PPARα转基因对小鼠的生理、生化等影响研究

目的 通过与正常C57BL/6小鼠作对照,在不同月龄分析PPARα转基因小鼠生理、生化等数据,比较其差异性,观察PPARα基因对小鼠的生理、生化是否会产生影响.丰富转基因小鼠数据库内容,为该模型实际应用于临床前药物评价提供理论依据.方法 实验分为4组,分别为PPARα雄性组、PPARα雌性组、C57BL/6雄性组和C57BL/6雌性组,9只/组.在动物10周龄、14周龄、18周龄、22周龄、34周龄分别检测血常规、血生化指标,在动物26周龄时观察其心、肝、肾脏器病变情况,并观察动物的一般生长情况.结果 PPARα转基因小鼠与C57B L/6小鼠比较①体重：6周龄到23周龄的PPARα转基因小鼠体重与C57BL/6小鼠体重比较差异无显著性（P＞0.05）.②血常规：10周龄PPARα雌性转基因小鼠红细胞计数（RBC）、嗜碱性粒细胞百分比（BAS％）、淋巴细胞百分比（LYM％）明显高于C57BL/6雌性小鼠,差异有显著性（P＜0.01）.14周龄PPARα雄性转基因小鼠白细胞计数（WBC）、淋巴细胞百分比（LYM％）明显高于C57BL/6雄性小鼠,差异有显著性（P＜0.05）.③血生化：10周龄PPARα雄性小鼠血尿素氮（BUN）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）明显高于C57BL/6雄性小鼠,差异有显著性（P＜0.05）.14周龄PPARα雄性小鼠天冬门氨酸氨基转移酶（AST）、甘油三酯（TG）明显低于C57BL/6雄性小鼠,差异有显著性（P＜0.05）.④组织病理：26周龄PPARα转基因小鼠与C57BL/6小鼠比较,心脏无明显的改变,但肝细胞出现透明病变,肾小管上皮细胞出现脂肪变性.结论 系统收集了PPARα转基因小鼠的体重、血常规、血生化、病理等背景资料,成功分析了其与野生型C57BL/6小鼠之间的差异,为该模型的应用提供参考数据.     

PPARα转基因小鼠在药物评价中的应用研究

目的研究过氧化物酶体增殖激活受体α激动剂药物在PPARα转基因小鼠体内对肝肾功能、血脂指标的影响,以评价该模型能否能应用于药效学研究中。方法选择27只6周龄的PPARα小鼠给予高脂饲料喂养一个月,随机分成3组,9只/组,分别为对照组1,高剂量组(非诺贝特60 mg/kg)和低剂量组(30 mg/kg)。同时选择9只C57BL/6小鼠作为对照组2。连续灌胃一个月,在动物给药前后分别检测肝功能指标、肾功能指标和血脂指标,并观察动物的一般生长情况。结果①给药后各组比较:与对照组1比较,非诺贝特各剂量组在PPARα转基因小鼠体内均能明显升高血脂中CHO和HDL-C(P<0.05),明显降低TG(P<0.05)。各组之间的体重没有明显的差异(P>0.05)。②给药前后比较:与给药前比较,给药后高剂量组能明显降低ALT、AST、ALP、BUN、TG(P<0.05);能明显升高CHO、HDL-C(P<0.01)。而低剂量组能明显降低ALP(P<0.05);能明显升高CHO、HDL-C(P<0.05)。结论 PPARα转基因小鼠评价PPARα激动剂药物比常规C57BL/6小鼠更敏感,是一个新的动物模型。     

利用心脏特异性CYP2E1基因修饰小鼠评价药物心脏毒性的初步探索

目的：研究具有潜在心脏毒性的药物西布曲明（Sibutramine）对心脏特异性CYP2E1（细胞色素P450 2E1，Cytochrome P2E1）基因修饰小鼠（心脏特异性CYP2E1转基因小鼠，α-MHC CYP2E1 transgenic mice，Tg(+)和心脏特异性CYP2E1基因沉默小鼠，α-MHC CYP2E1 silence mice，sTg(+)）的心脏、肝脏、肾脏等的影响，探索使用心脏特异性CYP2E1基因修饰小鼠来评价药物的毒性作用，Tg(+)型小鼠是否在评价药物的心脏毒性中具有更高的敏感性。方法：8周龄雄性Tg(+)型小鼠、sTg(+)型小鼠、野生型C57BL/6小鼠（WT），各50只，分别随机分成5组，每组10只，溶媒对照组（灌胃给予纯净饮用水）及4个实验组（分别灌胃给予50mg/kg 、100mg/kg 、150mg/kg 、300mg/kg西布曲明）。给药过程中进行一般症状观察以及存活率的测定；给药15d 后取血并解剖取心脏、肝脏、肾脏三个脏器，测定各组实验小鼠血生化指标（心脏毒性指标（乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB））、肝脏毒性指标（丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP））和肾脏毒性指标（尿素氮（UN）、肌酐（CREA））、脏器系数等，并进行病理组织学检查，免疫组织化学方法观察心脏组织缝隙蛋白43（Connexin 43 ，CX43）的表达情况。结果：1、从心脏损伤血生化指标结果来看，在给药剂量50mg/kg和100mg/kg时，Tg(+)型小鼠均显著高于WT型小鼠（P<0.05 或P<0.01）；在给药剂量50mg/kg、100mg/kg和150mg/kg时，Tg(+)型小鼠均显著高于sTg(+)型小鼠（P<0.05 或P<0.01）；而在给药剂量300mg/kg时，Tg(+)型小鼠均显著低于WT和sTg(+)型小鼠（P<0.05 或P<0.01），且sTg(+)型小鼠减小的程度最小。2、病理组织学结果显示，Tg(+)和WT型小鼠各个给药组均表现出心脏损伤的迹象。3、免疫组织化学染色显示，随着给药剂量的加大，Tg(+)、sTg(+)和WT型三种小鼠CX43在心肌细胞闰盘处的表达数量均逐渐下降，且染色颜色逐渐变浅；而CX43在心肌细胞闰盘处的表达数量下降程度和染色颜色变浅程度由高到低分别为，Tg(+)型小鼠，其次是WT型小鼠，sTg(+)型小鼠。结论：Tg(+)型小鼠在评价药物潜在心脏毒性试验中可能比WT型小鼠具有更高的敏感性，而sTg(+)型小鼠则是一个很好的心脏毒性保护模型。     

氯化镧短期重复剂量染毒对ICR小鼠遗传毒性和氧化损伤的影响

目的：研究氯化镧短期重复染毒对ICR小鼠产生的遗传毒性和氧化损伤;方法：ICR小鼠随机分为对照组、低剂量组和高剂量组,分别给予0 mg/kg、20 mg/kg、200 mg/kg氯化镧,连续灌胃7 d,测定外周血淋巴细胞微核,取脏器分别测定丙二醛（ malondiadehyde,MDA）、谷胱甘肽（ glutathione,GSH）、超氧化物歧化酶（ SuperoXide dismutase,SOD）的含量。结果：高剂量组微核率显著高于对照组（ P〈0.05）;镧元素在心脏、肝脏、脾脏和肾脏的蓄积量,高剂量组与低剂量组和对照组相比差异均有统计学意义（ P〈0.05）;高剂量组小鼠脾脏、肾脏组织中MDA含量高于对照组（ P〈0.05）;高剂量组小鼠脾脏、肾脏中 GSH、T -SOD 含量低于低剂量组和对照组（ P〈0.05）。结论：氯化镧经口染毒剂量在200 mg/kg时可在各脏器中蓄积,且可引起小鼠脏器发生氧化损伤和骨髓微核率的增加,提示200 mg/kg氯化镧对小鼠有一定的遗传毒性,氧化损伤可能是其引起遗传毒性的机制之一。     

熊果酸通过过氧化物酶增殖受体α和γ信号通路改善KKAy小鼠肝脏胰岛素抵抗的机制

目的：探讨熊果酸改善自发性2型糖尿病KKAy小鼠肝脏胰岛素抵抗的作用和机制。方法：KKAy小鼠35只,随机分为对照组、罗格列酮组、非诺贝特组、熊果酸高剂量组和熊果酸低剂量组,每组7只,以C57BL/6J小鼠作为正常对照。干预4周后,酶联免疫吸附法检测血清游离脂肪酸（free fatty acid,FFA）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）和脂联素含量,蛋白质印迹法检测磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（phosphoenolpyruvate carboxykinase,PEP-CK）、胰岛素受体底物2（insulin receptor substrate-2,IRS-2）及葡萄糖转运因子2（glucose transport factor-2,GLUT-2）的蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应法检测PEPCK、IRS-2及GLUT-2mRNA的表达,免疫组织化学法观察肝脏组织中过氧化物酶增殖受体α（peroxisome proliferator-activated receptor α,PPARα）和PPARγ的表达。结果：经药物干预后,与对照组相比,熊果酸高剂量组小鼠血清FFA、TNF-α含量明显降低,脂联素水平明显升高（P〈0.01）;药物干预4周后,高剂量熊果酸对PEPCK蛋白及其mRNA表达具有明显的抑制作用（P〈0.01）;低剂量熊果酸能抑制PEPCKmRNA的表达,并可诱导IRS-2磷酸化（P〈0.05）;高、低剂量熊果酸均可增强KKAy小鼠肝脏中PPARα的表达（P〈0.01）。结论：熊果酸可能通过提高肝脏组织PPARα的蛋白表达,调节下游信号转导通路PEPCK转录和诱导IRS-2的磷酸化,影响细胞因子FFA、TNF-α和脂联素的水平,从而改善KKAy小鼠的肝胰岛素抵抗。     

红芪多糖对糖尿病小鼠肾脏组织α-SMA表达及肾小管间质损伤的影响研究

目的探讨红芪多糖（HPS）对糖尿病小鼠肾脏组织α-SMA表达及对肾小管间质损伤的影响。方法将32只2型糖尿病db/db小鼠按随机数字表法分为糖尿病模型组、HPS高剂量组、HPS中剂量组、HPS低剂量组,每组各8只;另择8只db/m小鼠作为正常对照组。HPS高、中、低剂量组小鼠分别给予HPS400、200、100mg/（kg·d）灌胃干预,正常对照组、糖尿病模型组小鼠以等量的0.9%氯化钠溶液灌胃。各组小鼠均连续灌胃8周后处死,取肾脏组织作病理检查,比较各组肾脏组织肾小管间质损伤程度;采用免疫组化法检测肾脏组织α-SMA表达强度,Westernblot法检测α-SMA表达水平,并进行比较。结果5组小鼠肾脏组织肾小管间质损伤程度比较差异有统计学意义（P＜0.05）,糖尿病模型组小鼠肾脏组织肾小管间质损伤程度最重,除正常对照组外,HPS高剂量组小鼠肾脏组织肾小管间质损伤程度最轻。5组小鼠肾脏组织α-SMA表达阳性率比较差异有统计学意义（P＜0.05）,HPS高剂量组明显低于糖尿病模型组（P＜0.05）。5组小鼠肾脏组织α-SMA表达水平比较差异均有统计学差异（P＜0.05）,HPS高、中、低剂量组与糖尿病模型组均高于正常对照组（均P＜0.05）,HPS低剂量组小鼠肾脏组织α-SMA表达水平＞HPS中剂量组＞HPS高剂量组（均P＜0.05）。结论HPS能够抑制2型糖尿病db/db小鼠肾脏组织α-SMA的表达,减轻肾小管间质损伤程度。     

促生长素添加剂对大鼠青春期生长发育影响的初步探讨

目的：探讨动物饲料促生长素添加剂对雌性大鼠部分生殖功能指标和毒性指标的影响。方法：采用动物实验方法。研究灌胃不同浓度促生长剂溶液对大鼠阴道开口时间、动情周期脏器系数系等生殖功能指标和毒性指标的影响。结果：（1）低剂量组大鼠平均体重和体重增长率明显高于对照组（P＜0．05）；（2）低剂量组大鼠阴道开口时间明显早于对照组（P＜0．05）；（3）染毒2周后低剂量组进入动情期的大鼠显著多于对照组（P＜0．05），中剂量组和高剂量组与对照量组比较，进入动情周期的大鼠无统计学意义；（4）各剂量组大鼠子宫和卵巢脏器系数与对照组相比均统计学意义（P＞0．05），但随浓度增加，各剂量组有一定的下降趋势。结论：促生长剂对大鼠有一定的雌激素样作用，并且这种影响和促生长剂的浓度有一定的相关性。     

干扰素α-2a与α-2b的免疫原性研究

目的：观察干扰素α-2a（interferon α-2a,IFNα-2a）与干扰素α-2b（interferon α-2b,IFNα-2b）对昆明小鼠的免疫原性与免疫毒性。方法：实验设阳性对照P组（环磷酰胺,cytoxan,CTX,200 mg/kg）、IFNα-2b高剂量组（A组,2 μg/mL）、IFNα-2b低剂量组（B组,0.5 μg/mL）、IFNα-2a高剂量组（C组,2 μg/mL）、IFNα-2a低剂量组（D组,0.5 μg/mL）以及阴性对照组（溶剂对照组,N组,0.1%牛血清蛋白Bovine serum albumin 0.1%BSA）,每组8只腹腔注射给药5周。通过血清干扰素（interferon,IFN）浓度、干扰素抗体（antibodies of interferon,Anti-IFN）浓度及肾脏C3补体免疫组化进行免疫原性对比;通过小鼠体质量增量、脏器系数、血液学指标、免疫球蛋白以及脾脏组织病理学切片进行免疫毒性对比。结果：血清IFN浓度A组（9.27±0.79）高于C组（7.80±1.26）（P=0.000）;B组（7.91±1.09）高于D组（5.97±0.98）（P=0.013）。血清Anti-IFN浓度A组（7.49±1.30）低于C组（10.31±0.69）（P=0.000）;B组（6.18±1.02）低于D组（8.24±0.74）（P=0.013）。肾脏C3免疫组化A组（0.51±0.00）低于C组（0.54±0.00）（P=0.000）;B组（0.42±0.00）低于D组（0.47±0.00）（P=0.013）。体质量增长量A组低于C组（P=0.015）;B组低于C组（P=0.003）。脏器系数实验组与阴性对照组N组无差异。A、B、C、D组在白细胞计数（white blood cell count,WBC）、血小板计数（platelet count,PLT）、平均血红蛋白量（mean corpuscular hemoglobin,MCH）、淋巴细胞计数（lymphocyte count,LY）、淋巴细胞百分比（lymphocytes percentage,LY%）指标上高于N组但低于P组（P<0.05）。IgA、IgM、IgG浓度检测无统计学差异。干扰素实验组脾脏切片未发现病理结构改变。结论：IFNα-2a与IFNα-2b的免疫原性有差异;免疫毒性无明显差异。     

冠心康对ApoE^（-/-）动脉粥样硬化小鼠PPARγ-LXRα-ABCA1信号通路的影响

目的：观察中药复方冠心康对载脂蛋白E（apolipoprotein E,ApoE）基因敲除（ApoE-/-）动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）小鼠三磷酸腺苷结合盒转运体A1（ATP-binding cassette transporterA1,ABCA1）通路的影响。方法：70只ApoE-/-小鼠用高脂饲料喂养建立小鼠AS模型。14只C57BL/6J小鼠为正常对照组,给予普通饲料。70只ApoE-/-小鼠造模成功后随机分为5组,即模型组、高剂量冠心康组（生药浓度为3.456g/mL）、中剂量冠心康组（1.728g/mL）、低剂量冠心康组（0.864g/mL）和西药辛伐他汀组[3mg/（kg·d）]。每只小鼠灌胃0.5mL,每天1次。连续灌胃8周后取材,分离肝脏及主动脉。运用蛋白质印迹法检测各组小鼠过氧化物酶体增殖物激活型受体γ（peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ）、肝X受体α（liver X receptor α,LXRα）和ABCA1蛋白的表达,实时荧光定量聚合酶链反应法检测各组小鼠主动脉、肝脏PPARγ、LXRα和ABCA1mRNA的表达。结果：与C57BL/6J小鼠比较,ApoE-/-小鼠的主动脉、肝脏的PPARγ、LXRα、ABCA1mRNA的表达明显增高;与模型组小鼠比较,高、中剂量冠心康与辛伐他汀在不同程度上下调了主动脉、肝脏的PPARγ、LXRα、ABCA1mRNA的表达（P〈0.05）,而以高剂量冠心康的作用最为突出。低剂量组无明显改变（P〉0.05）。与C57BL/6J小鼠比较,ApoE-/-小鼠的主动脉、肝脏的PPARγ、LXRα、ABCA1蛋白的表达明显增高;与模型组小鼠比较,各用药组主动脉、肝脏的PPARγ、LXRα、ABCA1蛋白的表达量下降（P〈0.05）,而以冠心康高剂量组作用最为突出。结论：PPARγ-LXRα-ABCA1通路在ApoE-/-小鼠脂质代谢紊乱、炎症反应方面扮演重要角色。复方冠心康能改善ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化过程中的脂质代谢紊乱,抑制炎症反应的进展,可能与调控ApoE-/-小鼠的主动脉、肝脏PPARγ、LXRα、ABCA1 mRNA及蛋白的表达有关。     

绿色荧光裸小鼠主要脏器重量及脏器系数测定与比较

目的 测定绿色荧光蛋白（GFP）转基因裸小鼠主要脏器重量及脏器系数.方法 选用6～8周龄GFP转基因裸小鼠及BALB/c裸小鼠雌雄各30只,用电子天平分别测定体质量和8个主要脏器重量,计算脏器系数,并进行性别间比较.结果 ①GFP转基因裸小鼠与BALB/c裸小鼠之间比较：雄性肾上腺、胰腺的质量组间差异极显著（P＜0.01）,心、肺的质量差异显著（P＜0.05）,脏器系数中肾上腺、胰腺差异极显著（P＜0.01）;雌性体质量、心、肾、肺、胰腺的重量组间差异极显著（P＜0.01）,肝、肾上腺的质量差异显著（P＜0.05）,脏器系数中肝、脑、胰腺差异极显著（P＜0.01）.②GFP转基因裸小鼠雌雄组间比较,雄性鼠体质量明显大于雌性鼠（P＜0.01）;心、肝、肾、胰的质量差异极显著（P＜0.01）;雌雄间脏器系数比较,心、肾、肾上腺、脑间差异极显著（P＜0.01）,胰腺系数间比较差异显著（P＜0.05）.结论 转基因GFP转基因裸小鼠的脏器重量、脏器系数在雄雌间有一定的差异,为相关的生物医学研究提供了基础数据.     

机体保护多肽对大鼠重复给药毒性研究

目的检测机体保护多肽（HuBPP）对大鼠产生的毒性反应,为临床提供无毒性反应剂量,从而为临床更安全地用药以及不良反应的监控提供参考信息。方法80只SD大鼠单次静脉和肌内注射给药以确认给药剂量。选择0.2 mg/kg、1 mg/kg和4 mg/kg为本次实验的低、中、高剂量,并设置溶媒对照组,每组30只大鼠,雌雄各半。连续肌内注射给药一个月,实验期间观察大鼠质量、摄食量等指标,给药末期和恢复期采血检测各临床指标,病理学检测各主要脏器毒性变化。结果急性毒性实验表明,20 mg/kg给药剂量下,实验组与对照组相比各观察指标未发现明显改变。长期毒性实验结果表明,与对照组相比,各剂量组大鼠质量、摄食量、主要脏器指标均未发现明显毒性反应（P>0.05）。长期毒性实验给药结束后,高剂量组雌鼠MCHC高于溶媒对照组,MPV低于溶媒对照组（P < 0.01和P < 0.05）;中剂量对照组雌鼠TG高于溶媒对照组,Na+浓度低于溶媒对照组（P < 0.05）;雄鼠高、中剂量组活化部分凝血活酶时间显著低于溶媒对照组（P < 0.05）,高剂量组Cl-浓度显著高于溶媒对照组（P < 0.05）。恢复期结束后高剂量组雄鼠红细胞体积分布宽度值低于溶媒对照组（P < 0.05）,低剂量组雌鼠丙氨酸氨基转移酶、血糖、三酰甘油显著高于溶媒组（P < 0.05~P < 0.01）,但均处于文献报道正常变化范围内;其他指标差异无统计学意义。结论在本实验条件下,HuBPP对大鼠的相对安全剂量为4 mg/kg及其以下剂量。     

辛硫磷对雄性小鼠生殖细胞毒性作用的实验研究

目的 研究辛硫磷对雄性小鼠生殖细胞的毒性作用.方法 48只健康昆明种雄性小鼠,随机分为6组,每组8只.实验设4个不同剂量辛硫磷染毒组、阴性对照组（玉米油）和阳性对照组（环磷酰胺40mg/kg）,均采用腹腔注射染毒方式.首次染毒后第35d处死小鼠,观察睾丸及附睾脏器系数、精子数量、精子活率、精子畸形率及骨髓细胞微核率的变化.结果 除最低剂量组外,各染毒组精子数量均低于阴性对照组（P＜0.01）;精子活率各染毒组均低于阴性对照组（P＜0.05）,并呈剂量-反应关系.精子畸形率、骨髓细胞微核率各染毒组均高于阴性对照组（P＜0.05）,并呈剂量-反应关系.结论 辛硫磷对雄性小鼠生殖系统有一定毒性作用,主要引起精子数量、精子活率的降低和精子畸形率的增加,并具有致突变作用.     

电针对ApoE-/-小鼠肝脏PPARα与TNF-α蛋白表达的影响

目的 探讨电针对载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠肝脏过氧化物酶体增殖剂激活受体α(peroxisome proliferator-activated receptor alpha, PPARα)、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor alpha, TNF-α）蛋白表达的影响。方法 将30只ApoE-/-小鼠随机分为模型组、药物组及电针组,每组10只。采用高脂饲料喂养14周的方法复制高脂血症模型。电针组小鼠接受单侧神门、内关、足三里、三阴交电针,药物组小鼠每日接受40 mg/kg辛伐他汀灌胃。免疫组织化学法检测肝脏中PPARα、TNF-α的表达,采用Western blot检测肝脏PPARα的蛋白表达。结果 电针组小鼠肝脏中PPARα的蛋白表达水平高于模型组,但差异无统计学意义（P>0.05）,肝脏TNF-α表达水平显著低于模型组（P<0.05）。与模型组比较,电针组小鼠肝细胞内小颗粒脂滴减少,肝细胞凋亡和坏死减少,且肝细胞保存相对完整。结论 电针通过抑制炎性因子的表达而减少脂质沉积,治疗动脉硬化。     

激活PPARα缓解PPARγ诱导的小鼠脂肪肝

目的 研究PPARa激活后对PPARγ诱导小鼠脂肪肝的影响。方法给野生型（C57BL/6）小鼠饲喂含有0.125% PPARa激动剂Wy-14,643饮食 8天,或给野生型小鼠尾静脉注射PPARγ腺病毒（Ad/PPARγ）5天;或先给野生型小鼠Wy-14,643饮食 3天,再尾静脉注射Ad/PPARγ 5天,收集肝脏组织称重、照相,H&E、油红O染色观察PPARa激活后对PPARγ诱导肝脏脂肪变性的影响。结果 野生型小鼠给予PPARa激动剂Wy-14,643处理8天,与对照组相比,处理组小鼠肝脏明显增大,呈现过氧化物酶体增殖反应;野生型小鼠给予Ad/PPARγ 5天,小鼠肝脏显著增大,出现脂肪肝;给予PPARa激动剂Wy-14,643 3天,再给予Ad/PPARγ 5天,小鼠肝脏增大更加显著,H&E染色、油红O染色结果显示小鼠肝脏脂肪变性明显减轻。结论 激活PPARa能够缓解PPARγ诱导的小鼠肝脏脂肪变。本研究为脂肪肝的预防和治疗提供了新的研究思路和靶点。     

巨噬细胞内IKKα在小鼠肾脏缺血再灌注损伤炎症反应中的作用研究

［摘要］ 目的：研究巨噬细胞内IKKα在小鼠肾脏缺血再灌注损伤（ischemic reperfusion injury,IRI）炎症反应中的作用。方法：分别将20只8~10周龄健康雄性C57BL/6小鼠 (WT小鼠) 和20只8~10周龄健康雄性巨噬细胞内IKKα基因敲除即IKKαMKO小鼠(KO小鼠) 随机分为假手术（Sham）组,肾脏缺血再灌注损伤（IRI）组,分别构建模型。苏木素-伊红（HE）染色法观察肾脏组织形态学改变及炎症细胞浸润情况,免疫组织化学法检测肾组织抑炎因子白介素10（IL-10）、促炎因子白介素6 (IL-6),增殖指标Ki67、巨噬细胞标记物CD68、M1型巨噬细胞标记物iNOS、M2型巨噬细胞标记物Arg-1的表达, Western印迹检测IL-10、IL-6的表达变化。结果：HE染色法表明IRI组较Sham组肾组织结构损伤明显及炎症浸润增加。免疫组化结果表明肾脏IRI后IL-10和IL-6均呈高表达,IL-10表达呈时间依赖性上调, IL-6表达呈时间依赖性下调。与WT-IRI组相比,KO-IRI组小鼠肾脏病理损伤加重（P＜0.01）,IL-6、CD68、iNOS表达显著增加（P＜0.01）,IL-10（P＜0.01）、Ki67（P＜0.05）表达显著降低。结论：巨噬细胞内IKKα基因敲除加重了小鼠肾脏缺血再灌注损伤的炎症反应且不利于肾脏修复,这可能与增加了肾脏早期巨噬细胞（M1型为主）浸润及促进了炎症反应有关。 ［关键词］缺血再灌注损伤;炎症;巨噬细胞;IKKα ［中图分类号］R363     

盐酸克伦特罗对小鼠短期毒性效应的观察

目的:探讨盐酸克伦特罗对小鼠的短期毒性效应.方法:首先以霍恩氏法对小鼠进行急性经口毒性试验,求出盐酸克伦特罗的经口LD50.然后进行亚急性经口毒性试验,将40只昆明小鼠随机分为低、中、高剂量组和空白对照组,各剂量组分别以不同浓度的盐酸克伦特罗饮水染毒,连续28 d,对照组饮用去离子水.每7 d称量动物体重.染毒结束时测定小鼠血清丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)和尿酸(SUA),并计算心脏、肝脏、脾脏、肾脏脏器系数.结果:急性试验染毒后动物中毒症状明显,死亡发生较快,其经口LD50为126 mg/kg.亚急性试验染毒2周后体重增加呈现剂量效应关系,实验结束时高剂量组高于空白对照组(P＜0.05);随着染毒剂量的增加,小鼠血清AST逐渐升高,其中高剂量组高于空白对照组(P＜0.05);高剂量组SUA和肝脏系数均低于空白对照组(P＜0.05).结论:盐酸克伦特罗对小鼠的急性毒性为中等毒,亚急性饮水暴露对小鼠体重、AST、SUA及肝脏系数有一定的影响.     

安神补脑液对大鼠的长期毒性研究

摘要：目的 观察安神补脑液长期灌胃给药对大鼠所产生的毒性反应及严重程度，提供毒副反应的靶器官及其损害的可逆程度，确定无毒反应剂量，以评价安神补脑液长期用药的安全性，为拟定临床试验剂量及观察指标提供参考。方法 Wistar大鼠随机分为安神补脑液低、中、高剂量组（2.5、5、10ml/kg）和溶剂对照组（灌服同容积蒸馏水 2ml/100g），每组60只，雌雄各半，每天给药1 次，每周给药6天，连续二十六周。观察大鼠的外观行为、体重、摄食量，并分别于给药第十三、二十六周末及四周恢复期结束进行血液学及血液生化学等各项指标检测及脏器系数、病理组织学检查。结果 长期连续灌胃给予安神补脑液，对动物一般状态、行为活动和外观体征无明显不良影响；各剂量组的摄食量、体重、血液学及血液生化学指标与对照组比较无明显差别；给药三个月、六个月对动物各脏器组织位置、重量和脏器系数无不良影响，但部分脏器重量有所增加，各组动物脏器系数在正常范围内；病理结果显示对照组和安神补脑液高剂量组动物未见明显与给药相关的异常病理改变和毒性改变，恢复期停药后未见延迟性毒性，因此，中、低剂量组动物各脏器组织无需进行组织病理形态学检查。结论 安神补脑液长期用药对大鼠未见明确的毒性反应，停药后亦无延迟性毒性反应，预期拟定的临床用药量为安全剂量。     

转基因EGFP小鼠的主要脏器重量及脏器系数

目的测定转基因C57BL／6-Tg（ACTB—EGFP）1osb／J（EGFP）小鼠主要脏器重量和脏器系数。方法实验选用5～6周雄性、6～7周雌性小鼠各15只，用sartorius电子天平分别测定体重和9个主要脏器重量，计算脏器系数，并对雌雄脏器重量和脏器系数之间进行比较。结果雌雄小鼠脏器重量间比较，雄性鼠体重明显大于雌性的体重（P〈0．01）；心、肝、肺、肾、肾上腺的重量间差异极显著（P〈0．01）；脾脏比较差异显著（P〈0．05）；雌雄间脏器系数比较，肺、脑、肾上腺间差异极显著（P〈0．01），心、肝、脾、肾脏间差异不显著（P〉0．05）。结论转基因EGFP小鼠不同性别间脏器重量及脏器系数间有一定的差异，为相关研究打下了基础。     

加味四逆散长期毒性实验及安全性评价

目的通过长期毒性试验，观察加味四逆散对SD大鼠所发生的各种毒性反应，以评价加味四逆散的安全性。方法SD大鼠80只，雌雄各半，随机分为4组（空白对照组、加味四逆散高、中、低剂量组）每组各20只，三个用药组灌胃18w及停药2w后分别检测体重、血象、肝功、肾功、脏器系数及脏器组织病理。结果各给药组大鼠的血象、肝功、肾功、脏器系数分别与对照组相比差异无显著性意义（P〉0．05）。光镜下高剂量组大鼠心肌见嗜碱性变，心肌轻度充血，其余各组大鼠心脏结构清楚，肌纤维未见变性、坏死、断裂、心内外膜以及间质未见明显变化；停药2w后，各组动物脏器组织均正常，各给药组大鼠的血象、肝功、肾功、脏器系数分别与对照组相比差异无显著性意义（P〉0．05）。结论加味四逆散口服给药对正常大鼠的一般行为无明显影响，对大鼠肝脏、脾脏、肾脏、肺脏、子宫、卵巢、睾丸及肾上腺等组织无明显影响；长期高剂量口服给药对大鼠心脏有轻度的可逆性损伤；本实验表明加味四逆散停药后对大鼠无延迟毒性作用；对正常大鼠总体是基本安全的。     

酒精处理大鼠血压、体重及主要脏器重量系数的测定

目的 提供酒精处理后大鼠血压、体重、主要脏器重量及其重量系数的数据.方法 雄性SPF级SD大鼠分为空白组、酒精低剂量组、酒精中剂量组、酒精高剂量组.酒精低剂量组给予52％酒精0.25 mL/（100 gbw·d）灌胃;酒精中剂量组给予52％酒精0.5 mL/（100g bw·d）灌胃;酒精高剂量组给予52％酒精1.0 mL/（100 gbw·d）灌胃.在灌胃4、8、12周后分别观察大鼠的血压、体重、主要脏器重量及重量系数变化情况.结果 SD大鼠在本实验酒精剂量和方式的干预下,灌胃4周后、8周后、12周后血压值均未见明显改变.灌胃4周后,酒精高剂量组大鼠的体重、心脏重量、肝脏重量、肾脏重量与空白组比较差异有显著性（P＜0.05）;酒精中剂量组大鼠的心脏重量系数与空白组比较差异有显著性（P＜0.05）.在灌胃12周后,酒精各剂量组大鼠的体重、肝脏重量系数与空白组比较差异均有显著性（P＜0.05）;酒精高剂量组大鼠的肾脏重量与空白组比较差异有显著性（P＜0.05）.结论 初步建立酒精处理大鼠一定时间后大鼠血压、体重及主要脏器重量及其重量系数的常规生理学数据,为相关的实验研究提供基础资料.