大鼠心肌梗死后心肌组织中线粒体融合蛋白2基因和线粒体分裂蛋白mRNA表达水平的变化

目的观察大鼠急性心肌梗死后梗死周边区心肌组织中线粒体融合蛋白2基因(mfn2)和线粒体分裂蛋白(DRP1)表达水平的变化。方法 15只雄性SD大鼠通过前降支动脉结扎法建立大鼠急性心肌梗死模型后,随机分为心肌梗死2 d组,心肌梗死7 d组,心肌梗死14 d组;另设假手术组,每组n=5。利用荧光定量PCR法检测梗死周边区心肌组织中Mfn2和Drp1 mRNA的表达。结果心肌梗死组中Mfn2和Drp1mRNA表达低于假手术组,并在心肌梗死后2周内表达呈逐渐下降的趋势(P<0.05)。结论线粒体融合和分裂异常导致的能量代谢障碍,可能是心肌梗死后心室重塑及心力衰竭的重要机制之一。     

肝X受体激动剂对db/db鼠肾脏肝X受体表达及其活性的影响

目的探讨肝X受体(LXR)激动剂T0901317对db/db小鼠肾脏肝X受体表达水平及其活性的影响。方法将8周龄雄性db/db小鼠分为db/db组和db/db+T0901317组(均n=7),同时以同龄同性别野生型C57BL/6小鼠为对照组(n=7)。对照组和db/db组小鼠胃饲生理盐水(50μl/只/天×7),db/db+T0901317组小鼠胃饲T0901317[12.5 mg/(kg·d)×7];4周后RT-PCR检测肾组织ABCA1 mRNA水平;Western blot检测上述各组小鼠肾组织LXRα、LXRβ蛋白表达水平。结果与对照组相比,db/db组LXRα蛋白表达量、ABCA1 mRNA表达水平明显下调(P0.05);与db/db组相比,db/db+T0901317组上述指标表达上调(P0.05);与db/db组相比,T0901317组LXRβ蛋白表达差异无统计学意义(P0.05),而对照组LXRβ蛋白下调(P0.05)。结论 LXR可能通过激活LXRα进而上调ABCA1以减轻糖尿病引起的肾脏炎症性损害,为拮抗糖尿病所致的肾脏炎症性损伤提供新的理论依据。     

转化生长因子β1和血管内皮生长因子在单基因遗传自然发病糖尿病小鼠颌下腺的表达

目的:探讨单基因遗传自然发病型(db/db)糖尿病小鼠颌下腺转化生长因子β1和血管内皮生长因子表达变化与糖尿病性神经病变关系。方法:实验于2003-09/2004-05在承德医学院中心实验室和承德医学院附属医院病理科完成。①实验材料:引进日本C57BL/ksj-db/ m表型正常隐性基因小鼠80只。②实验干预及分组:小鼠近亲(兄妹)交配,得到纯合子和非纯合子后代。纯合子后代为单基因遗传自然发病型糖尿病小鼠,即db/db型,相当于人类Ⅱ型糖尿病;非纯合子后代,即db/ m型,为糖尿病和肥胖基因携带者。生后4周起,平均血糖值升高达10mmol/L以上且同时伴发肥胖者确定为糖尿病鼠,选取3,4,6,8,10个月龄db/db型,血糖>10mmol/L的雄性小鼠作为实验组;相应月龄的雄性同种db/ m型小鼠为对照组,每组5只动物。③实验评估:动物麻醉多聚甲醛灌注固定后,取3,4,6,8,10个月两组小鼠颌下腺,采用SP免疫组织化学染色,观察颌下腺的组织学改变和转化生长因子β1、血管内皮生长因子阳性表达的变化。结果:除去死亡和造模失败的小鼠外,正常对照组16只、实验组25只进入结果分析。①两组小鼠内皮细胞生长因子的表达变化:内皮细胞生长因子在正常鼠及糖尿病鼠颌下腺的血管内皮细胞中均有表达,实验组与对照组内皮细胞生长因子阳性细胞表达随月龄增加而增多。在月龄相同时,实验组的表达均强于同龄对照组(P<0.05或0.01)。②两组小鼠转化生长因子β1的表达变化:转化生长因子β1在正常及糖尿病鼠颌下腺的腺泡细胞、颗粒曲管及纹状管细胞中均有表达,阳性颗粒位于胞浆内。对照组阳性细胞数随月龄变化不大,实验组阳性细胞表达数随月龄增加而增多。在月龄相同时,实验组的表达均高于同龄对照组(P<0.01)。结论:db/db糖尿病小鼠颌下腺转化生长因子β1表达增强,同时有间质纤维增强,转化生长因子β1表达上调与糖尿病间质纤维增生密切相关。db/db糖尿病小鼠颌下腺血管内皮生长因子表达随病程延长表达增加,与糖尿病病程呈正相关。     

基于PINK1/Parkin通路介导的线粒体自噬探讨中药丹黄散对糖尿病溃疡的促愈机制

目的:以PINK1/Parkin通路介导的线粒体自噬为靶向,探讨丹黄散对糖尿病溃疡创面的促愈机制。方法:选择雄性无特定病原体（SPF）级db/db小鼠18只,同遗传背景的雄性SPF级db/m小鼠6只,按随机数字表法将18只db/db小鼠分为模型组、生长因子组、丹黄散组,每组6只;6只db/m小鼠作为空白组。使用4%水合氯醛麻醉,用无菌打孔器在小鼠背部建立直径为0.8 cm的皮肤缺损,制备糖尿病溃疡模型。空白组和模型组不予药物干预,对照组和丹黄散组分别给予重组人表皮生长因子凝胶和丹黄散外敷,每天换药1次,连续21 d。于造模后第7天、第14天取创面组织分析。通过苏木精-伊红染色法（HE）、Masson染色观察创面病理情况;透射电镜观察创面组织线粒体及自噬小体情况;Western-Blot检测创面组织LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ、PINK1、Parkin蛋白表达。结果:造模后的第7天、第14天、第21天空白组、生长因子组、丹黄散组创面愈合率均高于模型组（P<0.05）;第7天、第14天的小鼠创面组织HE染色、Masson染色后发现,与模型组相比,空白组、生长因子组、丹黄散组的炎症反应较轻,...     

生长分化因子11对db/db糖尿病小鼠胰岛β细胞功能的保护作用及机制研究

目的探讨生长分化因子11(GDF11)对瘦素受体基因纯合突变(db/db)糖尿病小鼠胰岛β细胞的保护作用及影响机制。方法将20只8周龄的C57B/6J野生型小鼠制备为db/db糖尿病模型,并随机分为GDF11组和DM组,每组各10只;GDF11组小鼠给予GDF11重组蛋白注射,DM组小鼠给予磷酸盐缓冲液(PBS)注射,连续注射6周;并选取10只同龄正常小鼠作为对照组(NC组),给予6周PBS干预。观察GDF11对小鼠生理生化指标、胰岛β细胞功能以及胰岛Smad2、P-Smad2表达水平的影响。结果经GDF11干预后,db/db糖尿病小鼠的空腹血糖(FBS)、糖化血红蛋白(Hb A1C)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、游离脂肪酸(FFA)均明显低于DM组及NC组小鼠(P<0.05);db/db糖尿病小鼠的糖耐量水平显著改善,GDF11组小鼠的血清胰岛素、血清胰升糖素均明显低于DM组(P<0.05),且均高于NC组(P<0.05);GDF11组小鼠的胰岛内胰岛素的水平明显高于DM组(P<0.05),但低于NC组(P<0.05);DM组与GDF11组小鼠的胰岛内胰升糖素无显著差异(P>0.05),且均高于NC组(P<0.05);经实时荧光定量PCR检测发现GDF11组小鼠胰岛胰十二指肠同源异型盒基因(Pdx-1)、亮氨酸拉链蛋白Maf家族A(MafA)、Nk同源异型盒基因家族6.1(Nkx6.1)、Insulin2基因表达上调;小鼠的p-Smad2、Smad2蛋白水平明显高于NC组小鼠(P<0.05)。结论GDF11可控制糖尿病小鼠胰升糖素分泌水平,调节β细胞转录因子表达,改善β细胞功能和含量,促进胰岛素的分泌合成,从而延缓糖尿病的发生和发展;GDF11对胰岛β细胞的保护作用可能与胰岛Smad2信号通路密切相关。     

有氧运动对乳腺癌大鼠癌因性疲乏后骨骼肌中线粒体动力学与功能的影响

目的:探讨乳腺癌大鼠癌因性疲乏后骨骼肌中线粒体动力学和功能变化及有氧运动干预对其的影响。方法:将24只雌性SD大鼠随机分为正常组、模型组和运动组,每组8只。除正常组外,其余各组均皮下注射鼠乳腺癌SHZ-88细胞株并接受化疗,以建立乳腺癌化疗疲乏动物模型;用水迷宫实验和力竭游泳实验检测各组大鼠癌因性疲乏状态;运动组鼠分别接受20min的中等强度的游泳运动,1次/天,6天/周,共6周。6周后检测大鼠癌因性疲乏情况,血浆中三磷酸腺苷(ATP)含量,骨骼肌中线粒体分裂蛋白(Drp1)和融合蛋白(Mfn1)的表达情况,线粒体膜电位(MMP),线粒体内ATP、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)的含量。结果:(1)化疗后,与正常组比较,模型组与运动组均出现疲乏(P0.05);与正常组比较,模型组血浆中ATP水平降低,骨骼肌中Drp1表达增加,Mfn1表达降低,MMP降低,MDA合成增多和GSH合成减少(P0.05)。(2)运动后,与模型组相比,运动组疲乏状态明显好转,血浆ATP水平升高,骨骼肌中Drp1表达减少,Mfn1表达增多,MMP升高,MDA合成减少和GSH合成增多(P0.05)。结论:中等强度有氧运动可以明显缓解乳腺癌大鼠的癌因性疲乏,可能与调节骨骼肌中线粒体动力学、改善线粒体功能有关。     

高脂饮食C57BL/6J小鼠Ym-1蛋白表达与胰岛素抵抗的关系

目的探讨巨噬细胞选择性活化与肥胖相关性胰岛素抵抗间的关系。方法 28只3周龄雄性C57BL/6J小鼠,随机平均分为2组:普食组(A组,n=14只),高脂饮食组(B组,n=14只),分别给予标准饲料与高脂饲料喂养。6周、12周分别检测空腹血糖((FBG)、血浆胰岛素(FIns)水平,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),测定肝组织匀浆三酰甘油(TG)、胆固醇(TC)及丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平;HE染色观察肝脏及脂肪组织病理学改变,DAB染色及免疫荧光染色检测小鼠肝脏、脂肪组织M2型巨噬细胞的特异性蛋白Ym-1表达情况。结果第6周B组小鼠体质量、FIns、HOMA-IR、TC均明显高于A组,FBG、TG、ALT较A组升高不明显;第12周B组小鼠体质量、FBG、FIns、HOMA-IR、TC、TG和ALT进一步升高,均明显高于A组。第12周B组小鼠脂肪组织内巨噬细胞选择性活化标志Ym-1蛋白表达较A组增强。结论巨噬细胞选择性活化可能参与了肥胖诱导胰岛素抵抗的发生。     

C57BL/6小鼠心肺复苏后心肌细胞线粒体自噬及细胞凋亡的相互作用与调节机制的研究

目的:探讨在心搏骤停心肺复苏系统性缺血再灌注损伤过程中,C57BL/6小鼠心室肌细胞线粒体自噬与细胞凋亡之间的相互作用和调控机制。方法:80只健康雄性C57BL/6小鼠应用高钾合并窒息法制备心搏骤停心肺复苏模型。其中6只复苏前组,74只小鼠造模。造模小鼠中有50只自主循环恢复(ROSC),将其随机分为复苏后2、12、24、48h组。应用透射电镜检测心肌细胞线粒体形态;应用Western blot检测线粒体自噬蛋白表达和蛋白磷酸化表达,检测与线粒体相关的细胞凋亡信号通路的蛋白表达和蛋白磷酸化表达。结果:C57BL/6高钾心搏骤停心肺复苏小鼠模型在复苏后48h内线粒体自噬特异性信号蛋白LC3-II表达持续显著增加,启动线粒体自噬的蛋白ULK1表达也持续增加。在复苏后12、24、48hC57BL/6小鼠通过mTOR磷酸化ULK1抑制线粒体自噬过度增加。C57BL/6小鼠在复苏后2、12h凋亡信号caspase-9蛋白活化增加,复苏后24、48h caspase-9蛋白激活逐步减少。心肺复苏后抑制凋亡因子Bcl-2未被明显激活。蛋白细胞色素C(Cyt c)和Smac/Diablo是线粒体释放的促进细胞凋亡的信号。C57BL/6小鼠在复苏后48h内线粒体释放的Smac/Diablo未见显著增加,线粒体释放的Cyt c在复苏后12h达到峰值。结论:免疫功能正常的C57BL/6小鼠心肌细胞在心搏骤停心肺复苏系统性缺血再灌注损伤过程中,激活线粒体自噬,清除受损的线粒体。在复苏后24h抑制线粒体自噬的信号通路也被激活,提示体内的调控机制发挥作用,防止线粒体过度自噬。线粒体释放促进细胞凋亡的信号蛋白Cyt c在复苏后12h达到峰值。Cyt c与procaspase-9/Apaf 1交联,促使caspase-9活化。     

血管紧张素转换酶2在糖尿病大鼠早期心肌组织中的表达

目的:观察糖尿病早期大鼠心肌组织中血管紧张素转换酶2(ACE2)mRNA的表达.方法:将21只8周龄雄性Wistar大鼠,随机分为正常对照组(n=7)和糖尿病组(n=14),一次性腹腔注射链脲佐菌素55 mg/kg,72 h后血糖大于16.7 mmol/L纳入糖尿病组,饲养12周.采用实时定量PCR(RT-PCR)检测正常及糖尿病大鼠心肌组织ACE2的基因表达.结果:与正常对照组相比,糖尿病组大鼠心肌组织ACE2 mRNA表达显著增加(P<0.05).结论:在糖尿病早期,大鼠心肌组织ACE2 mRNA的表达增加.     

环氧-二十碳三烯酸通过抑制线粒体分裂抑制肺气肿

目的研究环氧-二十碳三烯酸(EET)对慢性阻塞性肺病(COPD)肺气肿的影响和对线粒体动态变化的调节作用,探讨肺气肿和线粒体分裂的关系,进一步阐明EET对肺气肿的抑制作用及其相关分子机制。方法①采用野生型C57BL/6小鼠(WT小鼠)和Ephx2基因敲除小鼠(Ephx2-/-小鼠),随机分为吸入过滤空气组和熏烟组,每周暴露到相应的环境中5 d,每天1 h,熏烟16周建立COPD模型。造模结束后取小鼠肺组织,病理切片HE染色观察肺气肿严重程度;电子显微镜观察线粒体动态变化;肺组织匀浆提蛋白检测线粒体动态调控蛋白Drp1和MFN、自噬调控蛋白PINK1的表达水平。②采用人支气管上皮细胞(Beas-2B细胞系),用香烟烟雾提取物(CSE)刺激24 h建立模型,外源性加入14,15-EET(1μmol/L)(功能最强的EET亚型),研究14,15-EET对Drp1、PINK1和Parkin的作用。结果①与空气组比较,熏烟组小鼠出现明显的肺气肿[(96.38±39.01)μm vs.(29.18±16.6)μm;(57.53±17.81)μm vs.(25.13±10.12)μm],差异有统计学意义(P<0.05),而且Ephx2-/-小鼠的肺气肿程度较WT小鼠减轻[(57.53±17.81)μm vs.(96.38±39.01)μm],差异有统计学意义(P<0.05)。②与空气组比较,熏烟组小鼠肺组织上皮细胞内线粒体分裂明显增加[(5.33±2.52)μm vs.(15.33±5.03)μm;(10.33±1.53)μm vs.(16.33±4.73)μm],差异有统计学意义(P<0.05),而Ephx2-/-小鼠的线粒体分裂水平较WT小鼠减轻[(10.33±1.53)μm vs.(5.33±2.52)μm],差异有统计学意义(P<0.05)。③熏烟造成小鼠肺组织线粒体分裂蛋白Drp1表达水平升高(0.29±0.22 vs.0.18±0.06),融合蛋白MFN2表达下降(0.03±0.01 vs.0.13±0.01),线粒体自噬调节蛋白PINK1的表达升高(0.25±0.04 vs.0.14±0.028),差异有统计学意义(P<0.05)。④CSE刺激Beas-2B细胞后,外源性加入14,15-EET能够抑制Drp1、PINK1和Parkin的表达(1.97±0.43 vs.3.21±0.56,0.84±0.07 vs.2.01±0.20,1.24±0.13 vs.1.87±0.27),差异有统计学意义(P<0.05)。结论①EET可能通过抑制线粒体分裂减轻肺气肿;②其分子机制可能为抑制线粒体分裂调节蛋白Drp1。     

趋化因子CXCL13及其受体CXCR5在1型糖尿病DPNP中的作用机制

目的 探讨趋化因子CXCL13及其受体CXCR5在1型糖尿病引发的糖尿病性周围神经病理性疼痛（DPNP）中的作用机制。方法 将36只C57BL/6小鼠随机分为C57BL/6空白对照组和C57BL/6模型组（每组18只）。C57BL/6模型组采用腹腔注射链脲佐菌素（60 mg/kg）构建1型糖尿病模型。每周观测小鼠的体质量、血糖、机械痛和热痛阈值。于第15周检测2组脊髓中趋化因子、趋化因子受体和促炎因子水平的变化以及血清中炎症因子的变化。在上述试验基础上,再分别取12只C57BL/6小鼠和12只CXCR5^-/-小鼠按前述方法分别设立对照组和模型组（每组6只）,于第4周检测各组机械痛敏、第6周检测热痛敏。结果 C57BL/6模型组小鼠的脊髓中CXCL13和CXCR5等趋化因子及其受体的mRNA明显上调（P均<0.05）。C57BL/6模型组小鼠血糖升高、体质量减少,第4周的机械痛阈值降低、第6周的热痛阈值降低（P均<0.05）,但CXCR5^-/-模型组小鼠机械痛和热痛阈值无变化。与C57BL/6空白对照组比较,C57BL/6模型组小鼠的星形胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白、小型胶质细胞标志物离子钙结合衔接分子1以及炎症因子标志物环氧化酶-2、IL-1β以及磷酸化的丝裂原活化蛋白激酶（ERK）和信号转导和转录激活因子3（STAT3）的水平升高（P均<0.05）;血清中炎症因子IL-6、TNF-α和IL-1β蛋白水平升高（P均<0.01）。结论 趋化因子CXCL13及其受体CXCR5的激活或可促使1型糖尿病DPNP的发生,相关机制可能是通过激活胶质细胞与磷酸化的ERK、STAT3和炎症因子表达实现的。     

普伐他汀对家兔血小板源一氧化氮系统影响的实验研究

目的动态观察普伐他汀治疗前后血小板源一氧化氮(NO)系统的变化及其与动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)进程的关系。方法高胆固醇饲养诱导AS新西兰白兔模型30只。设普伐他汀药物干预组(A组,0周时开始服用普伐他汀10mg/d至24周)、普伐他汀药物治疗组(B组,在高胆固醇饲养(12周时开始服用普伐他汀10mg/d至24周)、无药物对照组(C组,0~24周均不用药)。采用RT-PCR方法检测A、B、C三组在0,6,12,18,24周不同时间血小板源内皮型氧化氮合酶(eNOS)基因mRNA和诱导型氧化氮合酶(iNOS)基因mRNA表达、氧化氮合酶(NOS)活性及NO含量的变化;通过大体病理形态证实不同时间大动脉AS程度及斑块形成情况。结果血小板源eNOSmRNA在0,6,12,18,24周时的表达量:A组无明显改变;B组分别是0.95±0.77,0.53±0.33,0.49±0.25,0.83±0.28,1.00±0.77(P<0.05);C组分别是0.82±0.16,0.40±0.29,0.33±0.29,0.51±0.23,0.19±0.12(P<0.05)。6,12周时B组和C组与A组比较明显降低(P<0.05);18,24周时,B组与A组无明显差异,但A组和B组较C组明显增高(P<0.01)。iNOS mRNA表达在A、B、C三组不同时期均无变化。NOS活性及NO含量在三组不同时期变化与eNOS mRNA相似。大体形态:A组未见AS形成;B组12周时见大动脉内膜粗糙,有大量脂纹,24周时有部分大动脉仍有脂纹,但内膜较光滑,未见斑块;C组24周时各大动脉均见大量斑块或脂纹。结论随着高胆固醇血症(HC)及AS的形成,血小板源eNOS mRNA表达量、NOS活性及NO含量逐渐降低;普伐他汀能上调血小板源eNOSmRNA表达,提高NOS活性,并能稳定AS病变的继续发展或使其逆转。     

运动训练对糖尿病大鼠尾神经传导速度的影响

目的：探讨运动训练对糖尿病大鼠尾神经传导速度（CNCV）的影响。方法：链脲霉素（STZ,55mg/kg）诱导的21只糖尿病大鼠随机平均分配到糖尿病运动8周组（A）、糖尿病运动4周组（B）和糖尿病对照组（C）,实验结束时17只糖尿病大鼠存活,其中A组6只、B组6只和C组5只;12只正常血糖大鼠随机分为正常运动8周组（D,n=6）和正常对照组（E,n=6）。运动组大鼠游泳60min/d,5d/周。实验过程中分别于基线、第4周、第8周时测定大鼠血糖、体重和CNCV。结果：糖尿病大鼠基线时血糖显著高于正常血糖大鼠     

mTOR在有氧运动调节胰岛素抵抗小鼠海马内突触可塑相关蛋白表达中的作用分析

目的:探讨有氧运动对胰岛素抵抗小鼠海马内突触可塑相关蛋白表达的影响及可能的mTOR和自噬相关机制。方法:6周龄C57BL/6J雄性小鼠适应性喂养1周后,随机分为普通对照组(C,n=12)和胰岛素抵抗模型组,分别进行普通饲料和高脂饲料喂养12周后,根据GTT、ITT结果判定胰岛素抵抗模型成功建立,并将该组小鼠随机分为胰岛素抵抗安静组(IR,n=10)、胰岛素抵抗+有氧运动组(AE,n=10)。AE组进行为期12周的递增速度跑台训练后,全部小鼠麻醉处死、取脑并剥离出海马组织,利用Western Blot技术检测小鼠海马内胰岛素信号通路,突触可塑、mTOR及自噬相关蛋白的表达情况。结果:胰岛素抵抗小鼠海马内PSD95、SYN的表达及AKT、mTOR的磷酸化水平显著性下降,4EBP2的表达显著性升高。有氧运动可提高mTOR、Raptor、LC3II/LC3I、NMDAR、SYN的表达以及AKT、mTOR的磷酸化水平。结论:有氧运动在提高胰岛素抵抗小鼠海马内PI3K/Akt信号通路活性的情况下,可通过激活mTORC1,进一步提高突触可塑相关蛋白NMDAR、SYN的表达。     

单宁酸对糖尿病大鼠血清及肾脏C反应蛋白表达的影响

目的观察单宁酸(tannic acid,TA)对链脲佐菌素(STZ)诱发糖尿病(DM)大鼠血清及肾脏C反应蛋白(CRP)表达的影响。方法 70只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、氨基胍(AG)组和TA低高剂量组,给药10周后处死大鼠。ELISA法检测各组大鼠血清CRP水平,免疫组织化学染色观察CRP在肾组织中的表达。结果 DM大鼠血清及肾组织CRP表达增加,单宁酸可降低DM大鼠血清CRP水平,下调肾组织CRP蛋白的表达。结论单宁酸可改善糖尿病大鼠微炎症状态,对保护糖尿病大鼠的肾脏损害具有一定的积极作用。     

The loss of GLUT2 expression by glucose-unresponsive beta cells of db/db mice is reversible and is induced by the diabetic environment.

Glucose-induced insulin secretion by beta cells of diabetic db/db mice was studied by a pancreas perfusion technique, and the levels of GLUT2 protein in pancreatic islets were assessed by immunofluorescence microscopy and protein blot analysis. Beta cells from diabetic mice had a high basal rate of insulin secretion; they did not respond to glucose stimulation but displayed a normal secretory response to arginine. At the same time, GLUT2 expression by db/db islets was lost whereas beta cells from nondiabetic db/+ mice expressed high levels of this transporter. GLUT2 levels in liver or kidney of diabetic mice were, however, mostly unaltered. Transplanting islets from db/db mice under the kidney capsule of db/+ mice restored normal GLUT2 levels. Conversely, transplantation of db/+ islets into db/db mice induced the disappearance of GLUT2 expression. When islets from db/+ mice were transplanted under the kidney capsule of streptozocin-diabetic mice, the immunodetection of GLUT2 also disappeared. We conclude that: (a) GLUT2 expression is decreased in glucose-unresponsive beta cells from db/db mice; (b) the decreased expression of GLUT2 is reversible; (c) the loss of GLUT2 expression is induced by the diabetic environment of db/db and streptozocin-induced diabetic mice. These observations together with previously published data suggest that a factor different from glucose or insulin regulates the beta cell expression of GLUT2.     

Chronic erythropoietin treatment affects different molecular pathways of diabetic cardiomyopathy in mouse

Background  Recent studies in mice experimental models with acute ischaemic injury revealed that erythropoietin (EPO) has numerous tissue-protective effects in the heart, brain and kidneys. We therefore explored the tissue-protective properties of chronic EPO treatment in an experimental model of the db/db mouse with diabetic heart injury.
Material and methods  We randomly treated 11 db/db mice with placebo (saline), 0·4 μg of the continuous erythropoietin receptor activator (CERA) per week ( n  = 11) or 1·2 μg CERA per week ( n  = 11) for 14 weeks, and analysed cardiac tissue. The lower CERA dose was a non-haematologically effective dose, whereas the second increased the haematocrit.
Results  Compared with mice in the placebo group, CERA-treated mice had a reduction in TGF-β₁ and collagen I expression in cardiac tissue ( P  < 0·01 vs. higher dose CERA). In addition, an increased expression of the pro-survival intracellular pathway p-AKT was observed ( P  < 0·05 vs. higher dose CERA). The values for the lower C.E.R.A had an intermediate nonsignificant effect. Furthermore, we were able to show that atrial natriuretic peptide (ANP) expression was increased in both CERA groups.
Conclusions  Chronic treatment with CERA protects cardiac tissue in diabetic animals, i.e. it inhibits molecular pathways of cardiac fibrosis, and the effects are dose-dependent.     

链脲佐菌素诱导C57BL/6小鼠糖尿病瘙痒模型的建立

[目的]探讨链脲佐菌素(streptozotocin , STZ)诱导C57BL/6小鼠糖尿病瘙痒模型的最佳剂量.[方法]24只雄性8周C57BL/6野生型小鼠,体重20～28 g,随机分为四组: A组(对照组)单次腹腔注射等剂量柠檬酸钠溶液 10 mL/kg,pH=4.5;B组STZ单次大剂量腹腔注射STZ 160 mg/kg;C组STZ腹腔注射40 mg/kg,连续注射5 d,每次给药时间间隔24 h;D组STZ两次中剂量注射,腹腔注射STZ 85 mg/kg+65 mg/kg,两次间隔时间24 h.从给药前4周开始,A组正常饮食,B、C、D组高脂饮食喂养至实验结束.注射STZ前1 d、注射STZ后1、2、3、4周测定动物的空腹血糖(FBG)、体重,采用录像记录30 min搔抓次数.[结果]与A组相比,B、C、D组造模后血糖升高并在不同时间点达到糖尿病标准(>200 mg/dL)(P<0.05),B组体重较A、C、D组下降(P<0.05),D组在STZ注射后第2、3周搔抓次数较A、B、C增多(P<0.05).[结论]腹腔分两次、间隔24 h注射STZ 85 mg/kg+65 mg/kg并配合高脂饮食是建立糖尿病并发瘙痒小鼠模型的合适方法.