白芍总甙对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞功能和脾细胞灾…

本文研究了白芍总甙对大鼠佐剂性关节炎滑膜细胞功能以及脾淋巴细胞增殖反应的影响及其作用机理。结果表明，ＴＧＰ５０ｍｇ．ｋｇ＾－１．ｄ＾－１×１０ｄｉｇ可使ＡＡ大鼠滑膜细胞过度分泌白介素１，肿瘤坏死因子和前列腺素Ｅ２的增殖；吲哚美辛２ｍｇ．ｋｇ＾－１．ｄ＾－１×１０ｄｉｇ抑制ＰＧＥ２，从而促进滑膜成纤维细胞的增殖，ＴＧＰ５０ｍｇ．ｋｇ＾－１．ｄ＾－１×１０ｄｉｇ恢复ＡＡ大鼠脾细胞过低的伴刀豆球蛋白Ａ增     

白芍总甙对大鼠腹腔巨噬细胞产生前列腺素E_2的作用及部分机制研究

白芍总甙（ＴＧＰ，０．０１～１００ｍｇ·Ｌ－１）对亚适浓度Ａ２３１８７（０．１μｍｏｌ·Ｌ－１）激活的大鼠腹腔巨噬细胞（ＰＭΦ）产生的前列腺素Ｅ２（ＰＧＥ２）呈现低浓度促进和高浓度抑制的双向调节作用。而ＴＧＰ对最适浓度Ａ２３１８７（１μｍｏｌ·Ｌ－１）激活的ＰＭΦ产生的ＰＧＥ２呈浓度依赖性的抑制作用，其ＩＣ５０为１６．７ｍｇ·Ｌ－１。在整体模型上，ＴＧＰ（５０ｍｇ·ｋｇ－１×１０ｄ）能使佐剂性关节炎（ＡＡ）大鼠ＰＭΦ产生过高的ＰＧＥ２恢复正常水平。采用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ荧光法测定ＴＧＰ对Ａ２３１８７（１μｍｏｌ·Ｌ－１）诱导正常大鼠ＰＭΦ胞内游离钙离子浓度［Ｃａ２＋］ｉ，发现ＴＧＰ（≤１０ｍｇ·Ｌ－１）对ＰＭΦ［Ｃａ２＋］ｉ无明显影响，而ＴＧＰ在（１０～１００ｍｇ·Ｌ－１）时，对ＰＭΦ［Ｃａ２＋］ｉ有一定抑制作用。提示高浓度ＴＧＰ对ＰＧＥ２的负向调节作用可能与抑制细胞内钙有关。     

白芍总甙对佐剂性生关节炎大鼠的免疫调节机制

动态观察白芍总甙（ＴＧＰ，５０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１，ｉｇ×２７ｄ）对佐剂性关节炎（ＡＡ）大鼠脾细胞刀豆球蛋白Ａ（ＣｏｎＡ）增殖反应发现，ＴＧＰ能使ｄ１４，２１与ｄ２８低下牌细胞增殖反应恢复正常。采用贴壁法纯化牌淋巴细胞（Ａ－），再回加２．５％的同系大鼠的腹腔巨噬细胞（ＰＭφ）建立重组细胞培养系统。结果发现，ＡＡ组的ＰＭφ能抑制正常和ＡＡ组Ａ－细胞的ＣｏｎＡ增殖反应，而ＴＧＦ治疗的ＡＡ组的ＰＭφ使上述培养的ＣｏｎＡ反应恢复正常，提示ＰＭφ是ＴＧＰ发挥治疗作用的一种靶细胞。采用放免法，动态观察ＴＧＰ对ＡＡ大鼠产生ＰＧＥ２的影响，发现ＴＧＰ能使ＡＡ鼠ｄ７、１４、２１与ｄ２８产生过高的ＰＧＥ２均恢复到正常水平。ＰＧＥ２与ＣｏｎＡ反应经相关性分析，发现ｒ＝－０．５５（Ｐ＞０．０５），提示ＡＡ大鼠ＰＭφ对ＣｏｎＡ增殖反应的抑制作用，除ＰＧＥ２外还有其它因子参与。     

松果腺与细胞免疫的关系及白芍总甙的作用

目的：观察松果腺功能低下大鼠的细胞免疫的变化及白芍总甙（ＴＧＰ）的作用。方法：主要应用傍晚腹腔注射普萘洛尔或大鼠双侧颈上神经节切除造成松果腺功能低下的模型。结果：下午４：００腹腔注射普萘洛尔（１５ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１×７ｄ）可引起Ｔ、Ｂ淋巴细胞转化率降低、ＴＧＰ（２０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１，ｉｐ或５０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１ｐｏ）能使普萘洛尔降低的Ｔ、Ｂ淋巴细胞免疫功能恢复正常；双侧颈上神经节切除造成大鼠胸腺及脾淋巴细胞的致分裂素反应降低，ＩＬ－２生成减少、ＴＧＰ（２０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１ｉｐ或５０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１ｐｏ）可反转双侧颈上神经节切除的作用。结论：ＴＧＰ的免疫调节作用与松果腺有关。     

白芍总甙的抗惊厥作用

采用最大电休克发作（ＭＥＳ）法、士的宁惊厥法和戊血氮最小阈发作（ＭＥＴ）法，观察白芍总甙（ＴＧＰ）对动物惊厥的影响。实验结果表明，ＴＧＰ（２０～８０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１，ｉｐ和ｉｇ×３ｄ）呈剂量依赖性对抗小鼠的ＭＥＳ。ＴＧＰ（６０～１００ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１，ｉｐ）能对抗士的宁引起的小鼠和大鼠的惊厥。ＴＧＰ（４０～８０ｍｓ·ｋｇ－１·ｄ－１，ｉｐ）对小鼠的ＭＥＴ无影响。ＴＧＰ（４０～８０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１，ｉｐ）对小鼠ＭＥＳ的作用高峰时间在０．５～１．５ｈ之间。     

红毛五加总甙的镇痛作用

红毛五加甙（ＴＧＡ，ｉｇ２００－８００ｍｇ·ｋｇ－１）能显著抑制小鼠热板、扭体、嘶叫反应及大鼠甩尾反应。连续给药７ｄ，镇痛作用无耐受现象。小鼠和大鼠ｉｃｖ２０ｍｇ（相当ｉｇ有效剂量的１／１０，可明显提高其痛阈。纳洛酮（２ｍｇ·ｋｇ－１）、利血平（４ｍｇ·ｋｇ－１）不影响ＴＧＡ的镇痛作用。ＴＧＡ还能明显降低大鼠足跖炎症组织中ＰＧＥ的含量。结果提示，ＴＧＡ具有镇痛作用，其作用部位可能在中枢，但可能不是通过兴奋阿片受体或影响脑内单胺类递质而发挥作用的；对ＰＧＥ含量的影响，可能是ＴＧＡ发挥镇痛作用的外周因素     

白芍总甙对大鼠腹腔巨噬细胞产生肿瘤坏死因子的调节机制

目的：研究不同浓度白芍总甙（ＴＧＰ）调节大鼠腹腔巨噬细胞（ＭΦ）产生肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）作用。方法：在ＭΦ培养系统中有或无环氧酶抑制剂和钙调蛋白抑制剂等工具药，测定４５Ｃａ内流、ＰＧＥ２和ＴＮＦ含量。结果：ＴＧＰ（０．５～１０ｍｇ·Ｌ－１）明显促进ＬＰＳ诱导ＭΦ的４５Ｃａ内流和ＴＮＦ产生。线性回归分析表明，４５Ｃａ内流和ＴＮＦ产生呈明显正相关。三氟拉嗪（４０μｍｏｌ·Ｌ－１）可阻断ＴＧＰ促进ＬＰＳ诱导ＭΦ产生ＴＮＦ。ＴＧＰ－ＬＰＳ的ＴＮＦ释放曲线呈钟罩形，而ＴＧＰ－ＬＰＳ的ＰＧＥ２产生曲线呈浓度依赖性升高。当ＴＧＰ在低浓度（０．５～１２．５ｍｇ·Ｌ－１）时，ＴＮＦ与ＰＧＥ２产生明显正相关，而高浓度（１２．５～２５０ｍｇ·Ｌ－１）两者呈明显负相关。吲哚美辛（１０μｍｏｌ·Ｌ－１）可使ＴＮＦ量效曲线下降支消失，而Ｎω亚硝基－Ｌ－精氨酸（１５μｍｏｌ·Ｌ－１）对此无明显影响。结论：低浓度ＴＧＰ对ＴＮＦ产生上调作用可能与促进４５Ｃａ内流，提高钙调蛋白活性从而促进ＰＧＥ２分泌等有关，而高浓度下调作用是可能与ＭΦ自身产生大量ＰＧＥ２介导有关。     

Ge－132赖氨酸盐的抗癌作用

Ｇｅ－１３２赖氨酸盐２００ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１×１０ｄ及１００ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１×１０ｄｉｇ对小鼠移植性Ｓ１８０荷瘤实体瘤的抑制率分别为４６．７％、３４．７％，对小鼠移植性Ｈ２２肝癌实体瘤的抑制率分别为４２．５％、３５．２％。２００ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１×１５·ｄ及１００ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１×１５ｄｉｇ对小鼠移植性ＬＬＣ肺癌实体瘤的抑制率分别为８１．７％、６１．７％，其抑制率均高于Ｇｅ－１３２同剂量组。Ｇｅ－１３２赖氨酸盐对Ｈ２２肝癌腹水型小鼠的生命延长率明显大于ＮＳ组及Ｇｅ－１３２组。提示Ｇｅ－１３２赖氨酸盐的抗癌作用比Ｇｅ－１３２更明显。     

黄芪多糖对烧伤小鼠细胞免疫功能的作用

应用小鼠烧伤模型，对黄芪多糖（ＡＰＳ）的免疫增强作用进行了体内外研究。结果表明：体内应用ＡＰＳ（２５０ｍｇ·ｋｇ－１，ｑｄ，连续５ｄ），可明显提高烧伤小鼠Ｔ淋巴细胞转化，ＩＬ－２的产生及ＩＬ－２Ｒ的表达；体外分别应用５０、１００、２５０ｍｇ·Ｌ－１的黄芪多糖，发现其可纠正烧伤小鼠Ｔ淋巴细胞转化，ＩＬ－２的产生及ＩＬ－２Ｒ表达的受抑状态，并促进巨噬细胞产生ＩＬ－１，抑制ＰＧＥ２合成，且呈剂量依赖关系；体外去除烧伤小鼠脾细胞中的巨噬细胞后，ＡＰＳ对Ｔ淋巴细胞转化，ＩＬ－２产生及ＩＬ－２Ｒ表达的调节作用消失。提示ＡＰＳ对烧伤小鼠的免疫调节作用依赖于巨噬细胞，通过调节其分泌ＩＬ－１，抑制ＰＧＥ２合成，而促进ＩＬ－２产生及ＩＬ－２Ｒ表达，进而增强Ｔ淋巴细胞增殖。     

白芍总甙、芍药甙和白芍总甙去除芍药甙对佐剂性关节炎大鼠的免疫调节作用

福氏完全佐剂致炎后ｄ１８，佐剂性关节炎（ＡＡ）大鼠刀豆素Ａ（３ｍｇ·Ｌ－１）诱导的脾淋巴细胞增殖反应显著低于正常对照水平，脂多糖（６ｍｇ·Ｌ－１）诱导的大鼠腹腔巨噬细胞（ＰＭΦｓ）产生ＩＬ－１显著高于正常对照大鼠。０．５～３１２．５ｍｇ·Ｌ－１白芍总甙（ＴＧＰ）、芍药甙（ＰＦ）和白芍总甙去除芍药甙（ＴＧＰ－ＰＦ）均能浓度依赖性地增强ＡＡ大鼠低下的脾淋巴细胞增殖反应（量效曲线均呈钟罩形），降低ＡＡ大鼠ＰＭΦｓ过度产生ＩＬ－１（量效曲线均呈倒钟罩形）。其中，２．５～６２．５ｍｇ·Ｌ－１ＴＧＰ的调节作用显著强于ＰＦ和ＴＧＰ－ＰＦ各等剂量组。这些结果表明，上述三种药物均具有浓度和机能依赖性的双向免疫调节作用，ＴＧＰ的作用最强。     

白芍总甙和丹皮总甙对松果腺调节炎症免疫反应的影响

本文采用普萘洛尔（１５ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１×７ｄｉｐ），双侧颈上神经节切除以及松果腺切除法观察了白芍总甙（ＴＧＰ）和丹皮总甙（ＴＧＭ）对松果腺调节炎症，免疫反应的影响。     

Total glucosides of paeony suppresses adjuvant arthritis in rats and intervenes cytokine-signaling between different types of synoviocytes

Total glucosides of paeony (TGP) are active compounds extracted from the roots of Paeonia lactiflora Pall. In this study, we investigated the mechanisms of total glucosides of paeony (TGP) in the treatment of adjuvant arthritis (AA). AA in rats was established. Synoviocytes proliferation and activity of IL-1 were determined by 3-(4, 5-2dimethylthiazal-2yl) 2, 5-diphenyltetrazoliumbromide (MTT) assay. Tumor necrosis factor alpha (TNF-alpha) and prostaglandin E2 (PGE2) were measured by radioimmunoassay. Ultrastructure of synovioctes was observed under transmission electron microscope. Phosphorylation of c-Jun N-terminal kinase (JNK), extracellular regulating kinase (ERK) and p38 kinase and expression of matrix metalloproteinases (MMPs) were detected by Western blot analysis. TGP (25, 50 and 100 mg kg(-1), ig, days 14-21) inhibited secondary inflammatory reaction, bone destruction and ultrastructure change of synoviocytes in AA rats. The administration of TGP (50 and 100 mg/kg, ig, days 14-21) in AA rats significantly decreased the production of IL-1, PGE2 and TNF-alpha by macrophage-like synoviocytes (MLS). TGP (25 mg/kg) also decreased the production of PGE(2) by MLS in AA rats. Furthermore, the increased phosphorylation of MAPKs, cell proliferation, and MMPs expression in fibroblast-like synoviocytes (FLS) stimulated by supernatants of MLS in AA rats could also be inhibited by TGP (50 and 100 mg/kg, ig, days 14-21). The results suggest that TGP possesses anti-inflammatory effects by modulating the pro-inflammatory mediators production from MLS and phosphorylation of MAPKs from FLS.     

丹皮总苷的抗炎免疫作用及部分机制研究

目的　研究丹皮总苷 (TGM)对佐剂性关节炎 (AA)大鼠抗炎免疫作用及其作用机制。方法　观察AA大鼠灌胃(ig)给药后继发性炎症反应、免疫功能及前列腺素 (PGE2 )释放水平的变化 ,并检测TGM体外给药对正常及AA大鼠免疫功能的影响。结果　TGM (2 5、5 0与 10 0mg·kg-1ig )对AA大鼠继发性炎症反应 (继发性足肿胀、多发性关节炎、继发炎症反应的踝关节病理组织学改变 )有明显治疗作用 ,且以 5 0mg·kg-1·d-1疗效最佳 ,并可使AA大鼠萎缩的胸腺器官重量恢复至正常。TGMig对AA大鼠低下的ConA诱导的增殖反应和IL 2产生以及对AA大鼠腹腔巨噬细胞(PMΦ)过高的IL 1和PGE2 产生有明显的抑制作用。体外培养发现 ,TGM对LPS诱导正常大鼠PMΦ产生IL 1具有低浓度 (0 4～ 10mg·L-1)促进和高浓度 (5 0～ 2 5 0mg·L-1)抑制的双向作用 ,对PMΦ产生PGE2 呈浓度依赖性地升高 ,其中IL 1产生曲线的下降支与PGE2 释放曲线两线呈负相关 (r =- 0 998,P <0 0 5 ) ;同时发现TGM在 10～ 2 5 0mg·L-1范围内能显著降低AA大鼠PMΦ产生IL 1和PGE2 ,同时显著升高AA大鼠脾淋巴细胞ConA增殖反应和IL 2产生。结论　TGM具有抗炎和剂量依赖性的免疫调节作用 ,并具有双向调节免疫细胞功能的特征 ,通过抑制细胞免疫功能实现对AA大鼠的治疗作用     

白芍总甙对大鼠佐剂性关节炎及其免疫功能的影响

本文研究了白芍总甙(TGP)对大鼠佐剂性关节炎(AA)的治疗作用及其机理。TGP 50 mg·kg~1·d~1 ig,连续11d对大鼠多发性关节炎有明显的防治作用,同时可使AA大鼠腹腔巨噬细胞升高的H_2O_2和白细胞介素(IL-1)水平下降,并可使AA大鼠低下的胸腺细胞有丝分裂原反应及脾淋巴细胞产生IL-2能力恢复正常。表明TGP对AA大鼠有抗炎和机能依赖性的免疫调节作用。     

氯苯扎利钠对小鼠T淋巴细胞及其亚型的影响

本文报道了氯苯扎利钠（ＣＣＡ）对小鼠淋巴细胞转化及对迟发性超敏反应（ＤＴＨ）的影响。结果表明，ＣＣＡ２５，５０，１００ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１ｉｇ，５一８ｄ对环磷酰胺（Ｃｙ，２５０和８０ｍｇ·ｋｇ－１）诱导的小鼠ＤＴＨ反应增高或降低呈双向调节作用。ＣＣＡ对由伴刀豆球蛋白Ａ。脂多糖诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖反应有增强作用。进而通过单克隆抗体间接免疫荧光法证明ＣＣＡ（５０，１００ｍｇ·Ｌ－１）使小鼠Ｌｙｔ－２＋细胞数增多，降低Ｌ３Ｔ４＋／Ｌｙｔ一２＋比值。     

木瓜苷对大鼠佐剂性关节炎的治疗作用

目的　研究木瓜苷对佐剂性关节炎 (AA)大鼠的治疗作用及部分机制。方法　大鼠足跖皮内注射弗氏完全佐剂诱发大鼠AA模型 ;足容积法测量继发侧足肿胀度 ,进行疼痛评分和多发性关节炎评分 ,MTT法检测胸腺T淋巴细胞和脾脏B淋巴细胞的增殖反应以及腹腔巨噬细胞产生IL 1水平 ,放射性免疫法测定腹腔巨噬细胞产生TNFα 和PGE2含量。结果　大鼠免疫后d 17开始分别灌胃木瓜苷 30、6 0、12 0mg·kg-1和阿克他利 6 0mg·kg-1对照药 ,连续给药 8d。木瓜苷 6 0、12 0mg·kg-1于d 2 1、d 2 4降低AA大鼠继发侧关节肿胀度、关节疼痛评分、多发性关节炎指数 ;木瓜苷 12 0mg·kg-1恢复AA大鼠胸腺T淋巴细胞增殖能力 ;木瓜苷各剂量还可不同程度抑制AA大鼠腹腔巨噬细胞产生IL 1、TNFα 和PGE2 。结论　木瓜苷可减轻AA大鼠关节肿胀、疼痛和多发性关节炎程度 ;该作用可能与调节T淋巴细胞的功能 ,抑制腹腔巨噬细胞过度分泌炎性细胞因子有关     

重组人内抑素诱导佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞凋亡的研究

目的以弗氏完全佐剂诱导的佐剂性关节炎(AA)大鼠为动物模型,观察重组人内抑素诱导AA大鼠滑膜细胞凋亡的作用。方法分离、培养滑膜细胞,噻唑蓝(MTT)比色法检测重组人内抑素体内用药对滑膜细胞增殖的影响;用缺口末端标记法(TUNEL)及流式细胞仪检测重组人内抑素对AA滑膜细胞凋亡的影响。结果AA大鼠表现为滑膜细胞异常增殖,rh-End(1.25、2.5、5.0mg·kg-1)体内治疗给药及rh-End6.25～50mg·L-1浓度范围体外给药可抑制AA大鼠成纤维样滑膜细胞的增殖反应。rh-End体内用药可诱导AA大鼠滑膜组织及细胞的凋亡,rh-End体外用药作用48h,AnnexinV/PI双染色法观察到大鼠AAFLS凋亡率为1.77%,rh-End(25mg·L-1)可诱导AA大鼠FLS的凋亡,其凋亡率为6.67%。结论rh-End可不同程度抑制FLS的增殖反应,并诱导其凋亡的发生,减轻AA大鼠增生性滑膜炎。上述结果提示炎症增生的滑膜细胞可能是rh-End的另一个作用靶点。     

重组人内抑素对大鼠佐剂性关节炎的影响

目的　观察重组人内抑素对大鼠佐剂性关节炎 (adju vantarthritis,AA)的影响及其作用机制。方法　用福氏完全佐剂 (CFA)诱导大鼠AA模型 ,MTT法检测脾淋巴细胞增殖反应 ,IL 1、IL 2活性的检测采用小鼠胸腺细胞增殖法 ,用放免法检测滑膜细胞培养上清液中IL 1和TNF α水平。结果　CFA致炎后d10 ,AA大鼠出现继发性炎症 ,给予不同剂量的内抑素 0 1、0 5、2 5mg·kg- 1·d- 1,sc ,连续 7d。结果发现 ,内抑素对AA大鼠的继发性足肿胀有抑制作用 ;进一步研究表明内抑素明显抑制AA大鼠过高的ConA诱导的脾细胞增殖反应 ,降低脾细胞IL 2的产生 ;对腹腔巨噬细胞(peritonealmacrophage ,PMΦ)产生过高的IL 1有抑制作用 ;另外 ,内抑素也可明显抑制AA大鼠滑膜细胞产生过高的IL 1和TNF水平。结论　重组人内抑素对AA大鼠具有治疗作用 ,其机制可能与其调节机体异常的免疫有关