侵袭性纤维瘤病中CTNNB1基因突变与复发的相关性

目的分析CTNNB1基因在侵袭性纤维瘤病中的突变情况,探讨其与肿瘤复发的相关性。方法回顾性分析2010年~2019年十堰市太和医院收治的32例CTNNB1突变阳性侵袭性纤维瘤病,采用免疫组化和PCR-Sanger测序法分别检测β-catenin蛋白表达和CTNNB1基因突变状态,分析侵袭性纤维瘤病局部复发的可能因素。结果32例侵袭性纤维瘤病中女性26例,男性6例;其中12例发生于腹壁,15例发生于腹壁外,5例发生于腹腔内及肠系膜。免疫组化标记侵袭性纤维瘤病中β-catenin的阳性率为84.4%,以核表达为主,部分伴有胞质着色。不同CTNNB1基因突变类型之间β-catenin阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。不同CTNNB1基因突变位点在患者年龄、性别、肿瘤大小、发生部位之间差异均无统计学意义(P均>0.05)。32例中10例患者首次术后出现复发,单因素生存分析结果显示,CTNNB1突变位点可能与肿瘤局部复发相关(P<0.05)。结论CTNNB1基因突变是侵袭性纤维瘤病中较为常见的分子病理事件,不同肿瘤突变位点可能与局部肿瘤复发有关。     

CTNNB1基因沉默抑制结肠癌SW480细胞生长的研究

目的探讨人结肠癌SW480细胞的CTNNB1基因沉默效应和对细胞生长的抑制作用。方法构建靶向CTNNB1的shRNA载体质粒,然后转染入结肠癌SW480细胞。用RT-PCR和Western Blot方法检测CTNNB1的mRNA和蛋白的表达情况。MTT实验评价转染后各组细胞的增殖情况。结果靶向CTNNB1的shRNA能够明显下调CTNNB1mRNA和蛋白质表达(P0.05),其抑制率分别是38.29%和42.86%。MTT实验提示转染了特异性CTNNB1shRNA的CTN实验组细胞在转染后呈现随着时间延长而进行性生长抑制的现象。在转染后72h,CTN组的细胞存活率为43.7%,与空白对照组相比有显著性降低。结论靶向CTNNB1的特异性shRNA对结肠癌SW480细胞具有下调CTNNB1基因表达,并显著抑制细胞增殖的效应。     

PROP1 and CTNNB1 expression in adamantinomatous craniopharyngiomas with or without β-catenin mutations

INTRODUCTION:

Activating mutations in exon 3 of the β-catenin gene are involved in the pathogenesis of adamantinomatous craniopharyngiomas. Recently, the interaction between β-catenin and PROP1 has been shown to be responsible for pituitary cell lineage determination. We hypothesized that dysregulated PROP1 expression could also be involved in the pathogenesis of craniopharyngiomas.

OBJECTIVES:

To determine whether dysregulated gene expression was responsible for tumor pathogenesis in adamantinomatous craniopharyngiomas, the β-catenin gene was screened for mutations, and the expression of the β-catenin gene and PROP1 was evaluated.

METHODS:

The β-catenin gene was amplified and sequenced from 14 samples of adamantinomatous craniopharyngiomas. PROP1 and β-catenin gene expression was assessed by real-time RT-PCR from 12 samples, and β-catenin immunohistochemistry was performed on 11 samples.

RESULTS:

Mutations in the β-catenin gene were identified in 64% of the adamantinomatous craniopharyngiomas samples. Evidence of β-catenin gene overexpression was found in 71% of the tumors with β-catenin mutations and in 40% of the tumors without mutations, and β-catenin immunohistochemistry revealed a nuclear staining pattern for each of the analyzed samples. PROP1 expression was undetectable in all of the tumor samples.

CONCLUSION:

We found evidence of β-catenin gene overexpression in the majority of adamantinomatous craniopharyngiomas, and we also detected a nuclear β-catenin staining pattern regardless of the presence of a β-catenin gene mutation. These results suggest that WNT signaling activation plays an important role in the pathogenesis of adamantinomatous craniopharyngiomas. Additionally, this study was the first to evaluate PROP1 expression in adamantinomatous craniopharyngiomas, and the absence of PROP1 expression indicates that this gene is not involved in the pathogenesis of this tumor, at least in this cohort.     

CTNNB1/β-catenin:涎腺基底细胞肿瘤鉴别标志物

正由于涎腺基底细胞腺瘤和腺癌在形态学方面表现相似,其主要区别在于肿瘤是否浸润生长至涎腺实质和(或)涎腺外组织,因而涎腺基底细胞肿瘤的鉴别诊断存在挑战,尤其对于穿刺活检标本。CTNNB1基因位于染色体3p21,β-catenin是其编码产物蛋白。Jo等检测73例涎腺肿瘤(22例基底细胞腺瘤、3例基底细胞腺癌、20例多形性腺瘤、20例腺     

乳腺韧带样纤维瘤病CTNNB1基因突变率较低而APC基因突变率较高

正韧带样纤维瘤病(DF)是一类少见且具有局部侵袭的非转移性纤维母/肌纤维母细胞性肿瘤,有复发倾向和不可预期的临床病程,因此,新的处理标准就是观望或等待。DF的分子特征是Wnt/β-catenin旁路途径活化致CTNNB1或APC基因突变(两者互斥)。乳腺韧带样纤维瘤病(DFB)罕见,     

新的HCC血清标志物GP73在HCC中的表达及临床价值研究

目的研究新的原发性肝细胞癌（HCC）血清标志物高尔基体蛋白73（GP73）在HCC血清中的表达及临床价值。方法选取确诊为HCC者40例为HCC组;肝炎患者及肝硬化患者120例为肝病组;健康体检者120例为健康组。用双抗体夹心ELISA法检测三组血清GP73浓度;同时检测甲胎蛋白（AFP）及d．L．岩藻糖苷酶（AFU）作对比研究。结果HCC组血清中GP73的表达水平为（399．17±264．43）ng／ml,显著高于肝病组的（105．12±67．79）ng／ml和健康组的（66．51±46．2）ng／ml,差异均有统计学意义（P〈0．05）。GP73、AFP、AFU诊断HCC的敏感性分别为89．28％、62．5％和80．7％：特异性分别为87．1％、78．5％和68．7％,GP73敏感性及特异性均高于AFP和AFU。结论GP73是继AFP、AFU之后另一个新的优秀的诊断HCC血清标志物,具有重要临床价值。     

卵巢微囊性间质肿瘤中β-catenin(CTNNB1)S33C的突变

微囊性间质肿瘤(MCST)是由Irving和Young于2009年报道的一种新的卵巢肿瘤,其主要特征为明显的微囊性结构和免疫标记弥漫性表达CD10和vimentin,但该肿瘤的精确来源和遗传学改变尚未清楚。     

免疫卡控点与HCC抗肿瘤治疗

免疫卡控点是机体免疫应答的重要组成部分,参与信号传递并且维持自身免疫耐受和机体免疫稳态。随着CTLA-4阻断剂伊匹单抗被FDA批准用于黑色素瘤的临床治疗,免疫卡控点的阻断剂给肿瘤患者带来了福音。中国是肝癌高发国家,为了探究免疫卡控点的阻断剂是否可以用于肝癌患者的治疗,本文对CTLA-4、PD-1及Tim-3在HCC中的相关研究进行综述,探讨这些免疫卡控点阻断剂在HCC抗肿瘤治疗中的应用。     

趋化因子受体CXCR3在HCC中的作用

肝细胞癌(HCC)是一种由肝细胞增生和凋亡比例失调而致的多因素、多阶段的恶性肿瘤.肝细胞在细菌脂多糖或γ-IFN刺激下可分泌IP-10、Mig等趋化因子,其本身也可表达CXCR3.CXCR3是一种7次跨膜G蛋白耦联受体,3个N-糖基化位点分别结合IP-10、Mig及I-TAC,介导炎症反应及血管生成等.在很多肿瘤中均可见CXCR3异常表达,在肝细胞癌发生发展中,CXCR3对机体的免疫调节及肿瘤血管生成起重要作用.     

Pyruvate kinase,muscle isoform 2 promotes proliferation and insulin secretion of pancreatic β-cells via activating Wnt/CTNNB1 signaling

Failure of pancreatic β-cells is closely associated with type 2 diabetes mellitus (T2DM), an intractable disease affecting numerous patients. Pyruvate kinase, muscle isoform 2 (PKM2) is a potential modulator of insulin secretion in β-cells. This study aims at revealing roles and possible mechanisms of PKM2 in pancreatic β-cells. Mouse pancreatic β-cell line NIT-1 was used for high glucose treatment and PKM2 overexpression by its specific expression vector. Cell proliferation by Thiazolyl blue assay, cell apoptosis by annexin V-fluorescein isothiocyanate/prodium iodide staining and insulin secretion assay by ELISA were performed in each group. The mRNA and protein levels of related factors were analyzed by real-time quantitative PCR and western blot. Results showed that Pkm2 was inhibited under high glucose conditions compared to the untreated cells (P < 0.01). Its overexpression significantly suppressed NIT-1 cell apoptosis (P < 0.01), and induced cell proliferation (P < 0.05) and insulin secretion (P < 0.05). Related factors showed consistent mRNA expression changes. Protein levels of β-catenin (CTNNB1), insulin receptor substrate 1 (IRS1) and IRS2 were all promoted by PKM2 overexpression (P < 0.01), indicating the activated Wnt/CTNNB1 signaling. These results indicated the inductive roles of PKM2 in pancreatic β-cell NIT-1, including promoting cell proliferation and insulin secretion, and inhibiting cell apoptosis, which might be achieved via activating the Wnt/CTNNB1 signaling and downstream factors. This study offers basic information on the role and mechanism of PKM2 in pancreatic β-cells, and lays the foundation for using PKM2 as a potential therapeutic target in T2DM.     

HCC患者多肽生长因子及肿瘤标志物测定的临床意义

目的：分析血清多肽生长因子水平与肝硬化、肝癌的关系,初步探讨其发病机制。方法：采用放射免疫分析（RIA）测定32例肝癌（HCC）、34例肝硬化（LC）患者及30名正常对照组人员的血清TGF-α、TGF-β1、AFP及AFU水平四项指标。结果：HCC患者组血清TGF-α、TGF-β1、AFP及AFU水平均显著高于LC组及正常对照组（P均〈0.05）,LC组则AFP及AFU水平均显著高于正常对照组（P〈0.05）,但TGF-α、TGF-β1水平与正常对照组比较无显著性差异（P〉0.05）。结论：HCC患者血清多肽生长因子TGF-α、TGF-β1、AFP及α-L、岩藻糖苷酶（AFU）水平发生了明显的变化,提示四项指标水平的升高及过度表达与肝癌的恶性增殖生长、病情的进展关系密切。     

HCC特异性结合的scFv-AP融合蛋白的构建与表达

目的：构建与肝癌细胞特异性结合的单链抗体-AP融合蛋白，并诱导表达。方法：提取从大型人源噬菌体抗体库中筛选的含有与HCC特异性结合的scFv-10基因的质粒，用SfiⅠ、NotⅠ分别酶切，连接至经同样双酶切后的原核分泌型表达载体pDAP2上，转化和筛选后，阳性细菌经IPTG诱导表达，细胞ELISA鉴定融合蛋白活性。结果：重组质粒经PCR扩增，Eco91Ⅰ单酶切及Eco91Ⅰ／NotⅠ双酶切鉴定，证明scFv-10基因已插入到原核分泌型表达载体pDAP2上。表达产物的定位分析表明融合蛋白主要分泌性表达到周质腔，细胞ELISA证明表达产物有与HCC结合的活性。结论：成功地构建并表达了与HCC特异性结合的单链抗体．AP融合蛋白，为其应用奠定了基础。     

Fas/FasL及其信号与HBV相关的HCC的关系

本文综述了 Fas/ Fas L 及其信号蛋白分布、结构、分类和功能情况 ,简介其传导途径以及与 HBV相关的HCC的关系 ,探讨运用 Fas/ Fas L 及其信号蛋白治疗 HCC的新途径     

阿霉素诱导人肝癌细胞株HCC—9204肝癌细胞凋亡的形态学 …

应用抗癌药阿霉素成功地诱导增减人肝癌细胞株ＨＣＣ－９２０４肝癌细胞发生凋亡，用２０μｍｏｌ．Ｌ＾－１阿霉素作用肝癌细胞３ｈ，换培养液继续培养１２ｈ后，肝癌细胞ＤＮＡ结构发生断裂，电泳呈梯状。肝癌细胞形态改变出现细胞膜小泡和凋讯小体形成等凋亡细胞特征，经透射电镜和扫描电镜观察显示，在体积缩小胞膜皱缩的肝癌细胞表面产生一种球形小体，有的肝癌细胞崩解为碎片状，形态学观察结构提示，肝癌细胞产生的球形小体可     

阿霉素诱导人肝癌细胞株HCC－9204肝癌细胞凋亡的形态学观察

应用抗癌药阿霉素成功地诱导培养的人肝癌细胞株ＨＣＣ－９２０４肝癌细胞发生凋亡。用２０μｍｏｌ·Ｌ~（－１）阿霉素作用肝癌细胞３ｈ，换培养液继续培养１２ｈ后，肝癌细胞ＤＮＡ结构发生断裂，电泳呈梯状。肝癌细胞形态改变出现细胞膜小泡和凋亡小体形成等凋亡细胞特征。经透射电镜和扫描电镜观察显示，在体积缩小胞膜皱缩的肝癌细胞表面产生一种球形小体，有的肝癌细胞崩解为碎片状。形态学观察结构提示，肝癌细胞产生的球形小体可能是一种与细胞凋亡有关的功能性结构。细胞崩解可能是肝癌凋亡细胞灭亡的形式之一，可能与细胞骨架破坏有关。