卡维地洛对缺氧心肌细胞NO生成的影响

目的　通过研究卡维地洛对培养的心肌细胞在缺氧过程中 NO生成的影响 ,探讨 NO是否参与了卡维地洛减少缺血 /再灌注损伤的机制 .方法　采用 SD大鼠乳鼠心肌细胞 ,缺氧缺糖模拟缺血 .实验分为对照组和卡维地洛组 .对照组不加药 ,卡维地洛又分为 1× 10 - 6 ,3× 10 - 6 ,1× 10 - 5mol·L- 1 3个浓度亚组 ,各组按孵育时间又分为 12 h和 2 4 h两组 .结果　各组缺氧前 NO产量无明显差异 (各组间 P>0 .0 5 ) ;缺氧后各组各个时间点 NO产量与缺氧前比均有明显升高(P<0 .0 1) ,而各组内各个时间点间差异显著 (P<0 .0 1) ;卡维地洛 1× 10 - 6 mol· L- 1 组各个时间点 NO产量与对照组差异不显著 (P<0 .0 1) ;而 3× 10 - 6和 1× 10 - 5mol· L- 1组在缺氧后 12 h和 2 4 h与对照组相比 NO显著升高 (P<0 .0 1) ,且与 1× 10 - 6 mol· L- 1组差异明显 (P<0 .0 1) .结论　卡维地洛可以进一步增加缺氧期间心肌细胞 NO的产量 ,而后者可以减少缺氧时心肌的损伤 ,因此 ,在卡维地洛减少 I/ R损伤的过程中可能也有 NO的参与 .     

大豆苷元对乳鼠心肌细胞过氧化氢损伤的保护作用

目的 观察大豆苷元对心肌细胞损伤的影响并探讨其可能机理。方法 用体外细胞培养方法，培养乳鼠心肌细胞，制备过氧化氢损伤模型，测定细胞存活率、上清液中乳酸脱氢酶活性(LDH)、肌酸激酶(CK)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NEB)含量。结果 大豆苷元(10-160μmol/L)各剂量都能显著地提高过氧化氢损伤心肌细胞的存活率和用MIT法测得的A570 nm值；显著地抑制过氧化氢损伤引起心肌细胞的LDH和CK的释放；显著地减少过氧化氢损伤的心肌细胞MDA的生成．提高过氧化氢损伤的心肌细胞SOD的活性；显著地抑制过氧化氢损伤的心肌细胞NEB活性，降低NO水平。结论 大豆苷元对过氧化氢损伤的心肌细胞具有保护作用。     

褪黑素对脂多糖诱导新生乳鼠心肌细胞损伤的影响

目的探讨褪黑素（Melalonin,MT）对脂多糖诱导新生乳鼠心肌细胞损伤的影响及机制。方法培养1～2d龄乳鼠心肌细胞,建立体外培养模型。随机分为四组：对照组、LPS组、低剂量MT预处理组和高剂量MT预处理组。检测各组心肌酶和肌钙蛋白水平、细胞存活率。ROS敏感性荧光探针DCFH—DA测定细胞内活性氧（ROS）。免疫印迹法检测NADPH氧化酶亚单位p22phox表达。结果与对照组相比,LPS组心肌酶和肌钙蛋白水平明显上调,同时细胞存活率明显下降,同时LPS可诱导p22phox表达。以上指标在低剂最MT预处理组和高剂帚MT预处珊组均被抑制。结论褪黑素可抑制LPS诱导的新生乳鼠心肌细胞损伤,其机制可能与下调心肌细胞氧化应激水平有关。     

金丝桃苷对过氧化氢损伤心肌细胞的保护作用研究

目的研究金丝桃苷对过氧化氢(H2O2)损伤心肌细胞的保护作用。方法以原代培养的乳鼠心肌细胞建立H2O2损伤模型。实验分为7组:正常对照组、模型对照组、二甲基亚砜组(1%二甲基亚砜)、维拉帕米组(25μmol/L)、金丝桃低剂量组(0.6μmol/L)、金丝桃中剂量组(6μmol/L)、金丝桃高剂量组(60μmol/L)。测定各组心肌细胞一氧化氮合酶(NOS)、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶、肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)活性变化及心肌细胞肌钙蛋白(cTnI)的含量。结果金丝桃苷中、高剂量组结构型一氧化氮合酶(cNOS)、总一氧化氮合酶(tNOS)、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性较模型对照组显著增加(P<0.01),诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性较模型对照组降低(P<0.05);金丝桃苷低剂量组、中剂量组、高剂量组上清液的CK-MB、cTnI含量较模型对照组低(P<0.01)。结论金丝桃苷具有抗心肌细胞过氧化氢损伤作用,这可能与其提高心肌细胞膜的Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性,并调节不同亚型NOS活性有关。     

阿替洛尔对过氧化氢损伤乳鼠心肌细胞有保护作用

目的：观察阿替洛尔对过氧化氢（H2O2）致心肌细胞氧化损伤的保护作用，并探讨此作用的机制。方法：用H2O2作用于新生SD大鼠心肌细胞，建立心肌细胞过氧化氢损伤模型。用阿替洛尔预处理后，观察心肌细胞状态，测定心肌细胞存活率、乳酸脱氢酶（LDH）、丙二醛（MDA）活性。结果：阿替洛尔提高心肌细胞过氧化损伤的细胞存活率（P〈0.05），减少LDH和MDA的生成（P〈0．05）。结论：阿替洛尔对心肌细胞过氧化损伤有一定起保护作用。     

褪黑素对氧化损伤培养心肌细胞的保护作用

目的　建立心肌细胞氧化损伤模型 ,探讨褪黑素(MT)的保护作用 .方法　 1采用两种荧光探针 DCFH- DA和 Fluo- 3- AM分别标记细胞 ,用激光共聚焦显微镜观察低浓度 H2 O2 对心肌细胞内活性氧 (ROS)和游离钙 ([Ca2 + ]i)的影响 . 2 TBA法检测不同时间细胞丙二醛 (MDA)含量 . 3生化法检测细胞内乳酸脱氢酶 (L DH)的漏出量 . 4台盼拒染法观察心肌细胞存活率 .结果　与对照组相比 ,低浓度 H2 O2(10 0 mol· L- 1 )可使细胞内 ROS、[Ca2 + ]i、MDA、L DH明显升高 (P<0 .0 1)和细胞存活率明显下降 (P<0 .0 1) ;MT预处理后细胞内 ROS、[Ca2 + ]i、MDA、L DH升高明显减弱 ,细胞存活率明显升高 ,两组相比差异显著 (P<0 .0 1) .结论　 MT从多个方面都表现出良好的抗过氧化损伤效果 ,具有明显保护损伤心肌细胞的作用     

褪黑素对大鼠脊髓损伤后iNOS表达的影响

目的：探讨褪黑素对大鼠脊髓损伤后诱生型一氧化氮合酶（iNOS）表达的影响。方法：采用改良Allen’S撞击法制备脊髓损伤模型;成年SD大鼠110只随机分为假损伤组、损伤组和药物治疗组3组,其中损伤组和药物治疗组各50只,分5个时间点（8小时、24小时、72小时、7天、14天）处死;假损伤组10只,于手术后14天处死,采用HE染色和免疫组化检测脊髓损伤后脊髓组织中iNOS蛋白的表达。结果：与损伤组比较,药物治疗组大鼠损伤后脊髓组织iNOS表达明显降低,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：褪黑素可通过抑制iNOS蛋白表达对大鼠脊髓损伤起保护作用。     

肉豆蔻-8散提取物对过氧化氢诱导心肌细胞损伤的影响

研究肉豆蔻-8散提取物对过氧化氢(H₂O₂)诱导乳鼠心肌细胞损伤的影响,并探讨其作用机制。分离并培养大鼠乳鼠心肌细胞,建立H₂O₂诱导心肌细胞损伤模型。倒置显微镜下观察肉豆蔻-8散提取物对心肌细胞形态学的影响;采用MTT法检测心肌细胞活力;使用全自动生化分析仪检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CK)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)的含量;采用试剂盒法检测细胞中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)的含量;采用Hoechst荧光细胞核染色观察心肌细胞凋亡形态;使用流式细胞仪测定心肌细胞凋亡率。100 μmol/L H₂O₂作用2 h能明显造成约50%心肌细胞损伤。H₂O₂模型组出现细胞间隙增大、细胞数减少、细胞胞浆空泡等明显损伤现象。与H₂O₂模型组比较,肉豆蔻-8散提取物各剂量组,心肌细胞形态不同程度好转;能明显降低H₂O₂损伤心肌细胞培养液中LDH、CK、AST含量;显著降低H₂O₂损伤心肌细胞内MDA和NO含量,并提高SOD活力,能明显抑制H₂O₂损伤心肌细胞凋亡。通过改善细胞生存状态、提高细胞活力、降低氧化应激损伤、抑制炎症反应、抑制细胞凋亡,肉豆蔻-8散提取物可改善H₂O₂诱导心肌细胞损伤状态,从而对H₂O₂损伤的心肌细胞起到保护作用。     

褪黑素对脂多糖所致新生乳鼠心肌细胞能量代谢障碍的影响？？

目的：探讨褪黑素（melatonin,MT）对脂多糖（I。PS）诱导新生乳鼠心肌细胞能量代谢障碍的影响。方法：培养12d龄乳鼠心肌细胞,建立体外培养模型,随机分为4组：对照组、I。PS组、低剂量MT预处理组和高剂量MT预处理组,检9n．4各组ATP、ADP及AMP水平,乳酸脱氢酶（I。DH）和线粒体琥珀酸脱氢酶（MSDH）活性;利用荧光分光光度计测定线粒体膜电位（mitochondrialmembranepo—tentiaI,MMP）;电子显微镜下观察线粒体形态改变。结果：与对照组相比,I。PS组ATP、ADP及AMP水平明显下调,乳酸脱氢酶活性明显上调,线粒体琥珀酸脱氢酶活性及线粒体膜电位明显下调,差异均有统计学意义（P〈0．05）。以上指标在低剂量MT预处理组和高剂量MT预处理组均被抑制（P〈0．050．01）。同时,MT能改善LPS诱导的心肌超微结构的异常改变。结论：褪黑素可抑制LPS诱导的新生乳鼠心肌细胞能量代谢障碍。     

氢过氧化枯烯对培养心肌细胞DNA的影响

应用氢过氧化枯烯作用于体外培养大鼠心细胞，观察其对ＤＮＡ的影响。结果表明，氢过氧化枯烯引起心肌细胞＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入降低，ＤＮＡ断裂，脂质过氧化物含量增加。提示氢过氧化枯烯引发了心肌细胞的脂质过氧化过程，说明培养心肌细胞ＤＮＡ对自由基损伤作用是敏感的。     

ERK1/2信号通路介导丙泊酚对 H2O2诱发的心肌细胞损伤保护作用

目的：研究丙泊酚对 H2 O2诱发的心肌细胞损伤的保护作用及其作用机制。方法采用胰酶消化法获取大鼠胎鼠心肌细胞,以 H2 O2损伤心肌细胞获得心肌缺血再灌注损伤实验模型;加入不同浓度丙泊酚（12.5、25、50μmol·L -1）,MTT 法检测细胞存活率;用硫代巴比妥酸法、黄嘌呤氧化酶法分别测定各组细胞培养液中丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性;流式细胞术检测细胞凋亡水平;Western blotting 检测细胞中 ERK1/2、Bcl -2及 Bax 的表达。结果丙泊酚（12.5、25、50μmol·L -1）能抑制由 H2 O2导致的细胞死亡（P 〈0.01）;减少MDA 的产生（P 〈0.01）,提高 SOD 活性（P 〈0.01）;25、50μmol·L -1丙泊酚能抑制由 H2 O2导致的细胞凋亡（P 〈0.05）;25μmol·L -1丙泊酚作用于细胞后能激活 ERK1/2磷酸化,增加 Bcl -2且减少 Bax 的表达。结论丙泊酚通过激活 ERK1/2磷酸化对 H2 O2诱发的心肌细胞损伤起到保护作用。     

烧伤大鼠肺组织一氧化氮水平的改变

目的：研究一氧化氮（ＮＯ）在烧伤后肺损伤中的作用。方法：选用ＳＤ大鼠，麻醉后制成２０％Ⅲ度烧伤。分成对照组、烧伤组和烧伤＋单甲基精氨酸（Ｌ－ＮＭＭＡ）组。伤后定期取肺组织测定ＮＯ２＾－／ＮＯ３＾－和ｃＧＭＰ，并分析ＮＯ与肺含水量之间的关系。结果：烧伤后肺组织ＮＯ和ｃＧＭＰ水平均明显升高，肺含水量也相应增加。给予一氧化氮合成酶特异性抑制剂Ｌ－ＮＭＭＡ后，随着肺内ＮＯ的减少，肺含水量也显著降低。结论：     

褪黑素对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用研究

目的 探讨褪黑素（MT）对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及其作用机制。方法 成年Wister大鼠60只分为假手术组、手术对照组、手术＋VitC组（125mg／kg）、手术＋MT1组（0．2mg／kg）、手术＋MT2组（1mg/kg）、手术＋MT3组（5mg／kg）。测定各组大鼠肝缺血40min再灌注90min后血清中ALT、AST水平和肝组织中的丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）含量，电镜观察肝细胞线粒体的结构变化。结果 与对照组相比，MT组血清ATT和AST值上升幅度明显降低（均P〈0．01）；MT组的肝组织中MDA含量显著降低，SOD、CAT的含量明显提高（P〈0．01）；MT组肝组织HE染色光镜观察肝小叶结构保存较完整，肝细胞肿胀减轻；电镜观察肝细胞线粒体结构保存较完整。结论 MT对大鼠肝缺血再灌注致肝损伤具有保护作用。其保护机制可能是通过维持肝组织内SOD、CAT含量，清除氧自由基，抗脂质过氧化，稳定细胞膜性结构来实现的。     

褪黑素对氧化诱导人淋巴细胞凋亡相关基因表达的影响

目的 研究抗氧化剂褪黑素(MT)对H2O2诱导人淋巴细胞凋亡的作用。方法 用免疫细胞化学的方法检测凋亡相关基因bcl-2、bax的蛋白表达。结果 H2O2处理细胞后bcl-2基因表达轻度增高，加入MT后明显增高，而bax基因表达明显增加，MT干预后明显下降。结论 H2O2可诱导人淋巴细胞凋亡，MT可使H2O2诱导的细胞bcl-2基因的蛋白表达明显增高，并明显降低bax基因的蛋白表达，从而抑制淋巴细胞凋亡。     

老年糖尿病患者血清褪黑素水平和白细胞诱导型一氧化氮合酶mRNA的表达

对70例新诊断的糖尿病患者和30例老年健康者（对照组）,检测空腹血清褪黑素及外周血白细胞中诱导型一氧化氮合酶（iNOS）mRNA表达水平.老年起病的糖尿病患者（37例）的血清褪黑素水平明显低于对照组[（6.6±1.3）与（7.7±1.4）ng/L,P＜0.01];外周血白细胞iNOS mRNA表达水平明显高于成年起病的糖尿病患者[（36±3）%与（30±4）%,P＜0.01],对照组无iNOS mRNA表达.多元logistic回归分析显示,血清褪黑素水平下降及外周血白细胞中iNOS mRNA表达水平增高,可能是老年人发生糖尿病的危险因素.     

过氧化氢治疗中、重度一氧化碳中毒的疗效观察

目的　探讨 0 3%过氧化氢治疗中、重度一氧化碳中毒的疗效及临床应用价值。方法　随机将 33例中、重度一氧化碳中毒患者分为常规治疗 +过氧化氢组 (观察组 ,17例 )和常规治疗组 (对照组 ,16例 )两组 ,进行临床疗效的比较。结果　观察组显效 8例 ,有效 7例 ,无效 2例 ;对照组显效 3例 ,有效 5例 ,无效 8例。两组比较有显著差异 (u =2 19,P <0 0 5 )。结论　过氧化氢治疗中、重度一氧化碳中毒有较明显疗效 ,该疗法尤适合在无条件开展高压氧治疗的基层医院中应用     

Effect of polysaccharide sulfate 916 on the production of nitric oxide in ECV3 04 cells induced by cytokines and H2O2

Objective To investigate the effect of polysaccharide sulfate 916 (PS916) on the productio n of nitric oxide (NO) in ECV304 cells induced by tumor necrosis factor-α (TNF α), interleukin-1β (IL-1β) and H(2)O(2) in vitro. Methods Production of NO in ECV304 cells was measured by the Griess method and the proli feration of cells was tested by the MTT method. The activity of NO synthase was detected spectrophotometrically.Results Production of NO in ECV304 cells decreased after treatment with 40 ng/ml IL-1 β and 40 ng/ml TNFα, but increased in the presence of H(2)O(2) 0.1 mmol/L . PS916 significantly enhanced NO production in ECV304 cells in a dose-depende nt manner in the TNFα and IL-1β treated groups and decreased it in the H2O 2 treated group. Proliferation of ECV304 cells was inhibited by TNFα and H 2O2 and no effect was found in the IL-1β treated group. PS916 increased the proliferation of cells treated with TNFα and H(2)O(2) dose-dependently. In vitro, PS916 has no effect on the activity of NO synthase. Conclusion PS916 has a protective effect on ECV304 cells exposed to IL-1β, TNFα and H2 O2.     

米格列奈对内皮细胞一氧化氮合成及氧化应激的影响

目的 观察口服降糖药米格列奈对高糖环境下内皮细胞一氧化氮（NO）合成及氧化应激反应的影响.方法 成功培养及传代人主动脉内皮细胞（HAECs）,分为对照组（葡萄糖浓度为5.5 mmol/L）、高糖组（葡萄糖浓度为30 mmol/L）、米格列奈组（30 mmol/L葡萄糖＋10 μmol/L米格列奈）.ELISA法测NO、上清液中内皮型一氧化氮合酶（eNOS）及诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的含量;比色法分别检测6、12、24、48、72 h上清中超氧化物岐化酶（SOD）的活力及丙二醛（MDA）的含量.结果 ①米格列奈组24 h NO含量为（232.7 1±8.78）μmol/L,较高糖组低（P＜0.05）,随后逐渐升高,48 h和72 h含量[（263.48±6.32）、（270.91±6.03）μmol/L]较高糖组明显增高,差异有统计学意义（P＜0.05）.②干预24、48、72 h测米格列奈组eNOS的含量[（51.96±2.65）、（59.28±3.63）、（60.41±4.48） μmol/L]均较高糖组增高,差异有统计学意义（P＜0.05）;同步测iNOS含量[（53.28±3.45）、（62.09±3.71）、（59.90±3.60） μmol/L]与高糖组相比明显降低,差异有统计学意义（P＜0.05）.③干预6、12、24、48、72 h测米格列奈组SOD活力[（3.99±0.46）、（5.70±0.14）、（4.98±0.37）、（3.18±0.25）、（3.35 ±0.51） U/mL]较高糖组高,差异有统计学意义（P＜0.05）;测MDA含量[（0.500±0.014）、（0.633±0.018）、（0.623 ±0.051）、（0.510±0.030）、（0.513±0.015） nmol/mL]较高糖组明显降低,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 米格列奈能减少高糖环境中动脉内皮细胞iNOS的生成,增强eNOS的活性和表达,促进内皮细胞NO的产生,同时能减轻高糖引起的氧化应激损伤.