刺五加愈伤组织的诱导及愈伤组织状态调控

目的获得适宜悬浮培养的刺五加愈伤组织。方法利用植物组织和细胞培养技术,考察3种诱导培养基及9种继代培养基对刺五加愈伤组织的诱导及愈伤组织状态的影响。结果以α-萘乙酸(α-Naphthaleneacetic acid)2.0 mg.L-1+6-苄氨基嘌呤[N-(phenylmethyl)-1H-purin-6-amine,6-BA]2.0 mg.L-1诱导出的愈伤组织适于悬浮培养,叶和叶柄的诱导率分别为93.3%和100%;筛选出最佳固体继代培养的外源激素配比为NAA1.0 mg.L-1+6-BA1.0 mg.L-1,在此激素配比下,愈伤组织生长代谢迅速,性状稳定,呈易分散的颗粒状,易于分散,适合下一步的悬浮培养。结论以刺五加嫩叶为外植体,NAA2.0 mg.L-1+6-BA2.0 mg.L-1为诱导培养基,NAA1.0 mg.L-1+6-BA1.0 mg.L-1为继代培养基可以获得适宜悬浮培养的愈伤组织。     

杜仲带腋芽茎段组织培养的研究

目的研究不同培养条件下杜仲带腋芽茎段愈伤组织的诱导和生长情况,以及腋芽的生长情况。方法以带腋芽的杜仲茎段为外植体,设计9种不同的培养基配方,为了防止褐化,在23.4℃下培养箱中暗培养,30 d后调查出愈率及腋芽的生长情况。结果 NAA浓度从0.05~0.5 mg.L-1,随着浓度增加,腋芽生长受抑制;6-BA浓度从0.3~1.0 mg.L-1,随着浓度增加,愈伤组织块增大,达到1.0 mg.L-1时愈伤组织的生长受到抑制;本实验中最佳的杜仲愈伤组织诱导和生长培养基配方为6号培养基:B5+0.5 mg.L-1NAA+0.3 mg.L-16-BA。腋芽生长最佳培养基配方为4号培养基:B5+0.05 mg.L-1NAA+0.5 mg.L-16-BA。结论本试验的结果对杜仲的生物技术利用有一定的参考价值。     

基于Box-Behnken法筛选与优化虎杖疏松愈伤组织培养条件

目的:研究虎杖疏松愈伤组织诱导的最佳条件.方法:本试验以MS为基本培养基,比较了不同外植体和激素配比对虎杖愈伤组织诱导的影响,采用单因素试验法研究了光培养和暗培养对愈伤组织诱导的影响,应用Box-Behnken 法考察不同激素浓度对虎杖愈伤组织增殖的影响.结果:虎杖愈伤组织诱导的最佳外植体是叶柄,愈伤组织最佳诱导培养基为MS+2,4-D 4.0 mg·L-1+NAA 1.0 mg· L-1,最佳的培养方式为暗培养,愈伤组织继代培养培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L-1+KT 0.4 mg·L-1+2,4-D 0.5 mg·L-1.结论:实验研究过程中优化了虎杖疏松愈伤组织培养的条件,为建立虎杖悬浮细胞培养体系提供了基础依据.     

蒙古黄芪不定根的诱导

以蒙古黄芪无菌芽的下胚轴、无菌苗的根、茎、叶为外植体,分别接种在不同激素组合的Murashige和Skoog(MS)培养基中,在(25±1)℃条件下暗培养,蔗糖浓度为3.0%,pH值为5.8,琼脂的浓度为0.8%.对蒙古黄芪(Astragalus membranaceus Bge.Var.mongholicus(Bge.)Hsiao)进行愈伤组织诱导.结果表明最适合蒙古黄芪下胚轴愈伤组织诱导的激素组合为MS+2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)2.0 ml/L+6-苄氨基嘌呤(6-BA)0.5 ml/L和MS+α-奈乙酸(NAA)3.0 mg/L+6-BA 0.5 ml/L;最适合作为蒙古黄芪愈伤组织诱导的外植体为叶,最佳培养基为MS+NAA 3.0 mg/L.综合考虑愈伤组织质地以及后期试验目的,最终确定蒙古黄芪愈伤组织诱导和增殖培养基为MS+NAA 3.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L.黄芪愈伤组织生长曲线呈现S型,在d9进入快速增长期,最佳继代时间是在24 d左右.     

激素对党参愈伤组织的诱导及其多糖含量的影响研究

以MS+6-BA0.5mg/L+2,4-D0.2mg/l为诱导培养基时,党参的愈伤组织长势良好,愈伤组织诱导率和芽分化率均为100%,是最适培养基。以党参愈伤组织为材料,经真空干燥后,用水杨酸法测多糖含量,平均值为9.16%。其中含量最高的培养基组合是MS+6-BA0.5mg/L+2,4-D0.2mg/L,为10.58%。实验表明,党参愈伤组织中多糖的合成与愈伤组织的生长情况成一定的正比关系。     

山葵愈伤组织培养及其风味物质的研究

通过山葵愈伤组织的诱导培养,测定培养物中的风味物质,为通过组织培养的手段来生产药用成分提供依据.选择山葵幼叶和叶柄作为外植体,以MS为基本培养基,配以不同浓度的激素进行愈伤组织的诱导.选择继代几次以后的愈伤组织进行风味物质的测定.确定MS-4-6-BA 1.0+NAA 3.0为愈伤组织诱导的最佳条件,致密型的愈伤组织经...     

地丁草组织培养及无性系建立的研究

目的:为满足人们栽培对种苗的需要,并保护野生资源.方法:以地丁革不同外植体为材料,进行了愈伤组织诱导与分化、不定芽生根和试管苗生根继代培养研究,建立起地丁革的无性系.结果:MS+ NH4H2PO420 mg·L-1+BA0.2 mg·L-1+IBA0.1mg·L-1+ NAA 0.8～1.0mg·L-1是愈伤组织继代扩...     

高山红景天的组织培养与快速繁殖

分别以高山红景天的幼茎和幼叶作为外植体,以MS为基本培养基,研究不同激素配比对高山红景天愈伤组织的诱导、继代、生根的影响,以建立其快速繁殖体系.结果表明,幼茎是最佳的外植体,愈伤组织诱导最佳的培养基为MS+6-BA3.0 mg/L+NAA0.5 mg/L,诱导率达83.3％;不定芽诱导和增殖的最佳培养基为MS +6-BA2.0 mg/L+NAA0.1 mg/L,诱导率和增殖率较高,达72％,且产生的不定芽数量较多,为3～4个;生根培养基以MS+IAA 0.5mg/L为最好,生根率100％,而且幼苗长势旺盛,能够满足高山红景天工厂化快速繁殖的要求.     

粗毛牛膝带腋芽茎段的植株再生研究

目的:研究粗毛牛膝带腋芽茎段植株的再生。方法:以粗毛牛膝带腋芽茎段为外植体诱导腋芽生长,继代诱导生根成完整小植株,考察基本培养基、萘乙酸(NAA)和6-苄基嘌呤(6-BA)浓度3个因素对茎段和腋芽生长的影响。结果:基本培养基MS、6-BA浓度对腋芽的生长有显著影响,最佳的培养基组合为MS+0.1mg·L-1NAA+0.5mg·L-16-BA;而在1/2MS+0.5mg·L-1NAA培养基上100%生根。结论:该培养基组合可使粗毛牛膝腋芽诱导生根能力强,且幼根生长健壮,值得推广。     

RP-HPLC法同时测定利胆排石片中5种有效成分的含量

目的建立同时测定利胆排石片中和厚朴酚、大黄素、厚朴酚、大黄酚和大黄素甲醚5种有效成分含量的HPLC方法。方法采用Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×200 mm,5μm)进行分离,流动相为乙腈-体积分数0.05%磷酸溶液(体积比62∶38),流速为1.0 mL.min-1,检测波长为254 nm,柱温30℃,进样量20μL。结果和厚朴酚、大黄素、厚朴酚、大黄酚和大黄素甲醚的质量浓度分别在0.76～7.6 mg.L-1(r=0.999 2,n=6)、9.4～94 mg.L-1(r=0.999 3,n=6)、0.50～5.0 mg.L-1(r=0.999 5,n=6)、21.0～210 mg.L-1(r=0.999 0,n=6)和5.5～55 mg.L-1(r=0.999 1,n=6)内与峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率依次为98.2%、99.3%、98.0%、98.4%和98.9%,RSD依次为1.9%、1.6%、2.0%、1.9%和1.7%。结论该方法快速、简便、重复性好,适合于同时测定利胆排石片中和厚朴酚、大黄素、厚朴酚、大黄酚和大黄素甲醚的含量。     

重庆产厚朴不同部位厚朴酚与和厚朴酚分布规律的研究

目的研究厚朴不同部位厚朴酚与和厚朴酚的分布规律,为进一步开发利用厚朴资源并对其进行质量控制提供科学依据。方法采用HPLC测定厚朴不同部位中厚朴酚与和厚朴酚的含量。结果厚朴根皮、干皮、枝皮和厚朴叶中厚朴酚与和厚朴酚的总含量分别约为:8.22%,2.30%,2.07%和0.43%,厚朴各部位中厚朴酚与和厚朴酚的总含量差异具有统计学意义(P<0.05)。结论厚朴不同部位中厚朴酚与和厚朴酚的含量差异较大,其质量控制有待深入研究,厚朴不同部位在临床用药时应有所区别,另外厚朴叶资源具有较大的开发价值。     

不同产地南五味子红外指纹图谱鉴别

目的:建立南五味子药材红外指纹图谱的鉴定分析新方法。方法:对不同产地南五味子药材进行红外光谱指纹图谱鉴别,并进行相似度计算与分析。结果:获得了6种不同产地南五味子药材的红外指纹图谱。结论:粉末的红外指纹图谱鉴定法可用于不同产地南五味子药材的鉴定和识别,相似度的计算结果进一步证明了方法的可行性。     

华中五味子化学成分的研究

目的对传统中药华中五味子中的化学成分进行初步研究。方法运用多种色谱方法分离纯化,通过现代波谱解析技术(如NMR和MS等)和理化数据的文献对照,鉴定结构。结果与结论从华中五味子中分离得到了10个化合物,分别鉴定为五味子酚(schisanhenol,1)、五味子酯乙(schisantherin B,2)、chicanine(3)、pregomisin(4)和甘五酸(schizandronic acid,5)、去氧五味子素(6)、前戈米辛(7)、内消旋二氢愈创木脂素(8)、五味子酯甲(9)、戈米辛P顺芷酸酯(10)。首次从该植物中分离得到化合物前戈米辛(7)。     

不同树龄厚朴生物活性成分的比较分析

利用高效液相色谱法(HPLC)测定不同树龄厚朴中绿原酸、芦丁、金丝桃苷、槲皮苷、槲皮素、和厚朴酚和厚朴酚的含量。目的:为了比较分析同一来源不同树龄厚朴中7种活性物质含量变化,为最佳厚朴采集年龄提供参考。结果:绿原酸、金丝桃苷、槲皮素和厚朴酚在13年树龄时含量最高,分别达到0.28、0.033、0.018和5.90%;芦丁和槲皮苷在7年树龄时含量最高,其含量分别为0.34和0.52%;和厚朴酚和厚朴酚在10年树龄时其含量最高为2.40%。厚朴中的厚朴酚和和厚朴酚为主要成分在10年树龄和到26年树龄其成分的变化不大,10、13和26年树龄厚朴中7种活性物质总的含量分别为7.99、8.75和8.73%,总含量变化也不显著,因此,选10年的树为最佳厚朴采集年龄。     

海南广藿香试管内芽分化与愈伤组织诱导研究

目的选择海南广藿香的最佳芽分化和愈伤组织诱导培养基。方法利用海南广藿香的叶柄、茎尖和带节茎段进行组织培养芽分化试验,并对上述材料进行愈伤组织诱导培养基选择试验。结果在芽分化培养基中,MS＋3-吲哚丁酸（IBA）1．0mg／L＋6-苄基腺嘌呤（6-BA）0．6mg／L培养基能够较好地诱导茎尖和带节茎端长出新芽,诱导率分别为94．3％和94．6％;在愈伤组织诱导培养基中,MS＋萘乙酸（NAA）0．1mg／L＋6-BA2．0mg／L培养基能较好地诱导海南广藿香叶柄和带节茎段产生愈伤组织,诱导率分别为80．0％和100％。结论海南广藿香的最佳芽分化和愈伤组织诱导培养基分别为Ms＋IBA1．0mg／L＋6-BA0．6mg／L和Ms＋NAA0．1mg／L＋6-BA2．0mg／L。     

基于代谢组学的厚朴与枳实配伍减毒机制分析

目的利用’HNMR为基础的代谢组学研究厚朴及厚朴配伍枳实的肝肾毒性。方法18只大鼠随机分成3组：空白组、厚朴组和厚朴枳实组。以’HNMR为基础的代谢组学分析空白组、厚朴组和厚朴枳实组大鼠尿液和血清样品代谢轮廓,同时进行肝、肾组织病理学检查。结果厚朴组和空白组样品代谢轮廓具有明显差异,厚朴枳实组的代谢轮廓同空白组样品接近,肝、肾组织病理学检查同时证实了数据分析。结论厚朴与枳实配伍使用能够有效减少厚朴对肝肾所产生的毒性。     

超高效液相色谱法同时测定南、北五味子中的7种木脂素含量

目的：建立UPLC测定五味子中7种木脂素的方法,并测定不同地区的南、北五味子中木脂素成分含量。方法：色谱柱ZORBAX Eclipse Plus C₁₈ column （1.8 μm,100 mm×2.1 mm）;流动相乙腈-水,梯度洗脱;流速0.3 mL·min^-1;柱温40℃;检测波长220 nm;进样体积1 μL。结果：各成分即五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子酯乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素之间基本达到基线分离,且线性关系良好,线性范围分别为0.984~246.000,0.636~159.000,0.552~138.000,0.472~1.180,0.952~2.380,1.120~2.810,0.436~1.090 μg·mL^-1（r>0.999 6）。平均加样回收率在98.29%~102.5%之间,RSD在1.4%~1.9%之间。结论：所建立的测定方法快速、稳定、可靠,适用于不同产地南、北五味子中木脂素含量的测定。     

厚朴酚与和厚朴酚的体内药物分析方法及药代动力学研究近况

厚朴酚与和厚朴酚是中药厚朴的主要药效成分,具有多种药理作用,研究其药代动力学过程,对指导临床用药具有现实意义,而适宜的体内药物分析方法的建立,是成功进行药代动力学研究的基础。分类介绍厚朴酚与和厚朴酚的体内药物分析方法,综述并探讨其药代动力学的影响因素。