免疫抑制小鼠系统性白色念珠菌感染模型建立的研究

目的:建立免疫抑制小鼠系统性白色念珠菌感染模型,为感染性疾病的研究和治疗提供科学依据。方法:给予昆明种正常小鼠腹腔内一次性注射环磷酰胺(CY)200 mg/kg,观察其对小鼠一般状况和白细胞数的影响。继之,分别给予前述小鼠尾静脉接种1.5×105/ml(低浓度组)、1.5×106/ml(中浓度组)、1.5×107/ml(高浓度组)的白色念珠菌菌液,建立感染模型。结果:正常小鼠腹腔注射CY后,各组均出现喜静、少动、消瘦、饮食明显减少、多尿、皮毛欠光滑等现象以及白细胞数的降低。小鼠尾静脉分别接种1.5×105/ml(低浓度组)、1.5×106/ml(中浓度组)、1.5×107/ml(高浓度组)浓度的白色念珠菌菌液后,连续观察3周。低浓度组小鼠死亡率为20%,中浓度组死亡率为50%,高浓度组则全部死亡。组织真菌培养证实白色念珠菌已经侵染小鼠内脏,证明感染模型建立成功。结论:CY能够有效降低小鼠白细胞数,导致免疫力低下。在此基础上经尾静脉接种合适浓度的白色念珠菌可建立小鼠系统性白色念珠菌感染模型。     

小鼠隐孢子虫感染动物模型的建立

目的：建立稳定的隐孢子虫（CPS）感染小鼠动物模型,为其防治研究奠定基础。方法：经口灌服醋酸地塞米松（DEX）抑制BALB/C小鼠免疫功能,7d后经口灌服CSO感染小鼠。结果：使用三组不同剂量的DEX免疫抑制小鼠都能感染隐孢子虫,DEX（6mg/kg）免疫抑制组的小鼠死亡率比其它组高,DEX（4mg/kg）免疫抑制组收集的卵囊数比其它组的多。小肠组织学及超微结构变化小肠粘膜有虫体定植,肠绒毛出现病理损伤。结论：采用DEX（4mg/kg）免疫抑制小鼠后接种CSO,可以的建立较稳定CPS感染模型。     

白色念珠菌经口感染ICR小鼠建立系统性感染模型

目的 探究白色念珠菌（C.albicans）经口感染ICR小鼠建立系统性感染模型,观察C.albicans经黏膜感染后在小鼠体内组织增殖及分布规律。方法 46只ICR雄性小鼠随机分为模型组A（n=20）、模型组B（n=20）、对照组（n=6）。模型组采用棉签法口腔接种C.albicans（7×10⁶cfu/mL）,对照组同方法接种等容积生理盐水。模型组A小鼠用于临床、生存、剖检观察试验;模型组B接种后第3、5、7天随机解剖5只小鼠用于组织载菌量和病理检验（对照组每个时间点解剖2只）,活菌平板计数法检测小鼠组织载菌量,光镜观察小鼠舌、胃、肝、肾病理组织学变化。结果 模型组小鼠接种后第3天舌面出现明显白斑并随时间加重引起死亡,第5天小鼠死亡率超过50%,第7天死亡率达100%,并能从舌（87.5%）、胃（87.5%）及内脏组织肝（54.5%）、肾（50.5%）、肺（20%）和心脏（4%）中分离到C.albicans,显微镜观察在舌、食道、胃、肝、肾存在菌丝的增殖,对照组未见C.albicans生长,提示模型组小鼠因C.albicans黏膜感染引起小鼠播散性的系统性感染。结论 C.albicans可在一定条件下突破黏膜免疫屏障引起小鼠机会性系统性感染,从而加重感染死亡。     

小鼠念珠菌感染模型和遗传因素研究

白色念珠菌是能感染人类皮肤和粘膜的真菌.当宿主的免疫系统受到抑制时,可导致念珠菌病.建立动物实验模型对研究不同类型的人类念珠菌病非常必要,如系统性和皮肤粘膜的念珠菌感染模型.目前,最为常见的是系统性念珠菌动物模型.而能准确反映人类皮肤粘膜念珠菌感染的动物模型仍未稳定建立.值得庆幸的是,特异性基因剔除小鼠(Specific-gene knock out mice)的出现为研究念珠菌与宿主的免疫应答提供了更为直接和准确的模型.     

免疫抑制小鼠肺白色念珠菌病病理研究

目的:通过建立免疫抑制小鼠肺白色念珠菌病动物模型,研究肺念珠菌病病理改变,探讨念珠菌致肺部病理改变的机制。方法:从临床重症病人体内分离、鉴定、纯化白色念珠菌,并制备成2.0×109CFU/mL菌液;免疫抑制小鼠后经气道接种法、口饲给菌法、腹腔注射法、尾静脉注射法建立小鼠肺部感染白色念珠菌病模型,观察小鼠临床症状,并用颈椎脱臼法处死小鼠,解剖观察并取材,经病理切片观察肺部病变。结果:白色念球菌感染后小鼠出现异常行为,肉眼观肺脏体积增大、肺切缘呈钝角、颜色苍白、表面多个粟粒状灰白色斑点,镜下可见肺泡壁毛细血管高度扩张充血、肺泡间隔增宽、间质水肿、肺泡腔扩张、肺泡上皮增生和空泡变性、肺泡腔内充满淡红色水肿液。结论:可通过免疫抑制小鼠气道接种白色念珠菌法获取肺白色念珠菌病动物模型,用于研究肺部白色念珠菌致病理改变的机制。     

维生素C对小鼠系统性白念珠菌感染的影响

目的观察维生素C对系统性白念珠菌感染病情的影响。方法 50只ICR小鼠随机分为5组(n=10),通过尾静脉注射白念珠菌菌液建立系统性白念珠菌感染小鼠模型。维生素C通过灌胃或腹腔注射给药,剂量为50mg/kg或500mg/kg;考察小鼠生存时间;检测肾脏载菌量;制作肾脏组织病理学标本评估真菌感染程度。结果补充维生素C后,各实验组与空白组中位生存时间均为4～5d,各组间无明显差异;补充维生素C后,实验组lgCFU/g分别为8.342、8.412、7.350、7.764,与空白组lgCFU/g7.134比较,肾脏载菌量增加(P<0.05)。肾脏组织病理学结果显示受检小鼠均有肾脓肿及肾小管上皮变性(肾病)损害,损害程度没有明显差异,表明维生素C不能缓解白念珠菌感染的病情。结论补充维生素C对小鼠系统性白念珠菌感染病情没有改善作用,甚至可能导致病情恶化。     

黄连对系统性白色念珠菌病小鼠模型影响的实验研究

目的:观察黄连对系统性白色念珠菌病动物模型小鼠的抗白色念珠菌作用。方法:采用尾静脉注射白色念珠菌10231(candida albicans)的方式,建立系统性白色念珠菌病动物模型。观察系统性白色念珠菌感染小鼠模型死亡率随时间推移变化的情况,及黄连水煎液灌胃对模型小鼠生存率及肾组织白色念珠菌集落数的影响。结果:黄连高剂量灌胃组与氟康唑灌胃组生存时间均长于模型对照组,差异有统计学意义(均P相似文献   

乳酸杆菌对系统性白色念珠菌感染小鼠保护作用的实验研究

目的:探讨乳酸杆菌对系统性白色念珠菌感染的免疫抑制小鼠保护作用的机理。方法:建立系统性白色念珠菌感染小鼠模型,随机分为生理盐水对照组,低剂量、中剂量、高剂量组。造模后24h分别给予4组小鼠腹腔注射生理盐水,1×108、1×109、1×1010/ml乳酸杆菌悬液0.2ml/d×10。ELISA法检测小鼠血清IFN-γ、IL-12水平,MTT法测小鼠脾脏T淋巴细胞增殖活性,计算小鼠肾负荷真菌数。结果:中、高剂量组小鼠血清IFN-γ、IL-12水平与生理盐水对照组、低剂量组差异明显(P<0.05),中、高剂量组小鼠脾脏T淋巴细胞增殖活性与生理盐水对照组、低剂量组差异明显(P<0.05),中、高剂量组小鼠肾负荷真菌数与生理盐水对照组、低剂量组差异明显(P<0.05)。结论:乳酸杆菌可通过增强系统性白色念珠菌感染小鼠细胞免疫功能对其发挥保护作用,且保护作用与乳酸杆菌的剂量有关。     

竹叶石膏汤治疗深部念珠菌病的实验研究

[目的]观察竹叶石膏汤对小鼠深部念珠菌病的治疗作用。[方法]昆明种小鼠160只,随机分成2组,其中1组腹腔1次性注射环磷酰胺0.2mL(200mg／kg),复制免疫抑制状态小鼠模型,然后每组再分为念珠菌感染模型组、竹叶石膏汤组(中药组)、氟康唑组(西药组)和2药合用组(中西药合用组);注射环磷酰胺5 d后,各组小鼠经尾静脉接种白色念珠菌C.albicans株,3 h后中药组以竹叶石膏汤30g/kg灌胃,西药组免疫抑制状态以1 mg／kg、非免疫抑制状态以0.5mg／kg的氟康唑灌胃,中西药合用组按以上剂量合用竹叶石膏汤和氟康唑,间隔1 h给药,模型组给予等容积蒸馏水,连续7 d.观察小鼠平均生存时间及肾脏内存活菌数的变化。[结果]竹叶石膏汤能使免疫抑制状态小鼠的生存时间延长(P<0.01),肾脏内活菌数减少(P<0.05),对免疫功能正常小鼠则无显著性疗效,但与氟康唑合用比单用氟康唑疗效好,能使小鼠的存活时间延长(P<0.01),肾脏内的活菌数减少(P<0.05),即有协同氟康唑疗效的作用。[结论]竹叶石膏汤对深部念珠菌感染有一定的保护作用,尤其是免疫功能低下时效果更显著,与氟康唑合用能显著提高疗效,其作用可能与调节机体免疫功能有关。     

大蒜素对白色念珠菌感染的免疫抑制小鼠IL-4和IgG产生水平的影响

目的:探讨大蒜素对白色念珠菌感染免疫抑制小鼠体液免疫功能的影响。方法:将实验鼠随机分为预防组、治疗组和感染组。3组小鼠于实验前3 d腹腔一次性注射环磷酰胺200 mg/kg。实验时预防组小鼠灌服大蒜素7 d,其余两组灌服等量生理盐水;第8天各组小鼠尾静脉接种2×107/ml白色念珠菌菌液,同时给予预防组和治疗组分别灌服大蒜素7 d,感染组灌服等量生理盐水7 d;继之,收集3组小鼠脾细胞悬液和血清,测定其IL-4和IgG的表达。结果:与感染组相比,大蒜素可提高预防组和治疗组小鼠IL-4、IgG产生水平(P<0.01),且以预防组作用明显。结论:大蒜素可提高白色念珠菌感染模型鼠体液免疫的功能。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌系统性感染小鼠模型的制备

目的 采用临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）感染ICR小鼠,建立MRSA系统性感染小鼠模型。方法 采用连续3 d腹腔注射环磷酰胺（100 mg/kg）进行免疫抑制后,将浓度为1×10⁷ cfu/mL的MRSA菌液经尾静脉接种ICR小鼠,通过生存分析、外周血白细胞计数、组织载菌量和病理学检查对模型进行评价。结果 MRSA接种后第2天小鼠开始死亡,14 d内累积死亡率达60%;外周血白细胞总数显著升高,细菌在多个器官定植,载菌量由高到低依次是肾、关节、肺、肝和脑,肾载菌量高达10⁹ CFU/g,关节、肺、肝和脑的载菌量范围在10⁴~10⁹ CFU/g。病理观察显示肾、心脏、肺、肝、脑和关节多器官感染的组织病理学改变。结论 采用环磷酰胺免疫抑制后静脉接种MRSA的方法首次成功建立MRSA系统性感染小鼠模型,该模型可应用于MRSA发病机理及药物筛选等研究领域。     

TALEN构建Fndc5基因敲除小鼠及初步分析

目的通过构建Fndc5基因敲除小鼠,为后续的研究提供动物模型。方法运用TALEN技术在Fndc5基因FNIII domain中造成缺失突变,并通过测序进行基因型鉴定。通过配对建立稳定遗传系并在mRNA和DNA水平鉴定出生小鼠基因型;对不同年龄段出生小鼠进行体重、血糖分析;通过q PCR确定Fndc5在肾脏、肝脏、大脑、肌肉、心脏等组织中的表达情况。结果成功构建并鉴定得到4种不同的Fndc5基因敲除小鼠品系;不同年龄段出生小鼠体重、血糖未见显著性差异;确定Fndc5在肌肉、心脏等组织中高表达。结论本实验在国际上成功构建了Fndc5基因敲除小鼠,并进行了初步分析,为深入研究Fndc5基因在体内中的功能提供了动物模型。     

精子特异性Sleeping Beauty转座酶转基因小鼠模型的建立

目的建立精子特异性表达Sleeping Beauty(SB)转座酶转基因小鼠模型,为研究SB转座子在小鼠中的应用提供工具。方法克隆精子特异性启动子用以驱动SB转座酶基因的表达,建立精子特异性表达SB转座酶的载体,利用显微注射方法建立以C57BL/6J为背景的精子特异性表达SB转座酶的转基因小鼠。PCR鉴定首建鼠的基因型,western blot(WB)和免疫组织化学(IHC)检测SB转座酶基因在小鼠生殖腺睾丸中的表达情况,筛选睾丸中高表达SB转座酶的转基因小鼠。结果显微注射方式获得了5只首建小鼠,其中3只能稳定传代,利用WB和IHC成功的筛选出一株在精子中高表达SB转座酶的转基因小鼠。结论成功建立了精子特异性高表达SB转座酶转基因小鼠模型,为将SB转座子作为一种基因工程工具应用于小鼠基因修饰模型的建立提供非常重要的工具资源。     

条件性感染金黄色葡萄球菌关节炎小鼠模型的建立和分析

目的 建立与分析条件性感染金黄色葡萄球菌感染关节炎模型,为关节炎机理研究及药物开发提供动物模型。方法 先对小鼠进行环磷酰胺免疫抑制处理,再尾静脉接种金黄色葡萄球菌,通过关节表观特征观察、关节炎指数分析和病理观察评分对模型进行评价。结果 接种后第1天开始,小鼠关节部位轻微肿胀,关节组织病变由少量滑膜增生且排列疏散紊乱,发展至滑膜增厚,往关节腔内延伸生长,中性粒细胞浸润增多等病理变化。结论 成功建立条件性感染SA模型,能在较短时间内模拟人关节炎的临床症状和病程发展,且在感染和免疫机理方面体现了人关节炎发病病因。     

野生树鼩肠道蠕虫感染调查及分析

目的调查野生树鼩(Tupaia belangeri Chinensis)感染肠道蠕虫的主要种类并进行鉴定,为今后树鼩寄生虫检测提供形态学参考,为实验树鼩寄生虫控制提供依据。方法采集203只野外来源的树鼩新鲜粪便,虫卵采用常规粪便直接涂片以及孵化后显微镜观察;绦虫采用压片、固定染色,以及线虫经透明后体视镜观察,虫卵与成虫相对应鉴定。结果野生树鼩肠道蠕虫的总感染率为75.86%,主要感染种类有3种,经鉴定为长膜壳绦虫、奇口线虫和粪类圆线虫,感染率分别为27.67%,30.06%和51.52%。三种蠕虫的混合感染率为4.55%。两种线虫虫卵在树鼩粪便中多为含胚胎形态。结论野生树鼩肠道蠕虫的感染率较高。对野外引入的新种源必须隔离检疫,进行针对性的药物治疗,才能有效地控制肠道寄生虫病的传播。     

旋毛虫感染黑线仓鼠及其白化突变系细胞因子变化比较分析

目的：比较旋毛虫感染黑线仓鼠及其白化突变系后两种动物免疫状态的变化,建立适合感染寄生虫的动物模型。方法用旋毛虫感染黑线仓鼠及其白化突变系后,通过检测血细胞生理值、脾脏 IL-2蛋白浓度和脾脏 IL-6基因表达水平,分析两种动物在感染旋毛虫前后免疫应答水平及免疫调控状态的变化。结果黑线仓鼠在感染旋毛虫后免疫细胞及细胞因子的水平高于白化突变系,反应程度更加剧烈。结论黑线仓鼠是旋毛虫感染的较为适宜的模型动物。     

C57-ras转基因小鼠模型杂交1代CB6F1的生长发育特性

目的 测定自主建立的转基因致癌性模型C57-ras小鼠与BALB/c 小鼠杂交1 代的生长发育特性参数, 为该模型的商业化供应提供基础数据。方法 将雄性转基因阳性C57-ras小鼠与野生型雌性BALB/c 小鼠交配, 获得杂交1 代(CB6F1 c-Ha-ras^+/-)并测定平均产仔数、离乳率、阳性鼠生长发育情况、转基因阳性率等参数。结果 在生长发育方面, 雌鼠平均每窝产子数为8只, 离乳率为90%, 雄雌性别比符合预期。CB6F1的平均出生重为(1.73±0.05)g, 10周龄时阳性鼠平均体重雌性(24.38±1.74)g, 雄性(29.42±1.72)g。雄性鼠体重明显高于雌性, 差异存在极显著性(P<0.01);基因型检测阳性率为46.9%, 符合遗传规律。结论 转基因致癌性模型C57-ras小鼠与BALB/c 小鼠杂交1 代的生长发育特性正常, 可实现规模化商业供应。     

Prevalence of Candida co-infection in patients with pulmonary tuberculosis

Background

Candida species are emerging as a potentially pathogenic fungus in patients with broncho-pulmonary diseases. The synergistic growth promoting association of Candida and Mycobacterium tuberculosis has raised increased concern for studying the various Candida spp . and its significance in pulmonary tuberculosis patients during current years.

Aims

This study was undertaken with the objective of discovering the prevalence of co-infection caused by different Candida species in patients with pulmonary tuberculosis.

Method

A total of 75 patients with pulmonary tuberculosis diagnosed by sputum Ziehl-Neelsen staining were included in the study. Candida co-infection was confirmed using the Kahanpaa et al. criteria. Candida species were identified using gram stain morphology, germ tube formation, morphology on cornmeal agar with Tween-80, sugar fermentation tests and HiCrome Candida Agar.

Results

Candida co-infection was observed in 30 (40%) of patients with pulmonary tuberculosis. Candida albicans was the most common isolate observed in 50% of the patients with co-infection, followed by C. tropicalis (20%) and C. glabrata (20%). Candida co-infection was found in 62.5% of female patients, while it was observed in only 29.4% of the male patients (P value 0.0133). Mean ± SD age of the patients with C. glabrata infection was 65.83 ± 3.19, while the mean ± SD age of the patients with other Candida infections was 43.25 ± 20.44 (P value 0.0138).

Conclusion

Many patients with pulmonary tuberculosis have co-infection with Candida spp. The prevalence of non-albicans Candida species is increasing and may be associated with inadequate response to anti-tubercular drugs. C. glabrata infection has a strong association with old age.     

肿瘤移植裸鼠粪类圆线虫感染病原和分子诊断

目的肿瘤移植裸鼠粪类圆虫病诊断。方法肿瘤移植裸鼠的尸体解剖显微镜检查发现类圆线虫作形态学鉴定并采用二重PCR进行分子诊断。结果尸检发现肿瘤移植裸鼠样本中出现大量粪类圆线虫,初步确诊粪类圆线虫病,二重PCR检出样本中粪类圆线虫特定DNA进一步确诊。结论防止这种严重后果是早期诊断。肿瘤移植受体和供体应进行寄生虫感染包括类圆线虫病筛查。本研究第一个广泛报道了肿瘤移植裸鼠粪类圆虫病诊断。