肿瘤抑制因子PTEN蛋白在自发性高血压大鼠主动脉平滑肌中的表达

目的：研究PTEN蛋白在雄性自发性高血压大鼠及SD大鼠主动脉中的表达。方法：取18周龄和26周龄雄性自发性高血压大鼠及同龄雄性SD大鼠主动脉石蜡包埋切片，免疫组织化学观察PTEN在主动脉平滑肌细胞中的表达。结果：SD大鼠主动脉平滑肌细胞中存在PTEN阳怀免疫反应产物。自发性高血压大鼠主动脉平滑肌细胞也存在PTEN阳性免疫反应产物，但免疫反应产物的染色强度明显低于SD大鼠。结论：SD大鼠主动脉平滑肌细胞PTEN高表达，自发性高血压大鼠主动脉平滑肌细胞PTEN表达呈下降趋势。提示PTEN可能在自发性高血压大鼠主动脉平滑肌细胞重塑过程中发挥作用。     

Wistar大鼠自发性乳腺肿瘤细胞系的建立及其生物学特性

目的 从Wistar大鼠自发性乳腺肿瘤中分离出乳腺肿瘤细胞系(ZHL2006),并对其进行鉴定,为动物模型的开发、肿瘤发病机制的探讨提供有价值的线索.方法 对一例Wistar大鼠自发性乳腺腺癌瘤组织进行培养.对传代培养细胞进行细胞生长曲线测定、细胞形态结构分析、细胞染色体分析,检测广谱细胞角蛋白(PCK)表达、软琼脂集落形成实验等检测.将细胞接种于10只裸鼠,并对形成的肿瘤进行病理组织学检查,并进行分离培养.结果 ZHL2006细胞在体外生长迅速,群体倍增时间为43.6 h;倒置显微镜及Giemsa染色镜下观察细胞为多边形及梭形;透射电镜观察可见细胞表面有微绒毛,核高度不规则,核浆比例增大,核仁明显等;染色体数目和结构异常,具有癌细胞特性.广谱细胞角蛋白(PCK)染色阳性,说明其自上皮而非来自基质;同时ZHL2006细胞系在软琼脂中可形成克隆,具裸鼠致瘤性.该乳腺肿瘤细胞系经体外长期培养后已形成永生化细胞系,并具有明显的恶性细胞表型.裸鼠接种实验成功率为6/10,复制肿瘤细胞和原发肿瘤形态结构一致,细胞培养形态结构一致.结论 本研究成功的建立了大鼠乳腺肿瘤细胞系,该细胞系具有典型的恶性肿瘤特征,能应用于裸鼠并成功复制出乳腺肿瘤模型.     

Ezrin在乳腺导管乳头状肿瘤中的表达及意义

目的探讨膜细胞骨架连接蛋白Ezrin在乳腺导管乳头状肿瘤中的表达及意义。方法采用免疫组化技术检测导管内30例良性乳头状瘤,28例非典型乳头状瘤,26例乳头状癌组织标本中埃兹蛋白的表达情况。结果Ezrin蛋白在导管内良性乳头状瘤,非典型乳头状瘤和导管内乳头状癌三组间的异常表达率分别为3.3%、32.1%、53.8%,差异有显著性(P<0.05)。非典型乳头状瘤组Ezrin的异常表达率高于良性乳头状瘤组,乳头状癌组高于非典型乳头状瘤组。结论Ezrin在导管内乳头状癌组有较高的异常表达率,且表达具有高度肿瘤特异性;Ezrin蛋白的表达对乳腺良恶性上皮病变的鉴别诊断具有重要参考价值。     

大鼠卵巢发育过程中Smad4的表达

目的 了解转化生长因子-β超家族(TGF-βs)在调节卵泡发育过程中的信号转导模式,以探讨在不同发育阶段大鼠卵巢中Smad4蛋白及mRNA的表达。方法 选择不同发育时期大鼠卵巢,运用免疫组化方法检测卵巢中Smad4蛋白表达,并进行图像分析;采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测Smad4mRNA在卵巢中的表达,以GAPDH作为内对照与特异性Smad4同时进行扩增,并计算Smad4和GAPDH的RT-PCR产物积分吸光度比值来表示Smad4mRNA的含量。结果 Smad4广泛表达于卵巢组织,但主要表达在卵泡中,其表达部位和强度随卵巢的成熟度不同而变化;在卵巢发育早期,Smad4主要在原始卵泡和窦前卵泡中表达,而在间质中的表达较弱;随着卵巢的发育成熟,Smad4在间质中的表达逐渐增强,性成熟后,在窦状及成熟卵泡颗粒细胞和卵泡膜的表达与间质细胞比较无显著差异(P>0.05)。Smad4在卵泡中的表达强度也发生了变化,即随着卵泡的发育,Smad4在窦状及成熟卵泡卵母细胞的表达明显减弱,与窦前卵泡卵母细胞比较有显著差异(P<0.05,P<0.01);与窦前卵泡比较,Smad4在卵泡膜细胞的表达逐渐增强(P<0.01),而在各级卵泡颗粒细胞中的表达无显著差异(P>0.05)。RT-PCR结果显示各阶段卵巢均有mRNA的表达,从第3周起Smad4mRNA的表达明显增强,Smad4和GAPDH积分吸光度比值与出生后1 d的差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 卵巢内存在Smad4,提示TGF-β家族对卵泡发育的调节是通过Smad信号转导模式实现的。     

乳腺肿瘤C-erbB-2表达的临床病理研究

采用单克隆抗体,对一组乳腺肿瘤作了癌基因C-erbB-2表达产物的免疫组织化学研究,结果发现浸润性癌65％(65/100)、导管内癌72％(36/50)、Paget's病80％(16/20)及导管内乳头状瘤病30％(6/20)有C-erbB-2的过度表达,提示这些肿瘤有C-erbB-2基因扩增。癌基因产物主要位于细胞膜。在浸润性癌C-erbB-2的过度表达与腋窝淋巴结转移及肿瘤细胞核分裂数增多呈正相关,提示C-erbB-2的过度表达与较差的预后有一定关系。     

大鼠乳腺肿瘤线粒体细胞色素b基因突变

目的 了解大鼠乳腺癌组织、癌旁组织和正常组织的线粒体细胞色素ｂ基因变异,６方法 提取细胞总ＤＮＡ,用ＰＣＲ法扩增细胞色素ｂ基因,产物用ＤＮＡ自动测序法进行序列分析。结果 癌组织发生了ｎｔ １４９３１Ｃ→Ｇ,ｎｔ１５００４Ｃ→Ｇ和ｎｔ １５４３５ Ｔ→Ｃ３处点突变。癌旁组织发生了ｎｔ１５４３６Ａ→Ｃ突变,正常组织没有突变。结论 大鼠乳腺癌组织和癌旁组织线粒体细胞色素ｂ基因存在突变。     

nm23-H1和P53表达与乳腺肿瘤浸润转移的关系

目的：研究ｎｍ２３－Ｈ１、Ｐ＾５３蛋白在乳腺肿瘤中表达与浸关系。方法：应用免疫组织化学Ｓ－Ｐ法对８１例乳腺肿瘤组织进行检测。结果：良性肿瘤两各基因产物ｎｍ２３－Ｈ１、Ｐ＾５３的阳性率分别为１００％和９．１％,乳腺癌则分别为５２．９％和５５．７％。在７０例乳腺癌中,ｎｍ２３－Ｈ１低表达、Ｐ＾５３过表达与浸润程度和淋巴结转移有关,Ｐ＾５３过表达与ｎｍ２３－Ｈ１低表达呈负相关。结论：ｎｍ２３－Ｈ１与Ｐ＾     

Egr—1在乳腺良性病变和癌组织中的表达

目的 探讨早期生长反应基因（Ｅｇｒ－１）在乳腺良性病变和癌组织中的表达及其与乳 癌的临床理联系，方法 用免疫组织化学法７５例乳腺病变组织进行Ｅｇｒ－１检测，观察乳腺良性病变和乳腺癌的表达情况，并比较其阳性率，结果：乳腺良性病变可见相对高水平的Ｅｇｒ－１表达，而乳腺癌Ｅｇｒ－１阳性仅１９例（４２．２％），Ｅｇｒ－１表达与乳腺癌的组织学类型和淋巴结转移有关（Ｐ〈０．０５）。结论：Ｅｇｒ－１表达的减少或     

Survivin在人乳腺浸润性导管癌中的表达及意义

目的 :探讨Survivin在人乳腺浸润性导管癌中的表达及临床意义。方法 :用原位杂交、免疫组化对人乳腺浸润性导管癌未化疗组 2 8例、化疗组 17例、癌旁正常组织 15例、乳腺良性病变 2 0例检测。结果 :每指标的SurvivinmRNA与Survivin蛋白表达无显著性差异且正相关 ;Survivin在人乳腺浸润性导管癌未化疗组表达高 ,不同年龄、TNM分期、病理分级、淋巴结转移、受体类型组间有显著性差异 (P <0 .0 1) ;化疗组比未化疗组低 (P <0 .0 1) ;在癌旁正常组织中无表达 ,在乳腺良性病变中低表达。结论 :Survivin在人乳腺浸润性导管癌高表达 ,有利于其诊断及疗效的判定。     

Survivin与Smac在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其相关性研究

目的探讨凋亡抑制因子Survivin及凋亡促进因子Smac在卵巢上皮性肿瘤中的表达及临床意义,并分析二者的相关性。方法 RT-PCR法检测20例上皮性卵巢癌及20例良性卵巢上皮性肿瘤组织中Survivin及Smac基因的表达情况;免疫组化S-P法检测60例上皮性卵巢癌及60例良性卵巢上皮性肿瘤组织中Survivin及Smac蛋白的表达情况,分析其与上皮性卵巢癌患者各临床病理指标的关系及两者表达的相关性。结果上皮性卵巢癌组织中Survivin基因表达水平（70.0%）明显高于良性卵巢上皮性肿瘤组织（5%）,Survivin蛋白在上皮性卵巢癌组织中的阳性表达率为61.7%,而在良性卵巢上皮性肿瘤组织表达率6.7%,免疫组化结果与RT-PCR结果一致;Survivin蛋白在上皮性卵巢癌组织中的阳性表达率与浸润深度、分化程度及淋巴结转移均相关（P〈0.05）。RT-PCR结果显示,Smac基因在上皮性卵巢癌组织中的阳性表达率为40%（8/20）,明显低于良性卵巢上皮性肿瘤组织90%（18/20）,此结果得到免疫组化的证实,Smac蛋白在上皮性卵巢癌组织中的阳性表达率为41.7%,明显低于良性卵巢上皮性肿瘤组织93.3%,而且Smac蛋白在上皮性卵巢癌中的阳性表达率与组织分化程度、浸润深度及淋巴结转移密切相关（P〈0.05）。Survivin蛋白与Smac在上皮性卵巢癌癌组织中的表达呈明显负相关（P〈0.05）。结论抗凋亡蛋白Survivin和促凋亡蛋白Smac之间存在着相互拮抗,相互调节的关系,在卵巢上皮性肿瘤的发生发展中共同发挥作用。     

SD大鼠不同小肠段对血糖控制作用的基础研究

目的 探讨正常SD大鼠不同小肠段对血糖控制改变的影响和可能机制.方法 将20只SD大鼠按数字表随机分为A、B、C三组,其中A组6只,B组和C组各7只.测各大鼠体质量及尾部静脉血空腹血糖.手术探查小肠全长度,并将其分为三等分,用7b丝线结扎每段肠管的两端,保留正常的肠系膜血液循环.A组向近侧段小肠腔内注射葡萄糖,B组向中间段小肠腔内注射葡萄糖,C组向远侧段小肠腔内注射葡萄糖(注射量均为1 mg/kg,生理盐水稀释至1 ml).分别测定注射葡萄糖后2 min、15 min、45 min、75 min、120 min尾部静脉血血糖.结果 手术过程中有3只大鼠死亡,A组1只死于失血量过多,B组1只死于麻醉药物中毒(麻醉药物注入血管),C组1只大鼠死于空气栓塞,手术存活率为85%.三组SD大鼠空腹血糖相互比较差异均无统计学意义[(7.85±1.26) mmol/L vs (7.76 ± 2.19) mmol/L vs (7.83 ± 1.82) mmol/L, P>0.05].术后2 min B组与A组血糖比较差异均无统计学意义[(9.90±1.51) mmol/L vs (10.56±1.47) mmol/L, P>0.05];而C组[(7.78±1.56) mmol/L]明显低于A组和B组,差异均有统计学意义(P<0.05).术后15 min、45 min、75 min、120 min血糖比较,B组均低于A组,C组均低于A组和B组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 通过向不同段SD大鼠小肠注射葡萄糖的研究结果发现,近段小肠控制血糖效果最差,中间段小肠次之,远段小肠效果最好.从本实验的结果中可以看出,越是靠近末端的小肠,越是有控制血糖水平的能力.不同肠段对血糖控制的作用机制可能与胃肠道激素分泌有关,尚有待进一步的研究.     

自发性高血压大鼠心肌间质重构的实验研究

目的：观察高血压心肌间质重构。方法：采用不同月龄自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）为实验动物模型,从胶原定性和定量指标观察心肌间质重构。结果：ＳＨＲ１０与ＷＫＹ１０比较胶原面积（交原容积分数（ＣＶＦ）增高１．４倍;ＳＨＲ１８－２２量高,与ＳＨＲ１０比较ＣＡ、ＣＶＦ增高２．４倍（ＫＰ〈０．０１）。ＣＶＦ比左室重量指数（ＬＶＷ／ＢＷ）增加更明显,结论：ＳＨＲ心肌间质、冠脉血管均发生了重构,ＳＨＲ１８－２２心肌     

肝硬化并发自发性细菌性腹膜炎患者发病危险因素分析

目的探讨肝硬化并发自发性细菌性腹膜炎（SBP）的发病危险因素。方法连续收集2008年1月至2010年12月间在惠州市中心人民医院及惠州市第一人民医院住院确诊为肝硬化合并SBP的206例病例。对可能影响肝硬化患者发生SBP的危险因素进行单因素分析,将有意义的因素纳入Logistic回归模型进行多因素分析。结果MELD评分,脾脏厚度和腹水总蛋白最终进入了Logistic回归方程,OR分别为4.703、3.864、7.108。结论 MELD评分、脾脏厚度、腹水总蛋白可能为SBP发生的独立危险因素。     

血管内皮细胞生长因子对Copenhagen大鼠乳腺癌发生的影响

目的：探讨外源性血管内皮细胞生长因子（VEGF）对致癌剂N-nitroso-N-methylurea（NMU）诱导Copenhagen（COP）大鼠乳腺癌发生的影响。 方法：NMU诱导的雌性COP大鼠持续给VEGF后,观察其乳腺癌的发生情况,同时采用RT-PCR及组织病理学等方法,检测大鼠乳腺上皮细胞中VEGF mRNA表达及乳腺组织中MAST细胞的浸润状态。 结果：①COP大鼠乳腺癌的发生率在VEGF处理组与未处理组之间差异无显著性（P>0.05）。②正常青春期COP大鼠乳腺上皮细胞VEGF mRNA的表达与阳性对照组Bufllo（BUF）大鼠相比差异无显著性,但230 d后前者的表达明显低于后者（P<0.05）。③由NMU诱导的COP大鼠乳腺癌上皮细胞中无VEGF的表达,而BUF大鼠有VEGF的阳性表达,两者差异有显著性（P<0.05）。④NMU处理的COP大鼠乳腺组织的增大淋巴结中有大量MAST细胞聚集,BUF组无MAST细胞的聚集。 结论：外源性VEGF不足以增加COP大鼠乳腺癌的发生率,但内源性VEGF表达减低及免疫反应的增加（MAST细胞聚集）在COP大鼠肿瘤抵抗性方面起一定的作用。     

线粒体途径在高草酸尿大鼠肾小管上皮细胞凋亡中的作用

目的探讨线粒体途径在高草酸尿大鼠肾小管上皮细胞凋亡中的作用。方法雄性成年SD大鼠24只,随机分为4组,每组6只,设为正常组、高草酸尿组、环孢素A（CsA）对照组、CsA干预组。各组均在第4周末处死并取左肾,常规HE染色检测肾小管草酸盐结晶沉着情况;原位末端标记法（TUNEL）检测肾小管上皮细胞凋亡程度;免疫组化检测细胞色素c（CytoC）、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达。结果高草酸尿组和CsA干预组肾小管腔内可见明显晶体沉着,正常组和环孢素对照组未见晶体沉着;与其它3组比较,高草酸尿组凋亡指数显著增高、CytoC、Caspase-3和Caspase-9表达明显增强（P〈0.01）。结论线粒体途径参与了高草酸尿大鼠肾小管上皮细胞凋亡,CsA具有降低凋亡指数及抑制CytoC、Caspase-3和caspase-9蛋白表达的作用。     

乳癖安胶囊对实验性乳腺增生大鼠的作用及其机制研究

目的观察乳癖安胶囊对乳腺增生的治疗作用,并探讨其作用机制。方法采用苯甲酸雌二醇和黄体酮制备大鼠乳腺增生症模型,对大鼠乳房、乳头的直径和高度进行测量,放射免疫法测血清雌二醇(E2)、孕酮(P)浓度;组织病理学方法测乳腺小叶数、腺泡数、腺泡腔平均直径,判定乳腺增生类型并计算乳腺增生率,锥板法测血液黏度观察乳癖安胶囊对乳腺增生的治疗作用。结果乳癖安胶囊能抑制乳腺增生大鼠乳房、乳头增高、增大;调节血清E2和P浓度,改善E2/P比值;降低乳腺增生的发生率,改善病理组织变化,抑制乳腺增生程度;降低全血及血浆黏度。结论乳癖安胶囊具有良好的抗实验性大鼠乳腺增生的作用。     

Survivin在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其与Bcl-xl蛋白表达的关系

目的：研究卵巢上皮性肿瘤中Survivin、Bcl-xl基因蛋白的表达及其相关性。方法：应用免疫组化SP法检测48例恶性肿瘤组织、20例良性卵巢肿瘤、10例正常卵巢中Survivin和Bcl-xl蛋白表达情况。结果：卵巢上皮性癌组织中Survivin蛋白表达率为60．42％，显著高于良性卵巢上皮性肿瘤及正常卵巢组织的表达率20％及0（P〈0.01）；卵巢上皮性癌组织中Bcl-xl蛋白表达率为56．25％，也显著高于良性卵巢上皮性肿瘤及正常卵巢组织的表达率15％及0（P〈0.01）。Survivin蛋白表达与卵巢上皮性癌的临床分期及组织学分级有关，与病理学类型、淋巴结转移无相关性（P〉0．05）。Survivin蛋白表达与Bcl-xl蛋白的表达有显著相关（P〈0.01）。结论：Survivin基因可通过抑制癌细胞凋亡，对卵巢上皮癌的发生和发展起作用：Survivin基因可能与凋亡相关基因Bcl-xl在卵巢上皮癌的发展中起协同作用。     

bag-1及bcl-2基因产物在乳腺癌组织中的表达及意义

目的 :研究抗凋亡基因bag 1和bcl 2在乳腺癌组织中的表达及其相互关系 ,探讨肿瘤细胞增殖与凋亡的特点 .方法 :采用免疫组化SABC法观察了 10 0例乳腺癌与 10例乳腺良性肿瘤及 10例正常乳腺组织的石蜡标本切片中bag 1和bcl 2的表达 ,并进行统计研究 .结果 :bag 1在乳腺癌组织中 ,乳腺良性肿瘤中 ,正常乳腺组织中阳性表达率分别为85 .0 % ,10 .0 %和 10 .0 % ,差异明显 (P <0 .0 5 ) .但其表达与不同病理类型及临床分期无关 (P >0 .0 5 ) ;bcl 2在乳腺癌组织中 ,乳腺良性肿瘤中 ,正常乳腺组织中阳性表达率分别为 4 6.0 % ,2 0 .0 %和 2 0 .0 % ,差异明显 (P <0 .0 5 ) .其表达与不同病理类型及临床分期亦无关 (P >0 .0 5 ) .结论 :bag 1在乳腺癌组织中高表达 ,bcl 2在乳腺癌组织中低表达 ,bag 1,bcl 2在乳腺癌组织中的表达与肿瘤的临床分期 ,病理分型等无关 .因此 ,bag 1,bcl 2可以作为早期诊断乳腺癌的一种生物标记 .     

SELlL基因在胃癌组织中的表达及意义

目的 探讨sel-1样基因(SEL1L)在胃癌组织中的表达及与临床病理因素之间的关系。方法 应用免疫组织化学染色方法及原位杂交方法检测SEL1L在100例胃癌组织、20例非典型增生胃组织和30例正常胃黏膜组织中的表达。结果 SEL1L蛋白在上述组织中的阳性表达率分别为83.0%、85.0%和16.7%,胃癌组织及非典型增生组织中的表达率显著高于正常组(P<0.01);相对应的3组中SEL1L的信使核糖核酸(mRNA)的阳性表达率分别为90.0%、95.0%和10.0%,前2组的表达率显著高于正常组(P<0.01)。结论 SEL1L的过表达可能是胃癌发生的早期表现,检测胃癌中的SEL1L的表达对于评估胃癌的发生和发展具有重要意义。     

胃癌及癌旁组织中细胞周期素D1的表达

目的探讨胃癌及癌旁组织中细胞周期素D1（CyclinDl）的表达水平及其与临床病理分期的关系。方法取术后新鲜的胃癌组织及对应的癌旁组织各37份,采用实时荧光定量RT-PCR及免疫组化方法检测Cyc—linD1的表达,分析其表达差异,并结合其临床病理资料进行综合分析。结果与癌旁组织相比,CyclinDlmRNA在胃癌组织中均呈高表达（P〈0．05）,CyclinDl蛋白在癌组织也呈高表达（P〈0．05）。CyclinDlmRNA与肿瘤的分化及大小有关护〈0．05）。CyclinD1蛋白仅与肿瘤分化程度有关（P〈0．05）。结论CyclinD1可能在肿瘤的发生发展中起重要作用。