单侧输尿管梗阻大鼠肾小管间质MCP-1的表达及其意义

目的：探讨肾间质纤维化中单核细胞趋化因子-1（MCP-1）的表达及其与肾间质巨噬细胞浸润的关系。方法：60只SD雌性大鼠随机分成假手术（SOR）组、单侧输尿管梗阻（UUO）组,于术后第1,4,7,10,14 d分别处死各组大鼠。用HE和MASSON染色法观察UUO大鼠术后不同时间点肾脏病理改变,用免疫组化法检测肾小管间质MCP-1表达和巨噬细胞浸润。结果：UUO组肾小管-间质MCP-1,单核巨噬细胞抗原ED-1表达较SOR组明显增多（P<0.05）,MCP-1表达与巨噬细胞浸润呈正相关（r =0.865,0.928,0.858,0.893,0.873,均P<0.05）;MCP-1表达和巨噬细胞浸润分别与肾间质胶原相对面积呈正相关（分别为r =0.856,0.896,0.686,0.820,0.867和r =0.942,0.898,0.920,0.914,0.829,均P<0.05）。 结论：随UUO大鼠病程进展,肾小管间质MCP-1表达增多,可能在肾间质纤维化中起重要作用。MCP-1可能通过介导巨噬细胞浸润参与肾间质纤维化,MCP-1可成为治疗肾间质纤维化的新靶点。     

FTY720对大鼠肾间质纤维化的抑制作用

目的 研究FTY720对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的防治作用及机制.方法 将45只SD大鼠随机分成假手术组(SHAM),单侧输尿管梗阻组(UUO)和FTY720治疗组(UUO FTY720).治疗组于术前3 d给予FTY720 0.5 mg/(kg·d)灌胃,UUO模型组和SHAM组给予等量生理盐水.3组分别于术后7、14、21 d各处死5只大鼠,并收集血清和24 h尿液,观察肾功能和24 h尿蛋白变化.取梗阻侧肾做组织学检查,观察肾间质纤维化程度.用免疫组化方法检测肾组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅲ型胶原(COL-Ⅲ)、CD3、ED-1的表达水平.结果 术后14 d时治疗组24 h尿蛋白较模型组明显降低(P＜0.05).术后7、14、21 d治疗组血肌酐水平与模型组相比较均明显降低(P＜0.05),治疗组与SHAM组比较差异无显著性意义.治疗组术后7、14 d血尿素氮较模型组均有一定程度下降(P＜0.05).病理检查显示,治疗组纤维化程度较模型组明显减轻.免疫组化结果显示,α-SMA表达,SHAM组仅限于血管,治疗组和模型组表达明显增多,但治疗组表达要弱于模型组(P＜0.05).SHAM组肾间质有少量Ⅲ型胶原表达,模型组表达逐渐增强,治疗组较模型组表达明显减少(P＜0.05).SHAM组肾间质各时间点均未见炎性细胞浸润,与模型组相比,治疗组肾问质CD3、ED-1阳性细胞数降低(P＜0.01).结论 新型免疫调节剂FTY720可以明显减少UUO大鼠肾间质T淋巴细胞和巨噬细胞浸润,在一定程度上可以抑制肾小管上皮细胞转分化和细胞外基质积聚,从而减轻UUO后大鼠肾问质纤维化的程度,保护肾功能.     

维甲酸对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的作用

目的 探讨维甲酸（at-RA）对单侧输尿管梗阻大鼠（UUO）肾间质纤维化的影响.方法将26只大鼠随机分为假手术组、模型组、给药组,结扎单侧输尿管造成梗阻性肾病模型.术后9天处死大鼠,取梗阻侧肾做组织学检查,HE染色,用免疫组化方法检测肾组织中结缔组织生长因子（CTGF）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）.结果维甲酸显著减轻肾小管间质损害,治疗组肾间质炎细胞浸润和肾间质CTGF、α-SMA表达显著低于对照组.结论维甲酸减轻UUO模型大鼠肾小管间质损害和炎细胞浸润,降低CTGF表达,抑制α-SMA表达,从而减轻肾间质纤维化.     

整合素连接激酶在梗阻性肾病合并肾小管酸中毒中的表达

目的：观察整合素连接激酶（ILK）在梗阻性肾病合并肾小管酸中毒中的表达,探讨肾小管酸中毒在致肾间质纤维化中的作用。方法实验大鼠75只,其中假手术组大鼠25只,单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠50只。UUO大鼠于术后第7天分为肾小管酸中毒大鼠（UUO1组,n＝31）和非肾小管酸中毒大鼠（UUO2组,n＝19）,同时做肾功能与组织学检测,于手术后7、14、21、28 d时分批处死大鼠,免疫组织化学与 Western blot法测定肾组织中 ILK的表达。结果与 UUO2组比较,UUO1组光镜下炎症细胞浸润和间质纤维化程度更严重;假手术组仅有少量的 ILK蛋白表达,几乎无纤粘连（FN）蛋白的沉积,UUO2组 ILK蛋白表达及 FN蛋白的沉积增多,而 UUO1组较 UUO2组增多。结论在梗阻性肾病中,肾小管酸中毒可上调 ILK蛋白的表达与FN的沉积,加速肾小管间质纤维化。     

脐带间充质干细胞外泌体对大鼠肾间质纤维化的抑制作用

目的: 探讨人脐带间充质干细胞来源的外泌体（human umbilical cord mesenchymal stem cell derived exosomes,hucMSC-Ex）对单侧输尿管梗阻（unilateral ureteral obstruction, UUO）所致大鼠肾小管间质纤维化的修复作用。方法: 分离培养hucMSC并从培养上清液中提取hucMSC-Ex。采用单侧输尿管结扎法构建肾间质纤维化模型,将大鼠随机分为假手术组、UUO组和hucMSC-Ex组,每组6只,hucMSC-Ex组大鼠在术后24 h 尾静脉注射250 μg hucMSC-Ex。7 d后收集肾脏组织,观察各组肾脏大体观。蛋白质印迹检测肾组织纤维化相关蛋白TGF-β1、E-钙黏蛋白和波形蛋白,并对肾脏组织切片进行HE染色、Masson染色和免疫组织化学染色,观察大鼠梗阻侧肾脏病理结构变化、炎症细胞浸润情况及肾纤维化程度,综合评价hucMSC-Ex对大鼠肾脏纤维化的抑制效果。结果： 与假手术组相比,UUO组大鼠肾脏炎性细胞浸润显著增加,组织结构严重破坏,广泛胶原沉积;hucMSC-Ex干预后组织形态结构部分恢复,胶原沉积减少,炎性细胞浸润减少。同时,UUO组大鼠肾脏α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、TGF-β1和波形蛋白表达升高,E-钙黏蛋白表达降低;但hucMSC-Ex输注后能够抑制α-SMA和TGF-β1的表达,逆转上皮间质转化。结论： hucMSC-Ex可以减轻大鼠肾组织病理损伤,延缓大鼠肾间质纤维化的进程。     

阿魏酸钠对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏保护作用的研究

目的 探讨阿魏酸钠对大鼠单侧输尿管梗阻模型肾问质纤维化的影响.方法 UUO大鼠给予阿魏酸钠100mg/(kg·d)腹腔注射,观察第14天血清肌酐、尿素氮的变化及肾间质纤维程度、Col Ⅰ、ColⅢ、t-PA、u-PA及PAI-1的表达.结果 与UUO组相比,治疗组血清肌酐、尿素差异均无显著性,肾小管纤维化程度、PAl-1及Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达显著降低,t-PA、u-PA的表达显著增加.结论阿魏酸钠可以通过下调PAI-1及上调t-PA、u-PA而减轻UUO术后大鼠肾间质纤维化.     

EGCG对梗阻性肾病大鼠肾小管上皮细胞转分化的干预作用及机制

目的 探讨表没食子儿荼素没食子酸酯(EGCG)对大鼠肾问质纤维化和肾小管上皮细胞转分化的作用及其机制.方法 雄性Wistar大鼠56只随机分为正常对照组(n=8)、单侧输尿管梗阻(UUO)模型组(n=24,以单侧输尿管结扎制作肾间质纤维化模型)和EGCG治疗组(n=24,单侧输尿管结扎术后每日给予腹腔注射EGCG 5 ...     

单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的机制

目的 :探讨单侧输尿管梗阻后肾间质纤维化的形成机制。方法 :将 2 0只大鼠采用单侧输尿管梗阻(UUO)模型 ,术后 1周、2周观察双肾组织病理改变 ,并应用免疫组织化学方法检测肾间质Ⅲ型胶原、转化生长因子β1(TGF β1)和核因子 κB(NF κB)的表达。结果 :随着梗阻时间延长 ,梗阻肾间质Ⅲ型胶原、TGF β1和NF κB的表达增加 ,对侧无明显变化 ,两组相比有显著差异 (P <0 .0 5 )。结论 :单侧输尿管梗阻肾间质TGF β1、NF κB的过度表达 ,可上调肾间质Ⅲ型胶原的表达 ,是形成间质纤维化的重要原因之一     

尿毒清颗粒抑制大鼠肾脏间质纤维化作用靶点研究

目的：研究尿毒清抑制大鼠肾脏间质纤维化的作用。方法采用单侧输尿管结扎术制备肾间质纤维化大鼠模型,将10周龄SPF级雄性大鼠60只,随机分3组：假手术(Sham,n=20)、模型组(UUO,n=20)和尿毒清治疗组（UNQ,n=20）;UNQ组于于术前1天给予尿毒清2 g/（kg·d）灌胃,假手术组及模型组每天灌胃等量生理盐水,各组分别于术后第3、7、14天处死5只大鼠,取梗阻侧肾脏进行组织学检查,对肾间质细胞浸润、肾小管萎缩和肾间质纤维化情况进行半定量评分;采用免疫组化、ELISA和Western Blot分别分析肾组织中转化生长因子β1(TGF-β1)、纤粘连蛋白(FN)表达。结果与Sham相比,UUO大鼠各时间点的病理损害进行性加重,肾小管间质中TGF-β1、FN 表达均增高(P<0.05)。与UUO相比,尿毒清治疗后3 d,可观察到大鼠的肾间质炎性细胞浸润、肾小管萎缩及肾间质纤维化(P<0.05)明显减轻,同时肾组织中TGF-β1表达减少(P<0.05);治疗后7 d,上述治疗作用持续存在,同时进一步使UUO大鼠肾间质的FN 表达下降(P<0.05);治疗14 d后,肾间质细胞浸润情况评分（CIS）和慢性病变(包括肾小管萎缩和间质纤维化)评分（AFS）较 UUO 组分别下降22.2%和19.1%(P<0.05),TGF-β1、FN的表达则较UUO 组分别减轻30.8%和30%(P<0.05)。结论尿毒清的保护作用表现在肾损伤的开始就通过减少TGF-β1表达从而使肾间质炎症细胞浸润受到抑制,同时还能减少病变肾组织细胞外基质的积聚,从而减轻肾间质纤维化。     

来氟米特阻抑UUO大鼠肾间质纤维化的实验研究

目的:观察来氟米特对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化指标PCNA、α-SMA及ColⅠ、ColⅢ的表达程度的影响及相互关系,从而探讨其作用机制.方法:将36只健康、雄性SD大鼠中的24只行左输尿管结扎术,另外12只行假手术.术后第2天开始给药,结扎后的大鼠分为UUO组和治疗组.术后第7、14天分别处死各组中的6只大鼠,用免疫组化方法测定PCNA、α-SMA、ColⅠ、ColⅢ的表达情况.行HE和Masson染色,动态观察肾间质病理学改变.结果:来氟米特能显著减少UUO大鼠肾小管间质的PCNA、α-SMA表达,减轻ColⅠ和ColⅢ在肾小管间质的沉积.结论:来氟米特可抑制受伤的肾小管间质α-SMA的表达,减少基质的聚集从而减轻肾间质纤维化.     

血府逐瘀胶囊对单侧输尿管梗阻大鼠SnoN和Ski表达的影响

目的：探讨血府逐瘀胶囊对单侧输尿管梗阻所致大鼠肾间质纤维化的作用及其机制。方法：雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、血府逐瘀胶囊治疗组,采用单侧输尿管结扎术（UUO）建立大鼠肾间质纤维化模型。术后21d取各组大鼠肾组织HE染色及六胺银染色（PASM）,观察肾组织病理变化;检测大鼠血肌酐和尿素氮含量,观察肾功能变化;放射免疫法检测肾组织中Ⅲ型前胶原含量,观察肾纤维化程度;Western blot检测肾组织中核转录共抑制因子SnoN与Ski蛋白表达水平,观察TGF—β1／Smad信号转导通路中逆向调控信号分子表达水平的变化。结摹：与假手术组比较,模型组大鼠肾小管基底膜明显增厚,部分肾小管上皮细胞变性,肾小管萎缩,管腔显著扩张,。肾间质明显增宽;血肌酐与尿素氮含量以及肾组织中Ⅲ型前胶原含量显著增加：SnoN、Ski蛋白表达显著减少。血府逐瘀胶囊治疗组大鼠梗阻侧肾组织的病理变化明显改善,血肌酐与尿素氮水平以及肾组织中Ⅲ型前胶原含量明显降低,SnoN蛋白表达水平显著增加,而Ski蛋白表达没有改变。结论：血府逐瘀胶囊可通过恢复SnoN蛋白表达水平,抑制TGF—β1,靶基因的活化,从而改善UUO大鼠的。肾功能和肾间质纤维化程度。     

基质金属蛋白酶-9在单侧输尿管梗阻大鼠肾间质的表达及干预研究

探讨基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在单侧输尿管梗阻（UUO）模型大鼠肾脏的表达及赖诺普利与瑞舒伐他汀钙应用对其的影响。方法 ：选择健康雄性SD大鼠72只,随机分为4组,测定不同处理后第3,7,14天肾脏MMP-9的表达情况。结果 ：模型组肾小球、肾间质区域可见MMP-9的表达均呈进行性升高,而治疗组则能明显降低基质MMP-9的表达。结论 ：在UUO大鼠肾MMP-9的表达明显升高,可导致肾间质纤维化。赖诺普利与瑞舒伐他汀钙均能有效抑制基质MMP-9的过度表达,从而减轻肾间质纤维化。     

选择性环氧化酶-2抑制剂对梗阻性肾病大鼠肾组织中巨噬细胞趋化蛋白-1的调节

目的 探讨塞来昔布(celecoxib)与吲哚美辛(indomethacin)比较对单侧榆尿管梗阻(UUO)大鼠模型肾脏的保护作用及可能机制.方法 大鼠随机分为4组:模型组(UUO组),塞来昔布治疗组(UUO+celecoxib组),吲哚美辛治疗组(UUO+indomethacin组)和假手术组即对照组(SOR).4周后检测各组大鼠血清肌酐及尿素氮水平,并采用放射免疫方法 测定大鼠尿液血栓烷素B2(TXB2)浓度.应用免疫组织化学方法 检测肾脏巨噬细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、转化生长因子-β,(TGF-β1)及Ⅳ型胶原(ColIV)的蛋白水平.结果 塞来昔布及吲哚美辛均可以降低尿TXB2浓度,以塞来昔布组更为显著;与对照组相比,其余3组,MCP-1、TGF-β;及ColⅣ的蛋白表达水平均显著上升,肾间质纤维化严重;塞来昔布治疗后,上述蛋白表达水平显著下调,肾间质纤维化程度明显减轻.结论 塞来昔布能减轻UUO大鼠肾间质纤维化,下调MCP-1的表达,减少肾间质单核巨噬细胞浸润可能是其机制之一.     

丹参注射液对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏的保护

目的 探讨丹参注射液对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾间质纤维化的影响。方法 采用UUO致肾间质纤维化大鼠模型。24只雄性Wistar大鼠，随机分为假手术组、模型组和丹参组。术后第10d肾组织做HE、Masson染色及TGF—β1，α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）免疫组化检测。结果 丹参组显著改善梗阻侧肾组织病理变化，下调转化生长因子-β1（TGF-β1）和α-SMA表达。结论 丹参注射液对梗阻性大鼠肾间质纤维化有保护作用。     

罗格列酮抑制大鼠肾间质纤维化的实验研究

目的：探讨过氧化物酶体增生物激活受体-γ激动剂——罗格列酮对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠。肾间质纤维化的影响。方法：将30只wistar大鼠随机分成罗格列酮治疗组、模型组和假手术组。对治疗组，模型组行单侧输尿管结扎术建立输尿管梗阻的动物模型。术后第21天取3组术侧。肾组织做HE和Masson三色病理染色及用免疫组化方法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β1(TGF-β1)和Ⅰ型胶原(ColⅠ)在肾组织的表达水平。结果：罗格列酮可显著下调α-SMA、TGF—β1的表达．减轻Ⅰ型胶原在肾间质中的沉积，改善了肾脏病理改变。结论：罗格列酮对UUO所致的肾间质纤维化的形成有抑制作用。     

单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化中氧化应激的变化

目的采用单侧输尿管结扎（UUO）致肾间质纤维化大鼠模型，观察UUO后肾脏病理和肾组织羟脯氨酸（Hyp）含量及各氧化应激指标的改变，探讨氧化应激在肾间质纤维化中的作用。方法 成年健康Wistar大鼠24只，随机分为两组（n=12）：模型组（UUO组）大鼠麻醉后打开腹腔分离左侧输尿管，并于靠近肾盂段行左输尿管结扎；假手术组（Sham组）仅分离输尿管，不行结扎。两组大鼠于手术后10d处死取左侧肾脏，HE和Masson染色观察大鼠肾脏常规病理；以化学比色法测定梗阻侧肾组织匀浆中羟脯氨酸（Hyp）的含量、总抗氧化能力（T-AOC）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）和丙二醛（MDA）的含量。组间比较采用单因素方差分析，P〈0.05为差异有统计学意义。结果 大鼠行单侧输尿管结扎10d后，梗阻侧肾脏肿大、肾实质变薄，肾间质水肿，弥漫炎细胞浸润，肾小管扩张或萎缩，部分肾小管腔内有蛋白或细胞管型，间质趋向纤维化。与Sham组相比，UUO组梗阻侧肾脏病理改变明显，且肾组织中Hyp和MDA含量增加（P〈0．01），T—AOC含量和T—SOD活性下降（P〈0．01）。相关分析显示肾组织中Hyp和MDA含量与Masson染色中胶原沉积成正相关，（r1=0.69，r2=0.66，P〈0．01）；肾组织中T—SOD活性和T—AOC含量与Masson染色中胶原沉积成负相关，（r3=-0．57，P〈0．05，r4=-0．59，P〈0．01）。结论 单侧输尿管梗阻可以诱导大鼠肾间质纤维化，氧化应激参与肾间质纤维化的形成。     

罗格列酮对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的作用

目的 探讨罗格列酮（RSG）对单侧输尿管梗阻大鼠（UUO）肾间质纤维化的作用。方法 将24只大鼠随机分为假手术组、模型组、治疗组。对治疗组、模型组行单侧输尿管结扎术建立输尿管梗阻的动物模型。术后14天处死各组大鼠，取梗阻侧肾组织做HE和Masson染色及用免疫组化方法检测结缔组织生长因子（CT-GF）和α-平滑肌肌动蛋白（d—SMA）在肾组织的表达水平。结果罗格列酮可显著下调CTGF和α—SMA的表达，改善了肾脏病理改变。结论 罗格列酮对UUO所致的肾间质纤维化的形成有抑制作用。     

阿托伐他汀对肾间质纤维化的作用及机制

目的 探讨阿托伐他汀对肾间质纤维化的作用及其机制。方法 以单侧输尿管梗阻（U U O）的Wist ar大鼠为肾间质纤维化模型,将54只大鼠分为假手术组（S O R）、U U O组及U U O＋阿托伐他汀组（治疗组）,分别给予相应处理。于术后第1、2、3周观察3组大鼠肾小管损伤程度和肾间质纤维化指数;术后第2、3周采用免疫组化染色法,检测大鼠肾脏组织转化生长因子-B（T GF-B）、S mad2蛋白、纤维连接蛋白（F N）及结缔组织生长因子（CT GF）的表达水平。结果 第1、2、3周U U O组、治疗组肾小管损伤程度及肾间质纤维化指数均大于S O R组,治疗组肾小管损伤程度及肾间质纤维化指数均小于UUO组,差异有显著性（F=9 0.09～11.231,P〈0.05）。第2、3周3组间TGF-B1、S mad2、F N及CT GF水平比较,U U O组最高,S OR组最低,差异有显著性（F=10.365～11.775,P〈0.05）。结论 阿托伐他汀能显著减轻U U O导致的肾间质损伤和纤维化倾向,其作用机制与抑制T GF-B1等表达有关。     

维甲酸对UUO大鼠肾组织RANTES表达及炎症反应的影响

目的 探讨维甲酸对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织RANTES表达及肾组织炎症反应的影响.方法 成年清洁级雄性SD大鼠45只,随机分为假手术组(S组),UUO组(U组)和治疗组(T组),每组15只.假手术组行左输尿管游离,不结扎.UUO组和治疗组行左输尿管结扎.治疗组术后每天给予5mg/kg全反式维甲酸(ATRA)皮下注射,假手术组和UUO组注射同体积溶剂.于术后第3、7、14天观察肾小管损害、肾间质炎性细胞浸润程度,免疫组化和RT-PCR法观察病变肾组织趋化因子RANTES及其受体CCR5和TGF-β1表达.结果 与UUO组相比,治疗组肾间质炎性细胞浸润和肾小管损害程度显著减轻(P＜0.05),肾组织RANTES、CCR5和TGF-β1表达显著降低(P＜0.01).结论 维甲酸能减少UUO大鼠肾间质炎性细胞浸润、减轻肾小管损害,抑制RANTES、CCR5和TGF-β1表达,从而减轻肾脏炎症反应和纤维化.     

UUO大鼠肾小管间质P38MAPK的表达研究

目的 探讨单侧输尿管梗阻大鼠肾小管间质P38MAPK、磷酸化P38MAPK的表达变化,从而阐明P38MAPK在肾小管间质纤维化发生中的作用.方法 将30只雌性SD大鼠随机分为假手术组及模型组,模型组行UUO术.术后第5、10、15天分别处死两组中的5只大鼠,取左肾行HE和Masson染色,并用免疫组化方法检测肾小管间质中TGF-β1、P38MAPK、P-P38MAPK的表达.结果 模型组第5天组肾小管间质增宽,小管间质细胞增多,梗阻后第10天病变明显,第15天可见弥漫的肾小管基底膜增厚皱缩,纤维化明显（P＜0.01）.免疫组化结果显示：假手术组大鼠肾小管间质中仅有少量TGF-β1、P38MAPK和P-p38MAPK表达.模型组大鼠梗阻侧肾小管间质中TGF-β1、P38MAPK和P-P38MAPK表达明显增加（P＜0.01）,随时间进展,表达更加明显.结论 实验大鼠梗阻侧肾小管间质中TGF-β1、P38MAPK和P-P38MAPK表达上调,P38MAPK信号通路可能参与UUO大鼠肾小管间质纤维化过程.