穿心莲内酯对脓毒症小鼠的保护作用及机制探讨

目的研究穿心莲内酯对脓毒症小鼠的保护作用及相关机制。方法采用盲肠结扎穿孔(CLP)法制作小鼠脓毒症模型。64只C57BL/6小鼠随机均分为4组:假手术组(sham组)、脓毒症模型组(CLP组)、二甲亚砜组(DMSO组)和穿心莲内酯组(AND组)。各组小鼠于术后1、6、12h腹腔内分别注射相同剂量(0.2mL)的生理盐水、5%DMSO或穿心莲内酯(10mg/kg),记录各组小鼠术后7d生存率并绘制生存曲线。另取48只C57BL/6小鼠,分组及给药方法同前,术后24h分别检测腹腔灌洗液(PLF)中性粒细胞(PMN)数量、外周血及PLF细菌负荷以及外周血炎症因子TNF-α、IL-6、IL-10水平,同时取小鼠肺脏及肝脏组织进行病理分析。结果与CLP组相比,AND组小鼠术后7d生存率增加(P<0.01),腹腔PMN计数下降(P<0.01),外周血和腹腔细菌清除能力增强(P<0.01),外周血TNF-α、IL-6水平降低,而IL-10水平升高(P<0.01),肺组织和肝脏组织病理损伤程度减轻(P<0.01)。DMSO组与CLP组各项检测指标差异均无统计学意义。结论穿心莲内酯对CLP脓毒症小鼠具有保护作用,可能与其调节免疫功能,增强细菌清除能力以及降低过度炎症反应有关。     

基于维生素D免疫调节作用研究加味凉膈散在脓毒症急性肺损/急性呼吸窘迫综合征中的干预机制

目的：基于维生素D免疫调节作用探讨加味凉膈散（LGS）对盲肠结扎穿孔术（CLP）诱导的脓毒症急性肺损伤（ALI）/急性呼吸窘迫综合征（ARDS）小鼠的干预机制。方法：将72只8周龄雄性C57小鼠随机分为假手术组、模型组、LGS组。连续给药5 d,末次给药1 h后,采用CLP建立脓毒症ALI/ARDS模型。每组各取12只,观察小鼠的7 d生存率;剩余小鼠于术后24 h处死,收集血清,采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测炎症因子白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及25-羟基维生素D3[25(OH)D3]水平。结果：(1)与假手术组相比,模型组小鼠7 d生存率显著降低（P<0.05）,血清中炎症因子IL-6、TNF-α水平显著升高,而25(OH)D3水平显著降低（P<0.05）;(2)与模型组比较,LGS组小鼠7 d生存率显著提高（P<0.05）,血清中炎症因子IL-6、TNF-α水平显著降低（P<0.05）,25(OH)D3水平明显升高（P<0.05）。结论：LGS可能基于维生素D免疫调节作用干预脓毒症ALI/ARDS。     

线粒体靶向抗氧化剂Mito-Tempo对脓毒症小鼠急性肝损伤的保护作用

目的：探讨线粒体靶向抗氧化剂Mito-Tempo对脓毒症小鼠急性肝损伤的影响及可能机制。方法：将C57BL/6小鼠随机分为对照组（Control组）、盲肠结扎穿刺组（CLP组）、Mito-Tempo治疗组（CLP+Mito-Tempo组）。采用盲肠结扎穿刺术（cecal ligation and puncture,CLP）构建小鼠脓毒症急性肝损伤模型,CLP+Mito-Tempo组在CLP处理前1 h使用Mito-Tempo腹腔注射进行预处理。24 h后麻醉并处死小鼠,取小鼠肝脏组织进行HE染色观察肝组织病理损伤;ELISA法监测血清中炎症因子,免疫荧光染色检测肝组织中活性氧（reactive oxygen species,ROS）的水平;电镜观察线粒体形态,Western blot法检测细胞焦亡相关蛋白剪切型含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1(cleaved cysteinyl aspartate specific proteinase 1,cleaved-Caspases-1)、剪切型焦孔素D(cleaved-gasdermin D,GSDMD)、白细胞介素-1α(interleu...     

白三烯B4受体1拮抗剂U75302对脓毒症小鼠细胞免疫与炎症反应的影响

目的 观察白三烯B4受体1（leukotriene B4 receptor 1,LTB4-BLT1）拮抗剂U75302对脓毒症小鼠免疫功能的影响,探讨阻断白三烯B4受体1在脓毒症治疗中的意义。方法 采用盲肠结扎穿孔术（cecal ligation and puncture,CLP）致脓毒症小鼠模型,将18只雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组（n=6）、 CLP组（n=6）、CLP+腹腔注射U75302组（n=6）。手术后24 h检测3组小鼠外周血中肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）及白介素10（interleukin-10,IL-10）的水平,利用流式细胞术检测3组小鼠腹腔灌洗液中Gr-1⁺细胞的计数以及胸腺T淋巴细胞的凋亡情况。结果 与CLP组相比,CLP+腹腔注射U75302组小鼠外周血中的TNF-α水平降低约43%（P<0.05）,IL-10水平升高约88%（P<0.05）,腹腔Gr-1⁺细胞计数降低（P<0.05）,胸腺T淋巴细胞凋亡比例减少（P<0.01）。结论 LTB4-BLT1拮抗剂U75302可降低外周血TNF-α水平、提高IL-10水平、改善细胞免疫,可能干预脓毒症的炎症反应。     

白三烯B4受体1拮抗剂U75302对脓毒症小鼠细胞免疫与炎症反应的影响

目的 观察白三烯B4受体1（leukotriene B4 receptor 1,LTB4-BLT1）拮抗剂U75302对脓毒症小鼠免疫功能的影响,探讨阻断白三烯B4受体1在脓毒症治疗中的意义。方法 采用盲肠结扎穿孔术（cecal ligation and puncture,CLP）致脓毒症小鼠模型,将18只雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组（n=6）、 CLP组（n=6）、CLP+腹腔注射U75302组（n=6）。手术后24 h检测3组小鼠外周血中肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）及白介素10（interleukin-10,IL-10）的水平,利用流式细胞术检测3组小鼠腹腔灌洗液中Gr-1⁺细胞的计数以及胸腺T淋巴细胞的凋亡情况。结果 与CLP组相比,CLP+腹腔注射U75302组小鼠外周血中的TNF-α水平降低约43%（P<0.05）,IL-10水平升高约88%（P<0.05）,腹腔Gr-1⁺细胞计数降低（P<0.05）,胸腺T淋巴细胞凋亡比例减少（P<0.01）。结论 LTB4-BLT1拮抗剂U75302可降低外周血TNF-α水平、提高IL-10水平、改善细胞免疫,可能干预脓毒症的炎症反应。     

CXCL14在慢性危重症模型小鼠心功能损伤中的作用

目的 探索CXC趋化因子配体14(CXCL14)在慢性危重症（CCI）模型小鼠心功能损伤中的作用。方法 采用盲肠结扎穿刺术（CLP）诱导脓毒血症建立CCI小鼠模型。24只C57BL/6小鼠按照随机数字表法分成假手术组、CCI组、CCI+CXCL14组和CCI+Anti-CXCL14组,每组6只。CLP后12 d,采用M型超声心动图记录各组小鼠左心室射血分数（LVEF）,酶联免疫吸附测定（ELISA）检测脑钠素（BNP）水平评估小鼠心功能。采用苏木精-伊红（HE）染色法观察心肌组织,比较各组小鼠心肌细胞排列和纤维化情况。采用ELISA法检测心肌组织CXCL14表达水平。采用蛋白质印迹法检测小鼠心肌组织纤维化相关蛋白α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和Ⅲ型胶原蛋白（CollagenⅢ）的表达情况。结果 与假手术组比较,CCI组小鼠LVEF明显降低[（59.17±3.35）%比（74.31±2.16）%,P<0.01],BNP明显升高[（11.27±0.50）比（6.07±0.45）,P<0.01],心肌组织病理损伤明显,心肌细胞体积增大,心肌纤维排列紊乱,CXCL14含量明显升高...     

西维来司他钠对脓毒症小鼠急性肝损伤的保护作用

目的 通过观察西维来司他钠对肝组织炎症因子及肝损伤指标的影响,探讨其对脓毒症急性肝损伤的保护作用。方法 60只SPF级雄性C57小鼠随机分为4组,每组15只。假手术（Sham）组：只进行开腹缝合手术,不进行盲肠结扎;假手术+西维来司他钠（Sham+S）组：假手术后腹腔注射100 mg/kg注射用西维来司他钠溶液;脓毒症（CLP）组：盲肠结扎法造模后腹腔注射100 mg/kg生理盐水;脓毒症+西维来司他钠（CLP+S）组：盲肠结扎法造模后腹腔注射100 mg/kg注射用西维来司他钠溶液。观察各组小鼠手术后的状态及活动情况,术后3、6、18小时检测血清中天门冬氨酸氨基转氨酶（AST）、谷氨酸氨基转移酶（ALT）的水平;ELISA法检测肝组织匀浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）的水平;肝脏组织HE染色观察病理变化。结果 与同时间点Sham组比较,CLP组血清AST、ALT的水平均显著升高（P<0.05）,肝组织匀浆中TNF-α、IL-6、NE的水平显著增高（P<0.05）;与同时间点CLP组比较,CLP+S组血清AST、ALT的水...     

miR-140靶向PD-L1在小鼠脓毒症免疫抑制中的作用

【摘要】 目的 探讨miR-140靶向PD-L1在小鼠脓毒症免疫抑制中的作用。 方法 取90只小鼠随机分成对照组（Control组）、脓毒症模型组（CLP组）和CLP+miR 140组，每组30只。盲肠结扎穿孔法（CLP法）建立小鼠脓毒症模型，尾静脉注射转染miR-140 agomir，记录30天生存率，ELISA法检测血清肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素2（IL-2）表达，流式细胞术检测血清CD4+T和CD8+T细胞百分率，提取腹膜巨噬细胞，流式细胞术分析PD L1阳性百分率，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测miR-140和PD-L1基因表达，蛋白印迹（Western blot）检测PD-L1蛋白表达，荧光素酶报告实验检测miR-140和PD-L1靶向作用关系。 结果 与control组相比，CLP组在1 、7、14 d的TNF α、IL-2水平升高（P＜0.01），而TNF-α、IL-2水平呈时间依赖性降低（P＜0.05）；CLP组较control组小鼠生存率降低（P＜0.01），CD4+和CD8+细胞百分比升高（P＜0.01），巨噬细胞PD-L1阳性细胞率升高（P＜0.01），miR-140表达水平降低（P＜001），PD-L1基因和蛋白表达水平升高（P＜0.01）；与CLP组比较，CLP+miR-140组小鼠生存率升高（P＜0.01），CD4+和CD8+细胞百分比升高（P＜0.01），巨噬细胞PD-L1阳性细胞率下降（P＜0.01），miR-140表达水平升高（P＜0.01），PD-L1基因和蛋白表达水平降低（P＜0.01）；荧光素酶报告实验结果显示miR-140和PD-L1存在靶向作用关系。 结论 miR-140可靶向作用于PD-L1，从而改善小鼠脓毒症引起的免疫抑制。     

抑制铁死亡可减轻脓毒症小鼠的心肌损伤：脂钙蛋白-2的作用

目的 观察铁死亡在盲肠结扎与穿孔（CLP）法诱导的脓毒症小鼠心肌损伤中的作用,并探讨脂钙蛋白-2（Lcn2）在铁死亡中的可能作用。方法 选取8周龄雄性C57BL/6小鼠,采用CLP法诱导脓毒症心肌损伤模型。小鼠随机分为3组（10只/组）：假手术组、脓毒症组（CLP,小鼠接受CLP手术）、脓毒症+铁死亡抑制剂Ferrostain-1组（CLP+Fer-1,小鼠腹腔注射浓度为5 mg/mL的Fer-1 5 mg/kg,1 h后接受CLP手术）。各组小鼠术后24 h通过超声心动图检测小鼠心功能。H&E染色观察心肌损伤,透射电镜观察心肌纤维细微结构和线粒体的变化;ELISA法测定血清中炎症因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平;组织铁试剂盒测定心肌组织铁含量的变化;Western blot法检测心肌组织中Lcn2蛋白和铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）和铁死亡抑制蛋白1（FSP1）的表达变化。结果 与假手术组相比,CLP术后24 h,脓毒症小鼠心脏收缩与舒张功能减弱,左心室射血分数（LVEF%）、左心室缩短分数（LVFS%）和左心室舒张末期内径（LVIDd）降低（P<0.05）;左心室收缩期末期内径（LVIDs）升高（P<0.05）。与CLP组相比,CLP+铁死亡抑制剂Fer-1组LVEF%、LVFS%和LVIDd升高（P<0.05）;LVIDs降低（P<0.05）。光镜下观察到CLP小鼠心肌纤维排列不整齐,部分变性,有炎症细胞浸润,间质水肿,横纹模糊,红细胞渗出。透射电镜观察到部分线粒体嵴减少,外膜破裂,部分线粒体变小,膜密度增高。CLP+Fer-1组小鼠心肌形态学有改善,线粒体损伤减轻。与假手术组相比,CLP组血清TNF-α水平、心肌组织铁含量、Lcn2蛋白表达升高（P<0.01）,GPX4、FSP1蛋白表达降低（P<0.01）。与CLP组相比,CLP+Fer-1组血清TNF-α水平、心肌组织铁含量、和Lcn2蛋白表达降低（P<0.05）;GPX4、FSP1蛋白表达升高（P<0.05）。结论 来源于GPX4、FSP1不同途径的铁死亡参与CLP引起的脓毒症性心肌损伤的发生,抑制铁死亡可减轻脓毒症心肌损伤,Lcn2可能参与其中。     

川芎嗪对脓毒症小鼠肝组织铁调素的表达调控及机制研究

目的探讨川芎嗪对脓毒症小鼠肝组织铁调素的表达调控及保护机制研究。方法将44只C57BL/6J雄性小鼠按随机数字表法分为假手术组、肠穿孔手术（CLP）组、CLP+铁调素抑制剂组和CLP+川芎嗪组,每组各11只。后3组小鼠开腹、结扎并穿刺盲肠制作CLP模型。术后12h取1只CLP组小鼠检测血液载菌量和腹腔液载菌量评估造模情况;观察4组小鼠术后4d生存率,采用ELISA法检测血清生化指标和炎症因子水平情况,采用Westernblot法检测肝组织中铁调素和磷酸化JAK/STAT（p-JAK/STAT）蛋白的表达。结果假手术组小鼠术后12h在血液和腹腔液中均未检测到细菌。CLP组小鼠模型建立评价结果显示,术后12h血液和腹腔液载菌量分别为（15.0±1.3）×103/ml和（8.6±1.0）×103CFU/ml。假手术组小鼠术后4d内无死亡,CLP+铁调素抑制剂组和CLP+川芎嗪组小鼠CLP术后4d生存率分别为75.0%（6/8）和87.5%（7/8）,高于CLP组0.0%（0/8）,差异均有统计学意义（均P＜0.01）。CLP+铁调素抑制剂组与CLP+川芎嗪组小鼠术后48h血清ALT、AST、TNF-琢、IL-1、IL-6和铁调素水平均显著低于CLP组,且CLP+川芎嗪组小鼠血清TNF-α、IL-1、IL-6水平显著低于CLP+铁调素抑制剂组,铁调素水平显著低于CLP+铁调素抑制剂组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。CLP+铁调素抑制剂组和CLP+川芎嗪组术后48h肝组织铁调素表达水平显著低于CLP组,高于假手术组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）;而CLP+铁调素抑制剂组p-STAT和p-JAK蛋白表达水平与CLP组相比,差异均无统计学意义（均P＞0.05）;CLP+川芎嗪组p-STAT和p-JAK蛋白表达水平显著低于CLP+铁调素抑制剂组和CLP组,高于假手术组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论川芎嗪能够通过抑制JAK/STAT磷酸化而减少铁调素在小鼠肝组织中的表达,从而减轻肝脏损及全身炎性损伤。     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

尿液pH值对红细胞检验影响的探讨

[目的 ]通过尿液 pH值对红细胞检验影响的观察 ,更加科学、准确地诊断血尿和血红蛋白尿。[方法 ]采用干化学分析仪检测和尿液显微镜红细胞计数 ,观察 180例正常人尿标本加入正常人血标本后 ,不同 pH值 ,不同时间内 ,观察红细胞溶解情况。 [结果 ]pH <5 .5以下时 ,随着时间的延长 ,红细胞溶解现象明显。 1h后观察有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;2h后有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。[结论 ]pH <5 .5时对红细胞计数影响较大 ,易致红细胞发生溶解现象 ,出现假性血红蛋白尿 ,对血尿和血红蛋白尿很难区分 ,给临床诊断造成不便 ,更易引起漏诊和误诊。     

醋柳黄酮缓释片的药动学初步研究

目的:研究醋柳黄酮缓释片在家犬体内的药动学过程,测定其药动学参数,计算缓释片相对于普通片的生物利用度。方法:将实验动物分为两组,分别用醋柳黄酮缓释片和普通片进行口服给药,用高效液相色谱法测定血浆药物浓度,应用3P97软件求算药动学参数。结果:醋柳黄酮缓释片及普通片的tm ax分别为4.87 h和2.87 h,Cm ax分别为每小时0.46μg.L-1和每小时0.56μg.L-1,缓释片的相对生物利用度为111.7%。结论:醋柳黄酮缓释片与普通片均符合一室模型,缓释片与普通片具有生物等效性,且醋柳黄酮缓释片有明显的缓释效果。     

主动脉窦瘤破裂的外科治疗

报告２０例主动脉窦瘤破裂修复术的结果。１７例男性，３例女性。年龄７～５６岁。痊愈１９例，另一例因急性肾功能衰竭一周后死亡。作者就发病机理，诊断和合并畸形的处理进行了讨论。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

颅咽管瘤切除术后并发症的处理

目的　讨论颅咽管瘤切除术后并发症的处理原则。方法　分析 36例颅咽管瘤切除术后并发症的临床资料。结果　术后并发尿崩症者 14例、高热 11例、电解质紊乱 8例、消化道出血 3例、癫痫 5例 ,死亡2例。结论　颅咽管瘤术后并发症较多 ,加强早期监测和处理 ,可进一步提高该病的治愈率     

上颌骨牙源性囊肿刮除手术的疗效观察

目的探讨对上颌骨牙源性囊肿患者进行囊肿彻底刮除手术的临床疗效。方法对我科在2010年1月～2017年9月收治的73例上颌骨牙源性囊肿患者行囊肿彻底刮除手术治疗,对患者术区肿胀消退、术后伤口感染、伤口愈合、牙龈再附着、术后复发、骨质改建、骨质修复等情况随访观察。结果 73例患者术后肿胀消退时间为1～4 d。73例患者术后均未发生伤口感染,伤口均一期愈合。所有患者牙龈再附着情况好,术后均未见复发。术后未见并发症。骨质改建效果好,骨质修复的效果因影像学资料过少,缺乏客观依据,暂不下有效结论。结论对上颌骨牙源性囊肿患者进行囊肿彻底刮除手术,术后患者的恢复情况良好,值得在临床治疗上进行推广。     

阴道炎1236例病原检查分析

对１２３６例阴道炎患者的阴道分泌物作直接镜检和病原菌分离培养检查；结果，细菌感染９００例，念珠菌２３４例，滴虫１０２例。９００例细菌经鉴定；葡萄球菌３００例，阴道加特纳菌２７６例，淋病奈瑟菌１７０例，其它细菌１２４例。结果表明，葡萄球菌，阴道加特纳菌，淋病奈瑟菌是细菌性阴道炎最常见的致病菌。     

碱量法测定壳多糖脱乙酰度的方法探讨

目的：评价壳多糖脱乙酰度测定的减量法的影响因素。方法：通过实验评价碱量法的精准度及样本含潮量等因素对测定结果的影响,并对汪氏推荐计算公式和本文作者提出的改良公式作出评价。结果：碱量法测定壳多糖脱乙酰度受样本性状、含潮率、反应体系中酸量的影响。改良公式更能反映样本实际脱乙酰度。结论：碱量法简便易行,评价指标在可接受范围,可用于壳多糖研制中的质量评价。     

喉癌主癌灶手术切缘的临床特点分析

目的探讨研究喉癌主癌灶手术的安全切缘在临床上的特点。方法回顾性分析2007年6月—2011年3月已经确诊喉癌的患者100例,随机分成A、B两组,A组为观察组50例,主要采取手术切缘后,然后采取镜下观察分析;B组为观察组50例,主要采取手术切缘后,然后采取肉眼观察分析,将结果进行临床特点分析比较。结果早期的喉癌患者和晚期的喉癌患者的阳性切缘例数,差异无统计学意义（P〉0.05）;晚期的阳性切缘发生次数高于早期的阳性切缘发生次数,差异有统计学意义（P〈0.05）。声门上区[SG]2、3和5、10mm;跨声门型[TG]2、3mm和5、10mm的切缘对比,差异有统计学意义（P〈0.05）。SG、G、TG、IG的2mm和3mm,5mm和10mm对,差异无统计学意义（P〉0.05）。肉眼阳性切缘观察39个,镜下阳性切缘观察43,两者差异无统计学意义（P〉0.05）。结论依据原发不同部位、不同分期和不同范围选取适合的切线,就可以有效地减少阳性切缘的发生。