梗阻性黄疸大鼠脂多糖结合蛋白的变化及其意义

目的　探讨梗阻性黄疸大鼠脂多糖结合蛋白在不同梗阻时间的变化及其增敏机理。方法　将 80只雄性Wistar大鼠随机分为梗阻性黄疸组 (OJ组 ,n =4 0 )和假手术组 (SO组 ,n =4 0 ) ,分别于胆总管结扎手术前及手术后 5d、10d、15d、2 0d检测两组大鼠血清中脂多糖结合蛋白及血浆中内毒素、TNF α和IL 6水平 ,每组每一时相点各取 8只大鼠。结果　OJ组大鼠在胆总管结扎术后 10d ,其血清中脂多糖结合蛋白值为 ( 11.2 5± 2 .4 1)mg/L ,较SO组〔( 5 .32± 1.35 )mg/L〕明显升高 (P<0 .0 5 ) ,且随着梗阻时间的延长而进一步升高。相关分析显示 ,血清脂多糖结合蛋白与血浆内毒素、TNF α和IL 6在大部分时相呈明显正相关。结论　梗阻性黄疸时血清脂多糖结合蛋白水平升高 ,其增敏作用在梗阻性黄疸多器官损害中可能具有重要的作用。由此提示 ,通过降低血清中脂多糖结合蛋白 ,阻断其增敏作用 ,可为防治梗阻性黄疸提供一种新的思路     

肠源性内毒素血症对组织脂多糖结合蛋白mRNA表达的影响

目的 探伤烫伤后肠源性内毒素血症对不同组织脂多糖结合蛋白（ＬＢＰ）ｍＲＮＡ表达的影响。方法 采用大鼠３５％体表面积Ⅲ度烫伤模型，观察门、体循环内毒素含量及肝、肺、肠、肾等组织ＬＢＰ ｍＲＮＡ表达的改变。结果 烫伤后血浆内毒素水平（门、体循环均值分别为０．７０７ＥＵ／ｍｌ与０．３４２ＥＵ／ｍｌ）及细菌移位率（３７．１％）较伤前值均有显著升高（Ｐ〈０．０１）。同时，肝、肺、肠、肾等组织ＬＢＰｍＲＮＡ表     

肠源性内毒素血症对组织脂多糖结合蛋白mRNA表达的影响

目的探讨烫伤后肠源性内毒素血症对不同组织脂多糖结合蛋白(LBP)mRNA表达的影响。方法采用大鼠35％体表面积Ⅲ度烫伤模型,观察门、体循环内毒素含量及肝、肺、肠、肾等组织LBP mRNA表达的改变。结果烫伤后血浆内毒素水平(门、体循环均值分别为0.707EU/ml与0.342EU/ml)及细菌移位率(37.1％)较伤前值均有显著升高(P<0.01)。同时,肝、肺、肠、肾等组织LBP mRNA表达亦显著增多(P<0.01)。给予杀菌/通透性增加蛋白(BPI)治疗后可明显降低门、体循环血浆内毒素水平及肺、肠、肾等组织LBP mRNA表达(P<0.05～0.01),其中以肠道改变最为显著(治疗组与烫伤组均值分别为0.990与1.729,P<0.01)。相关分析显示,肺组织LBP mRNA表达与血浆内毒素水平呈显著正相关(r=0.594,P<0.05)。结论创伤后肠源性内毒素血症可显著影响不同组织LBP mRNA的表达,LBP mRNA在局部组织表达增多可能与增敏内毒素血症的组织器官损伤有关。     

肠源性内毒素血症对组织脂多糖结合蛋白mRNA表达的影响

目的探讨烫伤后肠源性内毒素血症对不同组织脂多糖结合蛋白（ＬＢＰ）ｍＲＮＡ表达的影响。方法采用大鼠３５％体表面积Ⅲ度烫伤模型，观察门、体循环内毒素含量及肝、肺、肠、肾等组织ＬＢＰｍＲＮＡ表达的改变。结果烫伤后血浆内毒素水平（门、体循环均值分别为０．７０７ＥＵ／ｍｌ与０．３４２ＥＵ／ｍｌ）及细菌移位率（３７．１％）较伤前值均有显著升高（Ｐ＜０．０１）。同时，肝、肺、肠、肾等组织ＬＢＰｍＲＮＡ表达亦显著增多（Ｐ＜０．０１）。给予杀菌／通透性增加蛋白（ＢＰＩ）治疗后可明显降低门、体循环血浆内毒素水平及肺、肠、肾等组织ＬＢＰｍＲＮＡ表达（Ｐ＜０．０５～０．０１），其中以肠道改变最为显著（治疗组与烫伤组均值分别为０．９９０与１．７２９，Ｐ＜０．０１）。相关分析显示，肺组织ＬＢＰｍＲＮＡ表达与血浆内毒素水平呈显著正相关（ｒ＝０．５９４，Ｐ＜０．０５）。结论创伤后肠源性内毒素血症可显著影响不同组织ＬＢＰｍＲＮＡ的表达，ＬＢＰｍＲＮＡ在局部组织表达增多可能与增敏内毒素血症的组织器官损伤有关。     

血液透析患者脂多糖结合蛋白／CD14的变化及其临床意义

观察血液透析(血透)患者体内脂多糖结合蛋白(LBP)/CD14的变化,并结合血透时血浆肿瘤坏死因子(TNF)、白介素6(IL-6)和内毒素的变化,探讨LBP/CD14系统在血透时尿毒症患者全身炎症反应中的作用。方法采用鲎试剂、ELISA和细胞原位杂交等技术分别观察血透和未透析患者血浆LBP、TNF、IL-6和内毒素水平及单核细胞内CD14 mRNA的表达变化。结果 (1)血透患者血浆LBP水平较未透析者显著升高,单核细胞CD14mRNA表达也明显增多,两者在透析中变化更明显;(2)血透时血浆TNF、IL-6水平显著升高,与血浆LBP水平变化呈显著正相关关系;(3)血透时血浆内毒素水平较低(<100ng/L)。结论 血透患者体内LBP/CD14系统明显上调,这可能与血透时全身炎症反应的发生有一定关系。     

内毒素血症时肝组织中脂多糖受体CD14的表达及其意义

目的 观测内毒素血症时大鼠肝组织中脂多糖受体CD14 mRNA的表达及其在内毒素介导Kupffer细胞（KCs)激活中的作用。方法 经大鼠尾静脉注入内毒素（剂量按5mg/kg计算）建立内毒素血症动物模型，测定血浆中内毒素、脂多糖结合蛋白（LBP)、TNF－α及IL－6含量变化，同时观测不同时相点肝组织中CD14 mRNA的表达及肝组织形态学变化，并与生理盐水组大鼠相比较。结果 在内毒素血症组大鼠中，随着血浆LPS浓度升高和时间延长，肝组织中CD14 mRNA的表达明显增强；血浆中LBP、TNF－α和IL－6含量也明显增加，与对照组相比较有显著差异（P＜0．01）。伴随KCs激活和肝细胞损伤的形态学改变，表现为KCs数量增多、体积增大、噬功能增强，肝细胞出现变性、坏死等变化。结论 内毒素血症时，随着肝组织中CD14表达增强和血浆LBP增加，可介导KCs激活，产生和释放多种细胞因子，诱导或加重肝组织及其它器官的损害。     

内毒素血症大鼠肺主动脉中一氧化氮合酶蛋白表达

一氧化氮合酶（NOS）作为NO生长的限速因素，是影响内毒素体克发病过程的重要中介物质，现已发现的NOS按产生是否需要外界刺激分为结构型（cNOS)和诱导型，按分布位置又将前者分为神经型（eNOS).在动物实验和临床观察中应用NOS和（或）iNOS抑制剂抑制NOS的基因和蛋白表达变化可使肺间质水肿和低血压得到改善，但是内毒素休克的死亡率仍然居高不下。且肺循环和体循环对吸入DO存在不同的反应，本实验拟在大鼠内毒素血症模型的肺动脉和胸主动脉中观察3种NOS蛋白表达的时间依从性变化及肺动脉和胸主动脉中NOS蛋白表达的差异，以了解内毒素休克时肺循环和体循环中3种NOS的蛋白表达的变化规律。     

内毒素预处理对内毒素血症大鼠各器官细胞凋亡的作用

目的　观察大鼠内毒素血症时各脏器的细胞凋亡及内毒素 (LPS)预处理对其作用。方法　将雄性Wistar大鼠 42只随机分为 3组 :生理盐水组 (N组 ,n =6) ;LPS对照组 (L组 ,n =18) ;LPS预处理组 (P组 ,n =18) ,P组 :首次 ,经腹腔注射LPS 0 .2 5mg/kg体重 ;2 4h后再经腹腔注射LPS 0 .5 0mg/kg体重 ,其余两组在上述时间均给予等量生理盐水 (NS) ;第 2次腹腔注射 72h后 ,L组和P组经静脉注入LPS 10mg/kg体重 ,N组给予等量NS。在静注LPS后 ,N组取 6只在 6h末、L组和P组分别在静注 2、4、6h时各取 6只大鼠处死。取动物肺、肝、小肠、脾等脏器组织 ,采用光镜、电镜及脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法观察细胞凋亡。结果　内毒素血症时脾、肺、肝、小肠均出现不同程度的实质细胞和免疫细胞细胞凋亡增加 ,而内毒素预处理使上述器官的细胞凋亡明显减少 (P <0 .0 5 )。结论　内毒素预处理可减少大鼠内毒素血症时脾、肺、肝、小肠等脏器的实质细胞及免疫细胞的细胞凋亡 ,这可能是内毒素预处理保护作用的机制之一。     

烫伤大鼠肝脏脂多糖结合蛋白和脂多糖受体CD14 mRNA表达的意义

目的　观察烫伤后肠源性内毒素移位与肝组织内毒素增敏系统———脂多糖结合蛋白/脂多糖受体CD14(LBP/CD14)的相互关系及其意义。　方法　采用大鼠 35 %TBSAⅢ度烫伤模型 ,动物随机分为正常对照组、烫伤和重组杀菌 /通透性增加蛋白治疗组。烫伤组和rBPI2 1　治疗组动物于伤后 12h活杀。留取肝组织和血标本分别检测组织LBP、CD14、肿瘤坏死因子α(TNFα)mR NA表达及肝脏功能指标。　结果　烫伤后肝组织内毒素含量显著降增高 (P <0 .0 1) ,且肝组织LBP/CD14、TNFαmRNA表达亦明显增多。给予rBPI2 1　治疗可显著降低肝组织内毒素水平 ,并不同程度抑制组织LBP/CD14、TNFα基因表达。同时 ,rBPI2 1　治疗组动物血清谷丙转氨酶水平显著降低 (P <0 .0 1)。　结论　烫伤后移位内毒素聚积于肝脏 ,可明显刺激机体局部组织LBP/CD14mRNA的表达 ,而组织LBP/CD14表达上调可能是严重烫伤增敏内源性内毒素作用的主要分子生物基础     

脾切除内毒素血症肺脂多糖结合蛋白和肿瘤坏死因子基因表达的研究

目的 观察脾切除大鼠内毒素血症脂多糖结合蛋白及肿瘤坏死因子(TNF)基因表达的变化,探讨脂多糖结合蛋白(LBP)在脾切除后肺损伤中的作用。方法 雄性Wister大鼠112只,随机分为有脾组(对照组):行大网膜切除;脾切除组:行脾切除术,每组根据时间点再分为内毒素注射前、注射后0.5、1.5、4.0、12.0、24.0 h组;各组均留取肺组织标本,采用改良过氯酸法预处理组织匀浆液、鲎试剂基质显色法检测组织内毒索水平;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测组织LBP,TNF-α mRNA表达水平;ELISA法测定组织TNF-α含量;对肺脏行常规病理检查。结果静脉注射内毒素后,脾切除动物肺组织内毒素较有脾动物明显升高(P<0.05)。脾切除大鼠内毒素攻击后肺组织LBP mRNA及TNF-α mRNA表达峰值较有脾组明显增高(P<0.05),且峰值持续时间延长,脾切除动物肺组织TNF水平较有脾动物明显增高,相关分析结果表明,组织TNF-α水平与TNF-α mRNA表达呈显著正相关,LBP mRNA表达与髓过氧化物酶(MPO)水平显著相关。病理示脾切除大鼠肺损害明显加重。结论 脾切除后肺脏内毒素清除延迟,内毒素在肺组织积聚,致组织细胞LBP mRNA过量表达,增敏内毒素激活细胞,进而诱发炎症因子大量产生,造成器官明显损害。     

Bid蛋白在瘢痕疙瘩中的高表达及其意义

目的 检测促凋亡分子Bid蛋白在瘢痕疙瘩中的表达,研究其与瘢痕疙瘩发生的关系. 方法 用免疫组织化学法和免疫印迹法（western blotting）分别检测12例瘢痕疙瘩与12例正常皮肤组织中Bid蛋白的表达,定量分析Bid蛋白在瘢痕疙瘩中的表达. 结果①Bid蛋白在瘢痕疙瘩和正常皮肤组织的角质细胞、成纤维细胞、炎症细胞以及血管内皮细胞、毛囊、汗腺、皮脂腺等细胞的胞质及部分胞核中表达.②表皮中Bid蛋白表达量两种组织差异无显著性（P＞0.05）;凋亡启动的细胞数量正常皮肤（1738.33±348.89/mm^2）高于瘢痕疙瘩（891.67±395.00/mm^2）（t＝-5.565,P=0.000）.在真皮中的Bid蛋白阳性成纤维细胞数,瘢痕疙瘩（911.67±323.61/mm^2）高于正常皮肤（220.00±80.00/mm^2）（t=7.188,P=0.000）.免疫印迹法实验结果进一步证实Bid蛋白含量瘢痕疙瘩（0.46±0.08）高于正常皮肤（0.02±0.01）（t=18.905,P=0.000）.结论①正常皮肤表皮凋亡启动的细胞多于瘢痕疙瘩;②Bid蛋白在瘢痕疙瘩真皮组织中表达增高.     

布加综合征血浆蛋白C及S的变化及其临床意义

目的 :探讨血浆蛋白C(proteinC ,PC)、蛋白S(proteinS ,PS)在布加综合征 (Budd -Chiarisyndrome,BC -S)时的变化规律 ,了解其变化与中医辩证分型的关系。 方法 :采用酶联免疫吸附双抗体夹心法 (ELISA) ,定量测定血浆PC、血浆游离蛋白S(freeproteinSFPS)及血浆总蛋白S(totalproteinS ,TPS)含量 ;免疫吸附收色底物法 (发色底物法 )测定血浆PC活性。 结果 :BC-S病人血浆PC、活性蛋白C(activateproteinC ,APC)、TPS、FPS水平均较正常对照组显著降低 (P <0 0 1) ,但在中医辨证分型各组之间无明显差异。 结论 :PC、PS的降低反映了BC -S的共性病理损害 ,与肝功能损害及抗凝蛋白合成障碍有关。对于中医辨证尚需从其它方面寻找依据。     

The Kinetic Expression of Lipopolysaccharide-Binding Protein and CD14 Gene in Obstructive Jaundice

Background: Binding lipopolysaccharide (LPS) with high-affinity, lipopolysaccharide-binding protein (LBP) and CD14 lower the threshold stimulatory concentrations of LPS dramatically and enhance the rate of cytokine production markedly. This study aimed to investigate the kinetic expression of LBP/CD14 and its possible relationship with tumor necrosis factor alpha (TNF-α) to better understand the pathophysiology of obstructive jaundice. Materials and Methods: The tissues (liver, spleen, intestine, and lung) of male Sprague-Dawley rats were harvested at pre-bile duct ligation in controls and at specific time points (24, 48, 72, 96, and 120 hr) after bile duct ligation. LBP, CD14, and TNF-α mRNA expression were measured in tissues harvested from controls and at the specific time points. Results: Hepatic LBP mRNA expression increased significantly at five days after bile duct ligation. CD 14 mRNA expression increased significantly after five days of bile duct ligation in liver, lung, spleen, and ileum. TNF-α mRNA expression increased significantly in all four organs (liver, lung, spleen, and ileum) after four days of bile duct ligation. Conclusion: Five days of bile duct ligation upregulated CD 14 mRNA expression in liver, lung, spleen, and ileum and increased TNF-α mRNA expression simultaneously in the liver, lung, spleen, and ileum. In addition, five days of bile duct ligation also upregulated LBP mRNA expression in the liver and increased hepatic TNF-α mRNA expression simultaneously. The kinetic expressions of LBP and CD 14 in obstructive jaundice are intriguing and further evaluation is warranted.     

严重外科感染患者杀菌/通透性增加蛋白水平的变化规律及意义

目的观察外科严重感染患者内源性杀菌／通透性增加蛋白（BPI）的变化规律及其临床意义。方法筛选外科严重感染患者19例,分别于感染前和感染后第1、3、5、7、14天采集血标本。采用ELISA方法测定血浆BPI、脂多糖结合蛋白（LBP）和白细胞介素-6（IL-6）水平;内毒素含量采用改良基质显色法鲎试验检测。同时检查感染前及感染后第1、3、5、7、14天的中性粒细胞计数,并观察患者预后。结果与正常对照组比较,脓毒症组患者感染后第1～5天血浆中BPI／LBP比值明显降低（P〈0．01）,第7天恢复至正常范围;严重脓毒症组患者感染后第1～7天其比值显著降低（P〈0．01）。此外,感染后第1～3天严重脓毒症组血浆中BPI／LBP比值显著低于脓毒症组（P〈0．05）。结论外科感染时机体内源性BPI和LBP水平迅速升高,但BPI的增幅明显低于LBP;感染早期BPI／LBP比值与脓毒症病情的严重程度密切相关。     

重症急性胰腺炎合并急性肾功能衰竭54例临床分析

目的分析重症急性胰腺炎（SAP）合并急性肾功能衰竭（ARF）的临床特点及其预防和治疗。方法回顾分析南京军区南京总医院1997年1月至2005年4月收治的503例SAP中合并ARF的54例病人的临床资料，并用直线回归（逐步回归）方法，对影响SAP合并ARF的发生率及病死率的相关因素进行分析。结果SAP合并ARF的发生率为10．7％，病人的年龄、SIRS（全身炎症反应综合征）持续时间、病情严重程度（APACHEⅡ评分、CT评分）、ARDS（急性呼吸窘迫综合征）、MODS（多器官功能障碍综合征）、ACS（腹腔间室综合征）、感染及局部并发症等因素对ARF的发生有显著的影响；54例中，死亡18例（33．3％），同时合并ARDS和MODS是增加病人病死率的重要原因。是否伴有胰周感染对病人的病死率影响不显著。结论早期液体复苏、控制病情发展、维护重要脏器功能及积极有效的引流是预防SAP并发ARF，改善预后的重要手段。     

Bid 蛋白在骨关节病关节软骨细胞中的表达及意义

目的研究促凋亡蛋白Bid在正常关节软骨细胞和骨关节病时关节软骨细胞中的表达,探索Bid蛋白在骨关节病发病中的作用。方法取20例髋关节骨关节病行关节置换的关节软骨标本和10例正常关节软骨标本,应用免疫组织化学方法检测Bid蛋白在软骨细胞中的表达。结果Bid蛋白表达阳性率在骨关节病关节软骨细胞中较正常关节软骨细胞高,两者有显著性差异。结论Bid蛋白可能通过参与调控关节软骨细胞凋亡,在骨关节病发病中起作用。     

食管癌组织中P16蛋白表达及其临床意义

目的探讨Ｐ１６蛋白表达在食管癌中的临床意义。方法应用免疫组织化学Ｓ－Ｐ法研究了６１例食管癌组织标本中Ｐ１６蛋白表达与食管癌临床病理特征及预后的关系，以及与增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的关系。结果Ｐ１６蛋白阳性表达率为４４．３％，其表达与浸润程度、有无淋巴结转移在统计学上无差异（Ｐ＞０．０５），与分化程度、ＴＮＭ分期有关（Ｐ＜０．０５），与ＰＣＮＡ之间存在相关（Ｐ＜０．０１），与术后肿瘤有无转移、复发在统计学上有差异（Ｐ＜０．０５），Ｐ１６阳性表达组的术后生存时间明显高于阴性组（Ｐ＜０．０１）。结论食管癌组织中Ｐ１６蛋白表达对细胞增殖起负性调控作用，检测其表达有助于对食管癌患者预后的判断。     

重症胰腺炎合并急性肾功能衰竭相关因素分析

目的分析重症急性胰腺炎(SAP)合并急性肾功能衰竭(ARF)的临床特点及防治措施。方法回顾分析我院2000年1月至2006年12月收治SAP合并ARF的46例病人的临床资料,并用直线回归方法,对影响SAP合并ARF病死率的相关因素进行分析。结果病人的年龄、全身炎症反应综合征(SIRS)持续时间、病情严重程度(APACHEⅡ评分),急性呼吸窘迫综合征(ARDS)、多器官功能障碍综合征(MODS)、腹腔间室综合征(ACS)、感染及局部并发症等因素对预后有显著的影响。46例中死亡28例(60.9%),同时合并ARDS和MODS是病死率增加的重要原因。结论早期液体复苏、控制病情发展、积极有效的引流及早期重要脏器功能的支持是预防SAP并发ARF,改善预后的重要手段。