地塞米松诱导大鼠胸腺细胞凋亡

细胞凋亡是细胞受到特异刺激后启动内在“自杀”程序而引起的一种控制性死亡。为观察糖皮质激素对免疫器官──胸腺的调节作用,本文加地塞米松与大鼠胸腺细胞共同孵育,胸腺细胞是现了凋亡的典型形态学改变;提取该培养细胞的ＤＮＡ进行琼脂糖凝胶电泳可见典型“阶梯状”条带,提供了该细胞发生凋亡的生物化学依据。本研究结果表明糖质激素能诱导胸腺细胞凋亡。     

右归丸对糖皮质激素诱导的胸腺细胞凋亡的保护作用

目的：探讨右归丸对激素诱导的小鼠胸腺细胞凋亡的保护作用及机制。方法：采用Annexin V／PI双染法检测糖皮质激素及右归丸干预后小鼠胸腺细胞凋亡比例变化；同时采用RT-PCR法检测凋亡相关基因Bcl-2、BaxmRNA的表达状态。结果：激素处理小鼠的胸腺细胞凋亡比例较正常对照小鼠明显上升（P〈0．01），右归丸干预后小鼠胸腺细胞凋亡率则明显下降（P〈0．01）；同时，激素处理小鼠胸腺细胞Bcl-2的表达下调，Bcl-2／BaxmRNA比值随之下降；而右归丸干预后Bcl-2mR-NA转录水平明显高于激素处理小鼠（P〈0．01），Bax的表达虽无明显改变，Bcl-2／Bax比值较激素处理小鼠明显增高（P〈0．05）。结论：右归丸可明显抑制激素诱导的胸腺细胞凋亡，其机制与逆转激素诱导的Bcl-2／Bax表达失衡密切相关。     

瘦素对LPS诱导的小鼠胸腺细胞凋亡的保护作用

目的：观察瘦素对小鼠胸腺细胞凋亡的保护作用，探讨其作用机制。方法：取出小鼠胸腺细胞，用MTT法检测瘦素对胸腺细胞的毒性作用，采用Annexin V／PI双染色法流式细胞仪检测细胞凋亡，以RT-PCR检测caspase 3 mRNA的表达。结果：瘦素可呈剂量依赖性的减少LPS对胸腺细胞的毒性作用，流式细胞仪检测表明瘦素可抑制LPS诱导的细胞凋亡，其浓度〉100ng／ml时有统计学意义。RT-PCR表明加入瘦素后caspase3的表达下降，且呈剂量依赖性。结论：瘦素对LPS诱导的胸腺细胞凋亡有一定的抑制作用。     

参麦对小鼠烧伤后胸腺细胞凋亡的保护作用及机制探讨

参麦对小鼠烧伤后胸腺细胞凋亡的保护作用及机制探讨湖南医科大学病理生理教研室（长沙４１００７８）阳剑波邓恭华尢家马录罗正曜本文研究参麦是否具有防止小鼠烧伤后胸腺细胞凋亡的作用，并从ＢＣＬ－２蛋白含量（长寿基因蛋白产物）方面探讨其作用机制。成年昆明纯种健...     

地塞米松诱导小鼠胸腺细胞线粒体去极化与凋亡进程研究

目的研究地塞米松(DEX)诱导小鼠胸腺细胞凋亡进程中线粒体去极化作用特点。方法无菌获取Balb/c小鼠胸腺细胞,设对照组和DEX组;在5 h时点,利用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;利用DiOC6(3)/PI双染流式细胞术检测细胞线粒体去极化与死亡;利用DiOC6(3)/Annexin V-PE双染流式细胞术检测凋亡过程中的去极化现象。结果在1×10-6mol/L DEX诱导下,小鼠胸腺细胞在5 h凋亡百分率为(36.20±5.11)%,对照组为(4.10±0.98)%,差异显著(P<0.01);DEX组坏死百分率为(4.07±0.24)%,对照组为(1.25±0.25)%,差异显著(P<0.01)。DEX组线粒体去极化增强仍存活的细胞所占百分率为(46.77±6.21)%,显著高于对照组的(12.80±4.55)%(P<0.01)。DEX组线粒体去极化增强且已启动凋亡的细胞为(35.34±4.19)%,显著高于对照组的(7.21±0.61)%(P<0.01)。DEX组线粒体去极化作用增强未凋亡的细胞为(13.68±1.27)%,显著高于对照组的(6.85±0.92)%(P<0.01)。结论DEX诱导小鼠胸腺细胞发生典型细胞凋亡和线粒体去极化增强,在该进程中,线粒体去极化增强发生在细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻之前。     

阻断ERK途径对地塞米松诱导胸腺细胞凋亡中线粒体膜电势的影响

目的： 研究阻断ERK途径对地塞米松（DEX）诱导的胸腺细胞凋亡中线粒体膜电势的影响。 方法： 利用PD098059（PD）阻断小鼠胸腺细胞ERK途径，分别设对照组（control）、单纯PD组（PD only）、DEX组和PD＋DEX组；在3 h、5 h和7 h时点，利用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡；在3 h、7 h和11 h，利用JC-1染色流式细胞术检测线粒体膜电势（△ψm）变化。 结果： 在1 μmol·L-1 DEX刺激下，小鼠胸腺细胞在3 h、5 h和7 h凋亡率分别为(19.63±0.35)%、(41.84±1.67)%和(67.00±2.43)%，对照组分别为(4.98±0.39)%、(6.08±0.33)%和(9.31±0.34)%，差异显著（P<0.01）；相同时点下，PD only组细胞凋亡率分别为(7.95±0.60)%、(10.69±0.48)%和(22.20±1.24)%，显著高于对照组（P<0.01）；PD＋DEX组在3 h和5 h时点细胞凋亡率显著高于DEX组（P<0.01），而在7 h时点，两组差异不显著（P>0.05）。在3 h、7 h和11 h，DEX组△ψm降低的细胞比率分别为(21.23±1.43)%、(55.34±1.78)%和(70.88±2.87)%，对照组分别为(5.25±1.22)%、(8.01±0.97)%和(12.88±1.10)%，差异显著（P<0.01）；相同时点下，PD only组△ψm降低的细胞比率分别为(11.09±2.00)%、(16.21±2.25)%和(21.15±3.70)%，显著高于对照组（P<0.01）；PD＋DEX组在3 h和5 h时点细胞凋亡率显著高于DEX组，分别为(30.55±2.99)%和(65.22±4.32)%（P<0.01），11 h时点两组差异不显著（P>0.05）。 结论： DEX诱导小鼠胸腺细胞凋亡至少部分通过ERK途径，阻断ERK途径在该凋亡过程中具有重要生物学意义。     

组织胺及地塞米松引胸腺细胞凋亡的研究

近来发现糖皮质激素在体内外均可诱导胸腺细胞凋亡，这就使Ｔ细胞在胸腺中成熟过程的细胞凋亡的调节机理变得复杂。为了发现其它因素对Ｔ细胞在胸腺成熟过程的影响及探讨其可能机理，本实验研究了组织胺与地塞米松诱导胸腺细胞凋亡。取Ｓｐａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ大鼠胸腺细胞，分别与组织胺、地塞米松、雷尼替丁及组织胺＋雷尼替丁体外培养。在０，６，２４及４８小时取培养细胞。用台盼蓝染色计死亡细胞，吖啶橙细胞核染色观察凋亡细胞形态。二苯胺法及ＤＮＡ电泳检测ＤＮＡ断裂片段。结果表明，６小时以前组织胺及地塞米松主要使细胞ＤＮ…     

地塞米松诱导小鼠胸腺凋亡的形态学及组织化学研究

地塞米松诱导小鼠胸腺凋亡的形态学及组织化学研究陈英杰孙品伟朱小辉（北京医科大学组织学与胚胎学系）采用半薄切片技术研究小鼠胸腺内细胞凋亡。对ＢＡＬＢ／ｃ小鼠腹腔内注射地塞米松诱发胸腺细胞凋亡，制成凋亡模型。于注射后１、７、１５、１９、３０ｈ取材，常规电...     

IL—2,IL—6对地塞米松诱导小鼠胸腺细胞凋亡的调节作用

目的：以Ｄｅｘ诱导小鼠胸腺细胞凋亡为模型,研究细胞因子（ＩＬ－２、ＩＬ－６）对小鼠胸腺细胞凋亡的调节作用。方法：应用ＰＩ法检测亚二倍体细胞,二苯胺法测定胸腺细胞片段化ＤＮＡ含量（％）,ＤＮＡ凝胶电泳,流式细胞计分析胸腺细胞表型、测定高钙细胞百分比。结果：发现地塞米松（Ｄｅｘ）与小鼠胸腺细胞共同培养引起细胞凋亡,胸腺细胞减少以ＣＤ４^ ＣＤ８^ 细胞最明显。细胞凋亡具有时间效应并与Ｄｅｘ浓度有关。３～４     

IL—2,IL—6对地塞米松诱导小鼠胸腺细胞凋亡的调节作用

目的：以Ｄｅｘ诱导小鼠胸腺细胞凋亡为模型，研究细胞因子（ＩＬ－２、ＩＬ－６）对小鼠胸腺细胞凋亡的调节作用。方法：应用ＰＩ法检测亚二倍体细胞，二苯胺法测定胸腺细胞片段化ＤＮＡ含量（％），ＤＮＡ凝胶电泳，流式细胞计分析胸腺细胞表型、测定高钙细胞百分比。结果：发现地塞米松（Ｄｅｘ）与小鼠胸腺细胞共同培养引起细胞凋亡，胸腺细胞减少以ＣＤ４^ ＣＤ８^ 细胞最明显。细胞凋亡具有时间效应并与Ｄｅｘ浓度有关。３～４     

白色念珠菌诱导小鼠胸腺细胞凋亡

目的　研究白色念珠菌（ 白念菌） 在体内对小鼠胸腺细胞凋亡的诱导作用。方法　小鼠经尾静脉注射白念菌后,以流式细胞仪（ＦＣＭ） 分析、ＤＮＡ 琼脂糖凝胶电泳分析及细胞形态学改变为指标检测细胞凋亡。静脉注射ＮＯＳ 抑制剂观察对白念菌诱导胸腺细胞凋亡的影响。结果　白念菌能诱导小鼠胸腺细胞产生特征性的细胞凋亡形态学改变;流式细胞仪分析显示特征性的凋亡峰;琼脂糖凝胶电泳显示胸腺细胞出现典型的ＤＮＡ“梯状带”;用荧光染色（ＡＯ＋ ＥＢ） 以及ＦＣＭ 检测凋亡细胞百分率,发现白念菌注射后２４ 小时,胸腺细胞凋亡百分率随白念菌剂量增加而增高;用４ ×１０６ 白念菌经尾静脉注射后,胸腺细胞凋亡百分率于６ 小时开始增高,２４ 小时达高峰,以后迅速降低;小鼠胸腺萎缩,胸腺重量于１２ 小时明显降低,且于７２ 小时达到最低水平;ＮＯＳ 抑制剂氨基胍仅能部分抑制白念菌诱导的小鼠胸腺细胞凋亡;热灭活的白念菌不能诱导胸腺细胞凋亡。结论　白念菌菌血症能诱导小鼠胸腺细胞凋亡,而且呈时间和剂量依赖性;白念菌诱导小鼠胸腺细胞凋亡有赖于真菌的代谢;白念菌诱导小鼠胸腺细胞凋亡的过程可能与ＮＯ 部分相关。     

两种小鼠胸腺基质细胞对胸腺细胞凋亡的不同作用

采用两种体外建系的小鼠胸腺基质细胞（ＴＳＣ）系，即上皮样ＴＳＣ（ＭＴＥＣ１）和树突状ＴＳＣ（ＭＴＳＣ４），观察其对胸腺细胞凋亡的影响。小鼠胸腺细胞在体外培养过程中，可自发地出现细胞凋亡的特征，表现为ＤＮＡ呈梯度断裂片段，细胞经ＦＡＣＳ分析出现亚二倍体ＤＮＡ波峰，以及Ｆｅｕｌｇｅｎ′ｓ染色镜检所见的ＤＮＡ凝聚和断裂。胸腺细胞在与ＴＳＣ共育后，在ＭＴＥＣ１组可见其凋亡过程受到抑制和存活率的增加；在ＭＴＳＣ４组，仅在共育１２至１８小时时，见到胸腺细胞凋亡加强，而其存活率不受影响。结果提示在胸腺细胞发育过程中，其阴性选择作用的主要机制之一的ＰＣＤ过程受不同来源的胸腺基质细胞的调节。     

瘦素对小鼠胸腺细胞凋亡的保护机制

目的 观察瘦素对小鼠胸腺细胞凋亡的保护机制,探讨磷酸肌醇3位羟基激酶/AKT(P13-K/AKT)和胞桨型磷脂酶XZ(cPLA2)信号转导通路是否参与瘦素保护机制.方法 以IPS诱导小鼠胸腺细胞凋亡为模型,采用Annexin V-FTTC/PI双染色法流式细胞仪检测PI3-K/AKT特异性抑制剂LY294002 和 cPLA2 抑制剂AACOCF3对细胞凋亡的影响,以RT-PCR检测cPLA2 mRNA和caspase3 mRNA的表达,用cPLA2活性试剂盒检测cPLA2的活性.结果 瘦素可以保护LPS诱导的小鼠胸腺细胞凋亡,使胸腺细胞存活率由58%上升到65%,LY294002(10 μmol/L)和AACOCF3(10 μmol/L)可以明显抑制瘦素的保护作用,使胸腺细胞的存活率分别降至60%(P＜0.05)和62%(P＜0.05).RT-PCR表明加入瘦素后cPLA2 mRNA和caspase3 mRNA的表达下降.cPLA2活性试剂盒表明leptin可抑制cPLA2的活性.结论 瘦素抑制LPS诱导的胸腺细胞凋亡同时依赖IP3K/AKT和cPLA2途径.     

扶正中药对环磷酰胺诱导胸腺细胞凋亡的影响

<正> 本文采用25g～30gKm小鼠30只,雌雄各半,随机分成O、C、A、P和AP共5组.A组用黄芪6g/(kg.d),ig;P组用何首乌每日6g/(kg.d),ig;AP组同时给黄芪和何首乌,剂量、方法同上,连续14d.以上3组均加用环磷酰胺8mg/kg,ip,隔日1次,共7次.C组为环磷酰胺对照组,O组为正常对照组.末次给药24h后取出胸腺,制成胸腺细胞悬液,分别制备流式细胞仪检测标本和透射电镜标本,并进行观察分析.结果如下:(1)流式细胞仪细胞周期分析显示,C、A、P和AP组均出现明显的低一于G_1期DNA含量的亚G_1峰-AP峰.AP峰的高低依次为AP组相似文献   

地塞米松诱导红系细胞凋亡的观察

以ＦＶＡ病毒诱导ＢＡＬＢ／ｃ小鼠脾细胞形成的红系细胞（ｅｒｙｔｈｒｏｉｄｃｅｌ）为研究对象，在红系细胞凋亡抑制剂——红细胞生成素（ＥＰＯ）存在情况下，观察了地塞米松（Ｄｅｘ）对上述细胞凋亡的诱导作用。结果表明，在一定浓度范围内，随着Ｄｅｘ作用时间的延长，细胞逐步凋亡并出现特有的ＤＮＡ梯形（ＤＮＡｌａｄｄｅｒ），而且其ＤＮＡ断裂程度与Ｄｅｘ的作用浓度呈正相关。透射电镜的结果证实，经最适浓度（５×１０－５ｍｏｌ／Ｌ）Ｄｅｘ处理后，红系细胞出现核固缩，染色质凝聚，核周隙扩大，核破裂，胞浆近膜处出现空泡以及细胞破碎等程度不同的细胞凋亡特征。说明Ｄｅｘ可拮抗ＥＰＯ的作用，有效地诱导红系细胞凋亡     

奥氮平对鱼藤酮诱导PC12细胞凋亡的保护作用

探讨非典型抗精神病药物奥氮平对鱼藤酮诱导神经元凋亡的可能保护作用及其机制。以NGF诱导后的PC12细胞作为细胞模型,采用鱼藤酮诱导细胞凋亡。用不同浓度奥氮平、氟哌啶醇预处理后,观察鱼藤酮对PC12细胞的作用,分别用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性、流式细胞仪检测细胞凋亡率、Hoechst33342染色观察细胞形态学改变,并对二者的结果进行比较。鱼藤酮以剂量依赖的方式杀死PC12细胞。鱼藤酮(6μmol/L)作用后,奥氮平(50μmol/L)组预处理48h的细胞活力显著高于对照组(无药物预处理)(P<0.05);鱼藤酮(4、6、8μmol/L)作用后,氟哌啶醇组(20、40、60μmol/L)的细胞活力均低于对照组。流式细胞仪检测结果显示,对照组、氟哌啶醇(20μmol/L)组、奥氮平(50μmol/L)组、空白对照组(无药物预处理以及鱼藤酮处理)的细胞凋亡率依次为(32.2±1.3)%、(42.1±1.0)%、(14.0±1.0)%和(1.3±0.3)%。Hoechst33342染色结果显示,对照组每个视野多见凋亡细胞,细胞核裂解为碎块,氟哌啶醇组更明显;奥氮平组凋亡细胞数量较氟哌啶醇组及对照组为少。结果提示奥氮平对鱼藤酮诱导PC12细胞的凋亡具有保护作用,这可能是奥氮平和氟哌啶醇在精神分裂症病人应用中有不同的治疗效果和副作用的部分机制。     

左旋多巴诱导PC12细胞凋亡及谷胱甘肽对细胞的保护作用

目的:研究左旋多巴(L-dopa)对大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤(PC12)细胞的凋亡诱导作用并探讨其临床意义。方法:以PC12细胞为多巴胺(DA)神经元的细胞模型,利用电镜、DNA凝胶电泳结合图象分析仪、流式细胞术(FCM)等技术检测不同浓度L-dopa所致的凋亡率以及抗氧化剂谷胱甘肽(GSH)对它的影响。结果:流式术测得50 μmol/L、100 μmol/L、150 μmol/L处理组凋亡率分别为12.4%、24.4%、37.2%,与琼脂糖电泳的片断化DNA比例基本一致,与对照组(2.3%)有显著差异(P＜0.01),L-dopa与GSH合用组凋亡率2.5%与对照组比较无显著差异(P＞0.05)。结论:GSH可以阻断L-dopa 对PC12细胞的凋亡诱导作用,提示L-dopa 可能是通过氧化损害介导DA神经元凋亡,导致疗效减退。     

地塞米松影响小鼠胸腺细胞c-Myc表达以及凋亡研究

目的: 研究在地塞米松(DEX)诱导的小鼠胸腺细胞凋亡过程中c-Myc信号变化特点及其与下游caspase-3变化的相关性,以进一步探讨c-Myc在小鼠胸腺细胞凋亡过程中的作用机制。方法:以终浓度1 μmol/L地塞米松诱导小鼠胸腺细胞凋亡,通过Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术测定30 min、3 h、6 h和9 h凋亡和坏死细胞比率,在6 h时点电镜观察细胞形态,利用SDS-PAGE及Western blot检测0 min、30 min、1 h和3 h细胞内c-Myc和caspase-3信号变化特点。结果:在1μmol/L DEX诱导下,小鼠胸腺细胞在30 min、3 h、6 h和9 h凋亡比率分别为(5.70±0.46)%、(35.79±1.13)%、(50.61±2.15)%和(35.52±1.66)%,对照组分别为(5.97±0.25)%、(10.20±0.71)%、(12.10±0.66)%和(15.45±0.51)%,组间差异显著(P＜0.01)。相应DEX组坏死比率分别为(4.58±0.51)%、(4.66±0.67)%、(25.36±1.64)%和(46.99±2.67)%,对照组分别为(4.38±0.39)%、(4.19±0.73)%、(9.63±1.25)%和(13.38±0.72)%,组间差异显著(P＜0.01);电镜观察结果显示DEX处理6 h见较多典型凋亡细胞。对照组在0 min即可检测到c-Myc的明显表达,30 min略见增多,1 h和3 h呈微弱的下降趋势;DEX组c-Myc在0 min表达强于对照组,30 min最强,而在1 h和3 h显著减弱;对照组caspase-3随培养时间延长而逐渐增多,而DEX组caspase-3在0 min表达增多,30 min最多,而在1 h和3 h显著减少。结论:本研究结果提示DEX诱导的小鼠胸腺细胞凋亡呈现c-Myc介导的细胞凋亡模式,而且在该过程中c-Myc和caspase-3信号存在着反馈抑制调节的可能性。     

放线菌酮诱导大鼠胸腺细胞凋亡的电镜观察

利用透射电镜详细观察了放线菌酮体内诱导大鼠腺细胞凋亡的形态学变化。观察显示，腹腔注射放线菌酮４小时后，大鼠胸腺细胞发生凋亡，凋亡胸腺细胞胞核和胞质发生一系列形态学变化，产生凋亡小体。主要表现为染色质断裂、浓缩、边集、大部分细胞核变成花瓣状，其它细胞核变成半月状、黑洞样和空泡状；粗面内质网大量增殖，并包裹细胞成分形成自噬体；线粒体增多，嵴紊乱并空泡化。凋亡细胞及其形成的凋亡小体被其它细胞吞噬清除。结     

苯在体内诱导胸腺细胞凋亡的研究

苯是一种常见的工业毒物，也普遍存在于环境中，大量接触可导致再障，免疫功能障碍和白血病等，本文研究了苯对小鼠胸腺细胞的影响，实验观察到苯处理的小鼠胸腺明显萎缩，且与苯呈剂量和时间依赖性，与对照组相比，苯致毒小鼠胸腺细胞有以下特点：（１）透射电镜显示细胞皱缩，细胞膜空泡化，核凝缩，呈典型的细胞凋亡特征；（２）ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳呈特征性梯状图谱，片段大小为１８０ｂｐ或其倍数；（３）ＤＮＡ裂解百分率与苯