芫花甘草反药组合对小鼠肝脏损伤的机制研究

目的:从肝脏转运体角度,研究芫花甘草反药组合对小鼠肝脏的损伤机制。方法:40只小鼠随机均分为正常对照(等容生理盐水)组、甘草[15 g(生药)/kg]组、芜花[15 g(生药)/kg]组、芫花与甘草1∶1[15 g(生药)/kg]组、芫花与甘草1∶3[15 g(生药)/kg]组(n=8),ig给药,每天1次,连续7 d。HE染色,光学显微镜下观察肝组织病理形态学,并统计病理分级;Western blot法检测小鼠肝脏转运体Ntcp蛋白的表达;检测小鼠肝组织中胆汁酸盐(TBA)的含量。结果:与正常对照组比较,芫花与甘草1∶1、1∶3组小鼠肝脏转运体Ntcp蛋白表达增强;芫花与甘草1∶1组肝细胞变性等级"+++"的小鼠只数增加(8只),肝细胞中TBA含量增加;芫花与甘草1∶3组小鼠肝细胞变性等级"+++""++"的小鼠只数增加(分别为2、6只)。结论:芫花甘草反药组合可诱发小鼠肝脏损伤,其机制可能与增强Ntcp表达、致TBA大量蓄积于肝脏内有关。     

甘草酸单铵对异烟肼致大鼠肝损伤的保护作用及其机制

目的:考察甘草酸单铵(MAG)对异烟肼(INH)诱导的大鼠肝损伤的保护作用及其对肝脏转运体Na⁺-牛磺胆酸共转运多肽(Na⁺-taurocholate cotransporting polypeptide,NTCP)及多药耐药相关蛋白2(multidrug resistance protein 2,Mrp2)的调节作用。方法:Wistar雄性大鼠45只,随机分为9组,即对照组,异烟肼肝损伤组(INH组),甘草酸单铵治疗组(MAG组),以上每组又各分为干预7,14,21 d组。INH组大鼠灌胃INH 60 mg·kg^-1·d^-1;MAG组大鼠灌胃MAG 45 mg·kg^-1·d^-1 3 h后灌胃INH。干预结束后,处死大鼠,通过血清生化指标、肝脏病理及Ntcp、Mrp2蛋白表达对各组大鼠进行评价对比。结果:血清生化指标与肝脏病理结果显示,INH诱导的大鼠肝损伤具有时间依赖性,而MAG对INH诱导的大鼠肝损伤具有保护作用,且存在时间依赖性;与INH组相比,MAG干预21 d对肝脏转运体Ntcp及Mrp2表达具有明显下调作用(P<0.05)。结论:MAG对INH诱导的肝损伤的保护作用可能与下调肝细胞膜转运体Ntcp与Mrp2的表达有关。     

甘草与甘遂的配伍对大鼠肠黏膜P-gp的影响

评价甘草与甘遂配伍对大鼠肠黏膜P糖蛋白 (P-glycoprotein) 的影响。通过对大鼠口服甘草煎液、甘遂煎液、甘草甘遂合煎液及其合并液1周后, 使用垂直型扩散池 (ussing chamber) 技术, 体外评价罗丹明123 (rhodamine123, R123) 和荧光素钠 (fluorescein sodium, CF) 经大鼠空肠黏膜的经时吸收方向和分泌方向的透过量和表观渗透系数。R123和CF在接受室的浓度用荧光分光光度计检测。应用实时荧光定量聚合酶链式反应技术 (real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction) 检测mdr1a基因在肠黏膜中的表达。在ussing chamber实验中, 4种药液除甘草外均具有增加R123经吸收方向 (mucosa to serosa, M-S) 透过性和减少分泌方向 (serosa to mucosa, S-M) 透过性的趋势。甘草只增加了R123吸收方向的透过, 但对分泌方向影响不大, 且均无统计学意义; 甘遂组与合煎组均使R123 S-M透过明显减少 (P < 0.01); 合并组明显增加了R123 M-S的透过 (P < 0.05)。各组的泵出比均明显降低 (P < 0.05)。而rt-pcr实验中, 评价甘遂对肠黏膜的P-gp活性的影响时, 发现大鼠灌胃7 d和14 d甘遂后, 与对照组相比都有下调mdr1a表达的趋势, 但是没有统计学意义。另外, 在评价甘草与甘遂对旁细胞转运CF影响的实验中, 甘遂组、合煎组和合并组均明显减少了CF S-M的透过 (P < 0.01); 甘遂组、合煎组和合并组则均明显减少了CF M-S的透过 (P < 0.05), 但甘草对CF转运的影响没有统计学意义。甘遂可能是一种P-gp抑制剂, 而甘草与甘遂合用后对R123透过的影响与单用甘遂相似, 可能是甘草与甘遂有协同作用, 使其毒性成分吸收增加, 这可能是两者配伍产生毒性的机制之一。     

附子-甘草对离体大鼠衰竭心脏的影响及其指纹图谱研究

目的研究附子-甘草合煎液及单煎后合并液对离体大鼠心脏的作用及其物质基础。方法使用低钙K-H液灌流制备离体大鼠衰竭心脏模型。用附子单煎、附子-甘草合煎及单煎后合并水提液分别对离体心脏进行干预。采用左室内压(LVSP)、左室内压变化速率(±dp/dt_(max))为指标,观察药物对离体大鼠心脏的作用及其量效关系;运用总量统计矩法研究附子单煎,附子、甘草合煎及附子、甘草单煎后合并液的HPLC指纹图谱及变化,探讨其作用的物质基础。结果各组在给予药液灌流10 min后,各指标的恢复率均有所升高。其中附子生药量为0.1和0.2 mg时,附子配伍甘草后各指标的恢复率均高于附子单煎液;在附子生药量0.4、0.8或1.6 mg时,附子配伍甘草后各指标的恢复率均低于附子单煎液。附子-甘草煎液指纹图谱的统计矩参数如下:附子-甘草合煎液总量一阶矩(λ_(T,i=1))的加合性为100.95%,总量二阶矩(σ_(T,i=1)~2)的加合性为96.55%,平均加合性为70.13%;附子-甘草合并液λ_(T,i=1)的加合性为97.55%,σ_(T,i=1)~2的加合性为96.92%,平均加合性为95.45%。结论若附子、甘草按1∶1配伍,在附子生药量为0.1和0.2 mg时,配伍甘草能够增加其强心作用;在附子生药量为0.4、0.8或1.6 mg时,配伍甘草则减弱其强心作用。附子-甘草合煎液与合并液的化学成分存在差异。     

海藻、大戟、甘遂和芫花分别与不同剂量的甘草配伍对小鼠肠功能的影响

目的探讨海藻、大戟、甘遂和芫花分别与不同剂量的甘草配伍对肠功能的影响。方法采用均匀设计进行分组。小鼠分别ig给予海藻甘草、大戟甘草、甘遂甘草或芫花甘草合煎液1次,分别于给药后20,60,30和20min后,再ig给予5%印度墨汁混悬液0.2ml。给予墨汁20min后处死小鼠,测定小肠推进率(IPR)。结果大戟甘草合煎液组小鼠在总给药剂量0～30g·kg-1范围内且总给药剂量一定时,随甘草剂量的增加小鼠IRP降低(R=0.7853,P<0.05)。芫花甘草合煎液组总给药剂量低于5g·kg-1时,小鼠IRP未见明显变化;总给药剂量>5g·kg-1且一定时,小鼠IRP随甘草呈剂量依赖性增加(R=0.8414,P<0.05)。海藻甘草合煎液和甘遂甘草合煎液组海藻和甘遂与甘草配伍比例的变化对IRP无明显影响。结论在一定的总给药剂量范围内,大戟甘草合煎液对小鼠肠功能的影响与配伍比例密切相关,甘草剂量增加时小鼠肠功能减弱。芫花甘草合煎液对小鼠肠功能的影响也与配伍比例密切联系,甘草剂量增加时肠功能增强。     

茯苓甘草汤对功能性消化不良模型大鼠的改善作用机制研究

目的:研究茯苓甘草汤对功能性消化不良(FD)模型大鼠的改善作用机制。方法:取SD大鼠60只,随机分为正常组、模型组、茯苓甘草汤高剂量组(20 g/kg)、茯苓甘草汤低剂量组(10 g/kg)、联用组(茯苓甘草汤10 g/kg+多潘立酮0.004 g/kg)、多潘立酮组(0.004 g/kg),每组10只。除正常组外,其余组大鼠均灌胃冰稀盐酸建立FD模型。造模结束后,正常组和模型组大鼠灌胃等体积常温蒸馏水,其余组大鼠灌胃相应常温药物溶液(1 mL/100 g),每天1次,连续7 d。测定大鼠胃内残渣量以评价胃排空功能。采用免疫组化SP法检测胃黏膜组织中水通道蛋白3(AQP3)、胃促生长素(Ghrelin)、P物质(Substance P)的蛋白表达水平;采用蛋白印迹法检测胃黏膜组织中紧密连接蛋白1(Claudin-1)、闭锁蛋白(Occludin)、血管活性肠肽(VIP)的蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠胃内残渣量明显增多(P<0.01);胃黏膜组织中AQP3、Ghrelin蛋白阳性表达明显减少,Substance P蛋白阳性表达较多;AQP3、Ghrelin、Claudin-1、Occludin蛋白表达水平显著降低,Substance P、VIP蛋白表达水平显著升高(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,各给药组大鼠胃内残渣量明显减少(P<0.05或P<0.01);各给药组大鼠胃黏膜组织中AQP3、Ghrelin蛋白阳性表达较多,Substance P蛋白阳性表达较少;各给药组大鼠胃黏膜组织中AQP3、Occludin蛋白表达水平显著升高,VIP蛋白表达水平显著降低(P<0.05或P<0.01);茯苓甘草汤高剂量组、茯苓甘草汤低剂量组和联用组大鼠胃黏膜组织中Ghrelin、Claudin-1蛋白表达水平显著升高,Substance P蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论:茯苓甘草汤可能通过对大鼠胃黏膜组织中AQP3、Ghrelin、Claudin-1、Occludin蛋白表达的上调和Substance P、VIP蛋白表达的下调,从而改善FD模型大鼠水液潴留症状。     

小儿生血糖浆联合蛋白琥珀酸铁口服溶液治疗小儿缺铁性贫血的疗效观察

目的 从药效学角度探讨甘草-大戟配伍禁忌的机制。方法 30只SD大鼠按体质量随机分成6组,每组5只,即大戟单煎液组、甘草单煎液组、甘草-大戟（1：1、2：1、3：1）合煎液组和对照组,分别ig等体积大戟单煎液（0.24 g/kg）、甘草单煎液（0.72 g/kg）、甘草-大戟1：1合煎液（甘草0.24 g/kg、大戟0.24 g/kg）、甘草-大戟2：1合煎液（甘草0.48 g/kg、大戟0.24 g/kg）、甘草-大戟3：1合煎液（甘草0.72 g/kg、大戟0.24 g/kg）和等体积生理盐水,大戟、甘草单煎液剂量设置参考《中国药典》规定的人口服剂量,根据人和大鼠体表面积比例进行换算。观察大鼠的排尿量、尿液中总蛋白含量、排便量、小肠推进率,考察甘草对大戟峻下逐水作用的影响。结果 与大戟单煎液组比较,甘草-大戟合煎液组大鼠的排尿量和排便量减少,小肠推进率降低,尿液中总蛋白浓度升高,其中,甘草-大戟（1：1、2：1、3：1）合煎液组大鼠的排便量均显著减少（P<0.05、0.01）,甘草-大戟（1：1、3：1）合煎液组大鼠的排尿量显著减少（P<0.01）,甘草-大戟（2：1、3：1）合煎液组大鼠的小肠推进率显著降低（P<0.01）,甘草-大戟（2：1、3：1）合煎液组大鼠尿液中总蛋白浓度显著升高（P<0.01）。结论 甘草与大戟配伍可明显拮抗大戟的利尿和泻下作用,影响大戟的峻下逐水功效。     

甘草酸单铵保护利福平致大鼠肝损伤的机制初探

目的: 本文基于肝细胞膜转运体多药耐药相关蛋白2(multidrug resistance protein 2, Mrp2)和Na⁺-牛磺酸钠共转运体(sodium taurocholate cotransporting polypeptide, Ntcp),初步探究甘草酸单铵(monoammonium glycyrrhizinate,MAG)对利福平(rifampicin,RIF)致大鼠肝损伤的保护作用及机制。方法: Wistar雄性大鼠随机分为3组:对照组(control组):灌胃等容量的生理盐水;RIF肝损伤组(RIF组):灌胃RIF 60 mg·kg^-1·d^-1;MAG治疗组(MAG+RIF组):灌胃MAG 45 mg·kg^-1·d^-1 3 h后灌胃RIF 60 mg·kg^-1·d^-1。给药第7,14,21天时,各组分别随机取5只大鼠分离血清测定生化指标;取肝组织做病理切片,观察肝脏组织病理学变化并进行肝组织学活动指数(HAI)评分;采用 Western blotting法检测肝组织Mrp2和Ntcp蛋白表达量。结果: 与对照组相比,RIF组给药7,14,21 d时,其部分血清生化指标呈明显上升趋势,肝脏病理学HAI分值显著增加(P<0.01);MAG+RIF组血清生化指标与对照组之间无显著差异,与RIF组相比其HAI评分显著降低(P<0.05)。给药7,14,21 d时,RIF组较对照组Mrp2的表达均显著升高(P<0.05),而MAG+RIF组Mrp2的表达均显著低于RIF组(P<0.05)。给药期间,各组Ntcp的表达均无显著差异(P>0.05)。结论: 利福平肝损伤机制可能与其上调Mrp2有关,MAG可保护利福平诱导的肝损伤,且其保肝作用可能与其下调Mrp2有关。     

黄药子配伍甘草对大鼠肝脏CYP1A2、CYP2E1蛋白表达影响的实验研究

目的:研究黄药子和黄药子配伍甘草后对大鼠肝脏组织CYP1A2、CYP2E1蛋白表达的影响。方法:将24只雄性SD大鼠分为3组,分别给药28天,采用HE染色观察肝组织病理损伤,免疫组化法检测大鼠肝脏CYP1A2、CYP2E1蛋白表达的情况。结果:黄药子与甘草配伍能够改善大鼠肝脏组织病变;与对照组比较,黄药子组肝脏CYP1A2、CYP2E1蛋白的阳性表达指数明显升高(P0.01);与黄药子组比较,配伍组肝脏CYP1A2、CYP2E1蛋白的阳性表达指数降低(P0.05或P0.01)。结论:甘草能对抗黄药子导致的肝损伤,其减毒机理可能与抑制肝脏CYP1A2、CYP2E1蛋白表达有关。     

五味子-甘草配伍的调血脂作用及对甘油三酯合成途径的影响

目的探讨五味子及配伍甘草对正常小鼠血脂及对肝脏TG合成途径的影响。方法ICR♂小鼠,按体重随机分为4组,即对照组(C)、五味子组(SF)、五味子-甘草(SG)1∶1和1∶1.5组。C组灌胃生理盐水,SF、SG 1∶1和1∶1.5组分别灌胃含五味子生药量为3.9 g·kg^-1的提取物,共计10 d。生化法检测血清TG、TC、LDL-C、HDL-C水平及ALT活性;ELISA检测肝脏FAS、ACC活性和GPAT、ACO水平,免疫组化法检测肝脏SREBP-1c和PPARα蛋白表达。结果与C组比,SF明显升高血清TG和TC水平,降低HDL水平,病理学可见较多脂肪空泡,少量炎性细胞浸润,升高ACC活性和GPAT水平,上调肝脏SREBP-1c的表达,下调PPARα的表达。与SF相比,SG 1∶1明显降低血清TG水平及ALT活性,降低GPAT和ACO水平;SG 1∶1和1∶1.5下调肝脏SREBP-1c的表达,上调PPARα的表达。结论大剂量五味子可升高正常小鼠血清TG和TC,配伍甘草可调节TG合成途径相关蛋白而改善升高的血脂。     

莪术-三棱药对合煎液对大鼠子宫肌瘤的防治作用及机制研究

目的:研究莪术-三棱药对合煎液对大鼠子宫肌瘤的防治作用及机制。方法:将大鼠随机分为正常组、模型组、阳性组(米非司酮,2.25 mg/kg)和药对合煎液组(莪术-三棱药对合煎液,6.0 g/kg),每组10只。除正常组外,其余各组大鼠分别于每周一、三、五im苯甲酸雌二醇注射液(0.5 mg/kg),持续12周;从第13周开始,造模组大鼠增加im黄体酮注射液(5 mg/kg),并每天ig给药1次,至实验第16周。给药结束后,测定大鼠子宫系数,苏木精-伊红染色观察大鼠子宫病理变化并测定平滑肌厚度,免疫组化染色法测定大鼠子宫组织中转化生长因子β_3(TGF-β_3)和基质金属蛋白酶11(MMP-11)蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠子宫系数升高、子宫发生明显病理变化、子宫平滑肌厚度增加、子宫组织中TGF-β_3和MMP-11蛋白表达增强(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,阳性组和药对合煎液组大鼠上述变化均显著改善(P<0.05或P<0.01)。结论:莪术-三棱药对合煎液对大鼠子宫肌瘤有一定的防治作用,其机制可能与下调子宫组织中TGF-β_3、MMP-11蛋白表达有关。     

茵陈蒿汤及其不同组方提取物对雌激素诱导胆汁淤积大鼠的治疗作用及机制研究

目的：基于肝细胞膜转运体多药耐药相关蛋白1~4（multidrug resistant associated protein 1~4,Mrp1~4）、Na⁺依赖性牛磺胆酸共转运多肽（Na⁺-taurocholate co-transporting polypeptide,Ntcp）,探讨茵陈蒿汤及其不同组方提取物对胆汁淤积大鼠的治疗作用。方法： 30只Wistar雄性大鼠随机分为6组,即正常组、对照组、茵陈组、茵陈栀子组、茵陈大黄组、茵陈蒿汤组;采用皮下连续注射苯甲酸雌二醇（estradio benzoate,EB,5 mg·kg^-1·d^-1）5 d制备胆汁淤积大鼠模型。茵陈组、茵陈栀子组、茵陈大黄组、茵陈蒿汤组分别灌胃给予茵陈（0.43 g·kg^-1·d^-1）、茵陈栀子（1.08 g·kg^-1·d^-1）、茵陈大黄（1.09 g·kg^-1·d^-1）、茵陈蒿汤（1.69 g·kg^-1·d^-1）提取物14 d。干预结束后,测定各组大鼠胆汁流速,血清生化及肝脏病理,并采用Western blot检测肝组织中Mrp1~4和Ntcp的表达。结果：茵陈蒿汤及不同配伍组干预14 d后,胆汁流速均显著升高,血清生化与肝脏病理较对照组均有明显改善;与对照组相比,茵陈组、茵陈栀子组、茵陈大黄组及茵陈蒿汤组Mrp2、Mrp3、Ntcp的表达均升高;Mrp4的表达均降低;此外,茵陈栀子组Mrp1的表达降低。结论：茵陈蒿汤及其不同组方提取物对雌激素诱导的大鼠胆汁淤积均有治疗作用;其疗效可能与调控转运体Mrp1-4和Ntcp的表达相关,且不同组方提取物对Mrp1~4和Ntcp的调控作用不同。     

山楂果叶协同改善糖脂代谢紊乱的作用

目的研究山楂叶和山楂果提取物协同调节Ⅱ型糖尿病模型大鼠糖脂代谢紊乱的作用,并探讨作用机制。方法采用高糖高脂饲料结合小剂量腹腔注射链脲佐菌素构建Ⅱ型糖尿病大鼠模型,将72 h后空腹血糖(FBG)值≥11.1 mmol·L~(-1)的造模成功大鼠随机分为模型组、山楂叶组、山楂果组、山楂果叶混合组、盐酸二甲双胍组,另取SD大鼠普通饲料喂养4周,作为正常对照组。各组大鼠灌胃相应药物,每天1次,连续7周,正常对照组和模型组大鼠灌胃生理盐水,监测大鼠体重和FBG,7周后测定各组生物样本。结果与对照组相比,模型组大鼠血糖、血脂、总胆红素(TBIL)、碱性磷酸酶(ALP)含量明显升高(P<0.01),胰岛素(INS)含量显著降低(P<0.05);与模型组相比,各给药组大鼠血糖、血脂、TBIL、ALP、INS水平均得到一定的改善,山楂叶提取物升高INS水平的作用最强,山楂果叶混合组改善血脂的作用最好。Western印迹检测结果显示,与对照组相比,模型组大鼠p-AMPKα蛋白表达含量明显降低(P<0.05);各给药组大鼠肝脏均明显高于模型组大鼠样本,山楂果叶混合物组p-AMPKα蛋白表达水平显著高于其他各给药组(P<0.05)。与正常对照组相比,糖脂代谢紊乱模型大鼠肝脏组织的SREBP-1、ACC蛋白表达显著增加(P<0.05),各给药组均可使SREBP-1、ACC蛋白含量得到一定改善。结论山楂果叶提取物联合用药能较好的改善糖脂代谢紊乱大鼠的血糖血脂异常,其作用机制是通过AMPK/SREBP-1/ACC通路改善脂质代谢,抑制肝脂质合成。     

HO-1的过表达对大鼠移植后肝脏损伤的影响

目的 探讨血红素氧合酶-1(HO-1)在大鼠同种异体移植肝脏的过表达对移植后早期血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及肝脏结构功能的影响.方法 90只Wistar大鼠随机分为生理盐水预处理组(S1 组)、钴原卟啉预处理组(S2组)和锌原卟啉预处理组(S3组),每组30只.各组随机取出24只分为供受体,供体于预处理后24h行原位肝移植,余6只仅行预处理,分别于供体预处理后24h、门静脉复流后1h和3h各取6只取血及肝组织,分别检测血清ALT、AST、TNF-α水平、肝组织形态学变化及HO-1蛋白表达水平.结果 ①供肝预处理后24h,各组血清转氨酶及TNF-α水平无显著性差异(P>0.05),门静脉复流后各时间点,S2组血清转氨酶及TNF-α水平均低于S1组和S3组(P<0.05),S1组低于S3组(P<0.05);②供肝预处理后24h,S2组肝脏HO-1蛋白即有较高表达,S1组和S3组只有极少量表达;门静脉复流后各时间点,S2组均高于S1 组S3组(P<0.05),S1组高于S3组(P<0.05);③移植肝门静脉复流后3h,S2组肝脏损伤轻于S1组和S3组,S1组轻于S3组.结论 HO-1在大鼠同种异体移植肝脏中的过表达可减少血清TNF-α释放,显著改善移植后的肝脏功能,减轻供肝的缺血再灌注损伤.     

昆布-甘草合用对SD大鼠基础代谢干扰的代谢组学研究

研究昆布与甘草合煎给药与分别单煎给药对机体自身代谢的影响及差异。分别采用昆布、甘草单煎与合煎方法进行提取,通过常规生化参数测定、病理切片观察和气相质谱测定血清中内源性小分子方法研究提取物对SD大鼠肝、肾毒性以及系统代谢的影响。结果发现,昆布与甘草合煎给药较昆布单煎给药造成大鼠肾脏组织更明显的病理异常,昆布与甘草无论单煎还是合煎给药对肝脏均无明显影响,甘草单煎给药对肾脏无明显影响。昆布与甘草合煎组给药5天,引起血清中谷草转氨酶下降(单煎组没有明显变化)和总尿素氮明显升高(昆布单煎组也升高)。采用GC-MS方法对大鼠血清中内源性小分子分析发现昆布、甘草单煎与合煎提取物给药均对代谢有明显影响,且合煎给药组与昆布组对机体代谢影响相似,提示合煎提取物对机体代谢的影响可能主要来源于昆布。昆布、甘草分别单独煎煮和合煎提取物给药引起支链氨基酸、三羧酸循环中间物和糖代谢中间物(丙酮酸和乳酸)水平降低和3-羟基丁酸水平升高,昆布降低三羧酸循环中间物和糖代谢中间物能力强于甘草以及合煎组,而甘草给药组中支链氨基酸水平降低更加明显。提示合煎给药对SD大鼠代谢的影响与甘草和昆布均有关。昆布单煎及昆布-甘草合煎提取物连续给药均可造成肾脏损害,合煎给药较昆布单煎给药造成大鼠肾脏组织更明显的病理异常,说明一定剂量范围内甘草可加重昆布的肾脏毒性作用,是中药"相反"配伍禁忌的特征表现之一。     

丹皮与关木通配伍减毒作用研究

目的 探讨丹皮与关木通配伍的减毒作用.方法 比较关木通单煎和丹皮与关木通配伍的减毒效果,检测溶液中马兜铃酸的含量;进行动物实验,研究关木通单煎液和配伍液大鼠肾功能指标的变化情况.结果 配伍后的溶液中马兜铃酸单位含量明显降低,大鼠灌胃后明显较单煎液灌胃能减轻肾功能损害.结论 丹皮与关木通配伍可以减轻或抑制关木通的肾毒性作用.     

大鼠肝移植自然耐受模型移植术后Foxp3基因表达的变化

目的 探讨大鼠肝移植自然耐受模型移植术后Foxp3基因表达的变化及意义.方法 分别建立大鼠急性排斥(DA→LEW)、自然耐受(LEW→DA)、同基因组(DA→DA)肝移植模型,收集术后7、14、28d外周血、脾脏、肝脏标本,FCM检测标本淋巴细胞中CD4 CD25 Tr (regulatory T cell)比例变化,RT-PCR, Western blot分别检测肝脏内Foxp3基因及其scrufin蛋白的表达.结果 术后7d,各组外周血、脾脏、肝脏中CD4 CD25 Tr细胞比例无明显差异.术后14d自然耐受组脾脏、肝脏内CD4 CD25 Tr细胞比例明显高于同基因组(P<0.05),外周血中差异无统计学意义(P>0.05).术后28d自然耐受组与同基因组间无差异(P>0.05).术后7d,自然耐受组移植物Foxp3 mRNA水平明显高于排斥组和同基因组(P<0.05);术后14d,自然耐受组移植物Foxp3 mRNA水平明显高于同基因组(P<0.05);术后28d,自然耐受组与同基因组移植物Foxp3 mRNA表达无差异(P>0.05).自然耐受组与同基因术后14、28d scrufin蛋白条带明显强于7d,且自然耐受组表达强于同基因组.结论 大鼠肝移植术后1～2周内,移植肝内Foxp3基因表达可诱导机体对移植物产生免疫耐受.     

甘草配伍大戟的体外肝毒性研究

目的研究甘草和大戟配伍的体外肝毒性。方法采用显微观察法和MTT法检测不同浓度的甘草单煎液、大戟单煎液、甘草一大戟合煎液和甘草一大戟单煎混合液对人肝癌细胞HepG2增殖的影响,并比较大戟单煎液、甘草一大戟合煎液和甘草．大戟单煎混合液相当浓度下细胞毒性的大小。结果大戟单用及大戟与甘草配伍均有细胞毒性,且呈剂量相关性;与大戟单煎液相比,甘草一大戟单煎混合液细胞毒性无明显差异,甘草一大戟合煎液细胞毒性减小。结论甘草和大戟配伍导致大戟的体外肝毒性减小。     

人参皂苷Rg_1配伍乌头碱对体外培养心衰模型心肌细胞的保护作用

目的:考察人参皂苷Rg_1配伍乌头碱对体外培养心衰模型心肌细胞的保护作用。方法:将新生大鼠心肌细胞分为正常对照组、模型组、阳性对照组(去乙酰毛花苷注射液,1×10~(-7)mol/L)、人参皂苷Rg_1组(1×10~(-8)mol/L)、乌头碱组(1×10~(-9)mol/L)以及人参皂苷Rg_1与乌头碱不同配比的配伍组(1∶1、2∶1、1∶2,V/V)。除正常对照组外,其余各组细胞均以0.8%戊巴比妥钠诱导心肌细胞心衰模型。成模后,各组细胞给予相应药物培养1 h,然后检测细胞总三磷酸腺苷(ATP)酶、Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶和Na~+-K~+-ATP酶活力;检测细胞培养液中酸性磷酸酶(ACP)、乳酸脱氢酶(LDH)活力和脑钠肽(BNP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量以及细胞中总糖原含量。结果:与正常对照组比较,模型组细胞总ATP酶和Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶活力明显降低,Na~+-K~+-ATP酶活力明显升高,培养液中ACP、LDH活力及BNP含量均明显升高(P<0.05)。与模型组比较,各给药组细胞总ATP酶活力显著升高,细胞培养液中LDH活力显著降低,且以人参皂苷Rg1与乌头碱2∶1配伍时作用最强;乌头碱组和各配伍组细胞Na~+-K~+-ATP酶活力均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05);各给药组细胞培养液中ACP、BNP活力均有降低的趋势,细胞内总糖原含量和培养液中TNF-α含量无显著变化(P>0.05)。结论:人参皂苷Rg_1配伍乌头碱可改善大鼠心衰模型心肌细胞ATP酶活力和膜通透性,调节细胞分泌BNP,对心衰模型心肌细胞有一定保护作用,且以人参皂苷Rg_1与乌头碱2∶1配伍时作用最强。     

川楝子对大鼠长期毒性试验

目的观察川楝子连续给药后大鼠产生的毒性反应。方法取大鼠按不同剂量(120、60g生药/kg)分组,灌胃给予川楝子,连续45d。观察给药期间的一般表现,如活动度、毛色等;每周各组大鼠称1次体重,比较各组差异。处理时称重,摘取肝脏,双肾,脾脏,胸腺,计算脏器指数;检测红细胞计数(RBC)、血红蛋白(HGB)、白细胞计数(WBC)、红细胞容积(HCT)、血小板计数(PLT)、网织红细胞百分率(%RETIC)及血清ALT、AST、ALP(碱性磷酸酯酶)、TB(血清总胆红素)、BUN(尿素氮)。结果给药15d左右,给药组动物活动减少,四肢无力,药液色粪便增多。持续一周后缓解。体重与正常组比较未出现差异。灌胃川楝子120g生药/kg45d后,大鼠%RETIC值下降,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05);灌胃川楝子60g生药/kg、120g生药/kg45d后,大鼠AST、ALP、BUN值升高,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),120g/kg组ALT值升高,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05);60g生药/kg、120g生药/kg组的肝脏肿大,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.01),120g/kg组的肾脏肿大,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论大鼠连续灌胃给予川楝子后,可对肝脏、肾脏及造血系统产生毒性,且随着剂量增加,毒性增强。