基于OPG-RANK-RANKL系统研究饲粮不同钙水平对生长期WHBE兔骨代谢的影响

目的 利用护骨素-核因子κB受体活化子-核因子κB受体活化子配体（OPG-RANK-RANKL）系统,探讨饲粮不同钙水平对生长期WHBE兔骨代谢影响。方法 选择21只雄性断奶WHBE兔,随机分为3组（I、Ⅱ、Ⅲ组）,分别饲以钙水平为0.95%,1.10%和1.30%,其他营养水平基本一致的饲粮。实验期42 d。实验结束,测定兔血清钙（Ca）、甲状旁腺素（PTH）和骨源性碱性酶（BALP）含量;分别运用荧光定量PCR法和免疫组织化学法对WHBE兔骨组织进行OPG-RANK-RANKL的基因转录和蛋白表达分析。最后以RANKL/OPG比值为指标,评估WHBE兔骨代谢与饲粮钙水平间的相关性。结果 实验结果表明,I、Ⅱ、Ⅲ组在血清Ca、PTH含量和BALP活力上差异无显著性（P>0.05）。WHBE兔骨组织RANKL mRNA表达水平和RANKL/OPG mRNA比值均以Ⅱ组最低,与I、Ⅲ组差异有显著性（P<0.05）。钙水平对WHBE兔骨组织OPG-RANK-RANKL蛋白表达影响显著（P<0.01）,Ⅱ组和Ⅲ组OPG蛋白表达阳性指数均极显著高于I组（P<0.01）;而Ⅱ组兔骨组织RANK蛋白表达阳性指数则极显著低于I组和Ⅲ组（P<0.01）,RANKL/OPG的蛋白表达阳性指数比值以Ⅱ组最低,与I组差异有显著性（P<0.01）。此外,WHBE兔骨组织RANKL/OPG mRNA比值和的蛋白表达阳性指数比值均与饲粮钙水平间存在显著的二次曲线相关（R²=0.4068,0.8433,P<0.05,P<0.001）。结论 生长期WHBE兔的骨代谢与饲粮钙水平间呈显著相关性,当饲粮钙含量为1.10%时,生长期WHBE兔可获得较理想的骨代谢水平。     

RANK/RANKL/OPG系统与骨质疏松

目的分析RANK/RANKL/OPG系统与骨质疏松研究现状,并对两者的研究进行展望。方法从中国知网上下载"RANK/RANKL/OPG系统与骨质疏松"方面的论文,运用文献计量学和知识图谱的方法,分析RANK/RANKL/OPG系统与骨质疏松的关系的研究现状。结果 RANK/RANKL/OPG系统与骨质疏松方面的研究可归纳为"RANK/RANKL/OPG系统与骨重建"、"RANK/RANKL/OPG系统与骨质疏松"、"RANK/RANKL/OPG系统与类风湿关节炎"和其它等4个主流知识群。从知识图谱分析来看,RANK/RANKL/OPG系统与骨重建、RANK/RANKL/OPG系统与骨质疏松是研究的热点,OPG在骨吸收中起重要作用。结论 RANK/RANKL/OPG系统在阐明骨质疏松发生机制中有重要作用,OPG及其系统其他组分有可能作为以高骨吸收为特征的许多疾病的治疗药物。     

鹿角壮骨胶囊对去卵巢骨质疏松大鼠骨细微结构、骨代谢及OPG/RANK/RANKL信号通路的影响

目的:观察鹿角壮骨胶囊对去卵巢骨质疏松大鼠的细微结构、骨代谢及OPG/RANK/RANKL信号通路的影响。方法:通过卵巢切除联合糖皮质激素建立骨质疏松大鼠模型,将60只雌性大鼠随机,分为假手术组、模型组、阳性组、鹿角壮骨胶囊低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组10只。给药3月后,检测各组大鼠血清钙、血清磷、酸性磷酸酶、骨钙素的含量水平,显微镜下测定股骨骨小梁面积百分数、骨小梁厚度、骨小梁间距,免疫组化法检测股骨OPG及RANKL蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠血清钙、血清磷、酸性磷酸酶、骨钙素降低(P<0.05),股骨骨小梁面积百分数、骨小梁厚度减少(P<0.05),骨小梁间距增大(P<0.05),股骨OPG蛋白平均光密度值显著降低(P<0.05),RANKL蛋白平均光密度值明显增高(P<0.05)。而阳性组、鹿角壮骨胶囊中、高剂量组对上述指标均有明显改善(P<0.05)。结论:鹿角壮骨胶囊对去卵巢骨质疏松大鼠的改善作用可能与OPG/RANK/RANKL信号通路相关。     

核因子KB受体活化因子配体、护骨素在不同月龄雄性大鼠股骨的表达

目的研究核因子KB受体活化因子(receptor activator of NF-KB,RANK)及核因子KB受体活化因子配体(receptoractivator of NF-KB ligand,RANKL)和骨保护素(osteoprotegrin,OPG),在不同月龄雄性大鼠股骨表达的变化,探讨αD3对老龄大鼠RANK、RANKL、OPG表达的影响。方法将6周龄、6月龄、24月龄、24月龄+αD3组Wistar大鼠分为甲、乙、丙、丁4组,每组15只。其中丁组为24月龄+αD3组,按0.05μg/kg/d-1灌胃,隔天1次,每周3次。连续10周。取左侧股骨远中干骺端1/2,采用RT-PCR测RANKL、RANK及OPG的mRNA的表达。取右侧股骨做免疫组化。结果与6周组相比,6月和24月组RANKLmRNA分别增加6.2倍和7.3倍,(P<0.05),OPGmRNA值随月龄逐步增加(P>0.05)。24月龄+αD3组较24月龄组RANK降低(P<0.05)、RANKL/OPG比值亦降低(P>0.05)。免疫组化结果显示RANKL、OPG表达于软骨和成骨细胞胞浆和胞核。24月龄+αD3干预组OPG表达较24月组增强。结论股骨RANKL/OPG值随月龄增加,有利于骨的吸收和转换;αD3有促进骨形成降低骨吸收的作用,其机制可能与降低RANK、RANKL/OPG比值有关。RANKL、OPG表达于同一类型的细胞,二者共同调节骨的代谢。     

不同强度有氧健身运动对膝关节炎的改善作用机制

目的探讨不同强度有氧运动介导RANKL/RANK/OPG信号通路对老年人骨关节炎的改善作用。方法 3试验对象为老年关节炎患者30例,进行90天不同强度广场舞训练。采用骨关节炎指数评分,血清ELISA法及qRT-PCR法进行研究。结果与实验前比较,实验后A组、B组骨关节炎指数评分显著低于C组,相比A组,B组骨关节炎指数评分降低;血清SOD活性升高,NO、MDA含量下降,OPG/RANKL蛋白含量比值上升。qRTPCR显示:相比A组,B组OPG、RANK mRNA表达显著上升,RANKL mRNA表达降低(P 0.01);OPG/RANKL比值显著增高。结论提示不同运动强度广场舞运动干预能促进RANKL/RANK/OPG通路中OPG基因高表达,抑制RANKL基因表达,调节关节炎病症发展的改善过程,且中等强度效果最佳。     

补肾通督胶囊对肾虚寒凝型RA患者OPG/RANKL/RANK系统及骨代谢的影响

目的观察补肾通督胶囊对肾虚寒凝型类风湿性关节炎患者OPG/RANKL/RANK系统及骨代谢的影响。方法入选类风湿性关节炎患者随机双盲分为治疗组(36例)和对照组(35例),治疗组口服补肾通督胶囊,对照组口服雷公藤多甙片,均服药12周,于治疗前后采用DTX-200型骨密度仪检测受试者非优势侧前臂桡尺骨远端三分之一处BMD及采用酶联免疫吸附法(ELISA)观察血清OPG、RANKL、M-CSF、PINP、BGP、BAP。结果补肾通督胶囊可以使RA患者血清OPG、BGP显著升高(P0.01),RANKL、M-CSF、PINP、BAP显著降低(P0.01);与对照组相比,治疗组OPG、RANKL变化水平更为明显(P0.05)及PINP、BAP、BGP变化水平更加显著(P0.01)。在BMD方面治疗组与治疗前比较无明显差异(P0.05),对照组与治疗前相比显著降低(P0.01),但两组间比较无明显差异(P0.05)。结论补肾通督胶囊对肾虚寒凝型RA患者OPG/RANKL/RANK系统的调节及骨代谢具有良好的调节作用。     

前肢畸形WHBE兔血清钙、磷、碱性磷酸酶含量检测及骨密度分析

目的 观察前肢畸形WHBE (FMWHBE)兔前肢生理、病理特点和血清钙(Ca)、磷(P)含量等生化特性,探讨前肢畸形的可能成因及作为骨质疏松等骨生物力学研究模型的可能性.方法 分别选取1、2、3、4月龄FMWHBE兔、WHBE兔和日本大耳白(JPW)兔,每个月龄阶段各6只.检测所有实验兔血清钙(Ca)、磷(P)和碱性磷酸酶(ALP)含量;用小动物成像系统X射线成像后测量前肢肱骨、桡骨、尺骨骨密度(BMD),并经HE染色后,进行病理学检查.结果 与JPW兔比较,1、2、4月龄FMWHBE兔血清Ca含量显著降低(P＜0.05或P＜0.01),4月龄FMWHBE兔血清P含量显著升高(P＜0.05).FMWHBE兔血清ALP水平显著低于WHBE兔和JPW兔组(P＜0.05或P＜0.01);与同期正常WHBE兔比较,1～4月龄FMWHBE兔肱骨和2、3、4月龄桡骨及1、2月龄FMWHBE兔尺骨BMD均显著降低(P＜0.05或P＜0.01),与同期正常JPW兔比较,1、3月龄肱骨、桡骨和1、2月龄尺骨BMD均显著降低(P＜0.05或P＜0.01);病理学检查结果显示,与WHBE兔JPW兔比较,FMWHBE兔前肢肱骨、桡骨、尺骨骨皮质较薄,局部骨组织表面成骨细胞较少,未见整齐排列成一层,骨小管数量较少,新生骨组织较少.结论 FMWHBE兔前肢畸形可能与较低的血Ca和ALP水平导致BMD的降低以及成骨细胞减少、新生骨较少有关.     

OPG/RANK/RANKL轴与二尖瓣合并房颤患者术后窦性心律稳定性的相关性研究

目的:探讨OPG/RANK/RANKL轴与二尖瓣合并永久性房颤患者术后自动转复的窦性心律稳定性的关系及其临床意义?方法:选取135例在行单纯二尖瓣置换术后自动复律的房颤患者,根据术后7 d内房颤是否复发分为房颤(AF)组和窦性心律(SR)组?术中取右心耳组织,采用Western blot 及免疫组织化学法检测组织中OPG?RANK?RANKL的表达,用Masson三色法检测组织中间质纤维化程度?结果:AF组RANK和RANKL表达水平以及RANKL/OPG 比值均高于SR组,胶原容积分数(CVF) 在SR组显著低于AF组,RANK?RANKL表达水平以及RANKL/OPG 比值与CVF呈显著正相关?结论:OPG/RANK/RANKL轴可能参与了二尖瓣合并房颤患者术后房颤的复发,因此可作为房颤上游治疗一新靶点?     

OPG/RANKL/RANK系统参与牙槽骨吸收及重建过程作用初探

目的 初步探讨护骨素OPG、核因子κB受体活化因子配体RANKL、核因子κB活化因子RANK在牙周炎牙槽骨吸收及骨重建过程中的作用.方法 对小鼠单核巨噬细胞白血病细胞株RAW264.7实验组进行体外诱导培养,对照组为完全培养基培养;小鼠成骨样细胞株MC3T3-E1实验组采用前期实验收集的骨吸收上清处理,对照组采用完全培养基培养;以免疫荧光等方法检测细胞OPG、RANKL、RANK的表达.30只8周龄雄性SD大鼠建立实验性牙槽骨吸收模型,研究其吸收重建规律.以免疫组化S-P法检测OPG、RANKL、RANK的表达情况.结果 实验组MC3T3-E细胞经骨吸收上清处理7d后,OPG蛋白平均荧光强度为(29.636±5.652),对照组为(15.568±1.229),表达显著上调(P＜0.01);但实验组RANKL蛋白平均荧光强度为(6.806±1.738),对照组为(18.082±2.732),表达被显著抑制(P＜0.01),OPG/RANKL比值在上清处理后高于对照组(P＜0.05).采用大肠杆菌内毒素E-LPS注射法成功制备大鼠牙槽骨吸收模型.在牙槽骨吸收区域OPG水平较无骨吸收区域有所降低,RANKL的表达则相反.结论 OPG、RANKL、RANK参与了大鼠实验性骨吸收活动;破骨细胞骨吸收上清可能通过改变OPG与RANKL的比值,从而影响骨重建中骨形成与骨吸收的动态平衡.     

基于RANKL/RANK/OPG信号轴探讨骨痹通消颗粒对激素性股骨头坏死模型小鼠的治疗作用

目的 观察骨痹通消颗粒对激素性股骨头坏死模型小鼠的治疗作用,并从核因子-κB受体活化因子配体/核因子-κB受体活化因子/骨保护素（RANKL/RANK/OPG）信号轴探讨其作用机制。方法 采取腹腔注射脂多糖和臀肌注射醋酸泼尼松龙复制激素性股骨头缺血坏死（SONFH）动物模型,经核磁共振鉴定后,将模型复制成功的60只小鼠分成模型（MC）组、骨痹通消颗粒（GBTX）组及通络生骨胶囊（PC）组,每组20只,另设12只正常小鼠作为空白对照（NC）组。分别予以对应组灌胃相应药物12周后麻醉状态下取材,观察各组小鼠治疗前后的一般行为;酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组小鼠的骨碱性磷酸酶（BALP）和I型氨基端延长肽（PINP）含量;Western blotting和实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-qPCR）检测各组RANK、RANKL、OPG、磷脂酰肌醇特异性磷脂酶Cγ2（PLCγ2）、组织蛋白酶K（CTSK）、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）的蛋白和基因表达。结果 核磁共振显示,模型复制成功后的小鼠左侧髋部呈高信号状态。与NC组比较,MC组BALP、PINP水平,以及OPG蛋白和基因相对表达量均降低（P <0.05）,RANK、RANKL、PLCγ2、CTSK、TRAP蛋白和基因相对表达量均升高（P <0.05）;与MC组比较,GBTX组和PC组BALP、PINP水平,以及OPG蛋白和基因相对表达量均升高（P <0.05）,RANK、RANKL、PLCγ2、CTSK、TRAP蛋白和基因相对表达量均下降（P <0.05）;与GBTX组比较,PC组OPG、RANK、RANKL、CTSK、TRAP蛋白和基因相对表达量,以及PLCγ2蛋白相对表达量差异均无统计学意义（P >0.05）,而PC组PLCγ2基因相对表达量较GBTX组下降（P <0.05）。结论 骨痹通消颗粒可能通过上调OPG表达,抑制RANK、RANKL、PLCγ2、CTSK和TRAP表达,从而改善股骨头坏死情况。     

Lnc-AK077216基于OPG/RANKL/RANK通路对破骨细胞分化成熟的调控作用

目的 基于骨保护蛋白（OPG）/细胞核因子κB受体活化因子配体（RANKL）/细胞核因子κB受体活化因子（RANK）通路探究Lnc-AK077216对破骨细胞（OC）分化成熟的调控作用。方法 取对数生长期RAW264.7小鼠单核巨噬细胞,采用脂质体转染法将Lnc-AK077216-shRNA、Control-shRNA转染至RAW264.7细胞,分别设为转染组、空载组。另取未作处理细胞设为对照组。采用荧光显微镜观察转染率,并采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）测定转染后Lnc-AK077216 mRNA相对表达量;抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色检测诱导分化7 d后的OC数及阳性染色面积;采用qRT-PCR检测诱导分化培养3 d后各组OPG、RANKL、RANK mRNA相对表达量;采用Western blotting检测诱导分化培养3 d后各组OPG、RANKL、RANK蛋白相对表达量。结果 转染48 h后,荧光显微镜显示转染效率> 70％;转染48 h后转染组Lnc-AK077216 mRNA相对表达量低于对照组和空载组（P <0.05）;诱导分化前RAW264.7细胞多呈圆形且形态规则,诱导分化7 d后经TRAP染色,可观察到呈阳性的多核巨细胞,细胞有伪足、突起,且体积较大,表明生成OC;转染组OC数少于对照组和空载组（P <0.05）,阳性染色面积小于对照组和空载组（P <0.05）;转染组OPG mRNA和蛋白相对表达量高于对照组和空载组（P <0.05）,RANKL、RANK mRNA和蛋白相对表达量均低于对照组和空载组（P <0.05）。结论 敲低Lnc-AK077216可抑制RAW264.7细胞向OC分化,其调控机制可能与上调OPG mRNA和蛋白表达,下调RANKL、RANK mRNA和蛋白表达有关。     

Effect of High Positive Acceleration(+Gz) Environment on Dental Implant Osseointegration:A Preliminary Animal Study

Objective To observe the effect of high positive acceleration(+Gz) environment on dental implant osseointegration in a rabbit model and to investigate its mechanism.Methods Forty-eight New Zealand white rabbits were randomly divided into 6 groups. The rabbit's mandibular incisors were extracted and 1 implant was placed in each socket immediately. After 1 week of rest, the rabbits were exposed to a high +Gz environment, 3 times a week. The rabbits were sacrificed at 3 weeks(2 weeks +Gz exposure), 5 weeks(4 weeks +Gz exposure), and 12 weeks(4 weeks +Gz exposure and 7 weeks normal environment) after surgery, respectively. Specimens were harvested for micro-CT scanning, histological analysis, and real-time polymerase chain reaction examination.Results Compared with those in the control group, the mRNA expression levels of bone morphogenetic protein-2(BMP-2), osteopontin(OPN), and transforming growth factor-β1(TGF-β1)were significantly lower(P 0.05), while the mRNA expression level of receptor activator of nuclear factor κB ligand(RANKL) and the RANKL/osteoprotegerin(OPG) ratio were significantly higher(P 0.05)at 3 weeks; values of bone volume fraction, trabecular number, bone-implant contact(BIC), and TGF-β1 and OPG mRNA expression levels were significantly lower(P 0.05), and the value of trabecular separation, RANKL mRNA expression level and RANKL/OPG ratio were significantly higher(P 0.05) at 5 weeks; and the value of BIC was still significantly lower(P 0.05) at 12 weeks in the experimental group.Conclusion Early exposure to the high +Gz environment after implant surgery might have an adverse effect on osseointegration, and its mechanism could be related to the inhibition of osteoblast activity and promotion of osteoclast activity.     

卵白蛋白介导白毛黑眼兔变应性鼻炎模型树突状细胞功能的改变

目的 比较观察卵白蛋白（OVA）诱导的白毛黑眼兔（WHBE兔）和日本大耳白兔（JW兔）变应性鼻炎（allergic rhinitis,AR）模型外周血来源树突状细胞（dendritic cells,DC）的功能,揭示WHBE兔对AR敏感的可能机制。方法 以OVA诱导建立WHBE兔和JW兔AR模型,每次激发后观察动物一般体征,进行鼻黏膜HE染色,观察组织病理学改变。分离外周血DC,流式细胞仪检测外周血DC表面分子CD86的表达以及DC摄取抗原的能力,同时,采用荧光定量PCR检测外周血DC甘露糖受体（mannose receptor,MR）的mRNA表达水平。进一步以CFSE标记T细胞,流式细胞仪检测外周血DC诱导T细胞增殖能力。结果 一般体征和HE染色观察显示,WHBE兔和JW兔模型组动物均表现为典型的变应性鼻炎症状和组织病理学改变,提示模型构建成功。WHBE兔AR模型组外周血DC CD86的表达不仅极显著高于正常对照组,亦极显著高于JW兔AR模型组（P<0.01,P<0.01）。正常稳态下,WHBE兔外周血DC MR的mRNA相对表达量极显著高于JW兔（P<0.01）,经OVA诱发建立AR模型,WHBE兔外周血DC MR的mRNA表达水平显著升高（P<0.05）,且显著高于JW兔模型组（P<0.05）。并且,WHBE兔模型组外周血DC摄取OVA₆₄₇的能力极显著高于正常对照组（P<0.01）,亦极显著高于JW兔模型组（P<0.01）。结论 WHBE兔DC对变应原更敏感,可能与其高表达抗原识别受体MR,具备更强的分化成熟、摄取抗原能力有关。     

RANK/RANKL/OPG信号通路的研究进展

核因子κB受体活化因子/核因子κB受体活化因子配体/骨保护素(RANK/RANKL/OPG)信号通路是近些年来骨代谢领域的重大发现。许多激素、细胞因子、生长因子通过作用于核因子κB受体活化因子配体,骨保护素影响骨代谢,而导致骨代谢疾病如骨质疏松,溶骨性骨肿瘤及恶性肿瘤骨转移等。该文就主要RANK/RANKL/OPG信号通路的成员、信号转导及表达调控进行综述。     

运动联合阿仑膦酸钠片对去卵巢大鼠RANKL/OPG平衡及MAPK信号通路的影响

目的观察运动联合阿仑膦酸钠片(Aln)对去卵巢(OVX)大鼠核因子κB受体活化因子配体(RANKL)/骨保护素(OPG)表达及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响。方法 90只6月龄雌性SD大鼠随机分为假手术组(sham组)、OVX组、Aln治疗组(OVX+Aln组)、运动治疗组(OVX+EX组)、Aln与运动联合治疗组(OVX+Aln+EX组),每组18只,后4组大鼠切除双侧卵巢。大鼠切除卵巢8周后,各治疗组大鼠分别进行1mg/(kg·d)Aln灌胃和(或)跑台运动干预。干预12周后采用双能X线骨密度仪检测大鼠左、右股骨骨密度(BMD),ELISA法检测大鼠血清RANKL、OPG含量,real-timePCR检测大鼠骨组织RANKL、OPGmRNA表达,蛋白质印迹分析法检测骨组织c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p38MAPK(p38)、细胞外调节激酶(ERK)的磷酸化水平及c-Fos表达。结果干预治疗12周后:(1)与sham组相比,OVX组大鼠左、右股骨BMD降低(P<0.05),血清RANKL含量增加、OPG含量降低、RANKL/OPG比值增大(P均<0.05),骨组织RANKLmRNA表达增加、OPGmRNA表达减少(P均<0.05)。(2)与OVX组相比,OVX+Aln组、OVX+EX组及OVX+Aln+EX组大鼠左、右股骨BMD均增加(P均<0.05),血清RANKL含量降低、OPG含量增加、RANKL/OPG比值减小(P均<0.05),骨组织RANKLmRNA表达减少、OPGmRNA表达增加(P均<0.05)。(3)与OVX+Aln组和OVX+EX组相比,OVX+Aln+EX组大鼠左、右股骨BMD,血清RANKL、OPG含量,骨组织RANKL、OPGmRNA表达差异有统计学意义(P均<0.05)。(4)与sham组相比,OVX组大鼠骨组织p-JNK、c-Fos表达增加(P均<0.05);OVX+Aln组、OVX+EX组及OVX+Aln+EX组与OVX组相比,大鼠骨组织p-JNK、c-Fos表达降低(P均<0.05),但3组间表达差异无统计学意义;p-p38、p-ERK在各组间的表达差异无统计学意义。结论运动联合Aln治疗能够提高OVX大鼠左、右股骨骨密度,其作用可能与调节RANKL/OPG平衡、抑制JNK磷酸化及c-Fos表达有关。     

消肿方对骨关节炎兔软骨下骨成骨细胞OPG及RANKL mRNA表达的影响

目的观察消肿方对骨关节炎兔软骨下骨成骨细胞骨保护素(osteoprotegerin,OPG)及核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-kappa B ligand,RANKL)mRNA表达的影响。方法将30只新西兰大耳白兔随机分为空白对照组,模型组,消肿方低、中、高剂量组,每组6只。采用改良Hulth法复制膝关节骨关节炎模型,消肿方低、中、高剂量组分别给予40、80、160g/kg消肿方煎剂灌胃,空白对照组和模型组分别以等容积生理盐水灌胃,共28d。光镜下观察兔膝关节关节软骨下骨成骨细胞形态,采用RT-PCR法检测OPG、RANKL mRNA的表达。结果空白对照组与模型组OPG mRNA表达水平比较,差异无统计学意义(P<0.05);消肿方高、中、低剂量组OPG mRNA表达水平均较模型组显著升高(P<0.05),具有明显的剂量依赖性。模型组RANKL mRNA表达水平低于空白对照组,消肿方低、中、高剂量组RANKL mRNA表达水平较模型组逐渐降低,但差异均无统计学意义(P>0.05);消肿方高剂量组RANKL mRNA表达水平显著低于低剂量组(P<0.05)。结论消肿方可上调骨关节炎动物模型软骨下骨成骨细胞OPG mRNA表达,下调RANKL mRNA表达。     

益肾蠲痹法含药血清对大鼠成骨和破骨细胞OPG/RANKL/RANK信号通路的影响

目的 探讨益肾蠲痹法含药血清对骨代谢信号通路的影响。 方法 正常SD大鼠随机分为对照组和益肾蠲痹组,分别经生理盐水和益肾蠲痹汤灌胃给药,获取含药血清;分离大鼠成骨细胞和破骨细胞,利用碱性磷酸酶和Van kossa染色鉴定成骨细胞,TRAP和甲苯胺蓝染色鉴定破骨细胞;将成骨和破骨细胞各分为4组:对照组、益肾蠲痹法含药血清低、中和高浓度组;通过免疫印迹检测成骨细胞骨保护蛋白(OPG)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)和破骨细胞核因子κB受体活化因子(RANK)的表达。 结果 低、中、高浓度含药血清诱导成骨细胞OPG的表达分别为对照组的97%(P=0.710)、122%(P=0.005)和155%(P<0.001),RANKL表达分别为对照组的81%(P<0.001)、63%(P<0.001)和53%(P<0.001),表明OPG和RANKL表达与含药血清浓度分别呈正、负相关;含药血清使破骨细胞RANK表达分别调节对照组的75%(P<0.001)、50%(P<0.001)和46%(P<0.001),表明RANK表达与含药血清剂量呈负相关。 结论 益肾蠲痹法含药血清通过调节OPG/RANKL/RANK信号轴可能在抗骨丢失过程中发挥作用。      

桃叶珊瑚苷对去势大鼠骨质疏松的治疗作用及其机制研究

目的 探讨桃叶珊瑚苷治疗骨质疏松的作用及可能的机制,为临床治疗骨质疏松提供实验基础。方法 取48只健康雌性Wistar大鼠,随机分为桃叶珊瑚苷高剂量组（10 mg／kg）、桃叶珊瑚苷低剂量组（5 mg／kg）、模型组（等量生理盐水）、假手术组（等量生理盐水）4组,每组12只。除假手术组外,其余3组大鼠麻醉后切除双侧卵巢构建骨质疏松模型。各组大鼠连续给药8周后处死,收集血清样本,采用酶联免疫测试方法（ELISA）检测血清中碱性磷酸酶（ALP）与骨钙素（BGP）含量;取大鼠左侧股骨测定骨密度;观察胫骨组织形态改变;取大鼠右侧股骨测荧光定量PCR检测骨组织中OPG、RANK、RANKL mRNA表达。结果 ELISA结果显示,与假手术组比较,模型组ALP、BGP含量差异有统计学意义(P<0.01) ,桃叶珊瑚苷高剂量组ALP、BGP含量降低与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,高剂量组大鼠骨密度值显著升高(P<0.01),低剂量组骨密度值升高,差异有统计学意义（P<0.05）。骨组织形态发现,桃叶珊瑚苷高剂量组骨小梁结构紧密, 连续性较好,优于模型组。桃叶珊瑚苷高剂量组能提高了骨组织中OPG mRNA表达,降低了RANK mRNA的表达。结论 桃叶珊瑚苷能够促进骨形成,减缓骨丢失,其作用机制可能通过 OPG/RANKL/RANK系统发挥作用。     

Effect of Triptolide on Expression of Receptor Activator of Nuclear Factor-κB Ligand in Rat Adjuvant Induced Arthritis

Receptor activator of nuclear factor-kappaBligand(RANKL)promotes osteoclast formation,fusion,differentiation and activation.It plays akey role in osteoclast mediated bone erosion inrheumatoid arthritis(RA).Osteoprotegerin(OPG),as a soluble decoy receptor of RANKL,can prevent bone erosion in RA.Our previousstudies have shownthat Triptolide(TP),an activecompoundidentifiedin a traditional Chinese herb--Tripterygium wilfordii Hook F(TWHF),can ef-fectively inhibit bone destruction in ex…     

骨康对体外培养人成骨细胞OPG及RANKL基因表达的影响

【目的】观察中药骨康含药血清对肾阳虚型骨质疏松症患者成骨细胞细胞因子骨保护素(OPG)、核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)mRNA表达的影响。【方法】取6月龄体质量2.5～3.0 kg的新西兰大耳白兔4只,雌雄各半,随机分为2组(中药骨康组、空白对照组),每组2只;分别灌服骨康煎剂4.2 g.kg-1.d-1,以及等容积生理盐水,连续灌胃共7 d,最后1次灌胃2 h后所有动物进行心脏采血,收集血清备用。分离并传代培养肾阳虚骨质疏松症患者成骨细胞,取第2代,制成2×105/mL的细胞悬液。实验组分别加入低、中、高不同浓度(体积分数5%、10%、20%)的骨康含药血清进行干预,空白对照组仅加培养液,继续培养。48 h后采用Trizol一步法提取总RNA,然后采用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)法检测OPG、RANKL mRNA的表达。【结果】骨康低、中、高浓度组OPG mRNA表达量显著上升,与空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);骨康中浓度组与骨康低浓度组、骨康高浓度组与骨康中浓度组组间分别比较差异均有统计学意义(P<0.05);骨康含药血清以体积分数5%、10%、20%浓度递增时,RANKL mRNA的表达量显著下降,与空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05),骨康中浓度组与骨康低浓度组、骨康高浓度组与骨康低浓度组组间RANKL mRNA表达量比较差异均无统计学意义(P>0.05)。【结论】骨康可以上调肾阳虚骨质疏松症患者体外培养成骨细胞OPG mRNA的表达,下调RANKL mRNA的表达。