千年健寒热药性的实验评价

目的：通过前期建立的中药寒热药性的细胞评价方法评价中药千年健的寒热药性。方法用噻唑蓝（ MTT）比色法考察千年健对SGC-7901细胞体外增殖的影响,倒置显微镜观察千年健对细胞形态特征的影响,台盼蓝染色法分析千年健的细胞毒作用。结果千年健在5μg/mL（含5μg/mL）以下对细胞生长有促进作用。形态学观察表明千年健在5μg/mL（含5μg/mL）以下使细胞密度增加,细胞结构致密、生长旺盛。台盼蓝染色表明千年健对这2种细胞没有细胞毒作用。结论千年健药性应为温热,且对所用细胞没有细胞毒作用。     

评价中药寒热药性的实验方法研究

目的 通过考察寒凉药与温热药对人乳腺癌细胞 MCF-7体外生长增殖的影响来建立评价中药寒热药性的实验方法。方法 用噻唑蓝比色法(MTT法)考察4种寒凉药和5种温热药对人乳腺癌细胞 MCF-7体外生长增殖的影响,倒置显微镜观察寒凉药、温热药对细胞形态特征的影响,台盼蓝染色法分析所选寒凉药和温热药的细胞毒性作用。结果 寒凉药(50～800 μg/mL 黄连、虎杖、竹叶、夏枯草) 抑制 MCF-7生长增殖,随质量浓度增大抑制作用增强。温热药干姜和白胡椒(50～800 μg/mL)促进MCF-7生长增殖,干姜的促进作用随质量浓度增大而增强,白胡椒的促进作用先增大后减小。其余温热药低质量浓度(肉桂与花椒 50～200 μg/mL、仙茅 50～400 μg/mL) 促进 MCF-7 生长增殖,促进作用随质量浓度增大而增强;高质量浓度 (肉桂与花椒 400～800 μg/mL、仙茅 600～800 μg/mL) 抑制 MCF-7生长增殖,抑制作用随质量浓度增大而增强。形态学观察表明寒凉药(黄连、虎杖、竹叶、夏枯草)在所选质量浓度范围内使 MCF-7密度减小,细胞固缩变圆;温热药(干姜、白胡椒、肉桂、仙茅、花椒) 在各自起促进作用的质量浓度范围内使 MCF-7 密度增大,生长旺盛。台盼蓝染色表明各寒凉药与温热药对 MCF-7没有细胞毒性作用。结论 本方法有可能用于中药寒热药性的实验评价。     

黄芪多糖针对人胃癌细胞SGC-7901体外实验抑制作用

目的：体外研究不同浓度的黄芪多糖对人胃癌细胞SGC-7901增殖的影响。方法：体外培养人胃癌细胞SGC-7901,采用MTT比色法检测不同浓度（6ug/mL、12．5ug/mL、25ug/mL、50ug/mL、100ug/mL）的黄芪多糖提取液对其增殖的抑制作用,并用酶联检测仪在450nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。结果：在细胞抑制实验中,加药12h后,浓度高于25ug/mL的黄芪多糖均能表现出对人胃癌细胞SGC-7901的增殖的抑制作用,同时MTT实验结果表明,在药物浓度12．5ug/mL时,人胃癌细胞SGC-7901的增殖因药物浓度低,有上升趋势。随着黄芪多糖的药物浓度增加,在药物浓度50ug/mL～100ug/mL时有明显抑制人胃癌细胞SGC-7901生长的趋势,并呈浓度依赖性。结论：黄芪多糖在体外实验对人胃癌细胞SGC-7901的增值有较强的肿瘤抑制作用。     

隐丹参酮抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖的实验研究

目的探讨隐丹参酮对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响。方法通过体外无菌传代培养2013年5月所购的人胃癌SGC-7901细胞,设空白对照组与20μm、40μm、60μm、80μm和100μm五个浓度的隐丹参酮组,分别于6 h、12 h、24 h和48 h后采用MTT法检测隐丹参酮对人胃癌SGC-7901细胞的抑制率,并观察药物作用24 h和48 h后细胞的形态变化。结果 1刺激6 h和12 h后,各隐丹参酮组对人胃癌SGC-7901细胞的抑制率均〈35%;刺激24 h后,随着隐丹参酮浓度的递增,其对人胃癌SGC-7901细胞的抑制率从33%逐渐增加至72%;刺激48 h后,各隐丹参酮组对人胃癌SGC-7901细胞的抑制率均〉50%。2刺激24 h后,隐丹参酮对人胃癌SGC-7901细胞的IC50为59.11μM,3与空白对照组相比,各隐丹参酮组对人胃癌SGC-7901细胞均有抑制作用（P〈0.01）,且除了20μM与40μM组及40μM与60μM组之间差异无统计学意义（P分别为0.162和0.110）,其余各组间差异有统计学意义（P〈0.05）。结论隐丹参酮对人胃癌SGC-7901细胞的增殖有明显的抑制作用,且有时间和剂量依赖关系;究其原因可能是隐丹参酮能够诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡,具体机制有待进一步研究。     

采用两种细胞模型评价野菊花的寒热属性

目的 通过考察野菊花对人胃癌细胞株SGC-7901、人宫颈癌细胞株HeLa生长的促进或抑制作用,评价其寒热属性。方法 用MTT比色法考察野菊花对HeLa细胞和SGC-7901细胞增殖的影响;倒置显微镜观察野菊花对细胞形态特征的影响;台盼蓝染色法分析野菊花对HeLa细胞和SGC-7901细胞的细胞毒活性。结果 野菊花质量浓度≤20 μg/mL时对细胞生长有促进作用,使细胞密度增加、结构致密、生长旺盛,单个细胞略变大。台盼蓝染色表明野菊花对两种细胞无细胞毒活性。结论 野菊花药性温热,且对SGC-7901细胞、HeLa细胞无细胞毒活性。     

熊果酸对胃癌细胞株SGC-7901的抑制作用

目的：本文通过不同浓度的熊果酸（ursolic acid,UA）作用于人胃癌SGC-7901细胞,探讨UA对其生长的影响。方法：采用体外培养人胃癌细胞株SGC-7901,MIT法观察不同浓度UA对细胞生长的影响;用10μmoL／L,20μmoL／L,40μmoL／L和80μmoL／L不同浓度UA处理SGC-7901细胞12h后,倒置显微镜观察细胞形态变化以及MTT检测细胞的生长情况。结果：在细胞抑制实验中20～40μmoL／L UA可使SGC-7901细胞发生皱缩,40—80μmoL／LuA作用12h后,SGC-7901细胞形态明显变圆,出现不同程度的漂浮;同时MTT实验结果表明,不同浓度的UA能抑制SGC-7901细胞的生长并呈浓度依赖性。结论：UA能够抑制SGC-7901细胞的生长,具有较强的抗肿瘤活性。     

大豆异黄酮诱导人胃癌细胞株SGC-7901凋亡的研究

目的:探讨大豆异黄酮对体外培养的人胃癌细胞SGC-7901生长的抑制和诱导细胞凋亡的作用.方法:用MTT法检测药物效应,透射电镜及流式细胞仪观察大豆异黄酮处理SGC-7901细胞后细胞周期和细胞凋亡.结果:(1)MTT法证实大豆异黄酮对SGC-7901细胞生长有抑制作用,并呈剂量-效应关系.(2)流式细胞仪分析大豆异黄酮处理SGC-7901细胞后细胞滞留于G2/M期,并可见凋亡峰.(3)透射电镜可见SGC-7901细胞出现典型的凋亡细胞形态学改变.结论:大豆异黄酮对人胃癌细胞SGC-7901有抑制作用,抑制作用与诱导胃癌细胞凋亡、阻抑细胞周期进程有关,诱导胃癌细胞凋亡、阻抑细胞周期进程是大豆异黄酮抗胃癌作用的机制之一.     

猫眼草提取物对人胃癌细胞BCG-823增殖影响的实验观察

目的 观察猫眼草提取物对人胃癌细胞株BCG-823增殖的影响并探讨其可能的机制.方法 人胃癌细胞株BCG-823分别给予猫眼草提取物10.0,1.0,0.1mg/L培养48h,采用MTT法和台盼蓝染色法检测猫眼草提取物对胃癌细胞株增殖的影响.结果 MTT法测定结果显示,猫眼草提取物各浓度组对BCG-823细胞增殖均有明显抑制作用且具有良好的量效关系(P<0.05);台盼蓝法计数结果显示,给予猫眼草提取物后,活细胞数随培养时间的延长而减少,对胃癌细胞株C-823增殖的抑制具有良好的时效关系(P<0.05).结论 猫眼草提取物对人胃癌细胞株BCG-823增殖具有明显的抑制作用,其抑制作用强度随给药浓度的增加和作用时间的延长而递增.     

山竹提取物对胃癌SGC-7901细胞的体外实验研究

目的观察山竹提取物（GME）对人胃癌细胞SGC-7901增殖情况的影响,探讨其作用机制。方法采用新型四氮唑盐法（MTS）检测GME对SGC-7901细胞增殖的影响;采用流式细胞仪检测GME对SGC-7901细胞凋亡和诱导活性氧（ROS）水平的影响;采用Westernblot检测不同浓度GME对BGC-7901细胞的PTEN、Bax、Bcl-2表达的影响。结果GME显著抑制SGC-7901细胞的增殖（P＜0.05）,与阳性对照组5-氟尿嘧啶（5-FU）相比抑制率也较高（P＜0.05）,其半数抑制浓度为：7.89滋g/ml。经5、7.5滋g/ml的GME处理24h后,可有效促进SGC-7901细胞凋亡（P＜0.05）,ROS水平的累积;GME相同方式处理后,SGC-7901细胞中PTEN和Bax的蛋白表达量上调,Bcl-2蛋白表达量降低（P＜0.05）。结论GME能够显著抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖,能够诱导SGC-7901细胞ROS水平的累积,并通过影响PTEN、Bax和Bcl-2蛋白的表达,促进其凋亡。     

黄金分割法筛选丹参提取工艺参数初探

目的探讨用黄金分割法对丹参提取工艺参数进行筛选的可行性。方法以丹参酮ⅡA和丹酚酸B提取率为考察指标,用黄金分割法筛选回流提取的醇浓度和温度,用均匀设计法结合星点设计法验证,得出丹参的最佳提取工艺参数。结果丹参的最佳提取工艺为10倍量55%乙醇,90℃水浴提取,提取3次,每次1 h,丹参酮ⅡA和丹酚酸B提取率分别为73.13%、106.10%。结论将黄金分割法用于丹参提取工艺研究基本可行,可作为中药提取工艺的筛选方法之一。     

净丹参及酒炙丹参的薄层鉴别研究

目的建立净丹参及酒炙丹参的薄层质控方法。方法采用薄层层析法对净丹参、酒炙丹参进行鉴别研究。结果所用方法可鉴别净丹参及酒炙丹参的特征斑点。结论本方法操作简便、专属性强、重复性好,能有效地控制净丹参与酒炙丹参质量。     

HPLC法同时测定丹参类药材中水溶性活性成分的含量

目的建立HPLC法同时测定丹参和甘肃丹参中丹参素钠、原儿茶醛和丹酚酸B含量的方法,通过3种水溶性活性成分测定,评价野生和甘肃栽培丹参、野生和栽培甘肃丹参的质量。方法色谱柱为C18色谱柱（4．6mm×250mm,5μm）;流动相为甲醇-冰醋酸-水（20：80：1）;流速1．0ml/min。二元梯度洗脱。结果丹参素钠、原儿茶醛、丹酚酸B分别在58—1455ng、15-162ng、825-8250ng范围内线性关系良好,回收率分别为102．20％、101．53％和103．03％。结论方法简便、准确、分离效果好,可作为丹参水溶性活性3种成分的同时定量测定方法。     

丹参的超临界CO2提取工艺研究

目的筛选丹参的超临界C02提取最佳工艺条件。方法采用L9（3^4）正交试验,以丹参酮ⅡA含量为指标进行正交试验,对丹参的超临界CO2提取工艺进行考察,同时将考察结果与传统提取方法进行比较。结果丹参的超临界CO2提取最佳工艺为：取丹参药材粗粉（过20目筛）进行萃取,萃取压力为30MPa,提取时间为2h,萃取温度为40℃,解析压力为5MPa．与传统乙醇回流提取方法相比较,丹参酮ⅡA和丹酚酸B的提取率分别增加至1．25倍和1．58倍。结论运用该工艺提取效率高,稳定性较好,且有效成分提取率高于传统提取方法,适合大生产。     

接种AM真菌和喷施硒对丹参幼苗的影响

目的：研究不同施硒水平下接种AM真菌对丹参幼苗品质的影响。方法利用盆栽试验得到不同生长条件下丹参幼苗,通过测定多糖、硒、丹参酮ⅡA含量评价丹参品质。结果同一施硒水平下,接种AM真菌显著提高丹参幼苗多糖、微量元素硒的质量分数,表明AM真菌能够促进丹参对营养物质的积累,增强其对微量元素的吸收。且接种株丹参酮ⅡA质量分数均高于未接种株,当硒质量浓度为40μg/mL时接种株丹参酮ⅡA质量分数最高,为0.272%;不同施硒水平下,随硒质量浓度的增加,丹参多糖与丹参酮ⅡA 含量均先增大后减小,但接种株含量高于未接种株,在Se1（20μg/mL）~Se2（40μg/mL）时达到最高,说明高硒反而抑制药用成分的富集。由此看出适量质量浓度的硒与AM真菌具有协同作用,能够更有效地促进丹参营养和药用成分的积累。丹参中硒质量分数与施硒质量浓度呈显著正相关,但无明显线性关系,且硒的分布为茎叶＞根部。结论硒质量浓度为20~40μg/mL时AM真菌对丹参的接种效果最佳。     

不同种源丹参异地引种后质量分析

目的了解不同种源丹参在四川中江石泉引种栽培后的质量变化情况。方法采用高效液相色谱（high performance liquid chromatography, HPLC）法测定不同种源丹参引种栽培后的水溶性和脂溶性成分含量,运用SAS统计软件分析引种前后丹参有效成分含量变化情况,采用系统聚类法分析样品之间的亲疏程度。结果不同种源的丹参引种后的有效成分含量仍存在差异,山东、河南、四川中江集凤镇等产地丹参在四川中江引种后,有效成分含量依然较高,而河北、山东部分地区的丹参在引种后由引种前质量较佳变为引种后质量较次或者由较次变为较佳。结论丹参的质量受到遗传和环境饰变的双重作用,环境的饰变也是影响丹参质量的重要因素。     

紫花丹参多糖的提取工艺研究

目的确定丹参中可溶性多糖的提取工艺。方法对料液比、提取时间、乙醇浓度等进行了正交实验,对实验中各影响因素进行了统计学分析。结果结果表明乙醇浓度显著影响可溶性多糖的提取率。其次是料液比对提取率的影响。结论最佳工艺为丹参重量和水的比值1:20、提取时间4小时,乙醇浓度100%。[4]     

药用植物丹参繁育技术的研究进展

丹参（ Salvia miltiorrhiza Bge．）是临床治疗心血管系统疾病的常用中药。由于生产中长期的只种不选引起品种退化,导致药材产量和品质均有较大程度下降。为改良丹参的药材种质,提高产量和药用成分含量,确保临床用药质量,有关丹参的品种选育与繁殖技术的研究报道不断推陈出新。从良种选育、田间管理措施与组织培养技术等方面,对近年来药用植物丹参的品种培育与繁殖现状展开综述,为实现丹参的规范化种植,提高中药材产量和药用成分含量提供技术依据,对进一步推动丹参植物资源开发的现代化进程提供借鉴。     

丹参常见病虫害防治研究

目的:对丹参的病虫害情况进行研究,并对其生产中病虫害的防治提出一些有效经济的措施。方法:通过田间实验,用高效低毒农药对丹参的根结线虫病及蚜虫、棉铃虫进行各种处理。结果:通过田间试验得出,体积分数为50%辛硫磷1500倍液对丹参根结线虫病防治效果较好。体积分数为40%氧乐果1000倍液和50%西维因1000倍液对丹参蚜虫的防治效果较好,有效控制期为9 d左右;体积分数为50%辛硫磷乳油1500倍液和体积分数为50%西维因1000倍液对普遍存在的棉铃虫防治效果较好,有效期在10 d以上。结论:对于常年发生及发生规律明确的一些病害,防优于治,更能对丹参起到有效的保护作用,避免造成一些不必要的损失,还对于提高丹参品质和产量有较大的意义。