小鼠腹部心脏移植模型的显微外科技巧及并发症的预防

 目的 探讨小鼠腹部心脏移植术的手术技巧及并发症的预防和处理。 方法 雄性昆明（KM）小鼠60只，随机分供、受体2组，采用大鼠Ono术式进行小鼠腹部异位心脏移植，小鼠供体升主动脉与受体腹主动脉端侧吻合，供体肺动脉与受体下腔静脉吻合，实验30例。 结果 实验成功率86.7％(26/30)。取供心时间(9.4±1.2)min，供心修取时间(14.8±1.2)min，受体手术时间(60.4±2.4)min，其中吻合时间(29.8±2.5)min。结论 掌握小鼠心脏移植的显微外科技巧和正确的处理手术并发症，可以成功建立小鼠腹部心脏移植模型。     

大鼠异位工作型心脏移植模型的建立

目的 建立大鼠腹腔异位工作型心脏移植动物模型.方法 Wistar大鼠30只,将供心主肺动脉与左房吻合,再将供心移植到受体腹部,将升主动脉与供心腹主动脉端侧吻合,使得左心房获得前负荷,成为工作型心脏.结果 成功建立大鼠腹腔异位工作型心脏移植模型,15例成功11例,手术成功率为73%.手术平均时间为(38.8±5.7)min.移植心脏获得长期存活,在28 d后通过超声观察可见供体心脏工作正常.结论 手术的关键是提高供心的摘取技术及受体的血管吻合技术,同时术后给与供心适当的按摩辅助也非常必要.此模型可以更好的用于移植免疫学的研究.     

大鼠工作型异位心脏移植模型的建立

目的建立一种简单、稳定的大鼠工作型腹部异位心脏移植模型。方法将供体肺动脉与供体左心房吻合,供心升主动脉与受体腹主动脉行端侧吻合,受体血液经供心冠状动脉进入,在供心内循环后,由左心室排出,经供心主动脉吻合口进入受体腹主动脉。结果 20例实验成功17例。成功率85%,供心平均缺血时间为（33.2±3.7）min。失败的原因有吻合口出血,心肌保护不佳。术后1个月心脏彩超检查见供心二尖瓣口和主动脉瓣口均有血流通过。结论大鼠工作型腹部心脏移植模型更接近心脏生理,可更好地应用于实验研究;且操作简单实用,甚至可不需手术显微镜,易于推广。     

工作型大鼠异位心脏移植模型的建立

目的：建立工作型大鼠腹部异位心脏移植模型。方法：模型A，供心肺动脉与左心房端侧吻合，左心室血液经供心主动脉吻合口进入受者腹主动脉。模型B在模型A的基础上，增加受者下腔静脉与供心右心房的吻合。结果：建立A、B模型各10只，手术成功率均为90％。结论：工作型大鼠腹部心脏移植模型稳定、存活率高，工作型大鼠腹部心脏移植模型更接近心脏生理。     

近交系大鼠心脏移植模型建立的实验研究

目的：建立近交系大鼠同种异位腹腔心脏移植动物模型。方法：采用改良的ono术式建立Brown Norway到Lewis大鼠的腹部异位心脏移植,将供心升主动脉、主肺动脉分别与受体腹主动脉、下腔静脉进行端侧吻合。采用分别结扎右上腔和下腔静脉后一次性集束结扎法取心,行端侧血管吻合连续缝合法。结果：共进行了48例大鼠心脏异位移植,经过预实验16只的技术总结,正式实验32只手术成功率为96．88％,供心冷、热缺血时间和心脏复跳时间明显缩短,手术时间减少至60min。结论：加强供心的综合保护和围手术期的处理,是移植模型建立的关键因素。     

大鼠异位心脏移植模型的改进

目的 改进制作大鼠心脏移植模型的方法。方法 在陈忠华术式的基础上加以改进，用含肝素的冰生理盐水自下腔静脉直接灌注；采用腹腔异位移植方法，将供心主动脉和肺动脉分别与受者的腹主动脉和下腔静脉端侧吻合，以长哈巴狗夹代替两个弯血管夹。结果 72例大鼠心脏移植手术成功率提高到90%以上。手术时间缩短为70min。结论 采用作用所改进的方法能提高手术成功率，缩短手术时间。     

大鼠异位心脏移植模型的改进

目的 改进制作大鼠心脏移植模型的方法。方法 在陈忠华术式的基础上加以改进,用含肝素的冰生理盐水自下腔静脉直接灌注;采用腹腔异位移植方法,将供心主动脉和肺动脉分别与受者的腹主动脉和下腔静脉端侧吻合,以长哈巴狗夹代替两个弯血管夹。结果 72例大鼠心脏移植手术成功率提高到90%以上,手术时间缩短为70 min。 结论 采用作者所改进的方法能提高手术成功率,缩短手术时间。     

改良大鼠腹部心移植模型的制作

目的:总结制作大鼠腹部心脏移植模型的技巧并改良此模型的制作方法.方法:对传统Ono术式的受体准备、供心切取、供心移植等环节进行改良,建立Wistar和SD大鼠的腹部异位心脏移植模型.结果:共完成100例大鼠腹部心脏移植术,90例成功,手术成功率90%.结论:与传统0n0术式相比,此改良术式缩短供心冷缺血时问和腹主动脉阻断时间,降低吻合难度,提高手术成功率,是一种稳定、可靠的大鼠腹部心脏移植模型.     

小鼠腹部同种异体心脏移植模型的建立及改进

目的 :建立并改进小鼠腹部同种异体心脏移植模型。 方法 :在放大 2 6倍视野下用 10 0线将小鼠供体心脏的升主动脉和肺动脉分别与受体腹主动脉和下腔静脉行端侧吻合 ,术后观察移植心存活时间并做病理检查。结果 :手术成功率达 90 % ,平均取心时间和血管吻合时间分别为 (5 .9± 0 .97)min和 (38.5± 5 .5 )min ;Balb/c小鼠 昆明小鼠移植心平均存活时间为 (6 .2± 1.0 3)d ,昆明小鼠 昆明小鼠移植心存活时间超过 2 0d。 结论 :小鼠心脏移植模型与大鼠模型相比 ,技术操作难度大 ,术者需更长时间的训练 ,可作为大鼠心脏移植模型的补充 ,是利用纯系鼠进行移植研究的廉价选择     

大鼠-兔异种异位心脏移植模型的建立

目的　研究非协调性异种心脏移植 ,建立大鼠 -兔异位心脏移植模型。　方法　以 SD大鼠为供体 ,新西兰白兔为受体 ,应用袖套技术 ,将供心主动脉与受体颈总动脉、供心肺动脉与受体颈外静脉吻合。　结果　完成实验 4 8例 ,手术成功率 10 0 %。供心缺血时间 12± 5 min,吻合时间 2～ 4 min。　结论　应用袖套技术建立大鼠 -兔异位心脏移植模型 ,克服了腹腔心脏移植的局限性 ,简化了心脏移植实验技术     

小鼠左肺原位移植模型的建立

目的：通过显微外科技术建立小鼠原位肺移植模型,为肺移植研究提供动物模型。方法：采用C57BL/6小鼠作为供、受体,行同基因小鼠原位左肺移植,使用Cuff套管法进行气管及血管吻合。术后7天、14天、21天、28天取移植肺及原肺,行HE染色,评价肺移植后效果。结果：学习曲线后, 共30例小鼠移植,手术成功率89%, 小鼠成活率100%。供体手术时间：35.2?.81min,受体手术时间：24.6?.42min,冷缺血时间是：46.6?.92min,热缺血时间是：17.2?.08min。同基因移植物大体及病理无明显改变,病理显示与原肺无差别。结论：本技术能够方便快捷建立小鼠肺移植模型,成功率高,可重复性强,符合原位肺移植临床生理,是研究肺移植发病机制和治疗的良好动物模型。     

一种新型大鼠动脉移植模型的建立

目的移植物血管病(allograft vasculopathy,AV)限制着移植器官功能及远期存活,是器官移植领域最迫切需要解决的世界性难题。传统的血管缝合方式需要优秀的显微外科技术,开展困难。探索出更为简便、可行的动脉移植方法,可为临床研究AV提供思路。方法采用静脉留置针管自制血管套管,取供体大鼠胸主动脉牵拉入套管并两端翻转、结扎固定为移植体,将该移植体植入受体大鼠腹主动脉并于造模后1周、4周、8周取移植段动脉行HE染色,观测移植血管形态、测量内膜厚度。结果 40只受体大鼠中有38只健康存活达所需检测时间点,下肢及尾巴活动自如、大小便正常,且HE染色可见移植段血管内膜表现为与AV一致的同心圆样增厚。结论此种大鼠动脉移植方法简便可行,较传统血管缝合方法可明显缩短腹主动脉阻断时间、减轻受体大鼠的手术创伤、造模成功率高,可复制性强。     

云南眼镜蛇毒因子用于预致敏大鼠同种心脏移植的实验研究

目的观察纯化的云南眼镜蛇毒因子(Y-CVF)对预致敏大鼠同种心脏移植急性体液排斥反应的作用。方法BN大鼠到Lewis大鼠连续3次皮肤移植预致敏后行颈部异位心脏移植。将15对大鼠用随机数字法分成2组,实验组(n=8)于心脏移植前24h静脉给予Y-CVF80μg/kg;对照组(n=7)不用Y-CVF。观察移植心的生存时间,移植心停跳后病理学检查排斥类型,免疫组织化学染色观察移植心IgG和补体C3的沉积。结果Lewis大鼠预致敏后抗BN大鼠抗体滴度由0升高至1∶1028~1∶2056。对照组移植心存活时间为12·71h±13·94h,实验组移植心存活时间为99·50h±38·72h,与对照组比较差异有统计学意义(t=5·599,P<0·01)。病理检查结果证实,实验组均未发生急性体液排斥,仅见以大量单核淋巴细胞浸润为特征的急性细胞排斥反应。对照组则见以小血管内血栓形成为特征的急性体液排斥反应。免疫组织化学IgG染色实验组和对照组均为阳性,C3染色对照组为阳性,而实验组为阴性。结论使用Y-CVF可克服预致敏大鼠同种心脏移植急性体液排斥反应的发生。     

小鼠异位肢体复合组织移植模型的建立

目的：建立稳定的小鼠异位肢体复合组织移植模型。 方法：选用25对C57BL/6小鼠行同种同品系异位肢体复合组织移植手术。取供体小鼠后肢,于腹股沟韧带下缘起沿股动脉、股静脉向上游离,电凝切断除股静脉、股动脉外所有分枝血管至髂外动脉、髂外静脉,断髂外动脉、髂外静脉后,横断股骨、股部肌肉。将供体髂外动脉、髂外静脉分别与受体小鼠右侧颈总动脉、颈外静脉行端侧吻合。连续缝合供体皮缘于受体皮肤切缘固定肢体。于供肢胫骨远端关节处切断,结扎残端。 结果：手术成功率76%,总手术时间87.1?0.1min,供体获取时间23.8?.9min,血管吻合时间55.3?.6min。 结论：小鼠异位肢体复合组织移植成功率较高,稳定可靠,是一种新的研究移植免疫的理想的动物模型。     

EPO对同种异体心脏移植中供心保护作用的实验研究

目的 通过建立同种异体心脏移植模型来探讨促红细胞生成素(EPO)预处理供受体对供心的保护作用及其可能机制。 方法 健康雄性SD大鼠60只随机分成3组,每组20只。对照组:摘取供心前30min经尾静脉注射生理盐水0.5ml;EPO供体预处理组:供体摘取供心前30min经尾静脉注射EPO 5000U/kg,受体不处理;EPO受体预处理组:受体于移植前30min经尾静脉注射EPO 5000U/kg,供体不处理。利用4℃ HTK液保存供心16h后建立大鼠同种腹腔心脏移植模型。观察手术成功情况并评价供心功能;移植后8h和24h采血化验:CK-MB和TnT变化;移植24h后处死大鼠取供心留取组织标本检测:SOD和LPO的活性;SABC法检测组织中caspase-3蛋白表达;Tunel法评价心肌细胞凋亡。 结果 供心全部成功复跳,并存活到实验结束;EPO预处理组心功能较对照组明显改善(P<0.05);移植8h,供、受体预处理组 CK-MB、TnT均显著低于对照组(P<0.05),移植24h供体预处理组CK-MB、TnT及受体预处理组CK-MB、TnT低于对照组(P<0.05);供、受体预处理组间各指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。移植后8、24h组内比较,移植后24h两组各指标均显著低于8h(P<0.05)。心肌组织中SOD和LPO活性:供受体预处理组SOD活性明显高于对照组,LPO活性显著低于对照组(P<0.05);供、受体预处理组间比较无统计学差异(P>0.05)。EPO预处理组心肌组织中细胞凋亡指数分别为:3.36±0.36、3.48±0.22明显低于对照组3.21±0.50,差异有统计学意义(P<0.05)。EPO供体预处理组细胞凋亡指数与受体预处理组(3.36±0.36 vs 3.48±0.22)相比,差异无统计学意义(P>0.05)。供、受体预处理组caspase-3蛋白表达量均低于对照组(P<0.05),但受体预处理组caspase-3蛋白表达量高于供体预处理组(P<0.05)。 结论 EPO预处理供受体可通过减少氧自由基产生,提高氧自由基清除能力,抑制心肌细胞凋亡来发挥保护供心作用,提高移植心脏功能。     

小鼠腹部异位心脏移植模型的建立与改进

【】目的 建立并改进小鼠腹部异位心脏移植模型,为研究器官移植免疫学提供支持。方法 结合国内外文献报道的手术方法,将供者心脏的升主动脉和肺动脉分别与受者腹主动脉和下腔静脉行端侧吻合,建立小鼠异位心脏移植模型,并在传统方法的基础上对受体准备和供体心脏摘取、修整以及血管吻合技术加以改良,观察改进后的手术效果并分析其优势。结果 预实验完成50对。正式实验同系间移植完成20对,成功17对,成功率为85%。同种间移植完成15对,成功13对,成功率为86.7%。模型总成功率为85.7%。受体血管吻合前准备时间平均为11.2 ± 2.5分钟,供体心脏摘取、修整时间平均为13.6 ± 3.3分钟,供、受体血管吻合时间平均为21.7 ± 3.5分钟。改良后的心脏移植模型简化了手术操作,降低了手术难度。结论 改进的小鼠腹部异位心脏移植模型具有简便、成功率高等优势,为进一步进行移植免疫学研究奠定基础。     

实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠模型的建立及病理特征

目的建立实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)大鼠模型,观察其组织病理特征。方法 采用豚鼠全脊髓匀浆制备抗原免疫Lewis大鼠建立EAE模型。每天监测动物体质量和行为学变化。应用HE染色观察脑和脊髓炎性浸润、血管袖套等变化,罗克沙尔坚牢蓝(luxol fast blue,LFB)染色观察脊髓脱髓鞘变化,电子显微镜观察脊髓髓鞘超微结构。结果 随着病程进展,EAE模型组大鼠体质量下降明显;从第8天起出现行为学异常,神经功能损伤评分逐渐增高,于第12天达峰值。病理形态学检查显示,EAE模型组大鼠脑组织血管周围和脑实质有大量炎性细胞浸润;脊髓腰膨大脊膜出现炎性水肿,并有炎性细胞浸润;脊髓血管周围有大量炎性细胞密集环绕,呈"袖套样"改变;脊髓髓鞘大面积脱失,且髓鞘板层松散。结论 采用该模型作为急性MS的研究模型较为理想。     

负载供肾抗原的受者DC2细胞可延长肾移植大鼠的存活时间

 【目的】观察负载供肾大鼠抗原的DC2（未成熟DC）在体内特异性抑制急性排斥反应及其对移植物的功能和存活时间的影响。【方法】健康成年BN大鼠65只和Lewis大鼠80只,以BN大鼠为供者,Lewis大鼠为受者。利用受者大鼠骨髓细胞在体外诱导分化为未成熟的淋巴系DC前体细胞（DC2）,并对其进行免疫表型分析。将所获得DC2负载供肾大鼠抗原,观察DC2在体外抑制混合淋巴细胞反应（MLR）,以及在大鼠同种异体肾移植模型中特异性抑制移植排斥反应发生的情况,Kaplan-Meier生存分析研究对移植大鼠的存活时间的影响。【结果】负载供肾抗原的受者DC2对MLR具有抑制作用（P<0.05）;输注负载供肾抗原的DC2实验组的大鼠肾移植术后中位生存时间是62±6天,输注负载无关大鼠抗原和不负载抗原移植的实验组,术后中位生存时间分别是30±4天和27±5天,各实验组与对照组的血清肌酐和细胞因子IFN-γ、IL-4和IL-10的mRNA表达之间的差异具有统计学意义(P<0.05)。【结论】大鼠同系受体来源的负载供肾抗原的DC2具有体外抑制MLR的作用,体内能够预防和抑制急性排斥反应的发生,延长生存时间,提高远期存活率。