酸浆醇提物对食管癌EC-1.71细胞增殖的抑制作用

目的:研究酸浆醇提物(ethanol extracts of Physalis alkekengi Linn.,EEP)对食管癌EC-1.71细胞增殖的抑制作用,探讨其可能的作用机制.方法:EEP作用于EC-1.71细胞后,采用倒置显微镜观察细胞形态的改变;采用细胞计数法观察其对细胞增殖的抑制作用;通过流式细胞仪检测法...     

夏枯草醇提物对小鼠血糖的影响

夏枯草醇提物可降低正常小鼠（０．５ｇ／ｋｇ,ｉｇ）和四氧嘧啶糖尿病模型小鼠血糖水平（０．５,０．２ｇ／ｋｇ×３ｄ,ｉｇ）。该提取物可对抗肾上腺素升高血糖作用,并具有改善糖耐量、增加肝糖元合成的作用（０．５,０．２５ｇ／ｋｇ,ｉｇ）。其机制可能与促进胰岛素分泌或增加组织对糖转化利用有关。     

中药醇提物对血液透析效果的影响

①目的　观察中药醇提物 (HD组方 )对血液透析效果的影响。②方法　选择我院终末期肾衰竭 (ES RD)病人 6 6例 ,已行维持性血液透析治疗 1年以上 ,随机分为常规组 32例 ,中药组 34例。常规组继续进行常规血液透析 ,中药组在常规透析的基础上 ,将透析液中加入HD组方 ,疗程均为 6个月。定期观察各组病人透析前、后血清尿素氮 (BUN)、肌酐 (Cr)、平均时间尿素氮浓度 (TACurea)、蛋白分解率 (PR)及G S指数 (KT/V值 )。③结果　中药组治疗后BUN、Cr水平与常规组同期比较明显降低 ,差别具有显著性 (t=2 .5 6 1、2 .4 98,P <0 .0 5 )。中药组治疗后TACurea较治疗前明显降低 ,差别具有极显著性 (t=2 .797,P <0 .0 1 ) ;而PR、KT/V值较治疗前明显升高 ,差别具有显著性 (t=2 .36 1、2 .4 98,P <0 .0 5 )。④结论　中药HD组方在透析液中的应用可提高ESRD病人透析效果及生活质量     

仙人掌醇提物的抑菌试验

采用滤纸片法，对仙人掌醇提物进行抑菌活性实验，探讨了在不同浓度、不同pH值以及样品热处理（水浴100℃、湿热灭菌121℃）后的抑菌效果。结果表明：仙人掌醇提物浓度在0．07％～0．9％范围内，对大肠杆菌、酵母菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌和青霉抑制作用最适浓度分别为0．3％、0．9％、0．5％、0．9％和0．3％，在pH=5～9范围内，最适pH分别为6、6、6、8和9，仙人掌醇提物对细菌作用的热稳定性较好，对霉菌作用的热稳定性却较差。     

杜仲叶醇提物对小鼠免疫功能的影响

用淋巴细胞转化试验、溶血分光光度测定法、吞噬试验分别研究了三种杜仲叶醇提成分对小鼠免疫功能的影响。结果提示：杜仲叶醇提物能明显增强脾细胞对ＣｏｎＡ的增殖反应明显增强腹腔巨噬细胞的吞噬功能；而对脾抗体形成细胞未见明显影响。     

白头翁醇提物的抗肿瘤作用

目的：主要探索中药白头翁抗肿瘤的有效组分，研究其醇提物的作用及安全性，方法：采用小鼠移植性肿瘤模型（Ｓ１８０肉瘤、ＨｅｐＡ肝癌、ＥＡＣ腹水癌）、碳末廓清试验及口服量大耐量试验进行观察。     

闹羊花醇提物降压作用的研究

闹羊花醇提物注射于麻醉兔耳静脉或侧脑室,以生理盐水作为对照,实验组与对照组的降压作用有明显差异。小剂量闹羊花醇提物静注不引起降压作用,但同样剂量闹羊花醇提物注入侧脑室,却产生降压效应,提示闹羊花醇提物的降压作用可能与中枢神经系统有关     

藿香醇提物与挥发油成份的比较分析

研究比较不同提取方法对藿香中有效成分提取的效果,对提取后的样品经薄层层析鉴别和GC-MS分析,定性定量了其有效成分,试验结果发现:乙醇回流提取法获得的成份较为完全.     

重楼醇提物镇痛抗炎作用研究

目的 通过不同的致痛、致炎模型观察重楼醇提物的镇痛抗炎作用.方法 以重楼醇提物大、中、小3个剂量组(1.2、2.4、4.8 g/kg),采用小鼠热板法和扭体法,观察其镇痛作用;采用耳肿法及毛细管通透性法观察药物的抗炎作用.结果 重楼醇提物对醋酸所致的扭体有明显的抑制作用,热板法显示各剂量组均能明显提高小鼠的痛阈值,其中以大、中剂量组作用较为明显.重楼醇提物对二甲苯所致的耳廓肿胀及醋酸所致的毛细管通透性增加都有明显的抑制作用.其中以大、中剂量组作用较强.结论 重楼醇提物各剂量组均有显著的镇痛抗炎作用,其中以大、中剂量组作用较强.     

利用吗啉代寡核苷酸技术下调早期斑马鱼胚胎lmna基因的初步研究

目的利用吗啉代寡核苷酸技术建立下调斑马鱼lmna基因的技术方法。方法在斑马鱼lmna基因序列中选择靶点,设计针对斑马鱼lmna基因的吗啉代寡核苷酸序列(lmna-MO),构建能特异指示lmna基因表达的lmna-EGFP-pCS~(2+)重组质粒,并通过显微注射方式将二者共注射入斑马鱼胚胎中,通过观察胚胎中绿色荧光表达量反应lmna基因表达量,并通过蛋白质印迹法检测胚胎中lamin蛋白表达量。结果蛋白质印迹法检测斑马鱼体内lamin蛋白的表达,分别有大小为69 KD和62 KD两种蛋白表达。设计并构建了lmna-MO和重组质粒lmnaEGFP-pCS~(2+),单独注射lmna-EGFP-pCS~(2+)质粒后观察到从6 hpf到96 hpf胚胎均有绿色荧光蛋白表达;二者共注射后观察到,与对照组相比,实验组从6 hpf至30 hpf胚胎中绿色荧光蛋白表达量均不同程度下降或消失;蛋白质印迹实验结果显示实验组胚胎内lamin蛋白表达量明显下降。表明已成功下调了斑马鱼胚胎lmna基因表达。结论可通过lmna-MO和重组质粒lmna-EGFP-pCS~(2+)共注射方法下调斑马鱼lmna基因表达,并通过绿色荧光蛋白表达量反映下调效果。该方法可为深入研究人核纤层病提供良好的动物模型。     

斑马鱼sat1.a突变体的鉴定

目的 在我们的前期研究工作中，通过Tol2转座子介导的插入突变，筛选到了一批组织特异性表达绿色荧光蛋白GFP的斑马鱼品系。其中一个品系Tol2：20141221t的GFP在神经系统中表达，但还没有鉴定到Tol2转座子插入到基因组什么位置，造成了哪个基因的突变。本文的主要研究目标就是对这一由Tol2转座子插入诱导的斑马鱼突变品系进行鉴定。方法 使用交错式热不对称PCR（thermal asymmetric interlaced PCR，TAIL-PCR）鉴定Tol2转座子插入的基因组位置；利用原位杂交检测被突变的基因的时空表达是否与该品系GFP表达具有一致性；筛选鉴定纯合体突变体，并进一步分析该基因突变造成的发育缺陷。结果 在该品系中，Tol2转座子插入到了亚精胺/精胺N1-乙酰基转移酶1a（spermidine/spermine N1-acetyltransferase 1a，sat1.a）的第八个内含子区域，致使sat1.a基因转录提前终止。我们筛选到了sat1.a纯合突变体，但是没有检测到明显的发育缺陷。结论 筛选鉴定的Tol2转座子介导的斑马鱼sat1.a突变体没有明显的发育缺陷，但可以作为研究神经系统发育的有力工具。     

g6pd基因在野生型斑马鱼胚胎发育过程中的表达

目的: 观察g6pd基因在野生型斑马鱼胚胎早期发育过程中的表达情况。方法: 利用基因数据库和BLAST软件分别进行g6pd基因的共线性分析和G6pd蛋白质序列相似性分析。原位杂交技术观察不同时相斑马鱼胚胎中g6pd基因的表达;构建g6pd-EGFP-pCS²⁺重组质粒,并将其显微注射入斑马鱼胚胎内,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达;蛋白质印迹法检测24、48、72 hpf斑马鱼胚胎中G6pd蛋白的表达量;改良G6pd定量比值法检测24、48、72 hpf斑马鱼胚胎中G6pd酶活性。结果: g6pd基因在进化过程中相对保守,斑马鱼与人类的G6pd蛋白质相似度为88%,斑马鱼与小鼠的G6pd蛋白质相似度为87%。原位杂交试验结果显示,g6pd基因主要表达于斑马鱼的造血组织,显微注射g6pd-EGFP-pCS²⁺重组质粒后观察的结果与原位杂交试验结果一致。24、48、72 hpf斑马鱼胚胎中G6pd蛋白相对表达量分别为1.44±0.03、1.47±0.05、1.54±0.02,差异无统计学意义（P > 0.05）;G6pd酶活性分别为1.74±0.17、1.75±0.12、1.71±0.22,差异无统计学意义（P > 0.05）。结论: 成功观察到斑马鱼体内g6pd基因表达部位及其变化规律,并测定了不同发育时相斑马鱼胚胎中G6pd蛋白表达和酶活性,为建立斑马鱼G6PD缺乏症模型奠定了基础。     

毛萼香茶菜醇提物对干酵母致热大鼠解热机制研究

为探究毛萼香茶菜醇提物的解热药效及作用机制,采用背部皮下注射干酵母构建SD大鼠发热模型。实验分为空白组、模型组、阳性药扑热息痛组(150 mg/kg)、毛萼香茶菜醇提物低高剂量组(200 mg/kg、800 mg/kg)、迷迭香酸组(150 mg/kg)、蓟黄素组(150 mg/kg)、毛萼晶D组(150 mg/kg)。动物造模4 h后给药治疗,造模8 h后眼眶采血和组织取材。通过测定造模后各组大鼠肛温的变化考察药效,检测血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)和精氨酸加压素(AVP)、下丘脑前列腺素E2(PGE2)和环磷酸腺苷(cAMP)和脑腹中隔区精氨酸加压素(AVP)的含量初步探究作用机制。结果显示,总提取物能够显著抑制大鼠肛温的上升,降低血清中TNF-α含量,升高AVP含量,并降低下丘脑中PGE2、cAMP及脑腹中隔区AVP的含量。但迷迭香酸、蓟黄素和毛萼晶D对发热大鼠肛温的上升抑制不明显,且不影响发热大鼠上述生化指标的变化。上述研究结果表明,毛萼香茶菜醇提物具有良好的解热作用,其机制可能与抑制内生致热源TNF-α、中枢体温正调节介质cAMP和PGE2的分泌,以及促进中枢体温负调节介质AVP的分泌有关,但作用物质基础还有待进一步研究。     

5种马鞭草科药用植物的抗补体活性

采用细胞溶血法考察了千解草(Pygmaeopremna herbacea)、白花灯笼(Clerodendrum fortunatum L.)、尖尾枫[Callicarpa longissima(Hemsl.)Merr.]、赪桐[Clerodendrum japonicum(Thunb.)Sweet]及臭茉莉(Clerodendrum philippinum Schauer var.simplex Moldenke)等5种马鞭草科药用植物提取物经典途径和旁路途径的抗补体活性。结果表明:千解草水提取物、白花灯笼水提取物和醇提取物、尖尾枫水提取物和醇提取物、赪桐醇提取物及臭茉莉醇提取物有较强的经典途径抗补体活性,对经典途径的抗补体活性(CH50)分别为0.092±0.008,0.074±0.008,0.088±0.006,0.134±0.017,0.123±0.010,0.380±0.080及0.200±0.015 g/L;仅千解草和尖尾枫水提取物及白花灯笼醇提取物具有旁路途径抗补体活性,对旁路途径的抗补体活性(AP50)分别为0.533±0.033,0.758±0.031和0.362±0.029 g/L。因此,5种植物均具有不同程度的抗补体活性,其中白花灯笼醇提取物抗补体活性最强。     

参莲提取物对动脉粥样硬化家兔血管病理形态和脂质代谢的影响

目的 观察参莲提取物（由丹参和穿心莲组成）对动脉粥样硬化（artherosclerosis, AS）的影响。方法 以球囊导管内皮损伤术和高脂饵食法建立家兔AS模型,通过胸主动脉油红O大体染色、股动脉HE染色、平滑肌细胞计数等方法观察参莲提取物对AS斑块形成过程中血管病理形态和脂质代谢的影响。结果 辛伐他汀和参莲提取物各剂量均可显著减少AS模型家兔斑块形成面积,降低最大内膜厚度值（MIT）和中膜层平滑肌细胞数;参莲提取物1.12、4.48 g/kg剂量组家兔股动脉MIT值明显低于模型组。辛伐他汀和参莲提取物各剂量组可明显降低AS模型家兔血清总胆固醇（TC）;参莲提取物2.24、4.48 g/kg剂量组血清三酰甘油（TG）水平明显低于模型组。辛伐他汀可显著提高AS模型家兔高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）,参莲提取物无明显作用。辛伐他汀及参莲提取物各剂量组均可明显降低AS模型家兔低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）,与模型组比较具有显著差异（P＜0.01、0.05）。结论 参莲提取物对AS斑块形成具有显著的预防和治疗作用,其作用与改善脂质代谢有关。     

液质联用技术鉴定预知子提取物中的主要化学成分

目的 建立分析鉴定预知子提取物中的主要化学成分的方法。方法 采用LC-ESI-MS负离子检测模式对预知子中的皂苷类成分进行分析,对其进行多级质谱裂解分析。以对照品及文献数据为对照,通过对各成分的MS²和MS³谱图的解析对各成分进行指认。结果 预知子中的17个皂苷类成分获得了良好的分离和鉴定。结论 本方法准确快速,适合预知子中主要化学成分的鉴定,可用于预知子原药材的质量控制。     

斑马鱼肿瘤异种移植模型在抗癌药敏感性评价中的应用

目的应用人类肺癌、胃癌和肝癌细胞斑马鱼异种移植模型,分别评价5种临床常用抗癌药的体内敏感性。方法分别建立斑马鱼肺癌A549、胃癌SGC-7901和肝癌Hep G2异种移植模型,顺铂、紫杉醇、长春瑞滨、恩度和贝伐单抗设计3个剂量分别处理斑马鱼肺癌A549移植模型,紫杉醇、伊立替康、羟基脲、顺铂和5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)设计3个浓度或剂量分别处理斑马鱼胃癌SGC-7901移植模型,阿霉素、吉西他滨、羟基脲、顺铂和5-氟尿嘧啶设计3个浓度或剂量分别处理斑马鱼肝癌Hep G2移植模型。实验结束后,使用荧光显微镜进行体内肿瘤定量图像分析,计算药物对斑马鱼体内肿瘤生长抑制率,通过与模型对照组相比,分析是否具有统计学意义。结果受试的抗肿瘤药物在斑马鱼肿瘤异种移植模型中均有效,并且基本都呈剂量依赖性。在抗肺癌A549药敏试验中,药效从高到低分别为贝伐单抗(65%)顺铂(55%)长春瑞滨(40%)恩度(39%)紫杉醇(27%);在抗胃癌SGC-7901药敏试验中,药效从高到底分别为羟基脲(46%)5-FU(31%)=伊立替康(31%)紫杉醇(26%)顺铂(24%);在抗肝癌Hep G2药敏试验中,药效从高到底分别为顺铂(64%)羟基脲(56%)吉西他滨(46%)阿霉素(45%)5-FU(38%)。结论斑马鱼肿瘤异种移植模型适合用于抗癌药体内药敏试验。     

虫草复方对博莱霉素致大鼠肺纤维化的作用及其机制

目的 探讨虫草复方对博莱霉素致大鼠肺纤维化的作用及其机制。方法 Wistar大鼠随机分为对照组,模型组,复方虫草高、低剂量（150、75 mg/kg）组和醋酸泼尼松（3.33 mg/kg）组,每组18只。除对照外其余各组大鼠采用气管内一次性滴注盐酸博莱霉素造模,对照组大鼠气管内一次性滴注等体积生理盐水。造模后第2天开始给药,对照组和模型组分别ig给予等体积生理盐水。各组动物于7、14、28 d随机处死6只,分别观察大鼠肺指数、肺组织羟脯氨酸（Hyp）、丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）活性及血清中MDA的量和SOD的活性。同时取固定部位肺组织进行病理组织学检查,并应用免疫组织化学法检测转化生长因子-β1（TGF-β1）、I型胶原、III型胶原在肺组织中的表达;观察各组大鼠动脉血气的变化。结果 虫草复方能明显降低肺纤维化大鼠肺指数和肺组织Hyp的量,并可提高血清和肺组织中SOD活性,降低血清和肺组织中MDA和肺组织TGF-β1、I型胶原、III型胶原的表达;虫草复方可使肺纤维化大鼠动脉二氧化碳分压[p(CO₂)]降低和血氧分压[p(O₂)]提高;虫草复方明显改善实验性大鼠肺纤维化程度。结论 虫草复方对大鼠肺纤维化具有一定的干预作用,其机制可能与抗脂质过氧化、抑制TGF-β1表达、减少肺泡间质胶原沉积及改善肺呼吸功能有关。     

杭白菊、当归、丹参提取液抑制黄褐斑形成及机制研究

目的 观察杭白菊、当归、丹参提取液对im黄体酮及紫外（UV）照射导致的黄褐斑小鼠模型的抗氧化与抗黄褐斑形成作用。方法 将小鼠随机分成对照组、模型组、维生素C组、杭白菊组、当归组、丹参组共6组。采用im黄体酮及辅助UV照射方法建立黄褐斑小鼠模型。测定各组肝脏及皮肤组织中的谷胱甘肽过氧化酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）、酪氨酸酶（TYR）活性与总抗氧化能力（T-AOC）,以及丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）、肝脏脂褐质水平,并测定血液流变学指标,进行皮肤病理学检查。结果 杭白菊、当归、丹参提取液显著增强黄褐斑小鼠肝脏和皮肤中GSH-Px、SOD活性,降低MDA水平,抑制TYR增加,使黑素细胞（MC）生成减少,抑制黑色素合成,从而减轻皮肤色素沉着。结论 杭白菊、当归、丹参提取液有一定的防治黄褐斑的功效,其作用与提高机体抗氧化能力,抑制TYR活性,减少黑色素的合成以及改善机体的血液流变学有关。