不同组织来源的成纤维细胞的生物学特性比较

目的 探讨来自政治家皮肤、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织的成纤维细胞的生物学特性。方法 对三种组织均采用组织块法进行细胞的原代培养,采用胰蛋白酶消化传代,分别利用绘制细胞生长曲线,^H-胸腺嘧啶掺入及^3H-脯氨酸掺入等方法观察细胞的增殖,DNA合成代谢及胶原合成等情况。并比较它们之间的差异。结果 瘢痕疙瘩成纤维细胞在细胞增殖、DNA合成代谢及胶原合成量等方面均明显高于正常皮肤及增生性瘢痕组织来源的成纤维细胞。后两者之间有一定区别但无统计学意义。结论 不同组织来源的成纤维细胞其生物学行为亦有所区别,因此,在进行实验研究时应有一定的针对性。     

TGF-β3对增生性瘢痕成纤维细胞的生物学作用

目的：观察外源性TGF－β3对增生性瘢痕成纤维细胞（HSFB）生长增殖的影响，为临床治疗提供理论依据。方法：用MTT比色法检测TGF－β3对HSFB增殖活性的影响，^3H-脯氨酸掺入法检测细胞内胶原合成，免疫组化检测I，Ⅲ型胶原及TGF－β3蛋白表达情况。结果：TGF－β3可抑制HSFB细胞增殖，下调TGF－β1蛋白及I型胶原蛋白表达。结论：TGF－β3具有抗瘢痕形成作用，有望在临床中应用。     

抗纤维化短肽对血清诱导的心脏成纤维细胞增殖和胶原合成与I、III型胶原表达抑制作用的实验研究

①目的探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)对不同浓度血清(FBS)诱导的大鼠心脏成纤维细胞增殖和胶原合成的调节作用。②方法选用新生大鼠心脏成纤维细胞;采用3H-TdR掺入法检测心脏成纤维细胞的增殖;采用3H-脯氨酸掺入法检测心脏成纤维细胞胶原的合成,采用westernblot法检测心脏成纤维细胞I型与III型胶原的表达。③结果在0.4%、2%和10%几种血清浓度的条件下,随着血清浓度的增加,反映心脏成纤维细胞增殖3H-TdR掺入量和胶原合成的3H-脯氨酸掺入量增加。表明一定浓度的血清能诱导心脏成纤维细胞增殖和胶原合成。与0.4%血清的基础培养条件相比较,10%高浓度血清能刺激心脏成纤维细胞I、III型胶原蛋白的表达。在10-10~10-8mol/L浓度范围内,AcSDKP对10%诱导的心脏成纤维细胞增殖和胶原合成有抑制作用,并且在10-9mol/L时,AcSDKP对心脏成纤维细胞增殖、胶原合成抑制作用最强。同时10-9mol/L的AcSDKP对心脏成纤维细胞I、III型胶原蛋白的表达也有明显的抑制作用。④结论AcSDKP对血清介导的心脏成纤维细胞增殖、胶原合成以及I、III型胶原蛋...     

低氧促进大鼠心脏成纤维细胞胶原蛋白合成

目的研究低氧(2%氧)对成年Wistar大鼠心脏成纤维细胞胶原蛋白合成、总蛋白合成及Ⅰ、Ⅲ型胶原前α肽链mRNA表达的影响.方法分离培养成年Wistar大鼠心脏成纤维细胞,采用液体闪烁计数方法检测心脏成纤维细胞胶原酶敏感的3H-脯氨酸掺入率来观察细胞胶原蛋白合成变化,并检测3H-亮氨酸掺入率观察细胞总蛋白合成的变化,采用RT-PCR检测Ⅰ、Ⅲ型胶原前α肽链mRNA的表达.结果成年Wistar大鼠心脏成纤维细胞在低氧第24、48小时胶原酶敏感的3H-脯氨酸掺入率较常氧组显著增加,分别增加132%(P＜0.05)和163%(P＜0.01);低氧12 h起Ⅰ、Ⅲ型胶原前α肽链mRNA表达显著高于常氧培养的细胞.结论低氧能够直接促进体外培养的成年Wistar大鼠心脏成纤维细胞胶原蛋白合成和Ⅰ、Ⅲ型胶原前α肽链mRNA的表达,提示低氧对心脏成纤维细胞胶原合成代谢的直接调节可能是低氧性心肌纤维化的重要机制.     

大黄素抑制增生性瘢痕成纤维细胞胶原合成及细胞周期的研究

目的 检测大黄素对人增生性瘢痕成纤维细胞的抑制作用,探索大黄素防治瘢痕的机制.方法 进行人增生性瘢痕成纤维细胞的体外培养,将不同浓度的大黄素作用于细胞,以3H-脯氨酸掺入法检测成纤维细胞胶原合成的情况,并以流式细胞术检测成纤维细胞的细胞周期.结果 在不同浓度组大黄素的处理下,人增生性瘢痕成纤维细胞的胶原合成呈现出抑制的趋势;大黄素可以提高细胞G1期比例,而降低S期和G2期比例.结论 大黄素对人增生性瘢痕成纤维细胞胶原合成有显著的抑制作用,其机制和细胞周期阻滞在G1期从而抑制细胞增殖有关.     

抗纤维化短肽对血清诱导的心脏成纤维细胞增殖和胶原合成与Ⅰ、Ⅲ型胶原表达抑制作用的实验研究

①目的 探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)对不同浓度血清(FBS)诱导的大鼠心脏成纤维细胞增殖和胶原合成的调节作用.②方法 选用新生大鼠心脏成纤维细胞;采用3H-TdR掺入法检测心脏成纤维细胞的增殖;采用3H-脯氨酸掺入法检测心脏成纤维细胞胶原的合成,采用westernblot法检测心脏成纤维细胞Ⅰ型与Ⅲ型胶原的表达.③结果 在0.4%、2%和10%几种血清浓度的条件下,随着血清农度的增加,反映心脏成纤维细胞增殖3H-TdR掺入量和胶原合成的3H-脯氨酸掺入量增加.表明一定浓度的血清能诱导心脏成纤维细胞增殖和胶原合成.与0.4%血清的基础培养条件相比较,10%高浓度血清能刺激心脏成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达.在10-10～10-8mol/L浓度范围内.AcSDKP对10%诱导的心脏成纤维细胞增殖和胶原合成有抑制作用.并且在10-9mol/L时,AcSDKP对心脏成纤维细胞增殖、胶原合成抑制作用最强.同时10-9mol/L的AcSDKP对心脏成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达也有明显的抑制作用.④结论 AcSDKP对血清介导的心脏成纤维细胞增殖、胶原合成以及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达有明显抑制作用.     

粉防己碱对瘢痕成纤维细胞的生物学作用

目的：探讨粉防己碱对瘢痕成纤维细胞的生物学作用及其在瘢痕治疗中的意义。方法：采用瘢痕成纤维细胞培养和兔实验性瘢痕模型。观察粉防己碱对瘢痕成纤维细胞生物学特性的影响。结果：体外试验显示。粉防己碱各实验组^3H-TdR掺入率和^3H-脯氨酸掺入率均较对照组明显降低。呈剂量依赖关系。动物实验透射电镜表明,对照组瘢痕成纤维细胞中有丰富,高度发达的粗面内质网;粉防己碱治疗组瘢痕成纤维细胞内粗面内质网明显减少。提示其蛋白合成与分泌功能受抑。结论：粉防己碱对瘢痕成纤维细胞增殖,胶原合成与分泌功能具有抑制作用。     

rhGM-CSF对胎儿口腔粘膜成纤维细胞增殖及DNA合成的影响

目的探讨rhGM-CSF促进口腔溃疡愈合的作用机制.方法取体外培养的胎儿口腔粘膜成纤维细胞,用rhGM-CSF刺激成纤维细胞后第2、4、6天用细胞计数及3H-胸腺嘧啶掺入法(3H-TdR)测定其增殖情况.结果 rhGM-CSF对胎儿口腔粘膜成纤维细胞增殖及DNA合成有刺激作用,在80～100 ng/ml 时,细胞生长达到最佳状态,过高浓度rhGM-CSF的刺激作用反而下降.结论 rhGM-CSF可以通过刺激成纤维细胞增殖及DNA合成促进口腔溃疡愈合.     

红花对增生性瘢痕成纤维细胞增殖和胶原合成的影响

目的探讨红花对增生性瘢痕成纤维细胞（HSFB）增殖和胶原合成的影响及其意义。方法通过MTT比色试验和生长曲线测定法检测红花对体外培养的HSFB增殖活性的影响；^3H-脯氨酸掺入法测定红花对细胞胶原蛋白合成的影响；用光镜和电镜观察药物作用后HSFB形态学和超微结构的改变。结果红花可明显抑制HSFB的增殖和胶原蛋白的合成，且在一定范围内具有时间-剂量依赖性，以8μg／ml浓度组第3天作用最为显著；HSFB的形态和超微结构呈抑制改变。结论红花具有抑制HSFB增殖和胶原合成的作用，为应用该药治疗瘢痕提供了实验依据。     

强脉冲光照射对皮肤成纤维细胞胶原代谢的影响

目的 探讨强脉冲光照射对皮肤成纤维细胞胶原代谢的影响.方法 利用包皮环切术切除的包皮组织,体外分离、培养原代成纤维细胞.培养细胞分为照射组和非照射组(对照组)(n=10).前者采用波长590～1 200 nm,能量密度为29 J/cm2的强脉冲光照射.于照射后不同时间段,采用3H-脯氨酸掺入法分别两组细胞胶原合成情况.结果 照射组成纤维细胞经强脉冲光照射12、24和48 h后,其胶原合成明显较对照组增加(P＜0.01),分别为2 019±279 vs 1 500±260、 4 299±781 vs 2 064±222和5 765±459 vs 2 434±297.结论 强脉冲光能促进成纤维细胞胶原合成活性.     

汉防己甲素对血小板衍生生长因子促细胞增殖效应的阻断作用

目的研究血小板衍生生长因子（ｐｌａｔｅｌｅｔ－ｄｅｒｉｖｅｄｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＰＤＧＦ）对人成纤维细胞（ＨＬＦ）、大鼠肝贮脂细胞（Ｉｔｏ细胞）增殖活性和胶原合成的影响及汉防己甲素（Ｔｅｔ）对ＰＤＧＦ促细胞增殖效应的阻断作用。方法采用胶原酶灌流、密度梯度离心方法分离大鼠肝Ｉｔｏ细胞，并以Ｈ－ＴｄＲ、Ｈ－Ｌ－脯氨酸掺入法观察细胞增殖效应。结果在１％血清存在下，ＰＤＧＦ对ＨＬＦ、Ｉｔｏ细胞具有显著的促进ＤＮＡ合成和细胞增殖的作用，并随ＰＤＧＦ浓度的升高而作用增强；对无血清培养的ＨＬＦ、Ｉｔｏ细胞并无明显的促进增殖作用，但与胰岛素样生长因子（ＩＧＦ）等联合应用时，则可促进细胞的增殖，并证实ＰＤＧＦ具有促进ＨＬＦ、Ｉｔｏ细胞胶原合成的作用。Ｔｅｔ在不抑制细胞ＤＮＡ合成的剂量范围内，即可拮抗ＰＤＧＦ的促细胞增殖及胶原合成作用。结论ＰＤＧＦ对肝纤维化相关细胞ＨＬＦ、Ｉｔｏ细胞增殖活性及胶原合成具有促进作用，Ｔｅｔ对ＰＤＧＦ促细胞增殖效应具有阻断作用。     

内皮素-1刺激原代培养的人肺动脉平滑肌细胞核酸及胶原合成

目的 :研究内皮素 1 (ET 1 )对培养的人肺动脉平滑肌细胞DNA及胶原合成的影响。方法 :应用贴块法培养人胎儿肺动脉平滑肌细胞 ,3 H TdR和 3 H 脯氨酸 (3 H pro)掺入法测定细胞DNA和胶原合成量。结果 :与对照组相比 ,1 0 7,1 0 8,1 0 9mol/LET 1培养 72h后 ,细胞DNA和胶原合成的量明显增加。结论 :ET 1能够刺激人肺动脉平滑肌细胞增殖 ,并使胶原合成增加     

趋化素样因子1(CKLF1)对关节软骨细胞增殖及代谢的影响

目的：研究趋化素样因子1(CKLF1)对兔关节软骨细胞增殖及代谢的调节作用。方法：采用体外细胞培养技术及同位素参入法，检测CKLF1真核表达载体转染293T细胞所得条件培养基对软骨细胞DNA、胶原及蛋白多糖合成能力的影响。结果：在含5％(体积分数)胎牛血清(FCS)的DMEM培养条件下，转染后293T细胞表达的CKLFl可抑制兔关节软骨细胞DNA、胶原及蛋白多糖的合成，并可促进诱导性一氧化氮合酶(iNOS)的转录。结论：CKLF1可能通过提高iNOS的表达抑制关节软骨细胞增殖、胶原及蛋白多糖的合成。     

风湿性心脏病人心瓣膜成纤维细胞的体外培养及其胶原合成

目的：观察风湿性心脏病人瓣膜成纤维细胞的胶原合成，为研究风湿性心脏病瓣膜纤维化的发病机制建立基础。方法：采用消化组织块培养法建立人二尖瓣和主脉瓣成纤维细胞体外培养方法，对５例风湿性心脏病人和５例尸检中除外心血管疾病和胶原系统疾病的二尖瓣和主动脉瓣成纤维细胞进行了体外培养，并用３Ｈ－脯氨酸测定瓣膜成纤维细胞的胶原合成。结果：二尖瓣和主动脉瓣的瓣膜成纤维细胞其形态、生长方式及胶原合成差异均不明显，风湿性心脏病瓣膜成纤维细胞的胶原合成明显高于对照组。结论：体外培养的风湿性心脏病人瓣膜成纤维细胞胶原合成明显增加     

甲状腺素对血管紧张素Ⅱ所致心肌成纤维细胞胶原合成改变的影响

目的 :以AngⅡ处理培养的心肌成纤维细胞 ,促使细胞中胶原的合成发生改变 ,观测T3对AngⅡ所致细胞胶原合成改变的影响。方法 :以AngⅡ及T3分别或同时作用于培养的大鼠心肌成纤维细胞 ,通过测定3H TdR和3H Leu掺入来了解成纤维细胞增殖率和蛋白质合成率 ,同时用免疫细胞化学方法检测成纤维细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达。结果 :AngⅡ使成纤维细胞3H TdR和3H Leu掺入增加 ,同时细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达也显著增加。T3组成纤维细胞3H TdR和3H Leu掺入虽然也增加 ,但T3组细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达却呈显著性降低。当T3与AngⅡ共同作用于成纤维细胞时 ,与T3组和AngⅡ组比较 ,3H TdR和3H Leu的掺入率没有发生显著性的变化 ;与AngⅡ组比较 ,细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达显著性降低 ,与对照组的表达一致。结论 :T3能降低AngⅡ所致的心肌成纤维细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的增加     

Genistein对人乳腺癌细胞株BCaP-37的体外抑制作用

目的 :观察Genistein对乳腺癌细胞的抑制作用。方法 :采用MTT法、克隆形成实验、3 H TdR掺入实验测定Genistein对人乳腺癌细胞株BCaP 3 7的生长、克隆形成和DNA合成能力的抑制作用。结果 :Genistein能明显抑制BCaP 3 7细胞的生长、克隆形成和DNA合成 ,呈明显的剂量 效应关系 ,随作用时间延长其效果明显增强。结论 :Genistein通过抑制人乳腺癌细胞株BCaP 3 7DNA合成而降低其生长和繁殖能力。     

Effect of burn healing liquid on keratinocyte and fibroblast proliferation and on collagen lattice contraction

ＩｎＣｈｉｎａ,ｍａｎｙｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌｈｅｒｂａｌｒｅｍｅｄｉｅｓｈａｖｅｓｈｏｗｎｅｆｆｅｃｔｉｖｅｎｅｓｓｉｎｔｒｅａｔｉｎｇｓｕｐｅｒｆｉｃｉａｌｂｕｒｎｓ１　Ｏｎｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｂｙｗｈｉｃｈｔｈｅｓｅａｇｅｎｔｓｗｏｒｋｈａｓｂｅｅｎｓｕｇｇｅｓｔｅｄｔｏｂｅｔｈｅｉｒａｎｔｉｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙａｎｄｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｓ２　ＢｕｒｎＨｅａｌｉｎｇＬｉｑｕｉｄ（ＢＨＬ）ｉｓｏｎｅｏｆｔｈｅｓｅｈｅｒｂａｌｍｉｘｔｕｒｅｓＩｔｉｓａｎａｑ…     

动态应变下肌腱细胞三维培养的初步研究

目的：研究三维培养条件下机械应变对肌腱细胞形态，排列，增殖及代谢的影响。方法：采用自行研制的动态应变三维细胞培养装置，将机械应变作用于肌腱细胞－支架材料复合物。结果：机械应变对肌腱细胞分裂，DNA合成和代谢的影响与应变作用的强度，频率，周期及作用时间有关。采用特定的应应（10％伸长，0．2Hz，每小时作用15分钟）作用48小时，加载组肌腱细胞数和3H标记的胸腺嘧啶核苷掺入量都明显高于对照组（P＜0．05），在应变作用下，其细胞形态呈扁平形，沿应变方向延伸，机械应变还引起1型胶原合成增加（P＜0．05），结论：周期性机械应变直接作用于肌腱细胞可以刺激其生长，这对于应用机械应变促进组织工程化肌腱的构建具有重要应用价值。     

兔血管平滑肌细胞三维培养模型的建立

目的 观察兔血管平滑肌细胞（VSMCs)在三维培养系统中的生物学特性,方法 在兔主动脉中膜来源的VSMCs单层培养系统的基础上,将VSMCs培养在胶原凝胶中,形成VSMCs三维培养系统,并对细胞的形态结构,生长增殖及其影响因素进行研究。结果（1）三维培养VSMCs在凝胶形成后3－4h,形成多个细胞突起,呈星状,后继续伸展,呈梭 ,纺锤形,（2）张力条件下,三维培养VSMCs可呈一定的方向性排列。（3）三维培养VSMCs与经典的单层培养相比,细胞活力无统计学差异,但细胞增殖受到一定程度的抑制。结论 运用VSMCs三维培养系统不仅可以观察和研究细胞的形态结构,生长增殖等方面,还可研究在力条件下的撑特征,对组织工程化血的研究将产生积极的影响。