肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌AmpC β内酰胺酶的表型检测

目的 比较研究临床实验室对AmpCβ内酰胺酶（AmpC酶）的表型检测方法,了解对头孢西丁不敏感的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中产生hmpC酶和超广谱β内酰胺酶（ESBLs）的分布情况。方法 利用加与不加3-氨基苯酚硼酸（APB）的头孢他啶、头孢噻肟和头孢西丁纸片进行APB纸片增强试验检测肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的AmpC酶,并与Tris-EDTA纸片试验检测AmpC酶的结果进行比较。用CLSI纸片确认实验检测肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌产生的ESBLs。结果 APB纸片增强试验与Tris-EDTA纸片法检测结果完全一致。对头孢西丁不敏感的62株肺炎克雷伯菌和74株大肠埃希菌中,分别检测到产AmpC酶41株（66．1％）和33株（45．0％）。AmpC酶和ESBLs同时存在的肺炎克雷伯菌占51．6％,单产AmpC酶和单产ESBLs的肺炎克雷伯菌分别为14．5％和21．0％;而大肠埃希菌则以单产ESBLs为主,占40．5％,单产AmpC酶及同时产生AmpC酶与ESBLs的分别占20．3％和24．3％。结论 APB纸片增强试验和Tris-EDTA纸片试验操作简单,应用方便,成本低廉,均可用于临床实验室检测产AmpC酶的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶及传播方式的检测

目的 了解大肠埃希菌(E.coli)和肺炎克雷伯菌(K.pn)产ESBLs和AmpC酶的发生率、耐药性情况及传播方式.方法 对临床分离的66株E.coli和38株K.pn,用ESBLs表型确证试验纸片扩散法检测ESBLs,酶提取物三维实验检测AmpC酶,琼脂二倍稀释法测定最低抑菌浓度(MIC),质粒反式接合实验检测耐药基因的传播.结果 E.coli和K.pn产ESBLs/AmpC酶的发生率分别为74.2%(49/66)/10.6%(7/66)和71.0%(27/38)/13.1%(5/38),同时产ESBLs和AmpC酶的E.coli和K.pn分别为7.6%(5/66)和10.5%(4/38).这些产酶株对三代头孢菌素、氨曲南、头孢美唑全部耐药,对含酶抑制剂复合物敏感性较低,对亚胺培南敏感;产ESBLs菌株的传播绝大部分依赖质粒水平转移,而产AmpC酶菌株的传播只有小部分依赖质粒水平转移.结论 临床分离的E.coli和K.pn菌株大部分产ESBLs或AmpC酶,且存在一定比例既产ESBLs又产AmpC酶的菌株,对这些菌株的监测和阻止其传播具有重要意义.     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶及传播方式的检测

目的了解大肠埃希菌(E.coli)和肺炎克雷伯菌(K.pn)产ESBLs和AmpC酶的发生率、耐药性情况及传播方式。方法对临床分离的66株E.coli和38株K.pn,用ESBLs表型确证试验纸片扩散法检测ESBLs,酶提取物三维实验检测AmpC酶,琼脂二倍稀释法测定最低抑菌浓度(MIC),质粒反式接合实验检测耐药基因的传播。结果E.coli和K.pn产ESBLs/AmpC酶的发生率分别为74.2%(49/66)/10.6%(7/66)和71.0%(27/38)/13.1%(5/38),同时产ESBLs和AmpC酶的E.coli和K.pn分别为7.6%(5/66)和10.5%(4/38)。这些产酶株对三代头孢菌素、氨曲南、头孢美唑全部耐药,对含酶抑制剂复合物敏感性较低,对亚胺培南敏感;产ESBLs菌株的传播绝大部分依赖质粒水平转移,而产AmpC酶菌株的传播只有小部分依赖质粒水平转移。结论临床分离的E.coli和K.pn菌株大部分产ESBLs或AmpC酶,且存在一定比例既产ESBLs又产AmpC酶的菌株,对这些菌株的监测和阻止其传播具有重要意义。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌质粒β—内酰胺酶的筛选

目的：了解大肠埃菌和肺炎克雷伯菌的质粒介导的β-内酰胺酶的分布,表型及其检测方法,方法：经头孢泊肟初筛,用NCCLS确证试验检测超广谱β-内酰胺酶（ESBL）和用头孢西丁三相试验检测质粒AmpC.结果341株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中经常规药敏试验筛选出164株（48．1％）头孢泊肟（CPD）的MIC＞1μg/ml,对其中的102株进行检测,结果产ESBL的有64株,头孢西丁三相试验阳性者有6株。结大肠埃钸菌和肺炎克雷伯菌的质粒β-内酰胺酶以ESBL为主（30．2％）,质粒AmpCs仅占2．8％。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌质粒β-内酰胺酶的筛选

目的　了解大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的质粒介导的β-内酰胺酶的分布、表型及其检测方法。　方法　经头孢泊肟初筛,分别用NCCLS确证试验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBL)和用头孢西丁三相试验检测质粒AmpC。　结果　341株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中经常规药敏试验筛选出164株(48.1%)头孢泊肟(CPD)的MIC＞1μg/ml,对其中的102株进行检测,结果产ESBL的有64株,头孢西丁三相试验阳性者有6株。　结论　大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的质粒β-内酰胺酶以ESBL为主(30.2%),质粒AmpCs仅占2.8%。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌质粒型 AmpC 酶基因型的检测分析

目的：针对该院临床分离大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌质粒型 AmpC 酶基因型进行研究分析。方法收集2011年7月至2012年8月对头孢西丁不敏感无重复临床分离大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌共176株,采用聚合酶链反应（PCR）法和扩增全基因序列分析大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产 AmpC 酶基因型。结果 PCR 结果显示,AmpC 酶基因（ampC 基因）阳性率为18．2％主要以 DHA 型为主,阳性率为59．4％,CIT 型为37．5％,EBC 为3．1％;其中,大肠埃希菌 ampC 基因阳性率为11．4％,以CIT 型为主,阳性率为77．8％,DHA 型和 EBC 型阳性率均为11．1％;肺炎克雷伯菌 ampC 基因阳性率为23．7％,以 DHA 型为主,阳性率为78．3％,CIT 型为21．7％。基因序列结果显示,DHA 型有18株为 DHA‐1基因型和1株摩根摩根菌 ampC 基因型,一致率97．0％,CIT 型有10株为 CMY‐2基因型,1株 CMY‐42基因型和1株 CMY‐4基因型;EBC 型为阴沟肠杆菌 ampC 基因型,一致率为99．0％。将32株基因序列提交 GenBank ,均被接受,其登录号为 KJ127248～ KJ127279。结论该院临床分离大肠埃希菌 ampC 基因主要以 CMY‐2型为主,而肺炎克雷伯菌主要以 DHA‐1型为主。     

产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性分析

目的 了解本院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药情况,为临床合理使用抗生素提供指导.方法 采用美国BD公司生产的Phonenix 100全自动微生物鉴定药敏仪进行细菌鉴定及药敏检测.结果 分离培养得到103株大肠埃希菌和84株肺炎克雷伯菌,其中ESBLs产酶率分别为52.4%、45.2%,产ESBLs菌株对亚胺培南、美洛培南、哌拉西林/他唑巴坦敏感性较高,对其他β-内酰胺类抗菌药几乎全部耐药.结论 医院及时监测产ESBLs菌的发生率及其耐药趋势以指导临床用药至关重要.     

产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性分析及TEM、SHV基因检测

目的了解乌苏市产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药状况及TEM、SHV基因型的流行情况。方法收集乌苏市两所医院2011年7月至2013年6月分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,采用纸片扩散法(K-B法)进行药敏试验,并按照CLSI推荐的方法进行ESBLs初步筛选和表型确证试验,同时提取产ESBLs菌株的DNA,采用PCR和电泳方法检测TEM、SHV基因。结果共收集大肠埃希菌221株,肺炎克雷伯153株。其中产ESBLs菌株分别为37株和43株,肺炎克雷伯菌ESBLs检出率高于大肠埃希菌(χ2=6.942,P0.01)。两种菌的耐药情况较为相似,其中产ESBLs菌株对β-内酰胺类抗菌药物的耐药率明显高于非产酶株,大多在90%以上;对青霉素类和一、二代头孢类的耐药率接近100%;对庆大霉素和环丙沙星的耐药率也在50%以上;而对碳青霉烯类药物的耐药率较低,均不到5%。产ESBLs大肠埃希菌TEM、SHV基因的检出率分别为72.9%、54.0%,肺炎克雷伯菌分别为81.4%、65.1%,检出率基本一致(P0.05)。结论乌苏市大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs检出率较高,耐药形势严峻,TEM、SHV是ESBLs重要的基因型。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的临床分布与耐药分析

目的了解大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的临床分布及耐药情况。方法对2010年1～12月临床标本中分离的967株大肠埃希菌和988株肺炎克雷伯菌的临床分布和药敏试验结果用WHONET 5.4软件进行统计分析。结果大肠埃希菌主要从尿液（32.9%）中检出,主要来自普外科（21.9%）和重症监护病房（17.5%）,产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株检出率为58.9%;肺炎克雷伯菌主要从痰液标本中检出,主要来自重症监护病房（21.7%）和神经外科（17.3%）,产ESBLs菌株检出率为35.0%;除哌拉西林/他唑巴坦、头孢替坦、亚胺培南、呋喃妥因外,两种细菌中产ESBLs菌株对其他抗菌药物的耐药率均高于其非产ESBLs菌株。结论大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌是临床上的常见致病菌,加强产ESBLs菌株检测和细菌耐药监测对指导临床用药具有重要意义。     

产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性变化

目的分析产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性变化。方法收集我院2004年1月—2005年12月期间临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,对其产ESBLs及耐药情况与2000年1月—2002年10月进行比较研究。结果以头孢噻肟为底物检测ESBLs,2004—2005年产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别为35.4%和21.1%,与2000—2002年度比较显著增加(P<0.01)。2004—2005年产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌占尿标本41.4%(133/321),呼吸道分泌物占29.0%(93/321),血液占5.9%(19/321),伤口分泌物占12.8%(41/321),体液或引流液占8.1%(26/321)。产ESBLs大肠埃希菌对氨曲南敏感性2004—2005年较前有显著下降(P<0.05),对其他抗生素的敏感性差异无统计学意义。产ESBLs肺炎克雷伯菌对抗菌药物的敏感性2004—2005年较2000—2002年除左氧氟沙星外均有下降趋势,并且头孢他啶、头孢哌酮-舒巴坦敏感性显著下降(P<0.05)。结论产ESBLs细菌近2年有增加趋势,并对多种抗生素的敏感性下降。     

三种方法检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β—内酰胺酶？…

目的 用纸片协同试验、纸片确证试验和克拉维酸纸片叠加法检测产ＥＳＢＬｓ的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,并调查了医院感染这两种菌产ＥＳＢＬｓ的流行现状。方法 采用头孢他啶、头孢曲松、头孢噻噻肟和氨曲南方底物,用上述三种试验对临床分离的９９株大肠埃希菌和４８株肺炎克雷伯菌检测ＥＳＢＬｓ的产生。结果 纸片确证试验和克拉维酸纸片叠加法检测结果没有显著差异,总检出率在大肠埃希菌中为３５．４％,在肺炎克雷伯菌中为     

超广谱β—内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌耐药性的检测

超广谱β-内酰胺酶 (Extended- spectrumβ- lactamase,ES-BLs)是质粒介导的由革兰阴性杆菌产生的一种酶。它主要由肠杆菌科细菌产生 ,尤其以肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌为代表 [1 ] ,ESBLs可通过接合、转化、转导等形式使耐药基因在细菌间扩散 ,从而造成严重的医院交叉感染和院外耐药菌的扩散。为了解本地区 ESBLs菌的传播和流行情况 ,我们对 1 76株肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌做了 ESBLs检测 ,并分析其对 1 0种抗生素的耐药性 ,以便合理的指导临床用药。1　对象和方法1 .1　对象　 1菌株 :所有菌株均为我院 2 0 0 1 - 0 1～ 2 0 0 1 - …     

大肠埃希菌AmpC酶、超广谱β-内酰胺酶检测及耐药性分析

目的检测大肠埃希菌AmpC酶和超广谱β内酰胺酶(ESBLs),并分析其耐药性,以指导临床合理用药。方法采用改良三维试验法,分别进行AmpC酶和ESBLs测定。结果300株大肠埃希菌AmpC酶、ESBLs检出率分别为3.7%(11/300)、24.7%(74/300),其中同时产AmpC酶和ESBLs菌株检出率为2.3%(7/300)。产酶菌株对17种抗生素(除亚胺培南全部敏感外)的耐药率均高于平均水平。结论大肠埃希菌对β内酰胺类抗生素耐药的主要原因是产生AmpC酶和ESBLs,对产酶菌株临床经验用药可选用碳青霉烯类抗生素。     

大肠埃希菌AmpC酶、超广谱β-内酰胺酶检测及耐药性分析

目的 检测大肠埃希菌AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),并分析其耐药性,以指导临床合理用药。方法 采用改良三维试验法,分别进行AmpC酶和ESBLs测定。结果 300株大肠埃希菌AmpC酶、ESBLs检出率分别为3．7％(11／300)、24．7％(74／300),其中同时产AmpC酶和ESBLs菌株检出率为2．3％(7／300)。产酶菌株对17种抗生素(除亚胺培南全部敏感外)的耐药率均高于平均水平。结论 大肠埃希菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要原因是产生AmpC酶和ESBLs,对产酶菌株临床经验用药可选用碳青霉烯类抗生素。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测和耐药性分析

目的了解大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的情况,观察其耐药性。方法纸片扩散确证试验检测ESBLs,药敏试验采用纸片扩散法。结果258株大肠埃希菌和114株肺炎克雷伯菌确证试验阳性率分别为27.9%和26.3%。产ESBLs菌对头孢类抗生素高度耐药,对庆大霉素、环丙沙星等的耐药率为63.3%～93.1%,对亚胺培南高度敏感(100%),对头孢西丁、头孢哌酮舒巴坦、哌拉西林他唑巴坦等的敏感性在62.8%～91.9%。结论医院产ESBLs菌的阳性率较高,应开展检测,控制ESBLs的传播,根据药敏结果选用合适药物。     

2005年中国CHINET大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性分析

目的了解我国主要地区医院临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对抗菌药物的耐药性,指导临床合理使用抗菌药物。方法国内8所较有代表性的综合性医院按统一方案、统一方法(Kirby-Bauer法)和判断标准(CLSI2005版)进行细菌耐药性监测。结果临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs检出率分别为38.9%(20%～57%)、40.5%(13%～70%),各所医院检出率有较大差异。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对亚胺培南、美罗培南等碳青霉烯类抗生素仍高度敏感,耐药率为0～3%,有4所医院出现了对碳青霉烯类抗生素耐药株。大肠埃希菌产ESBLs株对头孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-三唑巴坦、头孢他啶、阿米卡星耐药率<20%,而肺炎克雷伯菌产ESBLs株对其耐药率>50%。大肠埃希菌ESBLs阴性株对氨苄西林、哌拉西林、环丙沙星、庆大霉素和复方磺胺甲噁唑耐药率>50%,肺炎克雷伯菌非产ESBLs株对氨苄西林高度耐药。不同医院产ESBLs细菌对同一药物的耐药率有较大差异。结论不同医院耐药性各具特点。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素仍最敏感,但已出现少数耐药株,应重视对其耐药机制的研究。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测和耐药性分析

目的 了解大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况,观察其耐药性。方法 纸片扩散确证试验检测ESBLs,药敏试验采用纸片扩散法。结果 258株大肠埃希菌和114株肺炎克雷伯菌确证试验阳性率分别为27．9％和26．3％。产ESBLs菌对头孢类抗生素高度耐药,对庆大霉素、环丙沙星等的耐药率为63．3％～93．1％,对亚胺培南高度敏感(100％),对头孢西丁、头孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦等的敏感性在62．8％～91．9％。结论 医院产ESBLs菌的阳性率较高,应开展检测,控制ESBLs的传播,根据药敏结果选用合适药物。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶检测及其耐药基因分析

目的了解大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的发生率,分析及研究其耐药性和耐药基因分型。方法用药敏纸片法对142株大肠埃希菌和79株肺炎克雷伯菌进行抗生素药物敏感试验,并对这2种菌株做ESBLs初筛和确证试验。对其中60株ESBLs阳性菌(大肠埃希菌29株,肺炎克雷伯菌31株)用聚合酶链反应(PCR)检测TEM、SHV、CTX-M3种基因并进行测序分型。结果142株大肠埃希菌和79株肺炎克雷伯菌中确证试验阳性率分别为56.3%和41.8%。产ESBLs菌对头孢类抗生素高度耐药,对庆大霉素、环内沙星的耐药率为71.3%~88.5%,对亚胺培南高度敏感(100.0%),对头孢西丁、头孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦等的敏感性在63.8%~92.0%。60株ESBLs阳性菌中,TEM、SHV、CTX-M3种基因检出率分别为58.3%、33.3%、66.7%。其中29株大肠埃希菌中,TEM基因检出率为75.8%,SHV基因检出率为0,CTX-M基因检出率为86.2%。31株肺炎克雷伯菌中,TEM基因检出率为41.9%,SHV基因检出率为64.5%,CTX-M基因检出率为48.4%。有35株(58.3%)菌株同时检测到2种以上基因型。序列分析证实TEM扩增产物均属于TEM-1基因,CTX-M扩增产物均属于CTX-M-3基因,而SHV扩增产物则分别属于SHV-1、SHV-5、SHV-11、SHV-12、SHV-28。结论大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产ESBLs的检出率较高,CTX-M-3、SHV-11和SHV-12是我院产ESBLs菌株的主要基因型。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶检测及其耐药基因分析

目的了解大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的发生率,分析及研究其耐药性和耐药基因分型。方法用药敏纸片法对142株大肠埃希菌和79株肺炎克雷伯菌进行抗生素药物敏感试验,并对这2种菌株做ESBLs初筛和确证试验。对其中60株ESBLs阳性菌（大肠埃希菌29株,肺炎克雷伯菌31株）用聚合酶链反应（PCR）检测TEM、SHV、CTX-M3种基因并进行测序分型。结果142株大肠埃希菌和79株肺炎克雷伯菌中确证试验阳性率分别为56.3%和41.8%。产ESBLs菌对头孢类抗生素高度耐药,对庆大霉素、环内沙星的耐药率为71.3%-88.5%,对亚胺培南高度敏感（100.0%）,对头孢西丁、头孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦等的敏感性在63.8%-92.0%。60株ESBLs阳性菌中,TEM、SHV、CTX-M3种基因检出率分别为58.3%、33.3%、66.7%。其中29株大肠埃希菌中,TEM基因检出率为75.8%,SHV基因检出率为0,CTX-M基因检出率为86.2%。31株肺炎克雷伯菌中,TEM基因检出率为41.9%,SHV基因检出率为64.5%,CTX-M基因检出率为48.4%。有35株（58.3%）菌株同时检测到2种以上基因型。序列分析证实TEM扩增产物均属于TEM-1基因,CTX-M扩增产物均属于CTX-M-3基因,而SHV扩增产物则分别属于SHV-1、SHV-5、SHV-11、SHV-12、SHV-28。结论大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产ESBLs的检出率较高,CTX-M-3、SHV-11和SHV-12是我院产ESBLs菌株的主要基因型。