D-半乳糖对小鼠骨矿物质、羟脯氨酸含量及最大载荷的影响

目的 研究D-半乳糖致衰老过程中对骨质的影响。方法 用D-半乳糖注射BALB/c断乳雄性小鼠4个月,建立衰老模型,对青年组、模型组和正常老龄组进行股骨长度、重量、最大载荷和功、骨钙、磷、镁、锰、以及骨羟脯氨酸等指标的检测与比较。结果 模型组最大载荷和功、骨钙、镁、锰及羟脯氨酸含量均比青年组有显著降低(P<0.01),而骨磷含量比青年组有显著升高(P<0.01),这些变化与自然衰老组的变化趋势一致,并且自然衰老组改变更为明显。结论 长期大量的使用D-半乳糖可能导致骨质疏松症。     

黄芪穴位注射对D-半乳糖致衰老小鼠皮肤抗氧化酶和羟脯氨酸的影响

目的:观察足三里穴位注射黄芪对D-半乳糖致衰老小鼠皮肤抗氧化酶及羟脯氨酸含量的影响。方法:颈背部皮下注射D-半乳糖造成小鼠亚急性衰老模型,黄嘌呤氧化酶法测定皮肤超氧化物歧化酶(Super oxi de Di smut ase,SOD),消化法检测皮肤羟脯氨酸(Hydroprol i ne,HYP)含量的变化。结果:黄芪穴位注射可提高衰老小鼠皮肤SOD活性(P<0.05),增加皮肤HYP含量(P<0.05)。结论:黄芪穴位注射有预防和延缓皮肤衰老的作用。     

不同月龄小鼠骨有机质和矿物质变化的观察

目的：观察不同月龄小鼠骨有机质和矿物质的变化，探讨小鼠骨质组成成分随月龄增长而变化的规律，为用小鼠建立骨质疏松模型提供实验数据，方法：分别取1－5月龄小鼠，按不同月龄分成5组，测体重，取股骨分别测定骨干重，骨横短径，骨矿物质钙、磷、镁、锌、锰、硫及骨有机质差异脯氨酸（B－HOP），进行组间比较。结果：不同月龄小鼠骨干重，骨横短径，骨有机质的主要成分骨羟脯氨酸（HOP），骨矿物质随着月龄增加有不同程度的增长，但骨微量元素的变化不大。骨HOP及骨钙的增加与骨干重的比值密切相关，结论：不同月龄小鼠骨物理指标，骨质和矿物质指标均随月龄的增大呈不同程度的改变，骨微量元素改变不大。     

黄芪对D-半乳糖致小鼠衰老模型作用的实验研究

目的:观察黄芪对D-半乳糖致衰老小鼠超氧化物歧化酶(SOD)的活性及羟脯氨酸(HYP)含量的影响,以探讨其延缓衰老的机理。方法:将小鼠分为4组,分别为空白对照组、衰老模型组、黄芪低剂量组和黄芪高剂量组。除空白对照组外其余各组采用皮下连续注射D-半乳糖40天建立小鼠衰老模型,各用药组在造模同时给予相应记录剂量的药物,并测定皮肤组织中SOD、HYP的变化。结果:与空白对照组比较,衰老模型组皮肤组织中SOD活性降低(P<0.05),HYP含量减少(P<0.05);黄芪组皮肤组织中SOD活性明显增强(P<0.05),HYP含量增多(P<0.05)。结论:黄芪具有抗衰老作用。     

D-半乳糖联合脱氢表雄酮诱导小鼠多囊卵巢综合征模型

目的研究D-半乳糖联合脱氢表雄酮(DHEA)诱导小鼠多囊卵巢综合征(PCOS)模型的建立方法。方法 20周龄雌性ICR小鼠随机分为正常对照组、DHEA组、D-半乳糖组和D-半乳糖联合脱氢表雄酮组(D+D联合组),分别给予溶剂注射、70mg/kg DHEA颈背部皮下注射、200mg/kg D-半乳糖腹腔注射,以及D-半乳糖联合DHEA分别腹腔注射及颈背部皮下注射,每天1次,连续21d。监测小鼠饮食和体重变化;取血测定小鼠空腹血糖值;观察小鼠动情周期排卵情况以及取卵巢组织并做HE染色,观察小鼠卵巢组织结构及形态变化。结果 D+D联合组、DHEA组、D-半乳糖组与对照组相比进食量均有所降低,且D+D联合组、DHEA组显著低于对照组(P0.05)。D+D联合组、DHEA组与对照组相比体重稍有增高,而D-半乳糖组与对照组相比体重稍有降低,但均无统计学差异(P0.05)。各造模组动情周期紊乱,表现为持续动情间期或动情后期,D+D联合组的变化更为明显。D+D联合组能够明显诱发卵巢卵泡发生闭锁及囊状扩张,91.7%(11/12)小鼠可见此变化,与PCOS患者卵巢病理改变非常相似,而单纯应用D-半乳糖或DHEA所致小鼠单侧或双侧卵巢囊肿及多囊性变化不甚明显,均只有50.0%(6/12)小鼠可见此变化。结论 D-半乳糖联合DHEA可诱导小鼠PCOS模型,其效果优于非联合组。     

人参茎叶皂苷对D-半乳糖大鼠不同部位骨骼的影响

目的建立D-半乳糖大鼠骨质疏松模型,通过骨形态计量学观察人参茎叶皂苷对大鼠不同部 位的影响。方法选取3月龄雄性SD大鼠50只,随机分为正常对照组（NS)、D-半乳糖模型组 (DG)、复方司坦唑醇阳性对照组（CP)、人参茎叶皂苷低剂量组（GSLL)、人参茎叶皂苷高剂量组 (GSLH),每组10只。给药14周后处死大鼠,取胫骨上段、胫骨中段,进行骨组织形态计量学参数检 测;取左侧股骨检测骨钙、磷以及骨胶原的含量。结果高剂量的人参茎叶皂苷可使D-半乳糖大鼠 胫骨上段松质骨的骨小梁面积百分数（％ Tb. Ar)增加、骨小梁数目（Tb.N)明显增加,而骨小梁分离 度（Tb.Sp)明显减少,动态参数无明显变化,骨吸收参数明显减少;使D-半乳糖大鼠胫骨中段的皮质 骨面积百分数（％Ct. Ar)增加,骨髓腔面积百分数（％Ma. Ar)减少,骨内外膜的形成和矿化均无明显 变化;高低剂量组的股骨干湿重体重比无明显变化,低剂量的人参茎叶皂苷的骨羟脯氨酸增加。结论 人参茎叶皂苷能有效对抗D-半乳糖大鼠胫骨上段和中段骨的丢失,高剂量效果好;低剂量的人参茎 叶皂苷可以提高D-半乳糖大鼠骨有机质的相对含量。     

番茄红素对D-半乳糖诱导衰老大鼠椎间盘的影响

目的 观察D-半乳糖诱导衰老大鼠模型椎间盘等的变化及番茄红素对其影响.方法 将30只SD大鼠随机分成对照组、模型组和干预组.模型组和干预组每天颈部皮下注射D-半乳糖,对照组用等量生理盐水替代,干预组每天用番茄红素灌胃.各组每周称体重,12周后处死并取椎间盘及血清观测.结果 与对照组相比,模型组椎间盘明显退变,干预组椎间盘轻微退变;模型组体重减轻(P<0.05)、抗氧化水平下降明显(P<0.05.P<0.01).而干预组较模型组体重及抗氧化水平有所升高(P<0.05·P<0.01).结论 D-半乳糖在诱导大鼠衰老的过程中可诱发椎间盘退变.而番茄红素可延缓椎间盘退变的进展.     

D-半乳糖对大鼠骨髓间充质干细胞拟衰老作用的实验研究

目的 探讨D-半乳糖（D-galactose，D-gal）诱导SD大鼠骨髓间充质干细胞（marrow mesenchymal stemcells，MSCs）衰老后的形态学及生物学变化情况。方法取3只2月龄SD大鼠MSCs分离培养至第3代，一部分置于含8g／LD-gal的培养液中继续培养至第6代作为诱导组；另一部分在原培养液中继续培养至第6代作为对照组，并作表型鉴定。采用流式细胞仪检测对照组加入8g／LD-gal后4d内细胞周期的分布变化。两组MSCs培养7d并绘制生长曲线，在光镜和透射电镜下观察其形态和结构变化，β-半乳糖苷酶染色、单细胞凝胶电泳检测DNA损伤方法检测其衰老后的生物学行为变化。结果诱导组MSCs镜下呈典型的衰老细胞形态；对照组MSCs形态均匀，长势良好。流式细胞仪检测表明加入D-gal诱导后90％MSCs停留在G0／G1期，而S期和G2／M期MSCs趋于消失，并随诱导时间延长趋势越明显；对照组MSCs各期比例正常。MSCs生长曲线示诱导组生长速度较对照组明显减慢。诱导组约85％呈β-半乳糖苷酶阳性染色，对照组染色为阴性。单细胞凝胶电泳示诱导组MSCs DNA有拖尾现象，对照组MSCs无DNA损伤。结论 D-gal对SD大鼠MSCs的老化具有诱导作用，初步推断8g／L为最适浓度，为研究MSCs衰老提供了较好的模型。     

脂肪干细胞对D-半乳糖致裸鼠皮肤老化的拮抗作用及对皮肤恢复功能的影响

目的:本文通过研究脂肪干细胞(Adipose stem cells,ASCs)在D-半乳糖诱导裸鼠皮肤老化的拮抗作用及其对皮肤恢复功能的影响,旨在探讨抗衰老机制并为临床上抗衰老疗法提供新的思路。方法:选择SPF级裸鼠40只,随机分为4组:对照组、D-半乳糖+磷酸盐缓冲液(PBS)组、D-半乳糖+ASCs组与D-半乳糖+氨基胍(AG)组,每组10只。对D-半乳糖+PBS组,D-半乳糖+ASCs组和D-半乳糖+AG组的裸鼠的背部进行皮下注射1 000mg/kg D-半乳糖,每天1次,持续8周。2周之后,3组小鼠背部分别注射PBS缓冲液(0.5ml)、ASCs(1×10^6/ml)和AG(100mg/kg),均注射至真皮层,每天1次,4周后处死。取每组皮肤组织,采用硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA),黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD),ELISA法测定晚期糖基化终末产物(AGEs)、总胶原蛋白、Ⅰ型胶原蛋白及Ⅲ型胶原蛋白水平。通过HE染色和马松染色比较各组皮肤组织真皮层厚度及胶原分布比,采用免疫组化测定各组CD31及血管内皮生长因子(VEGF)表达情况。结果:四组裸鼠的体重与模型构建前并无显著差别。对照组裸鼠表现为充满活力,反应敏捷,并且皮肤富有弹性,粪便无明显臭味;衰老小鼠模型皮肤逐渐变弱,变薄,失去弹性,并患有便秘,且排泄物发臭;而经ASCs或AG处理的小鼠裸鼠在处理后情况有所改善。相较于对照组,D-半乳糖+PBS组裸鼠SOD、总胶原蛋白、CD31、VEGF、Ⅰ型胶原蛋白及Ⅲ型胶原蛋白水平显著降低,MDA及AGEs表达量显著增加,而通过ASCs或AG处理的裸鼠各指标水平均有所改善。HE及马松染色结果显示,相较于对照组,D-半乳糖+PBS组裸鼠真皮层相对较薄,胶原分布比明显降低,而经ASCs或AG处理的裸鼠鼠真皮层有所增厚,胶原分布比显著上升。结论:ASCs移植对D-半乳糖诱发衰老的裸鼠的自由基与糖基化水平具有良好的拮抗作用,为ASCs的移植抵抗肌肤衰老的理论提供了实验依据。     

复合藻对D-半乳糖诱导小鼠衰老模型皮肤屏障功能的改善作用

目的：评价复合藻在D-半乳糖诱导小鼠皮肤衰老动物及细胞模型中对皮肤及细胞屏障功能的影响。方法：采用昆明种小鼠(分为5组,正常对照组、模型组及复合藻低、中、高剂量组),通过给予D-半乳糖刺激建立小鼠皮肤衰老模型及小鼠原代皮肤成纤维细胞损伤模型。检测小鼠皮肤水分,皮肤组织中羟脯氨酸(Hydroxyproline,HYP)、透明质酸(Hyaluronic acid,HA)、胶原蛋白和纤连蛋白含量,评价复合藻干预后对小鼠皮肤衰老相关指标的影响;检测成纤维细胞活力、胶原蛋白mRNA及蛋白表达量,评价复合藻干预后对小鼠原代皮肤成纤维细胞损伤及细胞屏障功能的影响。结果：复合藻可以明显改善D-半乳糖刺激导致的小鼠背部皮肤水分丢失,复合藻可以明显改善皮肤中透明质酸、羟脯氨酸含量,升高胶原蛋白和纤连蛋白含量,高剂量组与模型组比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。复合藻可显著改善D-半乳糖导致的小鼠原代皮肤成纤维细胞活力降低,同时促进细胞中COL1A2和COL3A1 mRNA水平升高,高剂量组与模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论：复合藻可以通过影响衰老皮肤COL1A2和COL...     

小剂量地塞米松对生长期小鼠骨微结构及骨代谢的影响

目的 观察小剂量地塞米松对生长期小鼠骨微结构及骨代谢的影响。方法 24只4周龄雌性小鼠随机分两组（n=12）：地塞米松组（DEX,1mg/kg,肌肉注射,2次/周）,对照组。4w后处死小鼠,检测血清Ⅰ型前胶原N端肽(PINP)和骨Ⅰ型胶原交联C端肽（β-CTX）蛋白的表达水平;检测胫骨干骺端骨保护素（OPG）、核因子-κ B受体活化因子配体（RANKL）表达;抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色方法检测破骨细胞;一侧胫骨行显微CT扫描分析。结果 DEX组小鼠胫表观骨密度和骨体积分数明显高于对照组（P<0.05）,骨小梁数量高于对照组,结构模型指数低于对照组,但无统计学意义。DEX组小鼠血清PINP及β-CTX浓度显著下降（P<0.05）。DEX组小鼠胫骨干骺端OPG表达明显增多,而RANKL表达无明显变化,相对于对照组,OPG/RANKL比值升高。TRAP染色示DEX组小鼠胫骨干骺端破骨细胞数量较对照组减少。结论 小剂量地塞米松间断给药可能通过上调OPG/RANKL比率维持生长期小鼠骨量。     

自噬对骨质疏松症骨代谢的影响研究

自噬的紊乱会引起成骨和破骨平衡失调,从而导致骨质疏松。研究表明自噬在一系列退行性疾病中具有重要性,通过对成骨细胞、破骨细胞以及骨细胞的调控,对维持骨骼强度,预防骨质疏松的发生发挥着至关重要的作用。本文就自噬与骨质疏松之间的关系作一综述,对其在骨质疏松症发病过程中的作用机制进行探讨。     

The effect of pulsed electromagnetic fields on bone cell metabolism and calvaria resorption in vitro,and on calcium metabolism in the live rat

Summary The effects of three pulsed electromagnetic fields were investigated on bone cells and calvaria in culture, and on calcium metabolism in the live rat. No significant effect was seen on: 1) the proliferation of calvaria cells in culture; 2) alkaline phosphatase level, lactic acid release and collagen synthesis by confluent calvaria cells, with the exception of one pulse which produced a small increase in the latter when expressed as DNA; 3) resorption of calvaria in culture; 4) intestinal absorption, urinary excretion and net balance of calcium, bone formation and bone resorption in the live rat.on leave from Department of Pharmacology, School of Dentistry, Tokyo Medical and Dental University, Tokyo, Japan     

甲状腺机能减退对骨代谢影响的初步研究

通过对３１例原发甲减患者、３４例健康人的骨密度、尿脱氧吡啶啉、血清骨钙素、碱性磷酸酶、钙、磷的比较研究，结果显示４０岁以上女性及全部男性甲减患者的骨密度显著减低，尿脱氧吡啶啉显著升高，血清骨钙素与血清游离甲状腺素呈显著正相关，与血清灵敏促甲状腺激素呈显著负相关。由此初步认为原发甲减时骨密度减低，是骨生成不足与骨转换加快共同作用的结果。     

雌激素的来源及其在骨代谢中的作用

雌激素是一类具有广泛生物活性的类固醇激素,具有多种存在形式,其中17β-雌二醇发挥主要生理作用。绝经前的雌激素来源于由卵巢内分泌入血的循环雌激素。绝经后卵巢功能衰退,由卵巢分泌的雌激素急剧减少,而一些非性腺组织和细胞却可以旁分泌或自分泌的形式合成的雌激素,并在局部发挥作用。雌激素与骨代谢密切相关,可通过多种途径维持骨内微环境的稳态,不仅参与成骨细胞和破骨细胞的生理过程,维持成骨和破骨能力的动态平衡,还可影响骨髓间充质干细胞向成骨方向分化。此外,雌激素缺乏还与甲状旁腺素、生长激素、胰岛素样生长因子等的生物活性相关,从多种途径导致破骨水平大于成骨水平,从而诱发骨质疏松。因此,对绝经后女性骨质疏松症可采用雌激素替代疗法。然而,目前的研究对于长期使用激素带来的副作用褒贬不一,尚需进一步研究。本文对雌激素的来源及其对骨代谢平衡的影响作一综述,初步探讨雌激素的非性腺来源以及长期激素替代疗法的可行性。     

阿仑膦酸钠对甲状腺功能减患者骨密度及骨生化、代谢影响的临床研究

目的观察阿仑膦酸钠对甲状腺功能减患者骨密度及骨生化、代谢影响的影响。方法初次诊断为未绝经的甲状腺功能减退女性患者64例,按随机数字表法将其分为治疗组32例,对照组32例。对照组给予左旋甲状腺素替代治疗,治疗组在对照组治疗的基础上给予阿仑膦酸钠70 mg/周,为期12个月。测定治疗不同时间段患者,腰椎1-4(L_(1-4))、左侧股骨颈BMD及血Ca~(2+)、血P~(3+)、1,25-(OH)_2D_3、碱性磷酸酶(ALP)、血清Ⅰ型胶原羧基端吡啶并啉交联肽(ICTP)以及血清骨钙蛋白(bone gla-protein,BGP)水平的变化情况。结果治疗前两组患者的骨密度及骨生化、代谢指标比较不具有统计学意义(P0.05);治疗12个月后,治疗组患者的腰椎1-4(L_(1-4))及股骨颈BMD均显著高于治疗前及同时期对照组(P0.05);治疗后12个月后,两组患者的血ALP、ICTP及BGP均有不同程度升高,治疗组的BGP升高程度明显大于对照组;而对照组的ALP及ICTP升高程度明显大于治疗组,比较有统计学意义(P0.05)。治疗前后两组患者血Ca~(2+)、血P~(3+)、1,25-(OH)_2D_3比较无明显差异(P0.05)。结论阿仑膦酸钠可以明显提升甲状腺功能减患者骨密度,改善骨生化和代谢状态。     

雌激素对去势骨质疏松症大鼠骨密度和骨代谢影响的实验研究

目的研究雌激素对去势骨质疏松症模型大鼠骨密度(bone mineral density,BMD)和骨代谢的影响,并探讨其治疗骨质疏松症的机制。方法将48只雌性SD大鼠随机分配成对照组、模型组、雌激素组和雌激素+三苯氧胺组,每组12只。除对照组外,其他各组大鼠采用双侧卵巢摘除法制备骨质疏松症模型。雌激素组给予尼尔雌醇(1 mg/kg)灌胃,1次/周;雌激素+三苯氧胺组给予尼尔雌醇(1 mg/kg)和三苯氧胺(3 mg/kg)灌胃,1次/周;对照组和模型组分别使用等量生理盐水灌胃,均持续3个月。3个月后取材,检测大鼠左侧股骨BMD和股骨骨矿物盐含量、血清钙含量以及胫骨中骨骼钙含量;酶联免疫法检测大鼠血清碱性磷酸酶(alkaline phosphates,ALP)、血清抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(tartrate resistant acid phosphatase-5b,TRAP-5b)的含量;免疫组化检测大鼠胫骨中骨保护素(osteoprotegerin,OPG)和核因子κB受体活化因子配体(receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL)蛋白的表达情况。结果治疗前,与对照组比较其他各组血清钙含量和血清TRAP-5b含量均显著升高(P0.05),骨钙含量、BMD和骨矿物盐含量显著降低(P0.05),血清ALP含量无显著性变化(P0.05);治疗后,与模型组比较雌激素组血清钙含量、血清TRAP-5b含量以及胫骨组织RANKL蛋白表达均显著降低(P0.05),骨钙含量、血清ALP含量、BMD、骨矿物盐含量以及胫骨组织OPG蛋白表达均显著升高(P0.05),而治疗后,与模型组比较雌激素+三苯氧胺组各项指标变化差异无统计学意义(P0.05)。结论雌激素通过显著性提高去卵巢骨质疏松模型大鼠骨骼钙、ALP、股骨骨密度、骨矿物盐以及OPG的含量,抑制骨钙流失、TRAP-5b及RANKL蛋白表达,达到改善骨质疏松的作用。     

染料木素对骨代谢和脂代谢的研究新进展

染料木素是豆科植物提取的活性成分,它能明显降低恶性肿瘤发生,能够通过不同的传导途径促进成骨细胞生成,增加骨的碱性磷酸酶活性以及骨DNA和钙的含量,并抑制破骨细胞分化,达到防止骨质减少,抗骨质疏松的作用。染料木素同时可以促进血脂代谢,防止内脂质的氧化作用,软化血管,达到保护心脑血管,防止心脑血管意外的作用。随着对其作用机制研究的不断深入,必将开发出一系列相关药品,最终为人类健康造福。     

慢性间歇性缺氧对大鼠骨代谢及OPG、RANKL基因表达的影响

目的通过建立wistar大鼠慢性间歇性缺氧(chronic intermittent hypoxia,CIH)模型探讨CIH对骨代谢及骨组织骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、核因子κB受体活化因子配体(receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL)基因表达的影响。方法 20只健康wistar大鼠随机分为正常对照组及CIH组,每组10只。对照组置于空气循环舱内,CIH组于置于间歇性缺氧舱内,每日8 h,共8周。应用双能X线骨密度仪测定大鼠全身、股骨、腰椎骨密度(bone mineral density,BMD),采用ELISA法检测大鼠血清骨特异性碱性磷酸酶(bone specific alkaline phosphatase,BALP)、骨钙素(bone glaprotein,BGP)、Ⅰ型胶原N端前肽(type Ⅰ collagen N terminal peptide,PINP)、Ⅰ型胶原羧基端肽β降解产物(β-C-terminal telopeptide of type Ⅰ collagen,β-CTX)、抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)水平,应用Real-time PCR技术测定股骨OPG、RANKL mRNA相对表达量。结果与对照组相比,CIH组全身和股骨BMD下降[(0.141±0.028)vs(0.122±0.027)和(0.143±0.026)vs(0.125±0.034)]、血清BGP降低[(26.42±3.71)vs(22.05±2.16)]、血清β-CTX和TRAP升高[(132.24±26.25)vs(173.82±22.16)和(20.12±2.43)vs(23.58±2.36)]、股骨组织OPG mRNA相对表达量降低[(1.031±0.125)vs(0.924±0.141)]、RANKL mRNA相对表达量升高[(0.856±0.068)vs(1.113±0.134)],差异均具有统计学意义(P0.05)。结论慢性间歇性缺氧可使骨组织OPG mRNA表达减少、RNAKL mRNA表达增加,影响骨代谢,降低骨密度,增加了骨质疏松的发生风险。