白附子水提物抑制人骨髓神经母细胞瘤细胞增殖的实验研究

目的 探讨白附子水提物体外对肿瘤细胞增殖的抑制作用.方法 以白附子水提物处理人骨髓神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞24、48 h后,应用细胞增殖检测试剂Kit-8 (CCK-8)细胞增殖和毒性实验检测白附子水提物对SH-SY5Y细胞的增殖抑制作用,运用蛋白印记反应(AV/PI)对该细胞株生长抑制机理进行初步探讨.结果 白附子水提物对SH-SY5Y细胞的增殖具有抑制作用,与细胞作用48 h的半数抑制浓度(IC50)为0.862 mg/mL,与细胞作用24 h的IC50为1.158 mg/ml.Western-blot法检测结果表明,白附子水提物可能通过抑制肿瘤细胞增殖、诱导凋亡抑制其生长.结论 白附子水提物有抑制SH-SY5Y细胞增殖作用.     

苦参碱抑制神经母细胞瘤SK-N-SH细胞增殖作用研究

目的: 观察苦参碱对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞增殖的影响,并探讨其作用机制。 方法: 取对数生长期SK-N-SH细胞,用磺酰罗丹明B（SRB）法检测苦参碱（0.5,1.0,2.0 g·L^-1）作用24,48,72 h后 SK-N-SH细胞的增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期,Western blot 检测半胱天冬氨酸蛋白酶（Caspase）-9和Caspase-3蛋白的表达。 结果: 苦参碱对 SK-N-SH细胞增殖具有明显抑制作用,且表现出剂量和时间依赖性。0.5,1.0,2.0 g·L^-1苦参碱作用24,48,72 h后SK-N-SH细胞的抑制率分别为（19.06±3.17）%,（30.18±3.02）%,（38.55±6.12）%;（45.12±4.02）%,（60.45±5.51）%,（71.38±7.91）%;（58.91±4.36）%,（73.44±8.17）%,（88.37±4.57）%。流式细胞仪检测对照组及各浓度组凋亡率分别为（2.45±0.49）%,（12.56±2.21）%,（19.44±4.32）%,（30.12±3.35）%,与对照组比较,苦参碱组的凋亡率均显著性增高（P<0.001）;细胞周期结果显示苦参碱作用SK-N-SH细胞48 h后G₀/G₁期细胞明显增多（P<0.01）,S期细胞明显减少（P<0.01）。苦参碱可显著上调Caspase-9和Caspase-3蛋白表达（P<0.01,P<0.01）。 结论: 苦参碱对神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的增殖具有抑制作用,这种作用与其阻滞细胞周期和激活Caspase-9和Caspase-3表达进而诱导产生细胞凋亡有关。     

救脑益智胶囊水提物对人神经母细胞瘤株SY5Y信号转导的影响

目的 :通过观察救脑益智胶囊对人神经母细胞瘤株SY5Y信号转导的影响 ,探讨此药促进神经细胞生长的可能机理。方法 :以人神经母细胞瘤株SY5Y为细胞模型 ,分为正常对照组和加药组。收集对照组及加药组细胞裂解物 ,取上清用Lowry法进行蛋白定量 ,将总蛋白量相等的样品进行免疫沉淀Westernblot分析。 结果 :与正常对照组比较 ,加药组SY5Y细胞蛋白激酶B(proteinkinaseB ,Akt/PKB) ,cAMP反应元件结合蛋白 (cAMPresponseelementbindingprotein ,CREB)、磷酸化的CREB (phosphorylatedCREB ,P-CREB)表达增加 ,细胞色素C(cytochromeC ,cytC¹)表达减少。结论 :救脑益智胶囊的生药水提取液能促进SY5Y神经母细胞存活信号通路中Akt/PKB ,P-CREB的表达 ,推测其促进体外培养的SY5Y神经母细胞生长的机理与其促进神经元信号通路中有关蛋白质的表达有关。     

葫芦素B固体脂质纳米粒对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的体外细胞毒作用评价

目的研究葫芦素B固体脂质纳米粒对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的体外细胞毒性。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测葫芦素B固体脂质纳米粒对人神经母细胞瘤SK-N-SH的细胞毒性;倒置显微镜观察细胞形态;流式细胞仪定量分析细胞周期。结果作用48 h后,葫芦素B以剂量依赖方式抑制SK-N-SH细胞的生长,0.143和0.716μmol.L-1葫芦素B固体脂质纳米粒对SK-N-SH细胞的抑制率分别为(34.9±4.6)%和(53.6±6.3)%,与对应浓度的葫芦B原料组的(13.2±2.3)%和(43.4±5.5)%相比较有显著性差异(P<0.05)。葫芦素B固体脂质纳米粒对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的IC50为0.508μmol.L-1,而葫芦素B原料为12.6μmol.L-1。细胞形态观察结果显示,与二甲基亚砜(DMSO)组相比较,葫芦素B原料及葫芦素B固体脂质纳米粒组的细胞密度下降,细胞体积缩小,大多数细胞形状发生改变。流式细胞仪检测结果显示,葫芦素B原料可将SK-N-SH细胞抑制在S期和G2/M期,而葫芦素B固体脂质纳米粒可把SK-N-SH抑制在G2/M期。结论葫芦素B固体脂质纳米粒与葫芦素B原料药既能抑制人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞增殖,又能诱导其凋亡,显示出较强的细胞毒性,且前者毒性更强。     

大豆苷元对神经母细胞瘤细胞增殖的抑制作用

目的探讨大豆苷元对神经母细胞瘤SH—SY5Y细胞凋亡和增殖的影响。方法采用细胞生长抑制实验（MTT法）、流式细胞仪检测等方法观察SH—SY5Y细胞的形态变化、细胞凋亡率及细胞周期变化。结果10．0～80．0μg／ml的大豆苷元明显抑制细胞的增殖，且有剂量依赖性；与对照组相比，大豆苷元处理24h后，各组SH—SY5Y细胞均出现亚二倍体峰（Sub—G1），细胞凋亡率与大豆苷元呈剂量依赖性。结论大豆苷元可诱导神经母细胞瘤SH—SY5Y细胞凋亡，对SH—SY5Y细胞增殖有明显的抑制作用。     

救脑益智胶囊对人神经母细胞瘤株SY5Y生长的影响

目的:通过观察救脑益智胶囊对人神经母细胞瘤株 SY5Y 生长的影响,从细胞水平评估此药对神经细胞生长的作用。方法:以人神经母细胞瘤株 SY5Y 为细胞模型,分为对照组和加药组。以 MTT 代谢率、细胞轴突长度、胞体面积为观察指标。结果:与对照组比较,加药组 SY5Y 细胞轴突长度和胞体面积均增加,MTT 代谢率升高。结论:救脑益智胶囊具有神经营养作用,且能增加细胞线粒体活性。     

白附子提取物抑制人胃癌 SGC-7901 细胞增殖及诱导凋亡的机制研究

 目的 探讨白附子提取物对人胃癌 SGC-7901 细胞增殖抑制和凋亡诱导作用及其可能机制。 方法 分别采用噻唑蓝（ MTT ）法检测细胞增殖活性、流式细胞仪检测细胞周期及凋亡、光镜观察细胞结构变化、 Hoechst33342/PI 荧光染色检测细胞凋亡、 Western blotting 法检测 caspase-3 、 Bax 和 Bcl-2 蛋白表达。 结果 0.072~7.2 mg · L^-1 白附子提取物处理 24 h 后,细胞增殖明显受到抑制,且抑制率随时间延长而增加;光镜下可观察到细胞凋亡形态的改变; Western blotting 结果显示,半胱氨酸蛋白酶（ caspase-3 ）酶原蛋白的激活, Bcl-2 蛋白表达的降低和 Bax 蛋白表达上调。 结论 白附子提取物通过影响 SGC-7901 细胞的增殖、周期和凋亡相关蛋白的表达发挥凋亡诱导作用。     

南方红豆杉水提物对肿瘤细胞增殖抑制作用的研究

目的研究南方红豆杉水提物对人胃腺癌细胞株SGC-7901和人乳腺癌株MCF-7增殖的抑制作用和机制。方法采用二苯基四氮唑溴盐比色法（MTT法）检测南方红豆杉水提物和紫杉醇对SGC-7901和MCF-7细胞增殖的抑制作用;光镜观察其对2种细胞形态的影响;流式细胞仪检测其对2种细胞凋亡的影响。结果南方红豆杉水提物对肿瘤细胞的增殖有抑制作用;其抑制作用机制为诱导细胞凋亡。结论南方红豆杉水提物对肿瘤细胞的增殖有抑制作用。     

南方红豆杉水提物对人肺癌A549细胞增殖抑制作用的研究

目的:研究南方红豆杉水提物对人肺癌A549细胞增殖的抑制作用和机制。方法:采用MTT法检测南方红豆杉水提物对A549细胞增殖的抑制作用;生长曲线法观察其抑制A549细胞的时间-效应曲线;流式细胞仪检测其对A549细胞周期及凋亡的影响;倒置显微镜及电镜观察其对A549细胞形态的影响。结果:南方红豆杉水提物对A549细胞的增殖有抑制作用;其抑制作用机制为使A549细胞周期出现明显的G0/G1期阻滞,诱导细胞凋亡。结论:南方红豆杉水提物对人肺癌A549细胞的增殖有抑制作用。     

活性氧在红花多糖抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖中的作用

目的:研究活性氧(reactive oxygen species,ROS)在抑制人肝癌细胞增殖中的作用.方法:采用MTT法测定SPS对人肝癌SMMC - 7721细胞增殖的影响;倒置显微镜观察不同浓度的SPS作用肝癌细胞后,细胞的形态学变化;流式细胞仪检测不同剂量组细胞ROS的变化.结论:SPS可以抑制SMMC -7721细胞增殖,对其形态影响很大,可能与其促进ROS的增加有关.     

白附子对人T细胞和单核细胞的调节活性

目的：研究中药白附子的免疫学调节活性。方法：用^3H介入法测定了中药白附子提取物（Rhizoma typhonii extract,RTE)对小鼠脾细胞和人淋巴细胞的增殖活性；用绵羊红细胞花结形成试验分离纯化淋巴细胞后，检测了RTE的效应细胞；用^51Cr游离实验测定了人杀伤细胞和自然杀伤细胞的杀伤活性，用ELISA法和生物法研究了单核细胞的细胞因子产生，并用^3H介入法分析了单核细胞对肿瘤细胞的吞噬功能；用层析法分析了白附子的化学成分，并用SDS－PAGE法测定了其有效成分的分子量。结果：RTE对小鼠脾细胞和人淋巴细胞的增殖活性有很强的促进作用，并有较好的量效关系；RTE的效应细胞是T细胞；RTE增强人杀伤细胞对肿瘤细胞的特异性杀伤活性和自然杀伤细胞的非特异性杀伤活性、增强单核细胞的细胞因子（肿瘤坏死因子和白细胞介素1）产生，并增强单核细胞对肿瘤细胞的吞噬功能。白附子的化学成分为66道尔顿的糖蛋白。结论：RTE对人的T细胞和单核细胞有免疫增强作用，并通过刺激机体的免疫系统杀伤或吞噬肿瘤细胞和外来抗原，这些活性可应用于临床调节免疫功能和治疗肿瘤等疾病。     

丹参注射液对活性氧诱导的平滑肌细胞增殖的影响

目的　探讨丹参注射液对H2 O2 诱导的血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖的影响。方法　用H2 O2 刺激VSMC增殖 ,应用氚 -胸腺嘧啶核苷 (3H -TdR)掺入实验观察VSMC的DNA合成 ,同时测定培养液中脂质过氧化物 (LPO)的含量。结果　丹参注射液剂量依赖性地抑制H2 O2 诱导的VSMC的3H -TdR掺入量 ,降低LPO的含量。结论　丹参注射液对预防由活性氧诱导的血管平滑肌细胞增殖所引起的疾病可能具有重要作用。     

5种石斛水提物对活性氧的清除作用

石斛是一种常用珍贵中药，《神农本草经》中即将其列为上品，具有益胃生津、滋阴清热、润肺止咳的功效，用于慢性萎缩性胃炎及降血糖、抗肿瘤、抗衰老等。石斛还有增强人体免疫力及扩张血管的作用。氧在生物体内通过单电子还原产生化学性质活泼的物质活性氧(reactive oxygen species，     

巴戟天水提物对人精子膜功能氧化损伤的保护作用

目的：观察巴戟天水提物对人精子膜结构和功能氧化损伤的干预作用,探讨巴戟天治疗弱精子症男性不育的作用机制。方法：采用Percoll梯度离心法优选具有正常功能的精子悬液分为正常组,模型组,阳性药对照组（维生素C组）和巴戟天水提物小、中、大剂量组,应用次黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶（HX-XO）体系产生活性氧（ROS）,在有氧环境下,ROS、不同剂量（0.125,0.25,0.5 g·mL^-1）的巴戟天水提物与精子悬液共同孵育后,检测精子膜脂质过氧化损伤程度,通过精子低渗膨胀试验评估精子膜功能,并与已知的抗氧化剂维生素C对照。结果：巴戟天水提物小、中、大剂量组（0.125,0.25,0.5 g·mL^-1）在相同的条件下均可提高精子悬液SOD活力,降低MDA含量,对ROS所致精子膜的氧化损伤均具有不同程度的干预作用,对精子膜功能具有一定的保护作用。其中0.125 g·mL^-1的巴戟天水提物组与维生素C组（0.25 mg·mL^-1）无明显差别,0.25,0.5 g·mL^-1的巴戟天水提物组明显优于维生素C组（P＜0.01,P＜0.001）。且巴戟天水提物的作用呈剂量依赖性,大剂量（0.5 g·mL^-1）时对精子膜功能的保护作用最显著。结论：巴戟天水提物对人精子膜的脂质过氧化损伤具有明显的干预作用,对精子膜结构和功能具有明显的保护作用。     

熊果酸对人肝癌SMMC-7721细胞增殖作用的实验研究

目的:评定熊果酸对肝癌细胞SMMC-7721的增殖作用,流式细胞术研究对肝癌细胞凋亡的影响。方法:将不同浓度的熊果酸分别与人肝癌细胞SMMC-7721共同培养24,72 h后,采用中性红染色法测定吸光度(A),评定熊果酸对肝癌细胞的增殖作用,流式细胞术研究其对肝癌细胞的凋亡。结果:熊果酸对SMMC-7721细胞增殖有明显的抑制作用(P<0.05或P<0.01),呈时间-剂量依赖关系,24 h和72 h半数抑制浓度(IC50)分别为12.59,8.32μg·mL-1;对肝癌细胞凋亡率为14.07%,药物浓度与凋亡率呈正相关。结论:熊果酸对肝癌细胞SMMC-7721增殖有明显抑制作用,该抑制作用可能与诱导肝癌细胞凋亡有关。     

术后康复汤对骨髓基质细胞增殖影响的实验研究

目的:通过观察术后康复汤对小鼠骨髓基质细胞(BMSC)增殖的影响,研究该方提升腹部手术后患者血红蛋白含量的作用机理。方法:原代培养小鼠BMSC,分别给予术后康复汤正常剂量含药血清、术后康复汤高剂量含药血清、空白血清和胎牛血清干预,MTT法检测药物作用后24h、48h、72h、96h BMSC的吸光度值。结果:术后康复汤作用后48h、72h、96h骨髓基质细胞活细胞数量均明显高于空白血清组,与胎牛血清组比较差异无统计学意义。结论:术后康复汤可能通过促进BMSC增殖,参与造血调控,进而升高机体血红蛋白含量,促进术后患者康复,发挥益气养血的作用。     

白附子混悬液对H_（22）荷瘤小鼠抗肿瘤作用的免疫调节机制研究

[目的]研究白附子混悬液对荷瘤小鼠免疫功能的调节作用,探讨其抗肿瘤作用的免疫学机制。[方法]采用H22荷瘤小鼠模型为研究对象,用酶联免疫吸附实验（ELISA）法检测小鼠血清中白介素-2（IL-2）和白介素-4（IL-4）水平;用流式细胞术（FACS）法分析对CD4＋,CD8＋T细胞的调节作用。[结果]白附子混悬液能够上调荷瘤小鼠血清IL-2细胞因子的表达,降低IL-4水平,可以使CD4＋T细胞表达升高,CD8＋T细胞表达降低。[结论]白附子混悬液能够通过调节荷瘤机体异常免疫功能状态而发挥抗肿瘤作用。     

羌活鱼水提物在大鼠骨髓间充质细胞成骨中的作用

目的：探讨羌活鱼水提物含药血清对大鼠骨髓间充质细胞（BMSCs）成骨的作用。方法：取大鼠第三代BMSCs分为4组,待BMSCs接近80%融合时,分别应用生理盐水＋DMEM/F12培养液＋成骨分化诱导液＋5%FBS（生理盐水对照组）、高剂量羌活鱼水提物＋DMEM/F12培养液＋成骨分化诱导液＋5%FBS（羌活鱼水提物高剂量组）、中剂量羌活鱼水提物＋DMEM/F12培养液＋成骨分化诱导液＋5%FBS（羌活鱼水提物中剂量组）、低剂量羌活鱼水提物＋DMEM/F12培养液＋成骨分化诱导液＋5%FBS（羌活鱼水提物低剂量组）培养基培养。应用碱性磷酸酶（ALP）活性、钙盐沉积量及钙化结节数检测成骨分化程度。采用SPSS 16.0软件包对数据进行单因素方差分析。结果：羌活鱼水提物含药血清组较生理盐水对照组表现出高ALP活性、高钙盐沉积量、高骨钙素分泌量。结论：羌活鱼水提物含药血清可提高成骨性诱导液诱导BMSCs成骨分化的能力,表现出高ALP活性及基质矿化能力,在BMSCs成骨分化中可起到重要作用。