人血清白蛋白对人牙龈上皮细胞在纯钛表面粘附作用的影响

目的：探讨人血清白蛋白（human serum albumin，HAS）对人牙龈上皮细胞（human gingival epith-elial cells，HE）在种植体材料表面粘附作用的影响。方法：HE原代培养，免疫荧光染色法标记细胞，观察人牙龈上皮细胞在人血清白蛋白预孵育及普通纯钛试件表面的粘附。结果：使用角朊细胞无血清培养基和分离酶成功地培养出HE；HE经广谱细胞角蛋白单抗免疫组化染色为阳性；浓度为50mg/ml的HAS预孵充于纯钛表面，4h时处理组粘附的HE的数量显著少于对照组，12、24h处理组与对照组相比，粘附的细胞数量无显著性差异。结论：HAS预孵充纯钛表面，对HE的粘附在早期产生抑制作用。     

骨髓基质细胞在钙磷涂层纯钛表面早期粘附的实验研究

目的：探讨表面经仿生法涂层纯钛片对骨髓基质细胞粘附特性的影响，方法：取三代兔骨髓基质细胞，接种于经仿生法钙磷涂层纯钛片表面和商用纯钛片表面，MTT法比较接种为0．5h,1h,2h,4h各时间点细胞在不同表面的粘附情况，并以荧光染色揭示细胞在不同钛片表面上的形态学差异。结果：荧光染色研究结果发现，2小时时粘附于涂层钛片的细胞体积更大，更不规则的多角形，多个伪足向四周伸展，而且粘附于仿生法钙磷涂层纯钛片表面的相对细胞数从1小时开始显著高于商用纯钛片表面相对细胞数，2小时点为细胞粘附的最高峰，结论：仿生法钙磷涂层能促进细胞早期粘附，是研究种植体表面改性的一种值得进一步探讨的实验室方法。     

兔骨髓基质细胞在不同纯钛表面的早期粘附

目的：比较兔骨髓基质细胞在3种不同化学蚀刻纯钛表面的早期粘附情况。方法：分别用HNO3、热H2SO4／H2O2、热H2SO4／HCl处理纯钛片30min。采用扫描电子显微镜、X射线光电子能谱对试样表面形貌及成分进行分析。取兔骨髓基质细胞接种于钛片表面,培养30、60、120min,采用荧光显微镜和四唑盐比色法对细胞粘附进行观察和分析。结果：HNO3组表面形貌光滑,平整;H2SO4／HCl、H2SO4／H2O2组表面粗糙。3组钛片表面的主要成分为钛、氧和碳。细胞在H2SO4／HCl、HNO3组表面粘附伸展良好,在H2SO4／H2O2组表面伸展较差。结论：细胞在H2SO4／H2O2组表面的粘附不及H2SO4／HCl组,甚至不如HNO3组。     

表面不同形貌对钛耐腐蚀性能影响的实验研究

目的：评价不同方法表面处理后纯钛表面粗糙程度对其耐腐蚀性能的影响。方法：制备33个纯钛试件并随机分为3组,分别进行喷砂、阳极氧化和机械抛光处理,应用扫描电镜观察不同处理后钛件表面微形貌,在酸性含氟人工唾液中测试开路电位和阳极极化曲线。结果：扫描电镜结果显示喷砂后钛表面有大量的弹坑和划痕,深度较深,且形状不规则,大小不一,边缘锐利,为微米级粗糙表面形态;而阳极氧化表面为大小均一的直径80Jim的纳米管状结构,为纳米级粗糙表面形态;机械抛光表面划痕明显,深度较浅,为微米级粗糙表面形态。在酸性含氟人工唾液中,3组之间自腐蚀电位值的比较为：阳极氧化组〉机械抛光组〉喷砂组;腐蚀电流密度值的比较为：喷砂组〉机械抛光组〉阳极氧化组,具有显著性差异（P〈0．05）。结论：不同的表面处理技术改变了钛材料表面的微形貌并影响了钛的耐腐蚀性能,经阳极氧化处理后的纳米级表面具有更好的耐腐蚀性能,喷砂会使钛的耐腐蚀性降低。     

纳米颗粒钛膜的构建及其表面形貌特征研究

目的构建4级纳米颗粒钛膜实验模型,并评价其表面微观形貌特征。方法采用直流磁控溅射法通过温度控制制备不同大小的纳米颗粒钛膜,采用X射线衍射测试其表面晶粒大小,采用原子力显微镜观察4个温度组（常温、100、250、380 ℃）Si、Ti基底及未镀膜对照组的表面微观形貌,统计并比较各组颗粒大小,测定各组表面粗糙度大小。结果各组样品表面均形成由密集的圆形或卵圆形颗粒组成的致密薄膜,随温度升高,颗粒大小和晶粒大小均逐渐增大。相对于平整的Si基底,Ti基底的本底形貌对表面膜有较大影响,形成一种复合结构,使Ti基底组的表面粗糙度呈现出随颗粒增大而降低的现象。结论本实验在直流磁控溅射中通过对温度控制而形成不同大小的纳米颗粒钛膜,这种在Ti基底上所形成的复合结构能进一步增大其比表面积。     

不同表面形貌掺锶羟基磷灰石涂层钛种植体的体内实验研究

目的:观察不同微弧氧化时间处理对纯钛表面形成的掺锶羟基磷灰石涂层表面形貌的影响,以及不同表面形貌特征对其表面成骨特性的影响。方法:经5、10、15 min 3种微弧氧化时间在钛表形成3组掺锶羟基磷灰石涂层,分别采用扫描电镜观察表面形貌;采用表面粗糙度仪测量涂层表面粗糙度数值。然后再将3种钛种植体植入新西兰兔体内,术后4、12周取材,采用组织染色法观察植入体表面骨形成情况和骨接触率(Bone Implant Contact,BIC)。结果:随着微弧氧化时间的延长,涂层表面形貌成多孔状且越加不规则,粗糙度增加;丽春红染色显示4周时植入体表面有新骨形成,12周时转化为成熟的骨组织并与涂层形成紧密的骨结合。随植入时间的延长种植体表面骨接触率逐渐增加,而且15 min组和10 min组的骨接触率在第4周和12周均高于5 min组。结论:不同微弧氧化时间可以改变掺锶羟基磷灰石涂层的表面特性,而粗化的的涂层表面结构有利于骨组织的形成。     

不锈钢洁治器、碳纤维洁治器对纯钛铸件表面形貌的影响

目的：比较金属洁治器和碳纤维洁治器对钛表面形貌的影响。方法：在磨光后的纯钛铸件表面分别用金属洁顺和碳纤维洁治器洁治，用肉眼，扫描电镜和表面形貌轮廓仪检测表面形貌的变化。结果：结论纯钛铸件表面形貌经过两种洁治器处理后都有改变，但是金属洁治器的影响比碳纤维洁治器明显。     

表面粗糙度对铸造纯钛表面细菌粘附影响的临床研究

目的 评价不同表面形态与表面粗糙度在对纯钛在口腔内戴用0．5年后的细菌粘附量与种类的影响。方法 常规制作纯钛铸造试件30个,分为皱纹形和不同粗糙度的平面形共5组。选择6名口腔粘膜健康的无牙颌受试者,在其上颌总义齿基托磨光面和组织面的不同部位粘固试件。戴用义6个月后,检测各组试件粘附细菌的情况。结果 ①患者个体因素对纯钛铸件表面粘附的细菌量明显的影响,但对细菌地染色分类影响不明显。②同一患者,试件表面粗糙度增加,细菌量明显增大（P＜0．01）,但细菌组成无明显变化;皱纹形试件比平面试件滞留的细菌数量多,除G^＋球菌外,还附着G^-球;相同粗糙度的2个试件,放于组织面者滞留的细菌数量比磨光面者明显减少（P＜0．01）,且前者粘附的主要为G ^-球菌和杆菌。结论 从有益牙周组织健康的角度看,制作纯钛修复体时应可能采用平面形钛制修复体,磨改后应重视抛光,尤其是组织面。     

纯钛表面改性对细菌粘附的影响

目的：研究氮离子溅射和氮等离子浸没注入对纯钛表面细菌粘附能力的影响。方法：制作纯钛试件288件,各随机选出96件,分别采用氮离子溅射和氮等离子浸没注入对其表面改性,纯钛组为对照组,氮离子溅射组为实验1组,氮等离子浸没注入组为实验2组。在实验1、2组和对照组试件表面粘附血型链球菌、粘性放线菌、白色念珠菌和金黄色葡萄球菌,分别进行细菌体外粘附实验。用菌落形成单位计数法统计分析氮离子溅射和氮等离子浸没注入对各种细菌粘附量的影响。结果：在细菌粘附24h、48h、168h后,上述4种细菌在氮离子溅射组和氮等离子浸没注入组表面粘附量较对照组表面粘附量显著减少（P〈0.001）,其中4种细菌在氮等离子浸没注入组表面粘附量明显少于氮离子溅射组（P〈0.001）。结论：纯钛表面氮离子溅射和氮等离子浸没注入均可抑制细菌粘附,氮等离子浸没注入较氮离子溅射抑制细菌粘附效果更明显。     

不同钛表面对血管内皮细胞早期粘附与增殖活性的影响

目的:观察血管内皮细胞在两种纯钛表面(光滑表面和粗糙表面)上的粘附情况.方法:医用纯钛片预备成光滑表面和粗糙表面两组,将猪血管内皮细胞接种于两组钛片表面,分别培养24、48和72 h后,通过吖啶橙染色和MTT活性测定,观察细胞在两种不同表面上的粘附和增殖活性.结果:荧光显微镜显示两组钛片上的内皮细胞均随着培养时间延长而增多,24 h时粗糙表面钛片上粘附的内皮细胞明显多于光滑表面组,而且细胞形态伸展好、成梭形.MTT结果显示粗糙表面组24 h和48 h的0D490值显著高于光滑表面组,而在培养72 h时,两组间没有统计学差异.结论:纯钛经双酸蚀处理形成的粗糙表面较其光滑表面更有利于血管内皮细胞的早期粘附,并促进其增殖.     

钛种植体表面微结构对成骨细胞影响的研究进展

钛种植体表面形貌是钛种植体表面改性的研究热点之一。种植体表面形貌主要有光滑、粗糙和多孔结构3类。种植体表面形貌对种植体一骨界面的成骨活性产生不同的影响。本文综述了种植体表面微结构对种植体一骨组织界面成骨细胞的生物学行为的影响，为研究和设计种植体表面微结构提供参考。     

氟化物控释装置对钛合金表面粗糙度影响的初步研究

目的:研究氟化物控释装置防龋对钛合金表面粗糙度的影响。方法:成品钛基台样本24个,随机均分4组。A、B、C组分别在加入2粒氟化物控释装置的20mL人工唾液中浸泡5、10、25d,D组在20mL人工唾液中浸泡25d作为空白对照。用干涉显微镜测量各组样本的表面粗糙度。结果:A、B、C组样本的表面粗糙度分别为(0.302±0.025)μm、(0.311±0.035)μm、(0.330±0.039)μm,D组的表面粗糙度为(0.292±0.030)μm。经统计学分析,空白对照组样本与其他各组样本表面粗糙度无显著性差异(P>0.05),A、B、C组样本两两之间亦无显著性差异(P>0.05)。结论:应用氟化物控释装置对钛合金表面无显著影响,表面粗糙度不随时间变化而变化。     

P-6对人骨髓间充质干细胞黏附和增殖特性的影响

目的 :探讨 6肽 (P - 6 )对人骨髓间充质干细胞 (mesenchymalstemcells,MSCs)黏附和增殖特性的影响。 方法 :将在体外分离培养的人骨髓间充质干细胞中分别加入 5、10、5 0、10 0、2 0 0、30 0、4 0 0ng/mL系列浓度的P - 6作为实验组 ,不含P - 6的培养基作为对照组 ,用图像分析系统计算接种后 1、2、4、8、12h各个时间点黏附细胞数 ;用MTT法分析培养第 2、4天细胞增殖活性。结果 :不同浓度P - 6组细胞黏附数无明显差异 (P >0 .0 5 ) ;5 0～ 2 0 0ng/mL的P - 6能促进MSCs增殖 ,其中以 5 0ng/mLP - 6培养 4 8h后 ,细胞增殖活性最强 (P <0 .0 5 )。 结论 :P -6对MSCs细胞黏附性无明显影响 ,5 0～ 2 0 0ng/mL的P - 6能刺激MSCs增殖     

Surface modification of titanium by etching in concentrated sulfuric acid

OBJECTIVE: The purpose of this study was to characterize the etching behavior of titanium in concentrated sulfuric acid and discuss its application on surface modification of titanium for biological use. METHODS: Commercially pure titanium (cpTi) plate was etched in 48% H2SO4 at RT -90 degrees C for 0.25-8 h. The weight loss was derived from the weight differences before and after etching. The surfaces after etching were characterized by surface roughness, X-ray diffractometry, and scannning electron spectroscopy. The apparent activation energy of the dissolution of cpTi into acid was derived from an Arrhenius plot of the rate of weight loss versus the acid temperature. RESULTS: The surface roughness of cpTi increased with the acid temperature and etching time. The surface roughness was strongly related to the weight loss. The weight loss increased drastically with the acid temperature after an initial period, which shortened with increasing acid temperature. The apparent activation energy for the dissolution of cpTi in H2SO4 was derived as 67.8 kJ/mol. SIGNIFICANCE: This study indicates that etching with concentrated sulfuric acid is an effective way to modify the surface of titanium for biological applications.     

Human gingival fibroblast functions are stimulated by oxidized nano-structured titanium surfaces

Objectives

The aim of this study was to analyze the features of an oxidized titanium implant surface and to evaluate its effects on the response of human gingival fibroblasts.

Methods

10 mm × 10 mm × 1 mm turned (control) and oxidized (test) titanium samples (P.H.I. s.r.l., Italy) were examined by scanning electron microscopy and atomic force microscopy and characterized by height, spatial and hybrid roughness parameters. Primary cultures of human gingival fibroblasts were seeded on titanium samples, and cell morphology, adhesion, proliferation and extracellular matrix deposition, in terms of type I collagen synthesis, were evaluated.

Results

Control and test surfaces appeared considerably different at the microscopic analyses: turned samples were grooved, whereas oxidized surfaces showed a more complex micro- and nano-scaled texture, as evidenced by roughness parameters. Cell adhesion and proliferation rate, as well as collagen synthesis, were greater on oxidized vs turned surfaces.

Conclusions

Although both control and test samples were in the range of average roughness proper of smooth surfaces, they exhibited significantly different topographic properties in terms of height and, mostly, hybrid parameters. Furthermore, oxidized surfaces enhanced human gingival fibroblast adhesion, proliferation and extracellular matrix deposition, and this could be due to the different structure at micro- and nano-scale levels.

Clinical significance

Oxidized nanostructured titanium surfaces could have a significant clinical utilization in virtue of their affinity for soft tissue attachment at the implant neck and/or at the transmucosal portion of the prosthetic abutment.     

纯钛或钛合金种植材料表面不同纳米结构对细胞行为的影响

种植材料表面可通过多种处理方法得到不同形态的纳米级结构,从而对细胞成骨相关的生物学行为产生重要影响。本文综述了纯钛或钛合金种植材料表面不同形态的纳米结构对细胞成骨相关生物学行为的影响,以期为种植体表面形貌的进一步改良及临床应用提供理论依据。     

四种纳米粒径钛片生物相容性检测

目的研究4种纳米粒径钛片的生物相容性。方法分别在常温、100℃、250℃和380℃,采用直流磁控溅射法,形成4种纳米粒径表面的钛片。在24孔培养板上,将SD（Sprague-Dawley）乳鼠第3代成骨细胞接种于4种纳米粒径的钛片和未处理的钛片表面,分别为常温组、100℃组、250℃组、380℃组、非处理组;另设1个空白对照组,细胞培养板内不放入钛片。四甲基偶氮唑盐比色法测定6组细胞的增殖情况。结果培养后第1、4、7天,250℃组和380℃组材料表面细胞持续增殖,其中250℃组最高;培养后第7天,4个温度处理组细胞光密度值与非处理组的差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论纳米化纯钛材料表面可促进成骨细胞的增殖。