诱导性多能干细胞的诱导培养和鉴定

诱导性多能干细胞(iPS细胞)与胚胎干细胞在形态和生长特征上有许多相同之处,但iPS细胞的应用前景更为广阔。它为再生医学提供了有价值的细胞资源,使得运用病人自身细胞来治疗自己成为可能。iPS细胞诱导有许多方法 ,培养和鉴定也有其特点,本文就近年iPS的诱导培养和鉴定方面的研究进展作一综述。     

诱导性多能干细胞的研究进展及应用前景

<正>干细胞治疗被认为是21世纪治疗人类疾病最理想的模式。根据分化潜能的不同,干细胞可以分为全能干细胞、多能干细胞、专能干细胞;根据来源的不同,干细胞可分为     

诱导性多能干细胞体外定向诱导分化的研究进展

胚胎干细胞体外定向诱导分化的研究已成为发育生物学和细胞移植治疗学的研究热点,但伦理及免疫排斥问题一直阻碍胚胎干细胞（ES）的研究和临床应用。近两年,科学家成功地从多种成体细胞获得了诱导性多能干细胞（iPS细胞）,iPS细胞具有和胚胎干细胞相似的特性,由于其可来自自体成体细胞,因而可避开伦理及免疫排斥问题,是胚胎干细胞良好的替代材料,具有广阔的应用前景。iPS只有诱导分化为成熟的功能细胞才能用于疾病的治疗。主要介绍iPS细胞向成熟细胞分化的研究现状及目前存在的一些问题。     

重编程因子配比决定诱导性多能干细胞质量

据Carey BW[Cell Stem Cell,2011,9(6):588-598]报道,美国麻省理工研究人员发现,调整用于将成体细胞重编程为诱导性多能干细胞(iPSC)的转录因子水平,将极大地影响由此形成的iPSC的质量。     

诱导性多能干细胞与心血管疾病

BACKGROUND:Induced pluripotent stem cells have great prospects in tissue repair, due to the characteristic of self-renewal, multi-directional differentiation, no immunological rejection and ethics controversy. OBJECTIVE:To summarize the differentiation of induced pluripotent stem cells towards cardiomyocytes and endothelial cells, and their applications in the cardiovascular diseases. METHODS:The first author performed a data retrieval of PubMed and CNKI databases from 2000 to 2015 to search articles addressing the differentiation of induced pluripotent stem cells towards cardiomyocytes and endothelial cells, and reviewed the literatures systematically. Finally, 78 articles were chosen for further analysis. RESULTS AND CONCLUSION:Induced pluripotent stem cells can differentiate into cardiovascular cells through a variety of methods. Factors such as cyclosporin A and ascorbic acid C may improve myocardial differentiation of induced pluripotent stem cells, while vascular endothelial growth factor and basic fibroblast growth factor may improve the endothelial differentiation of induced pluripotent stem cells. Cardiovascular cells derived from induced pluripotent stem cells can be applied to build disease models in vitro, transplantation in vivo and drug screening.     

诱导性多潜能干细胞(iPS细胞)的研究进展

多潜能干细胞(pluripotent stem cells)是指具有形成人和动物个体所有类型细胞的多向分化潜能、可以不断自我更新的一类细胞,其在细胞替代治疗、基因治疗、发育生物学研究、药理及毒理学等研究领域中具有独特的作用和优越性.     

不同分化阶段诱导性多能干细胞移植实验研究进展

诱导性多能干细胞（iPSCs）是由动物体细胞重编程得到的具有胚胎干细胞特性的全能干细胞。近年来,随着多能干细胞诱导技术的不断优化以及体外分化技术的飞速发展,多种分化状态的多能干细胞被用于移植实验。我们结合最新研究进展,阐述各种分化阶段诱导性多能干细胞用于动物移植治疗的优缺点,以及最新移植方法所存在的问题。     

体细胞重编程为诱导多能干细胞

诱导多功能性干细胞(induced pluripotent stem cells,iPS细胞)是通过导入特定的转录因子(如Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4等)将体细胞诱导重编程为多能性干细胞,其功能与胚胎干细胞相似.iPS细胞的建立,在生命科学领域引起了新的轰动.目前,iPS细胞的研究领域在转录因子的优化、iPS细胞的筛选、载体的运用、体细胞种类的选择和iPS细胞的应用等方面取得突破进展,但仍然存在致癌性、效率低等一系列急需解决的问题.     

诱导性多能干细胞诱导效率和方法的研究进展

背景：将多能性基因导入人或动物成体细胞内,使其重编程为具有发育多潜能的干细胞,这类细胞被称为诱导性多潜能干细胞或诱导性多能干细胞。目前,有关诱导性多能干细胞的研究进展非常迅速。 目的：综述诱导性多能干细胞在转化效率及优化诱导方法等方面的研究进展。 方法：应用计算机检索Medline数据库(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/Pubmed),检索时间范围为2006-01/2010-07,检索词为“induced pluripotent stem cells”,限定文章语言为English。共检索1 831篇文献,选用其中57篇进行综述。 结果与结论：诱导性多能干细胞的研究对生命科学产生了十分重大而深远的影响,成为干细胞领域新的研究热点,并在细胞重编程机制、诱导效率的提高、诱导方法的改进、细胞来源的扩大及向功能细胞的分化等方面取得了许多重要的进展。这些研究成果为最终的诱导性多能干细胞技术应用于临床细胞替代治疗奠定基础。     

人诱导性多能干细胞向神经干细胞分化的方法探讨

目的:探讨人诱导性多能干细胞(iPS细胞)体外定向分化为神经干细胞(NSCs)的方法。方法:人iPS细胞悬浮培养4 d形成的拟胚体(EB)经维甲酸(RA)诱导4 d,诱导后的EB在无血清培养基中筛选并扩增培养。倒置显微镜下观察诱导后细胞的形态变化,RT-PCR检测iPS细胞多能性基因Nanog、Oct4和Sox2的表达,免疫荧光法检测NSCs特异性标志物Nestin、神经元标志物β-tubulinⅢ和神经胶质细胞标志物GFAP的表达。结果:(1)人iPS细胞在饲养层细胞上稳定传代,表达多能性基因Nanog、Oct4和Sox2,去除饲养层后悬浮培养能形成球形EB;(2)经RA诱导后的EB在无血清培养基中筛选培养第1 d贴壁生长,周围爬出细胞;第3 d,在高倍镜下可见中央聚集的细胞呈环形的rosette结构,rosette结构增多到第7 d达高峰。对照组未观察到rosette结构。随后大部分rosette细胞脱离瓶壁悬浮生长,形成神经球样克隆。免疫荧光显示神经球呈nestin阳性表达。贴壁培养的神经球能分化成β-tubulinШ和GFAP阳性细胞。结论:RA诱导结合无血清培养基筛选法能诱导iPS细胞高效分化为NSCs。     

血液细胞重编程为诱导性多能干细胞的研究进展

诱导性多能干细胞（iPSCs)技术能够将已分化的体细胞反转为多能细胞,因其不存在伦理、排斥等问题,在再生医学领域具有广阔的应用前景。尽管已经建立了来源于多种体细胞的诱导性多能干细胞,但是能实际应用于临床、取材便利、诱导安全的供体来源仍然具有局限性。我们从血液细胞作为供体细胞进行重编程的特点、优势及应用等方面进行了综述。     

小鼠诱导性多能干细胞的神经细胞分化与突触连接的建立及其功能分析

目的探讨小鼠诱导性多能干细胞(i PSCs)在体外某些因素的诱导下能否分化成功能性的神经细胞,以及神经细胞之间突触的发生与建立。方法首先将i PSCs悬浮培养形成拟胚体,利用维甲酸(RA)将其诱导分化成神经前体细胞,最后撤去RA贴壁培养,利用免疫荧光染色技术观察小鼠i PSCs在体外分化成神经细胞以及神经细胞之间突触发生的形态特征,利用FM1-43染色技术分析突触末端的功能活性。结果小鼠i PSCs能够在RA的诱导下向神经细胞分化,这些神经细胞可以被成熟神经元与胶质细胞标记物标记,新分化的神经元还可以观察到树突棘及突触连接的形成,在去极化刺激下突触活动增强,表现为轴突末端大量FM1-43阳性内吞颗粒。结论由小鼠i PSCs分化而来的神经细胞在体外形成突触连接的过程,提示其可以进一步分化为功能性的神经元和神经胶质细胞。     

脐带多能干细胞的分离与鉴定

目的 探讨人脐带多能干细胞的分离、扩增方法,鉴定其免疫表型与分化潜能.方法 用Ⅰ型胶原酶消化华通胶(Wharton's jelly)获取细胞,用L-DMEM培养,MTT检测细胞增殖曲线,流式细胞仪检测免疫表型与细胞周期,向脂肪、骨及软骨方向诱导分化,并通过RT-PCR及特异性染色鉴定其分化能力.结果 人脐带华通胶中可获得成纤维样细胞,原代培养后12～16 d达80%～90%融合,传代后可维持未分化状态并稳定增殖,细胞倍增时间为(31.11±2.45)h,体外增殖达10代以上.细胞群中约85.84%处于G0/G1期,S G2 M期占14.16%.表面标记分析显示:CD29、CD44、CD73(SH3)、CDgO、CD105(SH2)阳性,SSEA-4弱阳性,CD31、CD34、CD45和HLA-DR阴性.体外诱导实验表明:细胞具有体外成脂肪、成软骨和成骨能力.结论 脐带是成体干细胞的新来源,从脐带中分离的多能干细胞具有间充质干细胞的生物学特性.     

人诱导性多能干细胞定向分化为神经干细胞的实验研究

目的 观察人诱导性多能干细胞（iPS细胞）定向分化为神经干细胞（NSCs）的潜能。方法 用维甲酸（RA）诱导人iPS细胞向NSCs分化。倒置显微镜下观察iPS细胞的形态变化,RT-PCR检测NANOG, OCT4, SOX2的表达;免疫组织化学方法检测NESTIN、SOX2、β-TUBULIN Ш和GFAP的表达。结果RA诱导后第4天,贴壁的拟胚体出现了早期神经祖细胞特有的神经管样结构并不断增多,细胞表达神经巢蛋白NESTIN,而对照组未观察到神经管样结构。神经管样结构内的细胞能分化为β-TUBULIN Ш阳性的神经元,但GFAP阳性的星形胶质细胞少见。结论 人iPS细胞具有定向分化为NSCs的潜能,并能模拟神经发育过程。     

成体干细胞诱导多能干细胞的研究进展

通过存在于卵母细胞中的一些未确定的因子,以成年细胞对动物进行克隆证实成年细胞能被重编程为胚胎干细胞(ESCs).近年来,某些转录因子被发现具有诱导体细胞且有多潜能性的特性,从而可以在不使用卵母细胞的情况下获得性能上与胚胎干细胞大体一致的诱导多能干细胞(iPS).iPS细胞为细胞多能性机制的研究、特定疾病模型的建立以及在...     

诱导多能干细胞的研究进展

人类组织工程的最终目的 是细胞在体外生长、分化为功能组织和器官以替代、修复、维持或者增强受损组织和器官功能.胚胎干细胞由于具有体外无限扩增的能力以及分化为机体各种类型细胞的潜能而成为组织工程中首选的细胞来源.主要就应用不同转录因子Oct3/4、Sox2、c-myc、Klf4、Nanog和LIN28经逆病毒导入未经遗传修改的成纤维细胞,从而使该类细胞去分化与重编程成具有分化为其它各种类型细胞的多能干细胞的研究进展作一综述.     

诱导多能干细胞建系过程中关键转录因子的作用

通过添加OCT4、SOX2等转录因子,体外诱导细胞重编程获得诱导多能干细胞是近年干细胞领域的一大突破.OCT4、SOX2和NANOG等转录因子在启动细胞重编程、维持诱导多能干细胞多能性和决定其是否走向分化方面起了关键作用.对这些转录因子作用机制的了解,有助于细胞莺编程分子机制的进一步阐明.     

利用诱导性多能干细胞改善盲鼠的视力

据2012年10月9日Li Y（Mol Med,2012 Agu 9.doi.110.2119/molmed.2012.00242）报道,一种特殊的多能性干细胞可能能够恢复视力或者阻止视力丧失。在年龄相关性黄斑变性中,因视网膜中的细胞退化而导致中央视力丧失。     

人胚胎干细胞研究进展

胚胎干细胞（Ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ,ＥＳ）是从着床前的内细胞团（ＩＣＭ）或原始生殖细胞（ＰＧＣｓ）经体外分离培养而建立的克隆细胞系。ＥＳ细胞的特点是只生长、不分经。并保持早期胚胎发育的多能性。人ＥＳ细胞既具有其他哺乳动物ＥＳ细胞的一般特性,又有自己的特殊性。人ＥＳ细胞系的建立及开发利用具有重要意义。     

人胚胎干细胞研究进展

胚胎干细胞 (Embryonic stem cell,ES)是从着床前的内细胞团 (ICM)或原始生殖细胞 (PGCs)经体外分离培养而建立的克隆细胞系。ES细胞的特点是只生长、不分化。并保持早期胚胎发育的多能性。人 ES细胞既具有其他哺乳动物 ES细胞的一般特性 ,又有自己的特殊性。人 ES细胞系的建立及开发利用具有重要意义