CD80和CD86在肝癌、肝硬化组织中的表达

0　引言　 T细胞介导的细胞免疫在实质器官肿瘤的抗肿瘤免疫应答中起着重要的作用 [1 ] .这种免疫应答的产生至少涉及 2种信号 .其一由 MHC与特异性抗原的复合物与 TCR相互作用提供 ,其二由共刺激分子提供 .在适当的条件下 ,共刺激分子 B7家族与 MHC , 类分子在肿瘤细胞上的共同表达 ,可以在抗原特异性免疫应答和肿瘤的免疫排斥中引起 T细胞亚群的成功活化 .不表达 CD80和 CD86的肿瘤细胞是没有免疫原性的 [2 ] .因此 ,我们采用免疫组织化学方法对肝细胞肝癌 (HCC)、癌周组织 (pericancerous tissuse,PCT)及肝硬化 (L C)组织细胞…     

CD80和CD86在食管癌组织中的表达

目的:观察食管癌组织中共刺激分子CD80(B7-1)和CD86(B7-2)的表达,以了解共刺激途径在食管癌肿瘤免疫中的作用和意义.方法:以正常食管组织和癌周组织为对照,采用免疫组织化学方法观察食管癌组织中CD80(B7-1)和CD86(B7-2)的表达.结果:CD80在食管癌组织中的表达阳性率及阳性频数均明显低于癌周组织和正常食管组织(P＜0.05、P＜0.01).CD86的表达阳性率在3组组织中无显著性差异(P＞0.05),但食管癌组织中阳性频数显著低于正常组织(P＜0.05).CD80和CD86存在细胞核,细胞质2种表达,缺乏细胞膜上的表达.结论:共刺激分子CD80与CD86在食管癌组织中呈低水平表达,并且存在着向细胞膜转运的障碍,可能与食管癌的发生、发展相关.     

CD80、CD83、CD86检测在非小细胞肺癌中的应用价值

目的 探讨CD80、CD83、CD86检测在非小细胞肺癌(NSCLC)中的临床意义。 方法 收集2012年1月-2015年12月在台州市第一人民医院治疗的NSCLC患者113例及健康对照组30例。采用流式细胞术分析NSCLC患者和健康对照者外周血CD80、CD83、CD86的表达水平。数据比较采用t检验和方差分析,患者生存时间采用Kaplan-Meier法和log-rank分析来确定是否有差异。 结果 NSCLC患者CD80、CD83、CD86水平明显低于正常对照组(t=10.026、4.963、4.870,均P<0.05),不同分期患者CD80、CD83水平差异有统计学意义(F=12.750、9.481,均P<0.05)。NSCLC患者术后CD80、CD83、CD86水平较术前明显升高(t=-3.648、-4.621、-4.257,均P<0.05)。CD80水平较高的NSCLC患者具有更好的生存率(P=0.040),而CD83、CD86水平与生存率无关(P=0.118、0.084)。 结论 检测NSCLC患者CD80、CD83、CD86水平具有一定价值,CD80、CD83与肿瘤分期密切相关,且CD80是NSCLC患者生存时间的独立预测因子。      

门静脉高压症患者外周血CD80/CD28的表达

目的检测门静脉高压症(portal hypertension,PHT)患者外周血淋巴细胞中CD80/CD28的表达情况,分析其与患者淋巴细胞亚群以及免疫功能的关系。方法采用流式细胞分析技术对30例门静脉高压症患者和30例正常人进行研究,对两组人群外周血CD80/CD28和淋巴细胞进行检测。结果流式细胞仪检测显示门静脉高压症患者外周血T细胞的CD80、CD28表达明显下降,PHT患者CD4+、CD4+/CD8+以及CD19+细胞均低于正常对照,与正常人对照组相比差异均有显著性。结论 PHT患者外周血T细胞低表达CD80、CD28,不能有效激活其通路,导致免疫功能低下。     

胃癌及区域淋巴结中树突状细胞CD83、CD80、CD86的表达与临床意义

树突状细胞(DENDRITIC CELL,DC)是机体内功能最强的抗原提呈细胞(ANTIGEN PRESENTING CELLS,APCS),具有独特的抗原提呈和激发功能,在肿瘤细胞和T淋巴细胞的相互作用中起桥梁和枢纽作用。对肿瘤微环境中浸润树突状细胞功能状态的研究将有助于揭示肿瘤的免疫逃逸机制。本研究应用     

LPS刺激对大鼠视网膜小胶质细胞CD80、CD86和CD40表达的影响

目的 研究脂多糖(LPS)刺激对CD80、CD86、CD40在大鼠视网膜小胶质细胞上表达的影响,探讨视网膜小胶质细胞在视网膜和视神经病变中与T细胞活化的关系.方法 分离培养大鼠视网膜小胶质细胞并进行OX42染色鉴定,当细胞培养达80%融合状态时分为正常培养组和LPS刺激组.采用RT-PCR法检测两组细胞CD80、CD86和CD40 mRNA的表达,硝酸还原法和ELISA法检测两组细胞一氧化氮(NO)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的分泌量.结果 RT-PCR检测显示,LPS刺激组的视网膜小胶质细胞CD80、CD86和CD40 mRNA的表达较正常培养组显著增加,两组比较差异有统计学意义(均P<0.01).正常培养组的视网膜小胶质细胞有少量NO和TNF-α分泌,LPS刺激组的小胶质细胞培养上清液中NO和TNF-α的分泌量较正常组显著增加[(18.10±1.57)μmol/L vs (1.55±0.15)μmol/L,(51.07±4.30)pg/mL vs (2.37±0.31)pg/mL],两组比较差异有统计学意义(均P<0.01).结论 培养的大鼠视网膜小胶质细胞有共刺激分子表达,LPS刺激后表达上调,提示视网膜小胶质细胞可能与T细胞活化有关.     

CD86在大鼠角膜移植排斥反应中的表达及意义

目的 观察大鼠角膜组织中共刺激分子CD86(B7-2)的原位表达，以了解共刺激分子在大鼠角膜移植排斥反应中的作用和意义。方法 制作大鼠角膜移植模型，观察角膜透明度、新生血管。采用免疫组化法检测CD86在角膜、脾脏组织中的表达。结果 术后角膜植片均出现不同程度的新生血管，角膜水肿、混浊，基质增厚。CD86在正常的角膜组织中无阳性表达；在移植后出现急性排斥反应的角膜上皮层中有大量阳性细胞表达。在脾脏的阳性细胞表达与文献报道的一致。结论 共刺激分子CD86在移植后发生排斥的角膜组织中的阳性表达，可能与免疫排斥反应有关。     

口服抗原对巨噬细胞共刺激分子CD80/CD86表达的影响

目的 探讨口服抗原对巨噬细胞(Mφ)共刺激分子CD80/CD86表达的影响及其在诱导妊娠免疫耐受中的作用.方法 自然流产小鼠(CBA/J×DBA/2)分为免疫组和未免疫组, 免疫组分别口服滋养细胞膜抗原(TMA2)和卵清蛋白(OVA),以正常妊娠小鼠(CBA/J×BALB/c)作为对照组.采用双标记流式细胞分析技术,分别检测各组小鼠脾脏及肠系膜淋巴结 (MLN) CD80 Mφ和CD86 Mφ的表达.结果 MLN内,未免疫组CD80 Mф表达明显高于对照组(P＜0.05),而CD86 Mφ含量明显低于对照组(P＜0.001);TMA2免疫组CD80 Mφ含量明显低于未免疫组(P＜0.05);OVA 免疫组CD86 Mφ含量明显高于未免疫组(P＜0.001).脾脏内,CD80 Mφ表达在各组间比较无显著差异;CD86Mφ表达, 未免疫组明显低于对照组(P＜0.05),TMA2免疫组显著低于未免疫组(P＜0.05),OVA免疫组则显著高于未免疫组(P＜0.001).结论 流产的发生与Mφ表面共刺激信号CD80/CD86异常有关;口服适当抗原可改变CD80/CD86 Mφ表达模式,诱导妊娠免疫耐受的形成.     

鼻咽癌组织中CD80、CD86表达量与鼻内镜术后复发及肿瘤凋亡、侵袭的相关性

目的:研究鼻咽癌组织中CD80、CD86表达量与鼻内镜术后复发及肿瘤凋亡、侵袭的相关性。方法:选择2013年2月~2014年3月期间在南充市中心医院手术切除的鼻咽癌患者并根据术后3年复发情况分为复发组、未复发组,选择同期活检的正常鼻黏膜组织,检测病灶中CD80、CD86以及凋亡分子、侵袭分子的表达量。结果:复发组、未复发组病灶组织中CD80、ARD1、Survivin、Shh、Ptch1、S100A4、Ezrin、N-cadherin的表达量显著高于对照组(P<0.05),复发组病灶组织中CD80、ARD1、Survivin、Shh、Ptch1、S100A4、Ezrin、N-cadherin的表达量显著高于未复发组(P<0.05);复发组、未复发组、对照组病灶组织中CD86的表达量差异无统计学意义(P>0.05)。CD80高表达的鼻咽癌病灶内ARD1、Survivin、Shh、Ptch1、S100A4、Ezrin、N-cadherin的mRNA表达量显著高于CD80低表达的鼻咽癌病灶(P<0.05)。结论:鼻咽癌组织中CD80的高表达能够通过促进细胞增殖及侵袭来参与肿瘤的复发。     

口服抗原对巨噬细胞共刺激分子CD80/CD86表达的影响

目的探讨口服抗原对巨噬细胞(M)共刺激分子CD80/CD86表达的影响及其在诱导妊娠免疫耐受中的作用。方法自然流产小鼠(CBA/J×DBA/2)分为免疫组和未免疫组,免疫组分别口服滋养细胞膜抗原(TMA2)和卵清蛋白(OVA),以正常妊娠小鼠(CBA/J×BALB/c)作为对照组。采用双标记流式细胞分析技术,分别检测各组小鼠脾脏及肠系膜淋巴结(MLN)CD80 M和CD86 M的表达。结果MLN内,未免疫组CD80 M表达明显高于对照组(P<0.05),而CD86 M含量明显低于对照组(P<0.001);TMA2免疫组CD80 M含量明显低于未免疫组(P<0.05);OVA免疫组CD86 M含量明显高于未免疫组(P<0.001)。脾脏内,CD80 M表达在各组间比较无显著差异;CD86M表达,未免疫组明显低于对照组(P<0.05),TMA2免疫组显著低于未免疫组(P<0.05),OVA免疫组则显著高于未免疫组(P<0.001)。结论流产的发生与M表面共刺激信号CD80/CD86异常有关;口服适当抗原可改变CD80/CD86 M表达模式,诱导妊娠免疫耐受的形成。     

LPS刺激对大鼠视网膜小胶质细胞CD80、CD86和CD40表达的影响

目的 研究脂多糖(LPS)刺激对CD80、CD86、CD40在大鼠视网膜小胶质细胞上表达的影响,探讨视网膜小胶质细胞在视网膜和视神经病变中与T细胞活化的关系.方法 分离培养大鼠视网膜小胶质细胞并进行OX42染色鉴定,当细胞培养达80%融合状态时分为正常培养组和LPS刺激组.采用RT-PCR法检测两组细胞CD80、CD86和CD40 mRNA的表达,硝酸还原法和ELISA法检测两组细胞一氧化氮(NO)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的分泌量.结果 RT-PCR检测显示,LPS刺激组的视网膜小胶质细胞CD80、CD86和CD40 mRNA的表达较正常培养组显著增加,两组比较差异有统计学意义(均P<0.01).正常培养组的视网膜小胶质细胞有少量NO和TNF-α分泌,LPS刺激组的小胶质细胞培养上清液中NO和TNF-α的分泌量较正常组显著增加[(18.10±1.57)μmol/L vs (1.55±0.15)μmol/L,(51.07±4.30)pg/mL vs (2.37±0.31)pg/mL],两组比较差异有统计学意义(均P<0.01).结论 培养的大鼠视网膜小胶质细胞有共刺激分子表达,LPS刺激后表达上调,提示视网膜小胶质细胞可能与T细胞活化有关.     

减毒耐药变形杆菌对慢性乙型肝炎患者外周血树突细胞CD80、CD86表达的影响

目的 观察减毒耐药变形杆菌对慢性乙型肝炎(HBV)患者和健康人DC细胞表面表达的CD80、CD86的影响.方法 分离慢性HBV患者和健康人外周血单个核细胞,并对树突状细胞进行体外定向诱导分化和培养,FACS检测DC细胞表面分子的表达.结果 在加入减毒耐药变形杆菌共培养后,慢性乙肝病人CD80,CD86的表达率显著增加(P=0.000.P=0.000),而健康人的CD80、CD86表达阳性百分牢改变不显著(P=0.185,P=0.118).结论 减毒耐药变形杆菌能够显著增加慢性乙肝病人外周血中树突细胞CD80和CD86阳性细胞百分率.对正常人外周血中树突细胞CD80和CD86表达的阳性细胞百分率并不增加.     

Expression of CD80／CD86 and CTLA-4 mRNA in Peripheral Blood Mononuclear Cells of the Patients with Systemic Lupus Erythematosus

The role of CD80/CD86 and CTLA-4 in the pathogenesis of systemic lupus erythematosus and their clinical significance was investigated. By using RT-PCR technique, the expression of CDS0/CD86 and CTLA-4 mRNA in peripheral blood mononuclear cells (PBMC) were semiquantitatively detected in 32 patients with active SLE. The results showed that the percentage of positive CD86 expression in active SLE was increased significantly as compared with normal controls (90.63% vs 60.00 %, P＜0.01). The mean level of CD86 mRNA expression in active SLE group was markedly higher than in the normal controls (0. 6410 0. 0174 vs 0. 4510 0. 0402, P＜0. 001).Compared with normal controls, the percentage of positive CTLA-4 expression and the mean level of CTLA-4 mRNA expression in active SLE group were both increased significantly (both P＜0.01). There was no statistical differences in positive rate of CDS0 and the average level of CDS0 mRNA between the two groups (both P~0.05). It was concluded that the aberrant expression of CD86 and CTLA-4 might play an important role in the activity and development of SLE.     

共刺激分子CD80和CD86在蠕虫保护性免疫及其Th2免疫应答中作用机制的研究

目的:探讨共刺激分子CD80和CD86在蠕虫保护性免疫及其Th2免疫应答中的作用机制。方法:采用巴西日圆线虫第3期幼虫感染BALB/c小鼠,在感染当天、感染后第3、7d分别腹腔注射大鼠抗CD80和/或抗CD86单克隆抗体,以阻断协同刺激信号。在感染当天,感染后第7、14d,计数小鼠外周血液的嗜酸性粒细胞,于感染后第14d计数小肠绒毛嗜酸性粒细胞;采用WatanabeN法测定IgE。结果:联合应用抗CD80和抗CD86两种单克隆抗体可导致成虫产卵量明显增加,成虫数量显著增多及排虫时间延迟。同时两种单克隆抗体也完全抑制了外周血液及小肠组织的嗜酸性粒细胞的增多并部分抑制了IgE水平的升高。而单独应用抗CD80或抗CD86McAb对保护性免疫及Th2型免疫应答反应均无明显影响。结论:在蠕虫保护性免疫和Th2型免疫应答反应中,T细胞的活化需要CD80和CD86两种共刺激分子的参与;而CD80或CD86单一刺激分子即可提供足够的共刺激信号。研究提示,人为调控CD80和CD86共刺激分子可能有助于对蠕虫病及Th2型免疫应答所介导的其它疾病的治疗。     

B7-CD28共刺激通路与系统性红斑狼疮的相关性研究

目的探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血淋巴细胞（PBLC）CD28、B7-1（CD80）及B7-2（CD86）的表达及其意义，探讨SLE患者共刺激通路是否异常。方法采用流式细胞仪检测30例SLE患者外周血淋巴细胞的CD28、B7-4，及B7-2，并以15例正常人作为对照。结果SLE患者外周血淋巴细胞中B7-1的表达水平与正常对照组差异无显著性，而B7-2的表达水平明显低于正常对照组（P〈0.01）；SLE患者外周血淋巴细胞中CD28的表达水平明显低于正常对照组（P〈0.05）。结论SLE患者PBLC上的B7-2及CD28的表达降低，影响B7-CD28共刺激通路，可能与SLE的发病有关。     

小鼠CD80和CD86基因RNA干扰慢病毒载体的构建及体外对树突状细胞的作用

 目的 构建小鼠CD80和CD86基因RNA干扰慢病毒表达载体,并在体外观察其对小鼠骨髓源性树突状细胞（dendritic cell,DC）的作用。方法 针对已经筛选确定的CD80基因RNA干扰有效靶序列,合成靶序列的双链DNA,接入pGCL-GFP载体,再与pHelper1.0和pHelper2.0质粒共转染293T细胞,包装产生慢病毒,以293T细胞GFP蛋白的表达水平测定病毒滴度;同法构建出CD86基因RNA干扰慢病毒载体。慢病毒感染体外培养的DC,通过荧光显微镜检测感染效率,Annexin V/PI双染色法检测感染细胞凋亡和坏死情况,流式细胞仪检测CD80和CD86的表达情况。结果 PCR和测序证实,pGCL-CD80shRNA和pGCL-CD86shRNA慢病毒载体构建正确,病毒滴度均达2×107TU/mL,适合感染DC的MOI值为20,此时慢病毒对DC具有低毒性,感染效率为85.42%。CD80和CD86表达的抑制率分别为82.05% 和77.78%。结论 成功构建出小鼠CD80和CD86基因RNA干扰慢病毒载体,其有明显抑制DC表面CD80和CD86的表达,这为移植物排斥提供了新的治疗手段。