HPLC测定人血浆中霉酚酸及其代谢物浓度

目的建立反相高效液相色谱法,同时测定人血浆中霉酚酸（mycophenolic acid,MPA）、酚化葡萄糖醛麦考酚酸（phenol glucuronide metabolite,MPAG）、酰基化MPAG（acyl-MPAG,AcMPAG）的浓度。方法用蛋白沉淀法对样品进行处理。固定相为Zorbax Eclipse XDB C18柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相：甲醇：20 mmol-L-1 NaH2PO4（用20%磷酸调至pH 3.0）为55∶45,流速：1.2 mL-min-1,检测波长：304 nm,柱温：45℃。结果 MPA、MPAG、AcMPAG浓度在0.2~50μg-mL-1（r=0.999 7）、2.8~531μg-mL-1（r=0.999 9）、0.3~24μg-mL-1（r=0.999 4）内呈良好的线性关系。MPA及其代谢物的绝对回收率均大于80%,MPA、MPAG、AcMPAG的相对回收率分别为94.0%~101.4%,98.4%~101.9%和96.1%~104.2%。日内及日间RSD远低于15%。结论采用反相高效液相色谱法测定人血浆中MPA、MPAG、AcMPAG的浓度和进行药物代谢动力学研究,方法灵敏度高、重复性强。     

人血浆中麦考酚酸及其葡糖苷酸代谢物HPLC法测定

目的:建立HPLC测定人血浆中麦考酚酸(MPA)及其代谢物葡糖醛酸结合物(MPAG)浓度的方法。方法:以安定为内标,血浆经乙腈蛋白沉淀后直接进样。采用Zorbax Eclipse XDB C_(18)(150 mm×4.6 mm,5μm),柱温:30℃,流动相:甲醇-0.1%三氟乙酸(55:45,pH=2.2),流速:1.0 mL·min~(-1),检测波长215 nm。结果:血浆内源性杂质和常用合并用药对样品测定无干扰,MPA和MPAG血药浓度分别在0.5-40μG·mL~(-1)和2.5—200μg·mL~(-1)范围内线性关系良好。MPA和MPAG的日内、日间RSD均小于8%,样品提取后在24 h内及3次冻融后稳定性良好。结论:该法快速,简便,准确,可用于MPA和MPAG的体内分析及常规的治疗药物监测。     

高效液相色谱法测定人血浆中霉酚酸及其代谢产物的浓度

目的建立高效液相色谱法建立测定人血浆中霉酚酸(MPA)、霉酚酸葡萄糖苷(MPAG)、霉酚酸酰基葡萄糖苷(Ac MPAG)的浓度。方法血浆处理采用乙腈蛋白沉淀法。色谱柱为Gemini C18(250mm×4.6 mm,5μm),柱温为40℃。Ac MPAG、MPA采用荧光检测,流动相:甲醇-10 mmol·L-1KH2PO4(43:57,p H=8.0),荧光激发波长343 nm,发射波长425 nm。MPAG采用紫外检测,流动相:甲醇-10 mmol·L-1 KH2PO4(45:55,p H=3.0),检测波长254 nm。结果 MPA、MPAG、Ac MPAG血药浓度分别在0.2~20μg·m L-1、4.75~475μg·m L-1、0.02~2μg·m L-1内与峰面积线性关系良好。MPA、MPAG、Ac MPAG的相对回收率分别为88.1%~104.3%、95.7%~99.6%、94.2%~96.0%。日内及日间RSD均<10%。结论该方法测定人血浆中MPA、MPAG、Ac MPAG的浓度,操作简便,方法灵敏度高,适合用于MPA及其代谢产物的药动学研究及血药浓度监测。     

HPLC法同时测定人血浆中霉酚酸与霉酚酸葡糖苷酸的浓度

目的:建立以高效液相色谱法同时测定人血浆中霉酚酸(MPA)与霉酚酸葡糖苷酸(MPAG)浓度的方法。方法:色谱柱为LunaC18,流动相为(20mmol·L-1磷酸二氢钾+40mmol·L-1四丁基溴化铵(pH5·5))-乙腈=73:27,流速为1·6mL·min-1,MPA与MPAG采用二极管阵列检测器和荧光检测器串联检测,MPAG检测波长为250nm,MPA荧光检测波长为316nm(激发波长)、430nm(发射波长),柱温为38℃,其中血样加乙腈沉淀蛋白后进样10μL。结果:MPA、MPAG检测浓度分别在0·2～20(r=0·9993)、1～100(r=0·9999)μg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系,最低检测限分别为0·05、0·1μg·mL-1;平均回收率分别为95·54%、100·22%;MPA日内、日间RSD均<6%,MPAG日内、日间RSD均<4%。结论:本方法快捷、简便、灵敏,可用于测定人血浆中MPA与MPAG的浓度。     

RP—HPLC法测定肾移植病人血浆中霉酚酸浓度及其应用

目的:建立反相高效液相色谱法测定血浆中霉酚酸浓度的方法。方法:采用美国Waters高效液相色谱仪,Symmetry C18(150mm×3.9mm,5μm)色谱柱,乙腈-0,05％磷酸(34:66)为流动相,流速1.0 mL·min-1,萘普生作内标。样品在酸性条件下用氯仿漩涡混合萃取浓集后手动进样,在254 nm波长下检测,按内标法定量。结果:标准曲线在0.1-40 mg·L-1范围内有良好线性,最低检测浓度为0.1 mg·L-1,方法回收率为98.3％-100.4％,萃取回收率为88.1％-92.4％,日内测定RSD为0.98％-1.5％,日间测定RSD为1.0％-4.4％。结论:本方法可用于肾移植患者霉酚酸的血药浓度测定和药动学研究。     

RP-HPLC测定人血浆中盐酸二甲双胍的浓度

目的以RP-HPLC测定人血浆中盐酸二甲双胍的浓度。方法色谱柱为D iamosil C18(5μm,4.6 mm×250 mm),流动相为0.01 mol.L-1KH2PO4-0.006 mol.L-1SDS-乙腈(34.25∶34.25∶31.5),流速为1.0 m l.m in-1,检测波长为233 nm,内标为阿替洛尔。结果盐酸二甲双胍的线性范围为0.05~4.00μg.m l-1,回归方程为Y=1.3397X 0.0222(r=0.9999);日内精密度为1.25%~6.14%,日间精密度为0.93%~6.43%。结论本方法操作简便,测定结果准确,重复性好,可用于盐酸二甲双胍人体药代动力学研究。     

肾脏移植患者血浆霉酚酸浓度的高效液相色谱法测定

目的:建立快速测定肾脏移植血浆中麦考吗乙酯(Mycophenolate mofetil,MMF)活性代谢物霉酚酸(Mycophenolic acid,MPA)的高效液相色谱测定方法.方法:色谱条件为分析柱:Hypersil ODS2(4.6 mm×200 mm,5μm);流动相:A相:25%乙腈+75%0.02 mol/L KH2PO4缓冲液(pH 3.0),B相:70%乙腈+30%0.02 mol/L K2HPO4缓冲液(pH 6.5);梯度洗脱程序:0～14.5 min为分析梯度,霉酚酸在8.7 min出峰,继续用100%B流动相清洗4 min.流速:1.0 ml/min;检测波长254 nm;柱温30℃;进样量100 μl.9例肾脏移植患者口服MMF 1.5 g,不同时间采血,测定血浆中霉酚酸的浓度并计算药动学参数.结果:本方法线性范围为0.10～27 mg/L时,峰面积与浓度呈良好的线性关系(r=0.9998),最低检出浓度为4μg/L,方法回收率分别为97.20%、98.73%和98.61%,日内精密度和日间精密度分别为3.5%、1.7%、0.6%和5.5%、3.0%、1.1%.药代动力学参数表明霉酚酸的平均血药浓度-时间曲线符合一室开放模型,tmax,cmax和AUC0-12 h分别为0.94 h、11.30 mg/L和30.35 mg·h·L-1.结论:用高效液相色谱法梯度洗脱测定肾脏移植患者霉酚酸血药浓度,操作简便,结果准确.     

RP-HPLC测定人血浆中盐酸二甲双胍的浓度

目的以RP-HPLC测定人血浆中盐酸二甲双胍的浓度.方法色谱柱为Diamosil C18(5 μm, 4.6 mm×250 mm),流动相为0.01 mol·L-1 KH2PO4-0.006 mol·L-1 SDS-乙腈(34.25∶34.25∶31.5),流速为1.0 ml·min-1,检测波长为233 nm,内标为阿替洛尔.结果盐酸二甲双胍的线性范围为0.05～4.00 μg·ml-1,回归方程为Y＝1.3397X+0.0222(r＝0.9999);日内精密度为1.25%～6.14%,日间精密度为0.93%～6.43%.结论本方法操作简便,测定结果准确,重复性好,可用于盐酸二甲双胍人体药代动力学研究.     

肾脏移植患者血浆霉酚酸浓度的高效液相色谱法测定

目的:建立快速测定肾脏移植血浆中麦考吗乙酯(Mycophenolate mofetil,MMF)活性代谢物霉酚酸(Mycophenolic acid,MPA)的高效液相色谱测定方法.方法:色谱条件为分析柱:Hypersil ODS2(4.6 mm×200 mm,5μm);流动相:A相:25%乙腈 75%0.02 mol/L KH2PO4缓冲液(pH 3.0),B相:70%乙腈 30%0.02 mol/L K2HPO4缓冲液(pH 6.5);梯度洗脱程序:0～14.5 min为分析梯度,霉酚酸在8.7 min出峰,继续用100%B流动相清洗4 min.流速:1.0 ml/min;检测波长254 nm;柱温30℃;进样量100 μl.9例肾脏移植患者口服MMF 1.5 g,不同时间采血,测定血浆中霉酚酸的浓度并计算药动学参数.结果:本方法线性范围为0.10～27 mg/L时,峰面积与浓度呈良好的线性关系(r=0.9998),最低检出浓度为4μg/L,方法回收率分别为97.20%、98.73%和98.61%,日内精密度和日间精密度分别为3.5%、1.7%、0.6%和5.5%、3.0%、1.1%.药代动力学参数表明霉酚酸的平均血药浓度-时间曲线符合一室开放模型,tmax,cmax和AUC0-12 h分别为0.94 h、11.30 mg/L和30.35 mg·h·L-1.结论:用高效液相色谱法梯度洗脱测定肾脏移植患者霉酚酸血药浓度,操作简便,结果准确.     

HPLC法同时测定霉酚酸及其代谢产物的方法学研究

目的 建立测定器官移植患者血浆中霉酚酸（Mycophenolic acid,MPA）与其代谢物（霉酚酸葡萄糖苷,MPAG和霉酚酸酰基葡萄糖苷,AcMPAG）的一种新颖简单的高效液相色谱（high performance liquid chromatography,HPLC）方法.方法 以10%的偏磷酸为沉淀剂采用蛋白沉淀的方法提取血浆中的待测物,MPA的类似物（the carboxybutoxy ether of MPA,MPAC）被用作内标物质.色谱分析条件是以乙腈和磷酸缓冲液（pH2.7）作为流动相的梯度洗脱,流速1.2 mL·min-1,紫外检测波长为254 nm.结果 所有待测物基线分离好,在待测范围内与峰面积线性关系良好（r2≥0.999）,方法精密（日间和日内变异度均≤6.02%）且准确（日间和日内准确度均在92.17% ~104.78%之间）.MPA、MPAG和AcMPAG在血浆中的回收率分别超过83.11%、98.62% 和93.94%,最低检测限则分别为0.1、0.2、0.1 mg·L-1.三种物质的在酸化过的血浆中,室温放置6 h、4℃条件下放置12 h、-40℃条件下放置4周及反复冻融三次均稳定无明显降解.提取后的三种物质在进样盘中放置至12 h同样稳定无降解.结论 该方法简便、灵敏且准确,可应用于MPA与其代谢物的临床监测.     

高效液相色谱法测定人血浆中霉酚酸的浓度

目的建立用高效液相色谱测定人血浆中霉酚酸浓度的方法。方法采用SUPELCOSIL C18色谱柱（4.6mm×250 mm,5μm） 流动相：乙腈-0.01 mol.L-1磷酸二氢钾（pH=3.0）溶液（40∶60,v/v） 流速：1.0mL.min-1 检测波长：254 nm。结果霉酚酸在0.4~51.2 mg.L-1线性关系良好（r=0.999 3）,最低检测浓度为0.4 mg.L-1,霉酚酸低、中、高浓度检测的日内、日间RSD分别为2.22%、5.15%、4.13%和1.75%、6.75%、3.35%。结论该法具有操作简便可靠、准确、稳定性高等特点,适合应用于霉酚酸的治疗药物监测和药动学研究。     

兔血浆中霉酚酸酯的活性代谢物霉酚酸的HPLC测定及其药代动力学研究

目的建立霉酚酸兔血药浓度测定方法 ,并进行了灌胃后药代动力学研究。方法采用HPLC 二极管阵列检测器测定血药浓度。血样采用乙醚萃取 ;色谱柱 :HypersilODS2 (2 0 0mm×4 6mm ,5 μm) ;流动相 :0 0 5mol·L-1KH2 PO4 CH3 CN(5 5∶45 ,pH 2 5 ) ;检测波长 :2 1 5nm ;流速 :1 0mL·min-1。结果霉酚酸血药浓度线性范围为 0 1 6～ 1 9 98μmol·L-1(r =0 9996,n =8) ,血浆最低检测浓度为 0 0 3 μmol·L-1,高、中、低 3种浓度平均回收率分别为 :(1 0 3 2 5± 6 3 2 ) %、(99 63± 2 75 ) %、(1 0 2 47± 3 1 8) % ,兔灌胃后主要的药代动力学参数分别为 :达峰浓度cmax为(8 2 7± 6 1 2 ) μmol·L-1,达峰时间tmax为 (0 49± 0 1 7)h ,消除半衰期t1/ 2 为 (3 1 2± 0 94)h ,药时曲线下面积AUC0 -t为 (1 3 0 8± 9 0 8) μmol·h·L-1,AUC0 -∞ 为 (1 3 80± 8 93 )mg·h·L-1。结论为霉酚酸的血药浓度监测及药动学研究提供了实验方法。     

HPLC测定肾移植患者血浆中的霉酚酸

目的 采用HPLC法测定肾移植患者血浆中的霉酚酸酯活性代谢物霉酚酸.方法 采用Symmetry C18柱(150 mm× 3.9 mm,5μm),流动相为乙腈-32 mmol· L-1甘氨酸缓冲液(pH9.2)(17∶83),柱温30℃,流速1.0 mL· min-1,用荧光检测法,激发波长342 nm,发射波长425 nm,进样量为20 μL.结果 霉酚酸0.01 ～40.00 μg·mL-1与峰高的线性关系良好(r=0.999),最低定量限为0.01μg·mL-1;提取回收率、加样回收率分别为92.29％ ～ 95.01％、100.69％ ～ 110.57％,日内、日间RSD均＜8％.结论 所用方法灵敏、快速、准确,符合生物样品分析方法的基本要求,适用于霉酚酸血药浓度的测定.     

反相高效液相色谱法测定人血浆中罗红霉素的浓度

目的:建立测定人血浆中罗红霉素浓度的反相高效液相色谱方法。方法:采用Agilent C_(18)分析柱(150 mm×4.6 mm,3.6μm),以甲醇-0.02 mol·L~(-1)乙酸铵(68:32,用氨水调pH至7.4)为流动相,流速0.8 ml·min~(-1),紫外检测波长210 nm,柱温55℃,血浆样品碱化后用乙醚提取2次,以克拉霉素为内标。结果:罗红霉素的保留时间为6.2 min,线性范围为0.25～33μg·ml~(-1)(r=0.999 7),最低检测限4 ng,方法回收率在96.2%～100.1%之间,日内、日间RSD均小于4%。结论:该法简便快速、准确灵敏、重现性好,适用于罗红霉素血药浓度测定。     

HPLC法同时测定人尿液中霉酚酸及其代谢物葡糖苷酸结合物的浓度

目的用HPLC测定人尿液中霉酚酸(MPA)及其代谢物葡糖苷酸结合物(MPAG)的浓度。方法分析柱为Zorbax Eclipse XDB-C8(150 mm×4．6mm,5μm);流动相为甲醇-0．1％三氟乙酸溶液(55:45,V／V);尿稀释5倍后直接进样。MPAG采用紫外检测,检测波长为250nm;MPA采用柱后添加0．2 mol·L-1 NaOH溶液进行荧光检测,荧光激发波长325 nm,发射波长435 nm。结果MPA和MPAG的线性范围分别为0．1-50 mg·L-1和10-500 mg·L-1,MPA、MPAG日内和日间RSD均<10％。结论此法能简便、灵敏、准确地测定人体尿液中MPA与MPAG的浓度,可用于临床药动学研究和治疗药物浓度监测。     

HPLC法测定人血浆中霉酚酸的浓度及药动学研究

目的:建立以高效液相色谱法测定人血浆中霉酚酸浓度的方法,并对其在人体内的药动学参数进行研究。方法:霉酚酸血浆样品经甲醇沉淀后直接进样测定,其中色谱柱为Symmetry Shield C18,流动相为乙腈-水-三乙胺(40∶60∶0.3),流速为1.0mL·min-1,柱温为30℃,测定波长为218nm,进样量为20μL。结果:霉酚酸检测浓度在0.2~50mg·L-1范围内与峰面积积分值线性关系良好(r=0.9996),定量下限为0.2mg·L-1;平均方法回收率为101.94%,平均提取回收率为87.06%;日内、日间RSD均<6%。另,人体药动学研究表明,霉酚酸在体内存在肠肝循环导致双峰出现,人体过程符合单室开放模型。结论:本方法简便、灵敏、专一、准确、精密,可用于霉酚酸的药动学研究。     

HPLC测定大鼠血浆中的丁香酚

目的 建立测定大鼠血浆中丁香酚的HPLC法.方法 流动相为甲醇-0.5％冰醋酸(63:37),采用Allsphere ODS-2RP-18色谱柱(250 mm× 4.6 mm,5μm),流速0.8 mL· min-1,检测波长280nm,柱温30℃.结果 丁香酚0.0895～11.445 μg· mL-1与峰面积比的线...     

反相高效液相色谱法测定人血浆中水飞蓟宾的浓度

目的 :建立测定人血浆中水飞蓟宾浓度的反相高效液相色谱法。方法 :血样在pH 8 5条件下经乙醚提取后 ,采用 μBondapakC18(30 0mm× 4 6mm)色谱柱 ,甲醇 -乙腈 -磷酸盐缓冲液 (pH 3 0 ) (2 9∶2 0∶5 1)为流动相 ,以萘酚为内标 ,检测波长 2 88nm。结果 :水飞蓟宾在 3 6 95～ 2 36 5ng·mL-1范围内线性相关 (r =0 9998) ,方法回收率为 96 5 % ,日内、日间RSD均小于 2 3% (n =3)。结论 :方法简便快速、灵敏度高 ,适用于该药的临床药理研究