博莱霉素致肺纤维化中TGF-β1表达

25只大鼠随机分为正常对照组和灌注博莱霉素实验组。在 3d ,7d ,14d ,30d分别取肺组织 ,以免疫组织化学技术测定TGF β1蛋白表达。结果显示未经博莱霉素处理正常对照组大鼠的少数细支气管粘膜上皮细胞的胞浆有TGF β1蛋白弱表达 ;博莱霉素处理大鼠的支气管、细支气管粘膜上皮细胞则TGF β1表达更明显和范围更广 ;特别是在 3～ 7d肺泡腔和间质中出现大量的TGF β1强阳性的肺泡巨噬细胞 ,14～ 30d时在肺泡腔和间质中只有少量TGF β1阳性的肺泡巨噬细胞。提示TGF β1蛋白表达阳性的肺泡巨噬细胞在急性肺泡炎期明显增加 ,对肺纤维化的发生和发展可能起重要的作用     

厄贝沙坦对2型糖尿病模型大鼠心肌TGF-β1和CTGF表达的影响

目的 探讨厄贝沙坦对2型糖尿病模型大鼠心肌TGF-β1和CTGF表达的影响.方法 对正常大鼠、糖尿病大鼠和厄贝沙坦给药的糖尿病大鼠进行体重、心脏重量指数、血糖和胰岛素的测定和比较,分析其心肌组织中TGF-β1和CTGF的表达.结果 两组动物3个月和6个月的体重、心脏重量指数、血糖和胰岛素表达的差异具有统计学意义,P＜0.05.厄贝沙坦能够降低干预组TGF-β1和CTGF的表达,且差异具有统计学意义,P＜0.05.结论 厄贝沙坦对2型糖尿病模型大鼠的心肌组织具有一定的保护作用,值得进一步的探讨和研究.     

胃癌组织中TGF-β1、TGF-βRⅡ、Smad2/3和CDC25蛋白的表达及其临床意义

目的 检测TGF-β1、TGF-βRⅡ、Smad2/3及CDC25蛋白在胃癌组织中的表达并探讨它们在胃癌组织中的发生、发展的意义.方法 利用免疫组织化学SP法检测110例胃癌、21例高级别上皮内瘤变、17例低级别上皮内瘤变、54例肠上皮化生、28例慢性萎缩性胃炎和57例正常胃黏膜组织中TGF-β1、TGF-βRⅡ、Smad2/3和CDC25蛋白的表达.结果 TGF-β1、TGF-βRⅡ、Smad2/3和CDC25在胃癌组织中的表达均高于正常胃黏膜组织.TGF-β1在胃癌组织中的表达高于上皮内瘤变、肠上皮化生和慢性萎缩性胃炎组织;Smad2/3在胃癌组织中的表达高于慢性萎缩性胃炎组织;CDC25在胃癌组织中的表达高于低级别上皮内瘤变组织,且在胃癌淋巴结转移组中的表达高于未转移组.TGF-β1与TGF-βRⅡ、Smad2/3和CDC25呈正相关,Smad2/3与CDC25也呈正相关.结论 TGF-β1、TGF-βRⅡ、Smad2/3和CDC25的表达是引起胃癌发生、发展的重要因素,可作为胃癌早期诊断的辅助指标.     

TGF-β1、PDGF、CTGF在矽肺患者血清中的表达水平及意义

矽肺是长期工作在较高浓度游离二氧化硅粉尘的环境中,吸入二氧化硅达到一定量后而引起的以肺纤维化为主的疾病,对人体危害严重,而且尚无有效的治疗手段。已有研究表明,一些细胞因子及其形成的网络系统在肺纤维化的发生、发展过程中起着重要作用,其中转化生长因子β1（TGF-β1）、血小板源性生长因子（PDGF）和结缔组织生长因子（CTGF）等对调控肺成纤维细胞的分裂、增殖及胶原蛋白合成与降解起着十分重要的作用。但关于这三种因子的研究多是体外研究,虽然离体实验一定程度可证明这些细胞因子存在相互作用网络关系,但不一定符合体内情况,     

结缔组织生长因子在博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化中的作用探讨

目的:检测结缔组织生长因子(CTGF)在小鼠肺内的表达,并探讨其在肺纤维化中的意义。方法:通过向气管内滴入博莱霉素建立小鼠肺纤维化模型。用免疫组化染色方法检测不同时期肺组织中CTGF蛋白的表达;用RT PCR检测CTGFmRNA的表达;用酸水解法测定肺羟脯氨酸的含量。结果:在正常小鼠肺组织中,CTGF蛋白和其mRNA几乎不表达;而在模型组的肺组织中表达明显升高(P<0.01)。CTGF蛋白表达于支气管/细支气管上皮细胞、肺泡Ⅱ型上皮细胞和肺成纤维细胞,表达量与肺组织中羟脯氨酸的含量呈显著的正相关(r=0.92,P<0.001)。结论:CTGF与肺纤维化的形成关系密切,CTGF检测可作为评价肺纤维化发生、发展的一种灵敏的指标。     

子痫前期患者胎盘组织TGF-β1及MMP-9 mRNA的表达及其意义

目的研究转化生长因子β1(TGF-β1)及基质金属蛋白酶9(MMP-9)mRNA在胎盘组织中的表达情况及其与子痫前期发病的关系。方法用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术对10例正常妊娠组和25例子痫前期组(包括11例轻度和14例重度)胎盘组织中TGF-β1、MMP-9 mRNA的表达水平进行检测。结果与正常妊娠组相比,重度子痫前期组胎盘组织中TGF-β1、mRNA表达量增加(P<0.05),MMP-9 mRNA的表达水平显着下降(P<0.01);轻度子痫前期组胎盘组织中TGF-β1、MMP-9与正常组相比无统计学差异(P>0.05)。结论TGF-β1、MMP-9的表达在基因转录水平就已经发生改变。TGF-β1通过下调MMP-9的表达而抑制滋养层细胞的侵入,这些浸润相关基因可能在子痫前期的发病中发挥着重要的作用。     

人脐带血干细胞抑制大鼠肺纤维化及肺巨噬细胞TGF-β1的表达

目的 研究人脐血间充质干细胞对博来霉素所致的大鼠肺纤维化及TGF-β1的影响.方法 取清洁级健康雄性SD大鼠60只随机分为博来霉素组(P组)、干细胞治疗组(M组)、地塞米松治疗组(D组)和阴性对照组(N组),取第2代人脐血间充质干细胞培养至第4代;P组、M组和D组分别经气管注入博来霉素制造肺纤维化模型,M组造模后立即经鼠尾静脉注入5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记的干细胞,D组造模后第2天开始连续7d腹腔注射地塞米松,N组经气管注入等量生理盐水,在第7、14、28天处死各组大鼠,行HE、Masson染色,免疫组织化学法观察TGF-β1表达及标记细胞情况.结果 M组第7、14、28天肺组织均可见标记的干细胞;HE及Masson染色后观察,与N组相比,P组7d时肺泡炎最明显,28 d肺纤维化程度最重,M、D组较P组轻且病理切片可见M组较D组肺泡炎及纤维化程度稍轻;肺组织中TGF-β1在P组7d时最高,M、D组明显少于P组,M组减少更明显,组间差异有统计学意义.结论 人脐血间充质干细胞可以定植于肺组织中,在肺纤维化早期通过抑制TGF-β1的表达,可能减轻肺泡炎及肺纤维化.     

早期肺腺癌中TGF-β1、p53、E-cadherin的表达及其相关性

目的探讨TGF-β1、p53、E-cadherin蛋白在早期肺腺癌中的表达及其相关性。方法采用免疫组化MaxVision法检测16例肺部不典型腺瘤样增生(atypical adenomatous hyperplasia, AAH)、33例原位腺癌、22例微浸润性腺癌、26例附壁生长为主型的浸润性肺腺癌(lepidic predominant adenocarcinoma, LPA)组织中TGF-β1、p53、E-cadherin蛋白的表达,并复习相关文献。结果早期肺腺癌中随着组织病理学分级的增高TGF-β1、p53蛋白阳性率升高,E-cadherin蛋白阳性率降低(P0.05)。在微浸润性腺癌及LPA浸润成分中TGF-β1、p53阳性率高于非浸润成分,E-cadherin阳性率低于非浸润成分(P0.05)。AAH、原位腺癌中TGF-β1与E-cadherin表达呈负相关,微浸润性腺癌和LPA的非浸润成分中TGF-β1与E-cadherin表达呈负相关(P0.05)。结论 TGF-β1、p53、E-cadherin蛋白在早期肺腺癌组织中存在异常表达,检测TGF-β1、p53、E-cadherin蛋白的表达有可能为早期肺腺癌的诊断提供依据。     

丹参联合川芎嗪对肺纤维化大鼠血清、支气管肺泡灌洗液中TNF-α和TGF-β1水平的影响

目的观察丹参联合川芎嗪腹腔注射对博来霉素(BLM)致肺纤维化大鼠血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)中TNF-α、TGF-β1水平的影响。方法将90只健康雄性SD大鼠,随机分为生理盐水(NS)组、BLM组、地塞米松(DXM)组、不同剂量中药联合干预组(即C1组:小剂量、C2组:中剂量、C3组:大剂量)6组。NS组大鼠气管内灌注NS,其余各组大鼠气管内灌注BLM造模,每天给予NS(NS组、BLM组)、DXM(DXM组)或不同剂量中药联合(C1、C2、C3组)腹腔注射,各组分别于气管内灌注药物后第7、14、28天处死大鼠各5只。肺组织HE染色和Masson染色观察肺泡炎和肺纤维化改变;ELISA检测血清和BALF中TNF-α、TGF-β1的水平。结果与NS组相比,BLM组第7天时肺泡炎较明显,第14天时有所减轻,出现肺纤维化,第28天时肺泡炎继续减轻,肺纤维化程度加重;DXM组不同时间点肺泡炎及肺纤维化程度均较BLM组减轻;C1组与BLM组相比,肺纤维化程度没有明显减轻;C2组和C3组大鼠第14天时肺泡炎及肺纤维化程度较BLM组明显减轻;C2组和C3组大鼠第28天时肺纤维化程度较BLM组明显减轻。与NS组比较,各组大鼠血清和BALF中TNF-α、TGF-β1水平均明显增加;与BLM组比较,DXM组和C2组、C3组不同时间点大鼠血清和BALF中TNF-α、TGF-β1水平均降低;与DXM组比较,不同剂量中药联合干预组不同时间点大鼠血清和BALF中TNF-α、TGF-β1表达均降低;以上比较差异均有统计学意义(P<0.05);C2组和C3组不同时间点血清和BALF中TNF-α、TGF-β1水平差异无统计学意义(P>0.05)。各组大鼠血清和BALF中TNF-α、TGF-β1的水平呈高度一致性。结论中、大剂量丹参联合川芎嗪腹腔注射可减轻BLM致肺纤维化大鼠肺泡炎和肺纤维化程度,其机制可能与降低血清和BALF中TNF-α、TGF-β1的表达水平有关。     

TGF-β1／Smad信号转导通路在子痫前期患者胎盘组织中的表达及其临床意义

目的检测子痫前期患者胎盘组织中TGF—β1／Smad的表达,探求TGF—β1／Smad信号转导通路在子痫前期发病中的作用。方法采用免疫组织化学法检测40例子痫前期（轻、重度）和正常孕妇15例正常妊娠妇女胎盘中TGF-β1以及Smad3、Smad4、Smad7的分布和表达,采用TUNEL法检测三组胎盘滋养细胞凋亡的情况。结果TGF-β以及Smad2、Smad3、Smad4、Smad7在正常妊娠和子痫前期患者胎盘的滋养细胞、内皮细胞、基质细胞中均有表达,以滋养细胞表达为主。TGF-β1以及Smad3、Smad4在正常妊娠组、子痫前期轻度组和重度组的表达强度及范围均呈逐渐升高趋势,Smad7在正常妊娠组、子痫前期轻度和重度组表达强度及范围依次呈逐渐下降趋势。正常妊娠和子痫前期患者胎盘的滋养细胞、内皮细胞、基质细胞均存在凋亡,以滋养细胞凋亡为主。重度子痫前期组胎盘滋养细胞凋亡（1．02）％显著高于子痫前期轻度组（0．73）％,子痫前期轻度组显著高于正常妊娠组（0．38）％,P〈0．05。滋养细胞TGF—β1的表达与滋养细胞凋亡具有相关性（r=0．96,P〈0．05）。结论子痫前期患者胎盘组织中的TGF—β1可能是通过Smad信号转导蛋白抑制滋养细胞浸润,诱导细胞凋亡。     

TGF-β1 shRNA真核表达质粒抑制人肺成纤维细胞TGF-β1的表达

目的:观察构建成功的三个针对人转化生长因子β1(TGF-β1)的小发夹RNA(shRNA)真核表达质粒抑制人肺成纤维细胞TGF-β1的表达.方法:将真核表达载体psiSTRIKE-RNAi1、psiSTRIKE-RNAi2、psiSTRIKE-RNAi3和对应的阴性对照载体经酶切鉴定和测序分析后,以Lipofectamine2000介导转染人肺成纤维细胞,48小时后应用实时荧光定量PCR检测人肺成纤维细胞TGF-β1 mRNA的表达并用ELISA检测细胞上清液中TGF-β1蛋白质的浓度.结果:重组质粒经酶切和DNA测序证实插入片段的碱基序列与预期设计一致.转染组细胞TGF-β1表达受到明显抑制,以psiSTRIKE-RNAi2的抑制效应最为显著(P＜0.01).结论:三个针对TGF-β1shRNA的重组质粒均能抑制TGF-β1在人肺成纤维细胞中的表达.     

实验性肺纤维化大鼠肺组织整合素α5β1和转化生长因子-β的表达

目的　研究纤维连接蛋白受体整合素α５β１ 在大鼠肺纤维化中的作用。方法　用免疫组化方法观察实验性大鼠肺纤维化纤维连接蛋白（ＦＮ） 及其受体整合素α５β１ 和转化生长因子β（ＴＧＦβ）表达的动态变化;用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 印迹杂交和免疫细胞化学方法观察ＴＧＦβ对体外培养的大鼠肺成纤维细胞整合素α５β１ ｍＲＮＡ和蛋白表达的影响。结果　（１）实验组１～３ 天,病灶内上皮细胞和内皮细胞整合素α５β１ 表达明显增强,炎细胞及增生的间质细胞亦呈阳性反应。以后,整合素α５β１ 阳性反应主要见于明显增生的间质细胞,并与ＴＧＦβ阳性分布相似。ＦＮ的变化与整合素α５β１ 的变化同步。（２）ＴＧＦβ作用后,大鼠肺成纤维细胞整合素α５β１ ｍＲＮＡ 及其蛋白表达增强（α５、β１ ｍＲＮＡ 杂交条带的积分光密度值,依次分别是对照的６．６ 、４．４ 倍;α５β１ 蛋白染色积分光密度值为对照的３．６ 倍） 。结论　整合素α５β１在肺间质细胞活化、增殖、分化及细胞外基质合成中起了极其重要作用。     

TGF-β的结构、受体及信号转导

转化生长因子β(TGF-β)是一种多功能细胞因子。人、鼠等哺乳动物的TGF-β已克隆出β1、β2、β3 3种亚单位。活性TGF-β是分子量为25kD的同源二聚体,每个单体由112个氯基酸组成。TGF-β受体育TβRⅠ～Ⅴ、Endoglin等。其中 TβRⅠ、TβRⅡ 属丝氨酸/苏氯酸激酶家族,在TGF-β信号转导中起主导作用。TGF-β与TβRⅡ结合后,再结合TβRⅠ,然后TβRⅡ磷酸化TβRⅠ,后者作为底物结合位点或激酶而发挥各种生物学效应。     

芪丹颗粒剂对大鼠肺纤维化模型的干预作用及对TGF-β1、TNF-α表达的影响

目的：探讨芪丹颗粒剂对博莱霉素A5所致大鼠肺纤维化的干预作用及可能的机制。 方法： SD大鼠经气管内一次性灌注博莱霉素A5(5 mg/kg)诱导肺纤维化，随后分别每日给予芪丹颗粒剂灌胃（芪丹组，3 125 mg/kg）、氢化可的松腹腔注射（氢可组，25 mg/kg）进行干预。对照组气管内灌注和灌胃均用生理盐水。各组动物均于药物干预后第7、14、28 d分别处死。用苏木素-伊红（HE）评价肺组织病理学变化、免疫组化（SABC法）测定肺组织TGF-β1、TNF-α蛋白的表达。 结果： 芪丹组肺泡炎及肺纤维化程度均明显轻于模型组和氢可组，TGF-β1、TNF-α蛋白的表达亦显著低于模型组和氢可组（P<0.01）。 结论： 芪丹颗粒剂可明显减轻博莱霉素A5诱导的大鼠肺纤维化的程度, 其作用机制可能部分通过降低TGF-β1、TNF-α蛋白的表达而实现。     

实验性肺纤维化大鼠组织整合素α5β1和转化生长因子—β的表达

目的 研究纤维连接蛋白受体整合蛋白受体整合素α５β１在大鼠肺纤维化中的作用。方法 用免疫组化方法观察实验性大鼠肺纤维化纤维连接蛋白及其受体整合素α５β１和转化生长因子－β表达的动态变化：用Ｎｏｒｔｈｅｍ印迹杂交和免疫细胞化学方法观察ＴＧＦ－β对体外培养的大鼠肺成纤维细胞整合素α５β１ ｍＲＮＡ和 白表达的影响。结果 （１）实验组１￣３天,病灶内上皮细胞和骨皮细胞整合素α５β１表达明显增强,炎细胞及     

复方三七饮对博莱霉素致大鼠肺纤维化TGF-β1/Smads信号通路的影响

目的 探讨复方三七饮(CPNG)对博莱霉素(BLM)致大鼠肺纤维化的干预作用及其机制.方法 雄性SD大鼠60只,随机分为6组:正常组、模型组、醋酸泼尼松组、CPNG大、中、小剂量组[CPNG(H、M、L)],每组10只.经气管内注入BLM(5mg/kg)制备大鼠肺纤维化模型.造模第2天,治疗组分别灌服醋酸泼尼松3.33 mg/(kg ·d)、CPNG大、中、小剂量(100、50、25) mg/(kg·d),正常组和模型组大鼠灌服等体积的蒸馏水,1次/d.28 d后处死大鼠,HE染色和Masson染色进行肺组织病理学观察;碱水法测定肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量;Western blot法检测TGF-β1、Smad2、Smad7蛋白的表达水平.结果 与模型组大鼠比较,肺组织的病理组织学HE和Masson染色显示CPNG能明显减轻大鼠肺泡炎和肺纤维化程度(P＜0.01);CPNG各剂量组大鼠肺组织中HYP降低(P ＜0.01);CPNG各剂量组TGF-β1、Smad2蛋白的表达水平降低(P＜0.01),Smad7蛋白表达水平升高(P＜0.01).结论 复方三七饮对博莱霉素致大鼠肺纤维化具有一定的防治作用,可能与调节TGF-β1/Smads信号通路有关.     

实验性糖尿病大鼠肺组织AGEs、TGF-β1、CTGF免疫组织化学分析

目的 探讨实验性糖尿病(DM)大鼠肺组织晚期糖基化终末产物(AGEs)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)的变化及其相关性. 方法 48只SD雄件大鼠随机分为DM组和对照组,每组24只.链脲佐菌素(STZ)60mg/kg尾静脉注射制造DM模型.分别于造模成功后4、12、20周末取材.免疫组织化学方法 观察肺组织AGEs、CTGF、TGF-β1的变化,并进行图像分析. 结果 DM大鼠肺泡上皮细胞、支气管黏膜上皮细胞、血管内皮细胞及平滑肌细胞可见大量AGEs阳性表达,平均灰度值低于对照组(P<0.05).随着DM病程的发展,AGEs阳性表达逐渐降低(P<0.01);4周DM大鼠支气管黏膜上皮细胞、血管内皮细胞、肺问质细胞可见少量CTGF、TGF-β1阳性细胞,12、20用时可见大量CTGF、TGF-β1阳性细胞,平均灰度值均低于对照组(P<0.01);Pearson相关分析显示,DM大鼠肺组织AGEs与CTGF、TGF-β1之间呈显著止相关(γ=0.939、0.904;P<0.01),CTGF与TGF-β1亦呈正相关(y=0.878;P<0.01). 结论 DM大鼠肺组织内AGEs随病程的延长其表达明显增加,并与CTGF、TGF-β1正相关.     

TGF-β1在卵巢癌患者血浆和肿瘤组织中的表达及临床意义

探讨TGF-β1在卵巢癌患者血浆和肿瘤组织中的表达及临床意义。采用ELISA方法定量检测79例卵巢癌、31例卵巢良性肿瘤和24例健康对照者的血浆TGF-β1浓度,79例卵巢癌患者中有31例收集到术后血浆,ELISA法检测TGF-β1在卵巢癌患者术前术后表达水平的差异;免疫组化法定性检测41例卵巢癌组织、20例卵巢交界性肿瘤组织和20例卵巢良性肿瘤组织中TGF-β1的表达情况,分析TGF-β1表达水平与临床病理指标间的关系。结果显示,与卵巢良性肿瘤及健康对照组相比,卵巢癌患者血浆中TGF-β1表达水平明显增高(P0.01);III/IV期卵巢癌患者血浆TGF-β1的表达水平明显高于I/II期患者(P0.05);与术前相比,术后卵巢癌患者血浆TGF-β1表达水平下降(P0.01);卵巢癌患者肿瘤组织中TGF-β1表达水平明显高于卵巢交界肿瘤组织及卵巢良性肿瘤组织,差异有统计学意义(P0.001),且肿瘤组织TGF-β1的表达水平与肿瘤临床分期及淋巴结转移有关(P0.05);而TGF-β1在卵巢交界肿瘤组织及卵巢良性肿瘤组织表达水平无差异(P0.05)。综上所述,TGF-β1在卵巢癌患者血浆及肿瘤组织中均呈高表达,且与肿瘤临床分期及淋巴结转移密切相关,提示卵巢癌患者机体及癌灶局部呈现免疫抑制状态。TGF-β1可为卵巢癌的临床诊断、病情监测提供重要的参考价值。     

转化生长因子β1与肺纤维化的研究进展

目的了解转化生长因子β1（TGF—β1）与肺纤维化的相关性及肺纤维化的治疗现状。方法应用现代信息技术，通过互联网等查阅近年来国内外相关资料并进行分析、整理、总结，对转化生长因子β1（TGF-β1）的生物学特征、TGF—β1与肺纤维化发病机制的相关性以及目前治疗肺纤维化的现状进行综述。结果转化生长因子β1（TGF—β1）在肺纤维化的发病机制中起到复杂的生物调节作用。结论深入研究转化生长因子β1（TGF—β1）与肺纤维化的发病之间的关系可以为临床上治疗肺纤维化提供新的思路。     

退变椎间盘中新生血管与TGF-β1表达的关系及其临床意义

目的观察并探讨转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)在退变椎间盘组织中的表达与新生血管的关系及其临床意义。方法采用免疫组化SP法,检测38例腰椎间盘突出症患者手术切取的椎间盘组织,与10例正常椎间盘组织中TGF-β1及CD34的表达情况。结果 TGF-β1和CD34在退变椎间盘中的阳性率分别为65.8%(25/38)和63.2%(24/38),在正常椎间盘组织中均未见表达(P<0.05)。TGF-β1和CD34的表达与患者的性别和年龄无关(P>0.05)。TGF-β1和CD34在病程3年以上患者的阳性表达明显高于3年以内者(P<0.05)。TGF-β1和CD34在脱出型和游离型的阳性表达比突出型更为明显(P<0.05)。TGF-β1和CD34阳性率呈正相关(P<0.05)。结论 TGF-β1和CD34在退变椎间盘组织的表达均明显升高,且两者之间的表达具有相关性,证实其在椎间盘退变的发病机制中可能具有一定的作用。