤(acute lung injury,ALI)中的作用及机制.方法 SD雄性大鼠84只,随机数字表法分为5组:Control组,仅注射生理盐水;脂多糖(lipopoIysaccharide,LPS)组,经尾静脉注射LPS 5 mg/kg;地塞米松(dexamethasone,DEX)+LPS组,注射LPS前30 min腹腔注射Dex 6 mg/kg;米非司酮(RU486)组,皮下注射GR拮抗剂RU486 20 mg/kg,90 min后经尾静脉注射生理盐水;RU486+Dex+LPS组,按照上述顺序分别注射RU486、Dex和LPS.Control组和RU486组6 h后,其余3组分别在1、3、6 h各时间点处死.检测各组大鼠支气管肺泡灌洗液(brobehoalveolar lavage fluid,BALF)中蛋白浓度,肺水系数(1ung index,LI),肺组织的病理变化,凋亡指数(apoptosis index,AI)以及肺组织中p38MAPK的活化状态及表达.结果 与Control组BALF中蛋白浓度(49±5)g/L、LI(2.36±0.14)、AI(12.0±1.7)%相比,LPS组分别为(77±9)g/L、5.93±0.44、(43.9±3.1)%(P＜0.05),HE染色显示肺组织炎症和损伤严重.与LPS组相比,Dex+LPS组分别为(54±4)g/L、3.77±0.48、(32.7±2.7)%(P＜0.05),且肺组织损伤程度减轻,应用GR抑制剂RU486后,Dex的肺保护作用消失.另外,LPS组肺组织中磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)的表达与Control组相比显著升高(P＜0.05);与LPS相比,Dex+LPS组p-p38MAPK表达下调(P＜0.05),而RU486+Dex+LPS组的表达上调(P＞0.05).结论 糖皮质激素受体在内毒素导致的急性肺损伤中发挥着重要的作用.激素活化的GR可能通过抑制p38MAPK的活化/磷酸化抑制肺组织细胞的凋亡,缓解肺损伤的程度.     

Numb基因上调对人肾细胞癌细胞周期和增殖的影响

目的 研究Numb基因上调对人肾细胞癌的细胞周期和增殖能力的影响及相关机制.方法 选取人肾细胞癌细胞786-O为研究对象,使用Numb-ORF表达质粒转染细胞为实验组,设置阴性对照及空白对照组.采用荧光定量聚合酶链式反应和蛋白质印迹技术检测各组Numb基因和肿瘤增殖抗原Ki-67的表达;采用流式细胞技术检测细胞周期,计算G0/G1期细胞比例、增殖指数(PI)和S期分数(SPF);以MTS法检测细胞的增殖活力.结果 实验组Numb的相对表达水平为(18.97±1.49),显著的高于阴性对照组(3.34±0.41)和空白对照组(3.21±0.39);实验组Ki-67的相对表达水平为(4.31 ±0.58),明显少于阴性对照组(10.35±0.84)和空白对照组(9.89±0.73),差异有统计学意义(P＜0.01).细胞周期检测:实验组中G0/G1期细胞的比例(％)为60.47±1.58,明显高于阴性对照组(49.67±1.97)和空白对照组(52.52±2.47)(P＜0.01).实验组的PI和SPF均低于两对照组(P＜0.01).增殖检测:实验组在24、48、72h的吸光度(A)值均低于两对照组(P＜0.01).结论 在786-O细胞中上调Numb基因可以抑制Ki-67的表达,减低细胞的PI和SPF,促使细胞发生G0/G1期阻滞,抑制细胞的增殖活力,实验结果提示Numb基因在肾细胞癌中可能发挥抑癌因子作用.     

The prevalence and clinicopathologic correlate of p16INK4a, retinoblastoma and p53 immunoreactivity in locally advanced urinary bladder cancer

The purpose of the study was to investigate the prognostic value and clinicopathological correlate of tumor p53, p16 and Rb protein expression in patients with locally advanced urinary bladder cancer. Sixty-five patients (44 men and 21 women; 40 to 84 yrs old) with locally advanced urinary bladder cancer (21 pT2, 27pT3, 17pT4) undergoing radical cystectomy and bilateral pelvic lymph node dissection were followed up for 2 to 116 months (mean +/- SD: 30.02 +/- 6.46 months). Immunohistochemical staining for p53, Rb and p16 proteins were performed on surgically obtained, formalin fixed and paraffin embedded tissue sections. Thirty of the tumors (46.2%) were p53+, 52 of the tumors (80%) were p16- and 41 (63%) were Rb-. Only 5 of the tumors (7.7%) had normal expression of all three proteins. The tumor expression status of p53 could not be correlated with p16 (P = 1.000) or Rb (P = 1.000). Only a marginal inverse relationship was found between the expression of p16 and Rb (P = 0.056). Higher grade tumors had significantly lower percentage of p16 abnormality (P = 0.05), while higher grade (not higher stage) tumors had higher percentage of Rb abnormality (P = 0.0245). Univariate analysis showed that tumor expression of Rb or p16, alone or combined, had no predictive value on progression-free and disease-specific survival. It did, however, show a significant correlation between progression-free survival and tumor p53 and LN status (P = 0.032 and P = 0.0304) and a significant correlation between tumor stage disease-specific survival (P = 0.042). Multivariate analysis showed tumor stage and nodal status to be two significant independent indicators for progression-free survival (P = 0.0038 and P = 0.0049) and disease-specific survival (P = 0.0066 and P = 0.0484). It was also noteworthy that, after receiving postoperative adjuvant systemic M-VEC chemotherapy, patients with node-positive p53-normal tumors had significantly better progression-free and disease-specific survivals than those with node-positive p53-abnormal tumors (P = 0.036 and P = 0.0479, respectively). This study has found tumor expression of p53, p16 and Rb proteins in locally advanced bladder cancer to be frequently abnormal. Although multivariate analysis showed tumor stage and nodal status to be the only two statistically significant parameters, p53 may also serve as an additional prognostic predictor of the outcome of postoperative adjuvant systemic chemotherapy in patients with regional lymph node tumor involvement. Such patients with p53-normal tumors experienced significantly better progression-free and disease-specific survivals than those with p53-abnormal tumors.     

Effect and mechanism of cysteine-rich protein 61 on transforming growth factor -β1-activated renal fibroblasts

Objective To observe the expression of cysteine-rich protein 61 (Cyr61) in transforming growth factor -β1 (TGF-β1)-activated renal fibroblasts (NRK-49F), and to explore its effect and mechanism. Methods (1) NRK-49F cells were activated by TGF-β1 with different concentrations (0.0, 0.5, 1.0, 2.0, 5.0 μg/L). Western blotting was used to detect the expression of Cyr61 protein, and CCK-8 assay was used to test the proliferative activity of NRK-49F cells. (2) NRK-49F cells with low expression and over expression of Cyr61 were established by plasmid transfection. The cells were divided into control group (null vector transfection), over-expression group and low-expression group. The proliferation was discovered by CCK-8 assay after 24, 48 and 72 h. Further, 5.0 μg/L TGF-β1 activated these three groups. The proliferation was also discovered by CCK-8 assay and the cell cycle was analyzed by flow cytometry. The mRNA expressions of fibrosis markers (Col1α1, Col3α1, MMP9, MMP13) and factors of cell senescence signal pathway (p53, p21, Rb, p16) were ascertained by real time PCR, and the protein expressions of Col3 and MMP9 were detected by Western blotting. Results (1) Compared with 0.0 μg/L TGF-β1 group, the proliferation of NRK-49F cells was enhanced in 0.5, 1.0, 2.0 and 5.0 μg/L TGF-β1 groups (all P＜0.05), while the expression of Cyr61 protein was decreased in 1.0 μg/L group and increased in 5.0 μg/L group (all P＜0.05). (2) The proliferation of over-expression group was lower than that of control group after 24, 48 and 72 h (all P＜0.05), which was in a time-dependent manner. (3) Compared with control group activated by TGF-β1, the over-expression group expressed less fibrosis factors (Col1α1 and Col3α1) and more anti-fibrosis factors (MMP9 and MMP13) with decreased proliferation (all P＜0.05). Simultaneously, the proportion of cells bogged down in G1 phases, as well as the expressions of p53, p21 and Rb mRNA increased (all P＜0.05). The above effects of low-expression group were just opposite to over-expression group. Moreover, there was no significant difference in the expression of p16 gene among the three groups (P＞0.05). Conclusions Cyr61 can curb the proliferation and fibrotic phenotypes of fibroblasts, thereafter slowing down the process of renal fibrosis. The p53/p21/Rb interrelated cell senescence signal pathway may be involved in the anti-fibrosis process.     

内皮型一氧化氮合酶在大鼠糖尿病膀胱病变中的作用

目的 探讨大鼠糖尿病膀胱病变组织中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达及意义.方法 雄性SD大鼠36只.随机分为正常组、多尿组和糖尿病组,每组12只.采用尿动力学方法对大鼠膀胱容量、单次排尿量、膀胱内最大压力、残尿壁和排尿率等指标进行评价,应用RT-PCR和蛋白质印迹方法检测大鼠膀胱组织中eNOS mRNA和蛋白质的表达水平,统计学分析其与膀胱功能的相关性.结果 6周时正常组大鼠最大膀胱容量、单次排尿量、残余尿量分别为(0.75±0.04)、(0.70±0.02)和(0.06±0.00)ml,多尿组分别为(1.62±0.15)、(1.52±0.30)和(0.11±0.01)ml,糖尿病组分别为(2.29±0.16)、(2.06±0.25)和(0.23±0.01)ml,与正常组和多尿组相比,差异具有统计学意义(P＜0.01);12周时正常组上述指标分别为(0.86±0.06)、(0.80±0.04)和(0.07±0.00)ml,多尿组分别为(1.93±0.10)、(1.77±0.11)和(0.13±0.02)ml,糖尿病组分别为(2.65±0.26)、(2.09±0.21)和(0.56±0.06)ml,各组间差异具有统计学意义(P＜0.01).糖尿病组与6周时相比,各指标增加,其中残余尿量差异具有统计学意义(P＜0.01).6周时3组排尿率分别为(93.3±2.1)%、(93.2±2.7)%和(90.0±2.5)%,组间差异无统计学意义(P＞0.05);12周时分别为(93.1±2.2)%、(93.8±3.2)%和(78.1±2.6)%,糖尿病组小于其他2组(P＜0.05).各组膀胱内压力差异无统计学意义.糖尿病组膀胱压力曲线出现压力小波动,曲线不规则.6周时各组膀胱组织中eNOSmRNA表达相对灰度值分别为0.81±0.12、0.90±0.12和1.98±0.16,糖尿病组高于其他2组,差异具有统计学意义(P＜0.01);12周时为0.87±0.17、1.05±0.11和2.89±0.23,糖尿病组与6周时相比增加(P＜0.01).6周时各组eNOS蛋白表达相对灰度值分别为0.98±0.12、0.93±0.14和2.28±0.16,糖尿病组高于其他2组(P＜0.01);12周时为1.03±0.13、1.14±0.11和3.12±0.20,糖尿病组与6周时相比增加(P＜0.01).糖尿病组大鼠膀胱eNOS蛋白表达强度与排尿率旱负相关(r=-0.669,P＜0.01).结论 膀胱组织中eNOS mRNA和蛋白表达上调可能参与了糖尿病膀胱病变的发生发展.