谷氨酰胺对腹腔感染肠黏膜屏障的保护作用

目的 观察腹腔感染时肠黏膜屏障功能的变化,探讨谷氨酰胺(GLN)对腹腔感染肠黏膜屏障功能的影响.方法 90只SD大鼠随机分为三组,每组30只.假手术对照组:仅行单纯剖腹手术;腹腔感染组:采用盲肠结扎加穿孔法(CLP)手术制作严重腹腔感染模型;GLN治疗组:行CLP后每天灌胃GLN,剂量为0.5g·kg-1·d-1;分别于成模后1、3、7d 3个时相点各观察大鼠10只,检测血浆二胺氧化酶(DAO)、D乳酸、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、内毒素(ET)和尿甘露醇与乳果糖比值(L/M)的变化.结果 腹腔感染组大鼠各个时相的DAO、D乳酸、L/M、IL-6、TNF-α和ET与假手术组比较有显著增高(P＜0.05);GLN治疗组与腹腔感染组比较,1d时IL-6、TNF-α和ET有明显下降(P＜0.05),3d和7d时DAO、D乳酸、IL-6、TNF-α和ET有显著降低(P＜0.05),7d时L/M亦明显下降(P＜0.05).结论 腹腔感染时肠黏膜通透性增加,肠黏膜屏障损害;GLN通过减少炎性介质和内毒素水平,降低肠黏膜通透性,起到保护肠黏膜屏障的作用.     

重度创伤性脑损伤后肠黏膜屏障应激性变化的模型

目的建立一种观察重度创伤性脑损伤(TBI)后肠黏膜屏障(IMB)应激性变化的模型。方法选用雄性Wistar大鼠64只,随机分为两组。TBI组(32只):采用改良的Feeney自由落体撞击法,建立TBI模型;假手术对照组(32只):只开骨窗,不行落体致伤。两组大鼠分别按术后6、12、24和48h时相点分为4个亚组(每组均为8只),观察脑组织、肠黏膜组织病理以及扫描和透射电镜下肠黏膜超微结构的变化。结果光镜下TBI组肠黏膜上皮细胞受损,电镜下还可见细胞间紧密连接较对照组明显增宽。结论用改良的Feeney自由落体撞击法,建立的重度TBI大鼠模型肠黏膜上皮细胞受损,细胞间紧密连接增宽,提示其IMB的功能的确发生了应激性损害,说明这种用来观察重度TBI后IMB应激性变化的模型是成功的。     

谷氨酰胺对肠黏膜屏障的免疫调节

肠道作为一个免疫器官,起着阻隔细菌和内毒素的屏障作用,而谷氨酰胺对维持肠黏膜上皮的生长、修复及免疫功能的改善具有理论意义和临床价值。本文就谷氨酰胺对肠屏障功能的影响及其机制的研究现状作如下综述。     

谷氨酰胺对化疗大鼠肠黏膜屏障功能影响的实验研究

目的：探讨谷氨酰胺对5-氟尿嘧啶化疗大鼠肠黏膜屏障功能的影响。方法：实验分成4组：空白对照组（A组）;5-氟尿嘧啶化疗组（B组）;5-氟尿嘧啶＋甘氨酸组（C组）;5-氟尿嘧啶＋谷氨酰胺组（D组）;比较给药后各组外周血内毒素水平,肠系膜淋巴结及肝脏细菌移位率,空肠及结肠湿重、绒毛高度、绒毛宽度、黏膜厚度等指标。结果：血内毒素水平,肠系膜淋巴结及肝脏细菌移位率B组、C组比A组、D组明显增高,有统计学差异（P〈0.05）;空肠及结肠湿重、绒毛高度、绒毛宽度、黏膜厚度B组、C组、D组较A组降低,有统计学差异（P〈0.05）。结论：谷氨酰胺对5-氟尿嘧啶化疗大鼠的肠黏膜屏障功能具有保护作用。     

谷氨酰胺对肝移植大鼠肠黏膜形态与肠黏膜免疫功能的影响

目的：探讨谷氨酰胺（glutamine,Gln）对原位肝移植后大鼠肠黏膜形态与肠黏膜免疫功能的影响。方法：健康雄性Wistar大鼠70只,随机分为正常对照组（n=10）、原位肝移植（orthotopic liver transplantation,OLT,n=30）组和ＯＬＴ+Gln组（Gln组,n=30）;正常对照组只分离肝十二指肠韧带,OLT组和Gln组按改良的两袖套法进行OLT。术前3 d、术后3 h开始Gln组受体给予肠内营养混悬液能全力+谷氨酰胺灌胃,OLT组及正常对照组受体仅给予肠内营养混悬液能全力。正常对照组于术后12 h、OLT组和Gln组于术后12、24、72 h分别取回肠肠壁组织行光镜和电镜观察肠黏膜形态及微绒毛长度测定、检测肠黏膜肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）含量、分泌型免疫球蛋白Ａ（secretory immunoglobulin A,sIgA）和肠黏膜上皮内淋巴细胞增殖活力。结果：OLT组和Gln组肠黏膜损害较正常对照组明显加重,而Gln组24、72 h肠黏膜损害较OLT组明显减轻（P＜0.01）;OLT组和Gln组肠黏膜TNF-α含量较正常对照组明显升高,而Gln组较OLT组明显下降（P＜0.01）;OLT组12、24、72 h和Gln组12、24 h肠黏膜sIgA含量、肠黏膜上皮内淋巴细胞增殖活力较正常对照组明显降低,而Gln组24、72 h较OLT组含量明显升高（P＜0.01）。结论：大鼠ＯＬＴ可引起肠组织中TNF-α表达上调、sIgA和肠黏膜上皮内淋巴细胞增殖活力下降导致肠黏膜机械屏障和免疫屏障损伤,围手术期应用Gln能抑制肝移植大鼠肠黏膜TNF-α表达,提高sIgA含量和肠黏膜上皮内淋巴细胞增殖活力而起到肠黏膜保护作用。     

谷氨酰胺对肝硬化患者肠屏障保护作用的研究

目的 探讨谷氨酰胺对肝硬化患者肠屏障功能的保护作用.方法 将40例确诊为肝硬化患者随机分为研究组(常规治疗+谷氨酰胺)和对照组(常规治疗),治疗6周后,比较各组治疗前后内毒素、二胺氧化酶、肿瘤坏死因子α、尿乳果糖/甘露醇排泄比水平的变化.结果 治疗6周后,研究组内毒素水平较治疗前降低;对照组内毒素水平治疗前后无统计学差异.治疗6周后两组尿乳果糖/甘露醇排泄比、二胺氧化酶、肿瘤坏死因子α均较治疗前降低(P<0.05).研究组各项数据在治疗前后变化幅度较对照组明显(P<0.05).结论 谷氨酰胺能够显著降低肝硬化患者血清内毒素水平,有效保护肠黏膜屏障功能.     

埃索美拉唑对大鼠创伤性脑损伤后肠黏膜屏障损伤的作用

目的 探讨埃索美拉唑对大鼠创伤性脑损伤(TBI)后应激性肠黏膜损伤的保护作用.方法 雄性Wistar大鼠54只,随机分为3组,各18只:TBI组埃索美拉唑预处理组[质子泵抑制(PPI)组],假手术组(对照组).TBI组动物制模前1 h皮下注射埃索美拉唑0.1 mg(0.25 mi/100 g),TBI组和对照组术前1 h注射等量的生理盐水(0.25 ml/100 g).各组动物分别在术后3、12、24 h心脏取血后处死(各时间点6只),处死后取脑组织和肠黏膜组织观察形态学改变,测定肠黏膜组织二胺氧化酶(DAO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛、羟自由基、髓过氧化物酶(MPO)的含量,同时检测血清中DAO活性及异硫氰酸荧光素(FITC)浓度.结果 (1)PPI组肠黏膜损伤程度较TBI组轻.(2)TBI组损伤后随时间延长血清FITC-右旋糖苷外渗逐渐增加,以24 h时间点最为明显(P＜0.01),PPI组较TBI组轻[(3720±401)ng/ml比(5230±489)ng/ml P＜0.05].(3)肠黏膜组织中DAO的活性随时间增加逐渐下降,以24 h点最为明显,PPI组下降幅度高于TBI组,血清变化与之相反.(4)TBI组肠黏膜组织中SOD、GSH随时间延长逐渐下降,以24 h点最为明显(P＜0.05),PPI组SOD和GSH分别高于TBI组(U/mgprot:13.0±2.4和208±48比10.2±2.8和140±46,均P＜0.05).(5)TBI组肠黏膜组织中羟自由基、丙二醛、MPO随时间延长逐渐升高,以24 h点最为明显(P＜0.05),PPI组羟自由基、丙二醛和MPO均低于TBI组(U/mgprot:108±8、6.2±0.6、1.53±0.52比150±8、7.7±0.9、1.93±0.53,均P＜0.05).结论 创伤性脑损伤可能导致应激性肠黏膜损伤,氧自由基在致肠黏膜损伤中起重要作用,埃索美拉唑通过抗氧化和抑制中性粒细胞活性可以减轻应激性肠黏膜损伤.     

地塞米松介导肠道炎症及肠黏膜屏障功能对斑马鱼脑损伤修复的抑制作用

目的 基于斑马鱼创伤性脑损伤（traumatic brain injury, TBI）后的可再生性修复功能,探究地塞米松（dexamethasone, Dex）处理对斑马鱼视顶盖损伤处细胞增殖的影响及损伤后恢复的作用及其机制。方法 通过对斑马鱼进行地塞米松预处理（5 mg/L和15 mg/L）和视顶盖损伤,分别构建4组模型:空白组,损伤组,5 mg/L Dex+损伤组,15 mg/L Dex+损伤组。采用免疫荧光检测损伤处增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）的表达;实时荧光定量PCR检测肠道中炎症相关分子（TNF-α、IL-6、TLR-2）及肠黏膜屏障相关分子（MUC2.1、DEFBL1、OCCLUDIN、TJP2α）mRNA表达。结果 损伤组损伤侧视顶盖周围PCNA阳性细胞数在损伤后48 h（48 hours post injury, 48 hpi）时较未损伤侧明显增多（P < 0.01）,而Dex（5 mg/L和15 mg/L）预处理+损伤组视顶盖细胞增殖则受到明显抑制。损伤组肠道中肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor-α, TNF-α）、白介素-6（interleukin-6, IL-6）在48 hpi明显回复表达,而15 mg/L Dex+损伤组肠道炎症因子的表达则受到明显抑制。Toll样受体2（toll-like receptor 2, TLR-2）mRNA表达水平在损伤组48 hpi表达明显升高,而Dex处理显著抑制其表达。Dex抑制黏液素2.1（mucin 2.1, MUC2.1）在48 hpi的升高表达。β防御素样肽-1（defensin beta-like 1, DEFBL1）、紧密连接蛋白（occludin, OCCLUDIN）在12 hpi呈现被抑制表达。结论 Dex可通过介导肠道炎症及肠黏膜屏障功能,抑制斑马鱼创伤性脑损伤后损伤部位的再生性细胞增殖过程,抑制损伤修复。     

肝素保护肠黏膜屏障的实验研究

目的 探讨肝素对烫伤鼠肠黏膜屏障的影响.方法 雄性Wistar大鼠70只(体重200~250 g)随机分为无烫伤组10只,烫伤组及烫伤后使用肝素组(肝烫组)各30只.用沸水制成大鼠背部35%Ⅱ°烫伤,肝烫组于烫伤后立即、4 h、8 h皮下注射硫酸肝素100μ·kg-1,烫伤组和无烫伤组相同时相皮下注射等量生理盐水.烫伤组、肝烫组分别于烫伤后8 h、12 h、24 h处死动物,无烫伤组8 h全部处死.大鼠FITC-D灌胃测定肠粘膜通透性,穿刺腹主动脉测血浆IL-6、IL-8.结果 烫伤后大鼠门静脉FITC-D标记的葡聚糖及血浆IL-6、IL-8与正常组相比均显著升高(P<0.01).使用肝素后,门静脉FITC-D标记的葡聚糖及血浆IL-6、IL-8均明显下降,分别与烫伤组8 h、12 h、24 h相比有显著差别.结论 烫伤可导致大鼠肠粘膜损伤,肠粘膜通透性增加,血浆IL-6、IL-8升高;肝素可以保护应激状态下的肠粘膜屏障,抑制炎症因子IL-6、IL-8 的产生,减轻全身炎症反应,保护脏器功能.     

谷氨酰胺与肠屏障

谷氨酰胺作为一种条件必需氨基酸，在各组织、脏器中的作用日益受到重视。近年来．在疾病状态下的营养支持已发展至使用器官特异性(organ—specific)和组织特异性(tissue—specific)的个体化氨基酸，如支链氨基酸用于抑制肌肉蛋白质的分解，精氨酸用于对免疫功能的促进作用。谷氨酰胺(Gln)则因其可作为肠粘膜细胞等快速生长和分化细胞的主要能源(respiratory)，用于维持肠粘膜的结构和功能。     

谷氨酰胺双肽对肝硬化患者肠屏障功能的影响

目的评价肝硬化患者肠黏膜屏障功能及静脉补充谷氨酰胺双肽对其的影响。方法43例肝硬化患者随机分为两组,均给予等氮等热量营养支持10d;研究组22例,给予谷氨酰胺双肽0．3g／（kg·d）,剩余氮量由平衡氨基酸提供;对照组21例,仅由平衡氨基酸提供氮源。采用分光光度法定量检测两组患者治疗前后外周血中二胺氧化酶（DAO）和内毒素（ETX）水平。另以15例健康志愿者作为正常组。结果肝硬化患者组DAO及ETX水平显著高于正常组（P〈0．01）;研究组治疗后血DAO及ETX水平较治疗前显著降低（P〈0．05）,且显著低于对照组治疗后水平（P〈0．05）;肝硬化患者血DAO与ETX水平呈正相关（r=0．269,P〈0．05）;两组治疗过程中均未见明显不良反应发生。结论对肝硬化患者补充谷氨酰胺双肽可能有助于改善肠黏膜屏障功能,从而减少内毒素血症的发生．使用过程相对安全。     

大鼠创伤性脑损伤后胰岛素抵抗的研究

目的:探讨大鼠创伤性脑损伤后是否存在胰岛素抵抗现象.方法:采用大鼠自由落体脑损伤模型(Feeney'smodel),分别在伤前1/2h及伤后6、12、24、48、72、120h测定轻、中、重型脑损伤动物的血糖和血清胰岛素值.运用正常血糖-高血胰岛素钳夹技术,检测大鼠重型创伤性脑损伤后24h后BG60-120、GIR60-120、ISI等3个反映胰岛素敏感性的指标.结果:中、重型创伤性脑损伤后大鼠血糖含量升高的同时血清胰岛素水平升高,大鼠重型创伤性脑损伤后24hBG60-120显著地升高,GIR60-120、ISI显著地降低.结论:在重型创伤性脑损伤急性期,大鼠血糖和血清胰岛素水平均显著地升高,高水平的胰岛素未能起到相应的降低血糖的作用,与机体产生胰岛素抵抗有关.     

大鼠创伤性脑损伤后血脑屏障通透性变化的研究

目的研究大鼠创伤性脑损伤后血脑屏障（BBB）通透性的变化。方法参照Feeney’s自由落体致伤法,制作大鼠顶叶局灶皮质挫裂伤模型。应用伊文氏兰（Evans Blue,EB）示踪,测定伤后不同时点皮层和海马脑组织中EB含量;应用荧光显微镜观察皮层和海马是否存在EB的渗出。结果损伤灶皮层和同侧海马中EB含量在伤后1～6h与伤后1～7d明显增多,高峰期在3h和3d。荧光显微镜下发现血脑屏障中间期损伤灶同侧海马仍然存在EB的渗出。结论大鼠顶叶局部脑挫裂伤后,损伤灶皮层和同侧海马BBB开放呈双相性变化,BBB开放中间期仍然有很少量EB渗出。     

大鼠创伤性脑损伤后血糖与血清胰岛素变化规律的研究

目的：研究大鼠创伤性脑损伤后血糖与血清胰岛素的变化规律。方法：采用大鼠自由落体脑损伤模型(Feeney’s model)，分别在伤前1／2h及伤后6、12、24、48、72、120h测定各组动物的血糖和血清胰岛素值。结果：大鼠创伤性脑损伤后血糖升高。脑损伤程度越重，血糖升高的速度越快，峰值越高。轻型脑损伤后血清胰岛素变化不明显。中、重型脑损伤后血清胰岛素水平升高，而且脑损伤越重，血清胰岛素含量升高的速度越快，峰值越高，但血清胰岛素水平下降的时间越早，至伤后72h血清胰岛素水平有低于伤前水平的趋势。结论：创伤性脑损伤后血糖升高可能与多种升血糖激素(如肾上腺素、胰高血糖索、糖皮质激素、生长激素等)和降血糖激素(如血清胰岛素)之间的动态变化及机体存在胰岛素抵抗有关。     

CD47敲除对小鼠颅脑创伤后血管生成的影响及其分子机制

研究整合素相关蛋白（IAP）CD47敲除对小鼠颅脑创伤（TBI）后血管生成的影响,阐明其可能的分子机制。     

颅脑损伤后继发肾上腺皮质功能不全的临床研究

目的 研究各型颅脑损伤后肾上腺皮质功能不全（Al）发生情况.方法 分析48例颅脑损伤患者受伤后72h早晨8时的基础皮质醇水平;同时应用小剂量ACTH刺激实验,检测刺激后30、60min的皮质醇水平,确定Al发生情况.结果 轻型、中型、重型颅脑损伤的皮质醇浓度分别为（660.57 ±233.66）、（675.46±326.1）、1625.05±316.6）nmol/L.3组间的差异无统计学意义（P〉0.05）.Al发生率分别为0%（0/8）、17.6%（3/17）、43.5%（10/23）,3组间的差异有统计学意义（P〈0.05）.结论 颅脑损伤后基础皮质醇水平不能反应肾上腺皮质功能不全;Al在重型颅脑损伤中发生率较高.     

兔颅脑创伤后血清抗脑抗体变化及脑组织谷氨酸的表达

目的：研究家兔颅脑创伤后抗脑抗体的变化及脑组织谷氨酸的表达。方法：16只成年新西兰白兔分为两组,颅脑创伤组（n=8）、假手术对照组（n=8）,建立兔脑单侧重型液压冲击创伤模型,收集所有家兔创伤前2h及创伤后3、7、14、21、28、35、42、49d各时间点血清标本。用ELISA法检测血清抗脑抗体的浓度：用免疫组化方法检测脑组织谷氨酸（Glu）的表达。结果：在予以单侧液压打击后,颅脑创伤组家兔血清中抗脑抗体浓度增高并有峰值出现,假手术对照组抗脑抗体浓度变化则不明显,两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）;颅脑创伤组家兔脑组织Glu的表达较假手术组增高,两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：颅脑创伤后,血清中抗脑抗体与伤前相比有明显升高;颅脑创伤后脑组织Glu的表达增高,提示抗脑抗体可能是颅脑创伤后出现癫痫的原因之一。     

黄体酮对颅脑损伤大鼠脑组织中 Nogo-A、胶质纤维酸性蛋白 及胰岛素样生长因子 -1 表达影响的研究

目的 研究颅脑损伤及黄体酮干预对大鼠脑组织内 Nogo-A、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）及胰岛素样生长因子 -1 （IGF-1）表达的影响,探讨黄体酮对颅脑损伤的神经保护作用及相关机制。 方法 健康雄性 SD 大鼠 75 只,随机分为假手术组、模型 组和黄体酮治疗组,每组 25 只,并依据检测时间点进一步随机分为 1、3、7、14、28d 共 5 个亚组。假手术组大鼠仅切开顶部头皮去除颅 骨,模型组和黄体酮治疗组建立大鼠中度脑挫裂伤模型。黄体酮治疗组于建模成功 6h 后开始予黄体酮(10mg/kg)腹腔注射,1 次 /d,直 至动物处死。假手术组与模型组用等量 0.9％氯化钠注射液腹腔注射,1 次 /d,直至动物处死。通过免疫组化检测各时间点大鼠病灶周 围组织 Nogo-A、GFAP 及 IGF-1 表达水平。 结果 免疫组化结果显示,假手术组中 Nogo-A、GFAP 和 IGF-1 在各时间点均有表 达,变化幅度较小。模型组各时间点脑组织 Nogo-A、GFAP 和 IGF-1 表达阳性细胞数均高于假手术组（均 P＜0.05）,GFAP 在 3d 达 峰值,Nogo-A 和 IGF-1 在 7d 达峰值,随后逐渐下降,28d 接近原有水平。黄体酮治疗组 GFAP 表达阳性细胞数在 3d 达峰值, Nogo-A 和 IGF-1 在 7d 达峰值;Nogo-A 和 GFAP 在各个时间点的表达阳性细胞数均低于假手术组和模型组（均 P＜0.05）,而 IGF-1 峰值较假手术组和模型组更高,随后呈下降趋势,14d 时 IGF-1 表达阳性细胞数仍略高于模型组,直到 28d 才与假手术组无统 计学差异。 结论 黄体酮能抑制颅脑损伤大鼠脑组织中 Nogo-A、GFAP 表达,上调 IGF-1 表达,具有减轻轴突生长抑制和抑制胶质 瘢痕屏障形成的作用,并能促进相关神经营养因子表达,能改善颅脑损伤患者的预后。     

颅脑创伤后大鼠脑组织自噬表达变化及渥曼青霉素保护作用的研究

目的探索颅脑创伤后大鼠脑组织自噬表达变化及渥曼青霉素的保护作用,为临床治疗脑外伤提供实验依据。方法将120只健康成年雄性SD大鼠随机分为3组[假手术组（A组）、颅脑创伤组（B组）、渥曼青霉素治疗组（C组）],每组40只。B、C组使用PinPointTM精密颅脑创伤撞击器、直径4mm的打击头制作中度创伤性脑损伤模型,其中C组于建模前10min侧脑室注入渥曼青霉素（0.5滋g/kg）,B组注入含有二甲基亚砜（DMSO）的PBS（25滋l/kg）;A组暴露硬脑膜但不撞击,建模前注入含有DMSO的PBS（25滋l/kg）。采用Westernblot检测自噬相关蛋白（LC3-Ⅱ,p62）表达水平,应用大鼠行为学评分观察大鼠颅脑创伤后神经功能的变化,采用干湿法检测脑组织含水量。结果与A组相比,B组和C组大鼠在颅脑创伤后24、72、168h脑组织LC3-Ⅱ表达水平增加,p62表达水平减少,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值升高,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。与B组相比,C组大鼠在颅脑创伤后24、72、168h脑组织LC3-Ⅱ表达水平减少,p62表达水平增加,差异均有统计学意义（均P＜0.05）;伤后72、168h脑组织LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值降低（均P＜0.05）。颅脑创伤后48、72h,C组大鼠行为学评分均高于B组（均P＜0.05）。颅脑创伤后72h,B组和C组脑组织含水量均较A组明显增加（均P＜0.05）,但C组较B组明显减少（P＜0.05）。结论渥曼青霉素能明显抑制颅脑创伤后过度的自噬反应,减轻脑水肿,改善大鼠神经功能。