植入式胶囊渗透压泵在大鼠脑梗死模型脑室给药中的应用

目的 探讨植入式胶囊渗透压泵对大鼠脑梗死模型（middle cerebral artery occlusion, MCAO）进行脑室内给药的可行性。方法 18只改良神经损伤严重程度评分（modified neurological severity scores, mNSS）在10～13分的SD雄性大鼠随机分成3组：渗透压泵给药组、常规给药组和对照组,每组各6只大鼠。模型前和模型后24h、3、7和14天分别行mNSS评分;模型后14天处死大鼠行2,3,5-三苯氯化四氮唑（TTC）染色并计算脑梗死体积。结果 模型后14天,渗透压泵给药组和常规给药组大鼠神经功能明显改善,mNSS评分均低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;渗透压泵给药组大鼠神经功能的恢复程度优于常规给药组大鼠,差异有统计学意义（P<0.05）。渗透压泵给药组大鼠的脑梗死体积为28.6%±5.8%,低于常规给药组（35.5%±7.6%）和对照组（38.2%±6.5%）,和对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）;常规给药组大鼠的脑梗死体积小于对照组,但差异无统计学意义（P>0.05）。结论 植入式胶囊渗透压泵应用于大鼠脑梗死模型的脑室给药是可行和有效的,这种缓释的给药方式显著优于单次脑室内给药方式。     

改良线栓法大鼠大脑中动脉阻塞模型的建立

目的对大鼠大脑中动脉阻塞（MCAO）再灌注模型进行改良，通过比较再灌注24h时大鼠神经功能评分、梗死率、模型制作时间、成功率和死亡率等指标评价改良线栓法大鼠MCAO再灌注模型的有效性。方法12只SD大鼠随机分为对照和模型两组，对照组采用分离结扎翼腭动脉，从颈外动脉插入线栓至大脑中动脉。模型组采用不分离结扎翼腭动脉，从颈总动脉分叉处插入线栓至大脑中动脉。阻断大脑中动脉血供2h后将线栓拔出实现再灌注。于再灌注24h时观察脑组织组织病理学改变，计算比较两组大鼠神经功能评分、模型制作时间、模型成功率和死亡率以及鼠脑切片TTC染色测量脑梗死率。结果两组MCAO模型在再灌注24h后大鼠神经功能评分、梗死率、模型成功率和死亡率等方面没有显著差异；模型组的模型制作时间显著少于对照组（P〈0．05）。结论采用不分离结扎翼腭动脉，由颈总动脉插入线栓的改良线栓法是稳定和可靠的MCAO造模方法。     

线栓法制作大鼠MCAO模型的技术改进与评价

目的探寻一种稳定、可靠、相对简单易行的大鼠大脑中动脉闭塞（MCAO）再灌注模型鼠的制作方法。方法将大鼠随机均分为实验组和对照组,实验组按改进后的方法进行造模,对照组按传统的Zea Longa的线栓法造模。造模成功后行神经功能缺损评分、大鼠脑梗死体积、造模成功率的比较。结果实验组与对照组在神经功能缺损评分、大鼠脑梗死体积和造模成功率的比较上无统计学意义。结论技术改进后的线栓法在制备MCAO模型鼠上是一种稳定、可靠、可重复率高、相对简单易行的方法。     

改良线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞模型

目的总结改良的、简单实用的大鼠大脑中动脉阻塞（MCAO）模型建立方法的相关经验。方法16只成年健康雄性Sprague Dawley（SD）大鼠,随机分为实验组（8只）和对照组（8只）。纵行切开左侧颈部旁正中皮肤,采用从左侧颈总动脉（CCA）插入尼龙栓线的制模方法,实验组术中分别使用显微动脉夹暂时夹闭CCA及颈内动脉。对照组仅暴露左侧大脑中动脉而不予其他处理。两组实验动物分别在缺血后24h进行神经功能评分、MRI常规轴面T_2W_1扫描、病理学检查以及四氮唑（TTC）染色判定模型成功与否。结果对照组MRI常规轴面T_2W_1扫描未发现异常,实验组MCAO后24h MRI T_2WI左侧基底节和顶叶皮层均显示异常高信号;对照组大鼠脑组织神经细胞结构正常,实验组大鼠脑组织神经细胞缺血24h时出现典型的缺血性神经细胞改变;两组实验动物神经功能评分差异有统计学意义（P〈0．05）;实验组TTC染色结果均显示左侧额颞顶皮层及基底节区缺血。结论根据改良线拴法的相关经验制备大鼠MCAO模型,制模成功率高、重复性好、手术时间短,可作为一种较为理想的制作大鼠脑缺血模型的方法。     

线栓法致大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型的制作及思考

目的建立一种可靠、稳定的大鼠大脑中动脉闭塞脑缺血/再灌注模型(MCAO/R)的制备方法。方法 32只SD大鼠随机分为手术组(20只)和假手术组(12只),模型制作后检测神经功能缺失评分,氯化苯四氮唑染色观察大鼠脑梗死面积。结果改良后的大鼠MCAO/R制作成功率为75%,神经功能评分以及脑梗死面积均较稳定。结论改良的大鼠MCAO/R是一种稳定性好、可重复率高的大鼠脑缺血/再灌注模型。     

线栓法大鼠脑缺血再灌注损伤模型的实验研究

目的:探讨大鼠大脑中动脉缺血再灌注(MCAO/R)损伤模型的建立及其稳定性评价,以及再灌注时间对脑梗死体积的影响。方法:SD雄性大鼠70只,随机分为假手术组(n=5)及MCAO/R组(n=65),MCAO/R组用改良的Zea-Longa法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,观察大鼠神经功能缺损,采用Longa评分法对大鼠神经行为学进行评分。分别于再灌注3 h、6 h、12 h、24 h、2 d、3 d、5 d、7 d后断头处死大鼠,取脑组织0.2%TTC染液进行染色。测量不同时间组脑梗死体积百分比,比较各组间大鼠神经功能缺损及脑梗死体积百分比。结果:MCAO/R组大鼠造模稳定性可达86.95%;与假手术组比较,MCAO/R组大鼠均出现神经功能缺损,脑梗死体积百分比在6 h组逐渐增大,3 d组达到高峰,5~7 d组下降。结论:线栓法制作大鼠脑局部缺血再灌注损伤模型是一种稳定性好、可重复性高的造模方法;随再灌注时间的延长脑梗死体积百分比先逐渐增大,而后逐渐减小。     

大鼠大脑中动脉阻塞再灌注模型改良的实验研究

目的通过对大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)再灌注模型神经功能缺失评分的计算和脑梗死体积的测量,评价改良的大鼠MCAO再灌注模型,为实验研究提供可重复性好、稳定可靠的动物模型。方法20只SD大鼠随机分为A、B两组,A组用头端烧制成圆球的传统"圆头线栓",B组采用头端用万能胶包裹成梭形膨大的改良"梭头线栓"制作大鼠MCAO模型,阻断大脑中动脉血供3h后将"线栓"拔出,造成再灌注损伤。采用"盲法"分别于再灌注10min和再灌注24h对大鼠进行神经功能缺失评分;再灌注24h后处死大鼠,脑切片TTC染色,数码相机照相,采用图像分析系统测量脑梗死体积比;根据统计结果评价改良的MCAO再灌注模型,分析MCAO再灌注后神经功能缺失评分与脑梗死体积比之间的关系。结果B组大鼠脑梗死体积比大于A组(P<0.01);B组大鼠脑梗死体积比明显较A组稳定,变异系数(coefficient of variation,CV)分别为CVB=0.12,CVA=1.08);再灌注10min和再灌注24h对大鼠进行神经功能缺失评分,B组评分均高于A组(P<0.05);MCAO再灌注模型大鼠神经功能缺失评分与脑梗死体积比的大小成线性相关关系(r=0.873,P<0.01)。结论采用改良的"梭头线栓"制作MCAO再灌注模型,神经功能缺失评分和脑梗死体积比变异度小、稳定性高,是可靠的制模方法;神经功能缺失评分能反映脑梗死的严重程度,可用作评价药物疗效的指标。     

远隔肢体缺血后适应对大鼠 MCAO 模型血管重塑的影响

目的：研究缺血后适应对大鼠急性缺血性脑卒中脑血流恢复、脑血管直径及脑梗死体积的影响。方法将SD大鼠随机分为后适应组（ MCAO＋后适应）、对照组（ MCAO）及假手术组（ Sham）。线栓法建立大鼠永久性MCAO缺血模型,于缺血前、缺血第1天及缺血第7天对对照组和后适应组进行脑血流检测,于缺血第1天和第7天行神经功能评分,在缺血第7天行脑梗死体积检测、大脑前动脉和大脑后动脉直径检测。结果缺血第1天后适应组与对照组神经功能评分无明显差异（P＞0．05）,第7天实验组较对照组神经功能明显改善（P＜0．05）;第7天后适应组较对照组脑梗死体积明显缩小（P＜0．01）;第7天对照组侧支血管直径较Sham组明显增粗（P＜0．01）,后适应组侧支血管直径较Sham组明显增粗（P＜0．01）,后适应组血管直径与对照组相比明显增粗（P＜0．05）;缺血第1天和第7天实验组脑血流量较对照组均有明显提高（P＜0．05）。结论实验结果显示缺血后适应能提高神经功能评分,减少脑梗死体积,促进缺血早期脑血流恢复,促进脑血管重塑。     

尼莫地平对脑缺血时间窗的影响

目的研究尼莫地平对大鼠脑缺血／再灌注损伤治疗时间窗的影响。方法将60只成年雄性WiStar大鼠随机分成,尼莫地平组和对照组两大组。每个大组再分成5个小组,即MCA02h,3h,4h,5h和6h组。应用线栓法制作大鼠MCAO模型。于再灌注前20min、再灌注后12h和36h尾静脉给药;48h后计算大鼠存活率、行神经功能缺损评分、脑血流量和脑梗死体积测定。结果①大鼠存活率：尼莫地平组存活率为53.3％（16／30只）,对照组为40％（12／30只）。大鼠存活率提高,但没有统计学意义。②神经功能缺损评分：尼莫地平组神经功能缺损明显少于对照组。其中MCA04h的大鼠神经功能尼莫地平组明显好于对照组（P〈0.05）。③脑组织血流量：尼莫地平组的大鼠脑血流量明显大于对照组（P〈0.05）。各时段大鼠脑血流量,尼莫地平组也明显大于对照组,其中MCA02h,3h和4h有统计学意义（P〈0.05）。④梗死体积：尼莫地平组的犬鼠脑梗死体积明显小于对照组,其中MCA02h组的大鼠脑梗死体积减小最突出（P〈0.05）。结论尼莫地平对大鼠脑缺血／再灌注损伤模型的治疗时间窗的影响在2h-4h范围。     

R(+)普拉克索对急性脑缺血大鼠脑损伤的保护作用

[摘要]　目的　研究R(+)普拉克索(R+PPX)对急性脑缺血大鼠体内氧自由基生成的影响,及其对急性脑缺血大鼠脑组织的保护作用。　方法　采用线栓法建立大鼠脑缺血2 h再灌注模型,抽签方法均分60只大鼠为3组：假手术（sham）组,中动脉栓塞（MCAO）组, R+PPX注射中动脉栓塞（R+PPX+MCAO）组。于再灌注8 h和24 h时,采用TTC磷酸盐染色、LOZEX-F图像扫描确定脑梗死体积,用新型荧光探针H2DCF-DA监测大鼠脑内氧自由基（ROS）阳性细胞数目。　结果 　（1）sham组大鼠未出现脑梗死,再灌注8 h和24 h时,MCAO、R+PPX+MCAO两组均出现脑梗死（P<0.05）。再灌注8 h时,R+PPX+MCAO组样本的脑梗死体积明显小于MCAO组（P<0.05）,但再灌注24 h时,MCAO、R+PPX+MCAO两组的脑梗死体积无明显差异。（3）再灌注8 h时,R+PPX+MCAO组的ROS阳性细胞数明显少于MCAO组（P<0.05）,但再灌注24 h时,这两组的ROS阳性细胞数差异无显著性意义。　结论　R+PPX干预可以明显减少再灌注早期脑缺血大鼠组织ROS细胞生成及减少脑梗死体积。     

小鼠大脑中动脉栓塞脑局部缺血模型及其评价方法

目的通过比较客观和可靠的神经行为学评分,以及脑梗死体积和水肿率的计算,评价小鼠大脑中动脉阻塞(middlecerebral artery occlusion,MCAO)局部缺血模型的成功率和可靠性。方法线栓法致小鼠MCAO制备大脑局部缺血模型,应用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色和神经行为学评分等方法,计算脑梗死体积、水肿率并观察行为学指标。结果TTC染色证实,MCAO可诱发明显的小鼠脑局灶性缺血,手术成功率约为90.8%,其中以皮质缺血为主,少数为单纯海马和丘脑缺血;脑局部缺血损伤可引起小鼠神经行为学的显著改变,即总体神经行为学评分增加;同时,脑梗死体积约占全脑体积的35%,分析结果准确和稳定。结论本研究成功地建立了MCAO致小鼠脑局部缺血的模型,且有较高的成功率(90.8%);同时所用评价神经功能损伤和脑梗死体积方法具有较高的可靠性。     

大鼠大脑中动脉缺血再灌注后不同时间点梗死体积的变化

目的:在局灶缺血模型中,研究再灌注后0 h、6 h、24 h、48 h、72 h对大鼠梗死灶体积的影响。方法:将大鼠分为假手术组(sham组)和实验组,实验组在激光多普勒血流仪的监测下进行手术,术后有3分症状的入主,然后随机分为0 h组、6 h组、24 h组、48 h组、72 h组。在不同的时间点处死大鼠,行TTC染色,然后计算梗死体积。结果:再灌注24 h之前,随着再灌注时间的延长梗死体积逐渐增大,0～24 h,梗死体积变化有显著性差异;但再灌注24 h之后,梗死体积不再发生实质性的增加,24～72 h,梗死体积无显著性差异。结论:在研究局灶脑缺血梗死体积的实验中,24 h是一个非常重要的时间点。     

Hyperbaric oxygen preconditioning induces neuroprotection against is chemia in transient not permanent middle cerebral artery occlusion rat model

Ｉｎ 1990 ,Ｋｉｔａｇａｗａｅｔａｌ1　ｆｉｒｓｔｆｏｕｎｄｔｈａｔｎｅｕｒｏｎａｌｃｅｌｌｓｉｎｔｈｅｇｅｒｂｉｌｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓｃｏｕｌｄｄｅｖｅｌｏｐｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｔｏｉｓｃｈｅｍｉｃｎｅｕｒｏｎａｌｄａｍａｇｅａｆｔｅｒａｂｒｉｅｆｐｅｒｉｏｄｏｆｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅｉｓｃｈｅｍｉａ Ｔｈｉｓｐｈｅｎｏｍｅｎｏｎ ,ｃａｌｌｅｄ“ｉｓｃｈｅｍｉｃｔｏｌｅｒａｎｃｅ” ,ｈａｓｄｒａｗｎａｔｔｅｎｔｉｏｎｂｅｃａｕｓｅｔｈｅｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇｏｆｉｔｓｍｅｃｈａｎｉｓｍｗｉｌ…     

新型查尔酮FMC对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 研究新型查尔酮（FMC）（3''-甲酰基-4'',6''-二羟基-2''-甲氧基-5''-甲基查尔酮）对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 建立重复性好、梗死部位恒定、成功率高的局灶性脑缺血再灌注损伤模型,以水溶性的FMC溶液腹腔注射,观察FMC对脑缺血大鼠神经行为、脑梗死范围以及脑组织的含水量、超氧化歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的影响。结果 术后出现追尾征及特殊体态,于2h后大脑中动脉供血区出现缺血。脑组织TTC染色均匀,出现梗死的脑组织面积相对于全脑百分比为27.96%±9.45%,动物模型成功率为78.6%。FMC组的脑含水量、MDA显著降低,SOD显著升高,梗死率降低。结论 本方法构成局灶性缺血再灌注模型,操作简单,重复性好,大鼠体重和年龄、麻醉剂应用、栓线直径和插入深度、控制出血和术后护理等是模型制作成功的关键因素。FMC可能通过降低脑组织水含量、MDA水平,升高SOD水平,减少梗死体积,对缺血再灌注损伤的脑组织起到一定的保护作用。     

吸氧预处理对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用

目的　研究吸入不同时间 10 0 % O2 能否诱导脑缺血耐受而对脑缺血再灌注损伤产生保护作用 .方法　 6 3只 SD大鼠随机分为 7组 (每组 n=9) :即 A组 (对照组 )于缺血前 2 4h吸空气 2 4 h;B,C和 D组分别于缺血前 2 4 h连续吸 10 0 %O2 2 4 ,12和 6 h;E,F和 G组分别连续吸 10 0 % O2 2 4 ,12和 6 h. A,B,C和 D组于吸氧结束后 2 4 h造成脑缺血 ;E组于吸氧后即刻造成脑缺血模型 ;F组间隔 12 h;G组间隔 18h后造成脑缺血 .局灶性脑缺血模型采用 3- 0尼龙线线栓法栓塞大脑中动脉 ,2 h后拔出尼龙线使血液再灌注 .脑缺血 2 h和再灌注后 2 4 h行脑功能障碍评分 ,并处死动物取大脑行TTC染色测量脑梗死容积 .结果　 B组的脑功能障碍评分与A组相比显著降低 (P<0 .0 5 ) ,C,D,E,F和 G组与 A组相比无显著性差异 ;脑梗死容积 B组 (10 4 .8± 6 2 .1) mm3显著小于 A组 (199.0± 6 9.6 ) mm3(P<0 .0 1) .吸 10 0 % O2 12 h及6 h组及吸 10 0 % O2 2 4 h后即刻造成脑缺血组与对照组相比其脑梗死容积无明显差异 .结论　本实验首次证实连续吸10 0 % O2 2 4 h且间隔一定时间后能模拟缺血预处理对大鼠短暂性脑缺血产生保护作用 .     

丁基苯酞对大鼠局灶缺血脑组织VEGF及bFGF表达的影响

目的研究丁基苯酞(NBP)对大鼠缺血脑组织中血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维生长因子(bFGF)表达的影响。方法健康雄性SD大鼠,用大鼠大脑中动脉线栓法(MCAO)建立永久缺血模型。实验分为假手术组、模型对照组和NBP组,每组各20只大鼠。NBP组术后予以NBP灌胃,每天2次,每次25mg/kg;假手术组、模型对照组每天灌胃相应剂量食用植物油。局灶性缺血72h后行神经功能评分(Longa评分),然后断头取脑。TTC染色观察脑梗死体积,免疫组织化学(SP)方法观察梗死周围区、海马区和梗死核心区脑组织VEGF和bFGF蛋白的表达,原位杂交方法(POD法)检测VEGF mRNA和bFGF mRNA的表达。结果NBP组神经功能缺损评分低于模型对照组(P<0.05),NBP组在梗死周围区和海马区VEGF和bFGF蛋白,VEGF mRNA和bFGFmRNA表达均高于模型对照组和假手术组(P<0.05),在梗死核心区差异均无统计学意义(P>0.05)。结论NBP明显改善缺血后大鼠的神经功能,上调大鼠梗死周围区和海马区脑组织VEGF、bFGF蛋白和mRNA的表达,可能通过此机制治疗保护缺血脑组织。     

2型糖尿病大鼠骨髓干细胞条件培养基促进糖尿病大鼠脑梗死后神经功能恢复

目的 探讨2型糖尿病（T2DM）大鼠骨髓干细胞条件培养基（BMSC-CM）对T2DM大鼠脑缺血/再灌注损伤后神经功能恢复的影响.方法 将成年雄性SD大鼠用烟酰胺、链脲佐菌素（STZ）诱导制作T2DM模型,制备T2DM大鼠BMSC-CM,线栓法制作T2DM大鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）脑缺血/再灌注模型.实验动物分为空白对照组、单纯培养基组和条件培养基治疗组（每组n=6）.治疗组分别于术后24、48 h经尾静脉注射T2DM大鼠BMSC-CM（10 ml/kg）,单纯培养基组经尾静脉注射培养基DMEM,空白对照组未给予任何干预措施.术后1、7、14天分别进行神经功能缺损评分（mNSS）和足错步试验.结果 术后第1天,各组mNSS、足错步次数比较差异无统计学意义（P＞0.05）.术后第7、14天,条件培养基治疗组mNSS、足错步次数明显低于空白对照组和单纯培养基组（P＜0.05）,空白对照组与单纯培养基组mNSS、足错步次数差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 T2DM大鼠BMSC-CM可明显促进T2DM大鼠脑梗死后的神经功能恢复.     

脉络宁对MCAO 大鼠的神经保护作用及其抗氧化机制研究

目的：探讨脉络宁对大脑中动脉栓塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）大鼠的抗氧化作用机制。方法：将18 只成年SD 大鼠随机分成假手术组（control）、模型组（MCAO）、脉络宁组（mailuoning）,每组6 只。采用线栓法建立大鼠MCAO 模型,缺血2 h 再灌注24 h。2% 2,3,5- 氯化三苯基四氮唑（2,3,5-triphenyltetrazolium chloride,TTC）染液测定大鼠脑梗死体积,荧光法测定活性氧（reactive oxygen species,ROS）的含量,吸光度法测定脑组织中丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量以及还原型谷胱甘肽（glutathione,GSH）,Western Blot 法测定半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（cysteinyl aspartate specific proteinase-3,caspase-3）、B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）、Bcl-2 相关X 蛋白（Bcl-2 associated X protein,Bax）表达量。结果：脉络宁能显著降低MCAO大鼠神经功能损伤,减少脑梗死体积;能够抑制脑组织中ROS含量以及MDA的生成,显著提高GSH 水平;能够抑制Bax、caspase-3 的表达,并增加Bcl-2 的表达。结论：脉络宁对MCAO 大鼠的保护作用可能与其抑制氧化应激及细胞凋亡有关。