补肾中药血清对成骨细胞中骨形态发生蛋白2、7活性的影响

背景:课题组拟以骨形态发生蛋白作为研究靶点来认识肾虚骨质疏松症的病理机制.目的:体外观察补肾中药血清对SD大鼠成骨细胞中骨形态发生蛋白2、7活性的影响.方法:采用多次胶原酶消化法体外培养获取新生SD大鼠颅盖骨的成骨细胞;随机将28只SD大鼠分为4组,分别灌胃补肾益精壮骨中药、补中益气颗粒剂和骨疏康颗粒,正常组不灌胃.干预8 d后,通过血清药理学方法使用各组大鼠血清培养成骨细胞48 h.结果与结论:与正常组相比,补肾组和骨疏康组成骨细胞骨形态发生蛋白2、7表达水平明显增加(P < 0.01),补脾组成骨细胞骨形态发生蛋白2、7表达水平降低(P < 0.01).结果表明补肾中药对成骨细胞保持自身功能、维持骨密度的作用上发挥重要的作用,成骨细胞中骨形态发生蛋白2、7可能有促进成骨细胞分化、增殖的功能.     

益骨胶囊对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织骨形态发生蛋白2表达的影响

背景:骨形态发生蛋白-2是高效骨诱导因子。骨形态发生蛋白-2诱导骨内、外膜和骨髓基质细胞分化为骨母细胞,有加强骨床再生能力的作用,还可以活化或诱导血管周围的间充质细胞分化为软骨和成骨细胞。目的:观察益骨胶囊预防和治疗用药对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织骨形态发生蛋白-2蛋白表达的影响。设计:随机分组设计、对照实验。单位:暨南大学附属第一医院中医科。材料:实验于 2003-03/10在暨南大学中药学实验室完成。动物:选择10月龄普通级雌性 SD 大鼠 72只,体质量(380±20)g,由广东省医学实验动物中心提供(合格证号:粤检证字第 2002A024号)。随机抽取24只分为假手术(腹部切口但不切除卵巢)预防用药组(12只)和治疗用药组(12只),余 48只行腹部切口双侧卵巢切除术复制骨质疏松模型后随机分为 4组:模型预防用药组、模型治疗用药组、预防用药组、治疗用药组,每组 12只。药物:益骨胶囊由淫羊藿、枸杞子、熟地黄、牛膝等组成,深圳三九医药股份有限公司提供免煎颗粒,配制成水溶液,含生药 1.0g/m L。干预:益骨胶囊预防用药于手术后 3d 即开始灌胃,假手术预防用药组、模型预防用药组灌胃生理盐水 3m L、预防用药组灌胃益骨胶囊水溶液 3m L,1次 /d,共 24周;益骨胶囊治疗用药于手术后第 13周开始灌胃,假手术治疗用药组、模型治疗用药组灌胃生理盐水 3m L、治疗用药组灌胃益骨胶囊水溶液 3m L,1次 /d,共 12周。免疫组化方法检测骨组织骨形态发生蛋白-2蛋白表达。主要观察指标:骨组织骨形态发生蛋白-2阳性反应细胞的平均灰度值。结果:大鼠造模 24周时,模型预防用药组、预防用药组、假手术预防用药组大鼠骨组织骨形态发生蛋白-2阳性反应细胞的平均灰度值分别为81.84±10.01,124.46±6.55,130.15±10.09,模型预防用药组明显低于假手术预防用药组 (P <0.01),预防用药组显著高于模型预防用药组(P<0.01),与假手术预防用药组相近(P >0.05)。模型治疗用药组、治疗用药组、假手术治疗用药组大鼠骨组织骨形态发生蛋白-2阳性反应细胞的平均灰度值分别为 77.97±10.35,110.32±8.69,131.79±12.10,模型治疗用药组明显低于假手术治疗用药组(P <0.01),治疗用药组显著高于模型治疗用药组(P <0.01),与假手术治疗用药组相近(P >0.05)。结论:益骨胶囊预防和治疗用药均能促进骨组织骨形态发生蛋白-2蛋白表达。     

补肾活血方对去卵巢胶原诱导性关节炎大鼠垂体雌激素受体amRNA表达的影响

背景:药理学研究显示,补肾活血方中的补肾中药如熟地、葛根等含有黄酮类物质,具有植物雌激素的作用特点,其中异黄酮具有雌激素受体调控剂的作用.目的:观察自拟补肾活血方对胶原诱导性关节炎大鼠血清雌二醇水平及垂体雌激素受体αmRNA表达的影响.设计、时间及地点:随机分组设计、对照动物实验,于2006-05/2008-05在白求恩国际和平医院中心实验室完成.材料:健康Wistar雌性大鼠60只,随机分为2组:假手术组(n=10)和手术组(n=50).手术组在卵巢切除术后2周复制胶原诱导性关节炎模型,选取关节炎指数≥5的大鼠再随机分为4组,每组10只:模型组、补肾活血方、甲氨蝶呤组和补肾活血方+甲氨蝶呤组.补肾活血方所用中药骨碎补、红花、熟地、仙灵脾、丹参、葛根等购自石家庄乐仁堂药店.常规煎煮,离心去杂,浓缩为1.3 kg/L的水煎液,密封分装,4℃冷藏备用.方法:假手术组和模型组灌胃给予生理盐水,2 mL/d;补肾活血组:补肾活血方煎液2 mL/d灌胃;甲氨蝶呤组按2.6 mg/kg剂量灌胃1次/周,体积为2 mL,其余时间生理盐水灌胃2 mL/d;补肾活血方+甲氨蝶呤组按甲氨蝶呤2.6 mg/kg剂量灌胃1次/周,体积为2 mL,另外补肾活血方煎液2 mL/d;各组均持续6周.主要观察指标:腹主动脉采血用磁分离酶联免疫法检测血清雌二醇水平,同时取大鼠垂体采用反转录一聚合酶链反应检测大鼠垂体雌激素受体αmRNA的表达.结果:与模型组比较,甲氨蝶呤组雌激素受体α mRNA表达增加,但差异无显著性意义;补肾活血方+甲氨蝶呤组表达明显增加(P<0.01);补肾活血方表达量高于甲氨蝶呤组,低于补肾活血方+甲氨蝶呤组(P<0.05);补肾活血方、补肾活血方+甲氨蝶呤组与假手术组差异无显著性意义.与假手术组比较,模型组雌二醇水平明显降低.与模型组比较,3个治疗组雌二醇水平均有不同程度的提高,其中甲氨蝶呤组偏低,与模型组差异无显著性意义(P>0.05),补肾活血方+甲氨蝶呤组提高最明显,接近正常水平(P<0.01).雌二醇与垂体雌激素受体αmRNA呈显著正相关(r=0.483,P<0.05).结论:自拟补肾活血方具有拟雌激素样作用,可提高雌二醇水平,上调垂体雌激素受体α mRNA表达.     

补肾中药血清对成骨细胞中骨形态发生蛋白2、7活性的影响

背景：课题组拟以骨形态发生蛋白作为研究靶点来认识肾虚骨质疏松症的病理机制。目的：体外观察补肾中药血清对SD大鼠成骨细胞中骨形态发生蛋白2、7活性的影响。方法：采用多次胶原酶消化法体外培养获取新生SD大鼠颅盖骨的成骨细胞;随机将28只SD大鼠分为4组,分别灌胃补肾益精壮骨中药、补中益气颗粒剂和骨疏康颗粒,正常组不灌胃。干预8d后,通过血清药理学方法使用各组大鼠血清培养成骨细胞48h。结果与结论：与正常组相比,补肾组和骨疏康组成骨细胞骨形态发生蛋白2、7表达水平明显增加（P〈0.01）,补脾组成骨细胞骨形态发生蛋白2、7表达水平降低（P〈0.01）。结果表明补肾中药对成骨细胞保持自身功能、维持骨密度的作用上发挥重要的作用,成骨细胞中骨形态发生蛋白2、7可能有促进成骨细胞分化、增殖的功能。     

肾脏雌激素受体亚型表达分布及补肾中药防治肾损害的受体机制

目的:观察雌激素受体α和β在大鼠肾脏中的表达、分布情况,分析补肾中药防治肾损害的受体机制。方法:实验于2000-09/2002-07在河北医科大学生化实验室完成。选用健康雌性SD大鼠45只,按随机数字法分为3组,即正常对照组、肾脏损伤模型组及中药防治组,每组15只。肾脏损伤模型组和中药防治组大鼠每天腹腔注射1mL9g/L的灭菌AlCl3溶液复制肾脏损伤模型,正常对照组注射1mL灭菌生理盐水,每连续注射3d,间隔1d,共计72d。中药防治组大鼠每天灌胃1mL生药含量为2.6g/mL的补肾中药复方煎剂(由淫羊藿、熟地、制首乌、黄芪、当归、郁金、石菖蒲、茯苓和川芎9味中药组成,由石家庄乐仁堂药业有限公司提供,每付生药含量为125g),正常对照组和肾脏损伤模型组灌胃等量自来水。每连续灌胃7d,间隔1d,共计72d。应用免疫组织化学方法检测雌激素受体α和β在各组大鼠肾组织中的表达水平和分布区域,应用放射免疫分析法测定各组大鼠血清雌二醇水平。结果:45只大鼠全部进入结果分析,无脱失。①雌激素受体亚型在各组大鼠肾组织中的表达和分布情况比较:正常对照组大鼠肾脏皮质和髓质的远曲小管和近曲小管上皮细胞胞浆中都有雌激素受体α和β阳性颗粒,两种受体亚型的髓质反应信号均比皮质强。肾脏损伤模型组大鼠肾脏皮质雌激素受体β反应信号减弱;髓质雌激素受体α反应信号增强。中药防治组大鼠肾水肿基本消失,皮质雌激素受体β反应信号增强至近正常水平,髓质雌激素受体α反应信号降低至近正常水平。②各组大鼠的血清雌二醇水平比较:肾脏损伤模型组大鼠血清雌二醇水平显著低于正常对照组[(19.0±0.6,40.0±0.1)pmol/L,P<0.01],中药防治组大鼠血清雌二醇水平与肾脏损伤模型组相近[(18.0±0.6)pmol/L,P>0.05]。结论:AlCl3导致肾水肿时,肾脏皮质雌激素受体β表达减弱,髓质雌激素受体α表达增强,血清雌二醇水平降低。补肾中药具有雌二醇样作用,通过拮抗皮质雌激素受体β表达减弱和髓质雌激素受体α表达增强而发挥其肾脏保护作用。     

益骨胶囊对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织骨形态发生蛋白2表达的影响

背景：骨形态发生蛋白-2是高教骨诱导因子。骨形态发生蛋白-2诱导骨内、外膜和骨髓基质细胞分化为骨母细胞，有加强骨床再生能力的作用，还可以活化或诱导血管周围的间充质细胞分化为软骨和成骨细胞。 目的：观察益骨胶囊预防和治疗用药对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织骨形态发生蛋白-2蛋白表达的影响。 设计：随机分组设汁、对照实验。 单位：暨南大学附属第一医院中医科。 材料：实验于2003-03／10在暨南大学中药学实验室完成。动物：选择10月龄普通级雌性SD大鼠72只，体质量（380&;#177;20）R，由广东省医学蛮验动物中心提供（合格证号：粤检证字第2002A024号）。随机抽取24只分为假手术（腹部切口但不切除卵巢）预防用药组（12只）和治疗用药组（12只），余48只行腹部切口双侧卵巢切除术复制骨质疏松模型后随机分为4组：模型预防用药组、模型冶疗用药组、预防用药组、治疗用药组，每组12只。药物：益骨胶囊南淫羊藿、枸杞：产、熟地黄、牛膝等组成，深圳三九医药股份有限公司提供免煎颗粒，配制成水溶液，含生药1．0g／mL。干预：益骨胶囊预防用药于手术后3d即开始灌胃，假手术预防用药组、模型预防用药组灌胃生理盐水3ml、预防用药组灌胃益骨胶囊水溶液3mL，1次／d。共24周；益骨胶囊治疗用药于手术后第13周开始灌胃，假手术治疗用药组、模型治疗用药组灌胃生理盐水3mL、治疗用药组灌胃益骨胶囊水溶液3mL。1次／d，共12周。免疫组化方法检测骨组织骨形态发生蛋白-2蛋白表达。 主要观察指标：骨组织骨形态发生蛋白-2阳性反应细胞的平均灰度值。 结果：大鼠造模24周时，模型预防用药组、预防用药组、假手术预防用药组大鼠骨组织骨形态发生蛋白-2阳性反应细胞的平均灰度值分别为81．84&;#177;10．01，124．46&;#177;6．55，130．15&;#177;10．09，模型预防用药组明显低于假手术预防用药组（P〈0．01），预防用药组显著高于模型预防用药组（P〈0．01），与假手术预防用药组相近（P〉0．05）。模型治疗用药组、治疗用药组、假手术治疗用药组大鼠骨组织骨形态发生蛋白-2阳性反应细胞的平均灰度值分别为77．97&;#177;10．35，110．32&;#177;8．69。131．79&;#177;12．10，模型治疗用药组明显低于假手术治疗用药组（P〈0．01），治疗用药组显著高于模型治疗用药组（P〈0．01），与假手术治疗用药组相近（P〉0．05）。 结论：益骨胶囊预防和治疗用药均能促进骨组织骨形态发生蛋白-2蛋白表达.     

卵巢去势对骨折修复中骨组织超微结构和骨形态发生蛋白4基因定位分布的影响(英文)

背景:在卵巢去势后雌激素缺乏状态下,由于骨质疏松时全身及局部骨结构发生骨量减少和骨微细结构以及生长因子基因定位分布变化,无疑会对骨折愈合产生明显的影响。目的:观察雌激素对骨折愈合过程超微结构变化和骨生长因子骨形态发生蛋白4基因表达及定位分布的影响。设计:随机对照观察。单位:云南大学分子生物学实验室。对象:实验于1999-07/2002-07在云南大学分子生物学实验室完成。选用健康2月龄雌性SD大鼠96只,平均质量160～200g。方法:①取96只大鼠腹腔麻醉后,其中48只作双侧卵巢切除术为骨质疏松组,余48只行假手术为对照组。所有大鼠1个月后,在麻醉状态下于双侧胫骨骨干中段行手法折断,任其自行修复,制作成骨折愈合模型。两组动物分别于骨折后1,3,5,7,14,28,56,112d麻醉后处死取骨痂和周围软组织,每个时间点取6只。②大鼠胫骨骨组织超微结构采用电镜下观察。③骨痂组织和软组织骨形态发生蛋白4表达采用原位杂交法观察,杂交液中不加标记探针作为阴性对照。选取两组1,3d时间点原位杂交阳性表达切片各6张,每张在25倍物镜下随机选取3个视野,统计每个视野所有阳性表达颗粒数。主要观察指标:①两组大鼠胫骨骨组织超微结构观察结果。②骨痂和软组织骨形态发生蛋白4表达结果。结果:96只大鼠均进入结果分析。①两组大鼠胫骨骨组织超微结构观察结果:骨折28d以后,对照组骨性骨痂、骨胶原纤维性排列致密,骨陷窝中见骨细胞,体积小、胞质少,但体积小骨小梁周围见破骨细胞。骨质疏松组:纤维性骨痂、骨基质中胶原纤维排列疏松,成骨细胞数量多、体积大,破骨细胞多见。②骨痂和软组织骨形态发生蛋白4表达结果:骨折后1～3d,对照组<骨质疏松组(23.7143±5.0568,21.7143±5.0238比51.2857±8.1387,49.5714±9.0711,P<0.01)。表达局限于骨折周围骨痂形成区的软组织内。结论:卵巢切除后骨质疏松组大鼠骨形态发生蛋白4基因表达增多,并呈现一定的区域性,即局限于骨折周围的软组织内。骨折愈合过程中骨痂基质的形成和质量明显低于对照组。     

谷康泰灵对维甲酸诱导大鼠颌骨骨质疏松的干预作用

目的:观察谷康泰灵对维甲酸诱导大鼠颌骨骨质疏松的影响。方法:实验于2001-03/04在西安交通大学地方病研究所动物实验室和骨软骨生化实验室完成。①选用雌性SD大鼠36只,按随机数字表法分为2组,对照组11只,模型组25只。模型组大鼠按85mg/(kg·d)维甲酸灌胃进行颌骨骨质疏松模型复制。灌胃15d后,每组随机选5只大鼠处死,进行骨组织病理形态学观察及形态计量学分析,确认模型复制成功后,进入治疗实验阶段。②实验大鼠分为4组:以上对照组中剩余的6只大鼠作为正常对照组,将模型组剩余的20只大鼠分为3组,骨质疏松组6只,谷康泰灵组8只,雌激素组6只。正常对照组和骨质疏松组均正常饲养;谷康泰灵组给予谷康泰灵注射液(主要成分为骨形态发生蛋白、多种骨生长因子及多种微量元素,由四川国泰制药有限责任公司重庆康宁制药厂生产)0.08mg/(kg·d),腹腔注射;雌激素组给予苯甲酸雌二醇(天津金耀氨基酸公司生产)50μg/只,每周3次,腹腔注射。实验大鼠治疗30d处死后,截取下颌骨磨牙段,制作苏木精-伊红染色切片,进行病理形态学观察,并在每组随机选取5只大鼠病理切片作形态计量学分析,指标包括松质骨面积比、骨小梁平均宽度及骨小梁平均间隔宽度等。结果:36只大鼠全部进入结果分析。①各组大鼠下颌骨骨组织病理形态学观察结果:造模期模型组大鼠下颌骨骨小梁稀少、变细,破骨细胞数目增多、活跃,骨髓腔扩大,对照组则可见骨小梁丰富、饱满。治疗30d后谷康泰灵组和雌激素组大鼠下颌骨骨小梁数目增多,骨小梁增宽,骨小梁间隙缩小,骨髓腔变小。而骨质疏松组大鼠骨小梁及骨小梁间隙无明显变化。②各组大鼠下颌骨骨组织形态计量学指标比较:造模期模型组大鼠下颌骨骨小梁平均宽度显著小于对照组(P<0.05),骨小梁平均间隔宽度显著大于对照组(P<0.05)。治疗30d后与骨质疏松组大鼠相比,其余3组大鼠的骨小梁平均宽度均显著增加(P<0.05),骨小梁平均间隔宽度显著减小(P<0.05)。结论:谷康泰灵能有效改善颌骨骨质结构,减缓颌骨骨吸收,促进成骨,改善颌骨骨质疏松。     

应力缺失致骨质疏松大鼠成骨细胞细胞信号外调节激酶表达及通络生骨胶囊的影响

背景:长期卧床患者和航天员应力缺失导致骨质疏松现象的发生,通络生骨胶囊具有促进骨生成的作用,可能干预应力缺失状态下骨质疏松的发生.目的:观察应力缺失型骨质疏松动物细胞信号外调节激酶的变化以及通络生骨胶囊对其改善作用.方法:SD大鼠40只随机分为对照组、模型组、药物高、药物低剂量组,除正常组外以鼠尾悬吊法制备动物应力缺失模型,药物高、低剂量组将通络生骨胶囊按0.6,1.2 g/kg剂量灌胃,1次/d,21 d后,取腿骨,观察骨形态变化及成骨细胞细胞信号外调节激酶的表达水平.结果与结论:应力缺失导致骨质疏松,对细胞信号外调节激酶总量无显著影响,但显著降低其磷酸化蛋白表达;通络生骨胶囊可显著改善应力造成的骨质疏松状态,但药物高剂量组对磷酸化的细胞信号外调节激酶的表达影响不显著,药物低剂量组则还降低其表达.说明应力缺失通过降低细胞信号外调节激酶磷酸化水平导致骨质疏松,通络生骨胶囊不是通过影响细胞信号外调节激酶通路改善应力缺失导致的骨质疏松的.     

磷酸钙人工骨联合雷洛昔芬修复兔下颌骨缺损

背景：雷洛昔芬是第3代选择性雌激素受体调节剂,可减少骨量的丢失,增加骨组织中的矿物质含量,降低骨折风险。目的：观察雷洛昔芬结合自固化磷酸钙人工骨修复兔下颌骨缺损的效果。方法：在36只新西兰大白兔左侧下颌骨制作8 mm×4 mm×3 mm的缺损模型,随机分组,实验组12只植入自固化磷酸钙人工骨,并给予雷洛昔芬7.5 mg/（kg·d）;药物组12只给予雷洛昔芬7.5 mg/（kg·d）;人工骨组12只植入自固化磷酸钙人工骨。分别于治疗4,8,12周取下颌骨标本,免疫组织化学法观察骨形态发生蛋白2的表达,激光共聚焦显微镜观察转化生长因子β的表达。结果与结论：实验组治疗后4,8周时的骨形态发生蛋白2免疫组织化学染色阳性细胞数明显高于药物组与人工骨组,治疗后12周时实验组骨改建基本完成,骨形态发生蛋白2免疫组织化学染色阳性细胞数目低于其他两组。实验组转化生长因子β免疫荧光染色表达为逐步升高,到第8周时达到峰值,而药物组和人工骨组的转化生长因子β免疫荧光表达从4-12周一直呈上升状态,趋近于最高峰。说明雷洛昔芬能够促进自固化磷酸钙人工骨在骨缺损过程中骨形态发生蛋白的早期表达及早期骨痂的形成,加快骨缺损修复。     

黄精多糖对骨质疏松性骨折大鼠骨代谢因子的影响

背景:骨质疏松性骨折主要原因是雌激素减少所形成的高转换型骨质疏松,采用雌激素虽能够有效地治疗,但长期雌激素替代治疗会引发诸多疾病.目的:观察黄精多糖对骨质疏松性骨折大鼠骨代谢因子的影响.方法:6 月龄雌性SD 大鼠,随机分为对照组(n=8)和骨质疏松性骨折组(n=36).骨质疏松性骨折组行卵巢切除后建立骨质疏松性骨折动物模型,再以0.066 mg/kg 雌激素,400,200,100 mg/kg 黄精多糖进行灌胃,2 d/次,连续35 d.采用Elisa方法测量骨钙素、抗酒石酸酸性磷酸酶的表达.结果与结论:骨质疏松性骨折大鼠的骨钙素、抗酒石酸酸性磷酸酶的阳性表达活性升高,给予黄精多糖干预治疗后,高剂量的黄精多糖使骨钙素、抗酒石酸酸性磷酸酶的阳性表达活性下降,而在中、低剂量组干预效果不显著.说明高剂量黄精多糖对骨质疏松性骨折大鼠具有降低骨钙素、抗酒石酸酸性磷酸酶的阳性表达活性的作用,促进骨折愈合的作用.     

Estrogen deficiency leads to impaired osteogenic differentiation of periodontal ligament stem cells in rats

Estrogen deficiency in post-menopausal women is considered as one of the risk factors for periodontal diseases. The periodontal ligament is a connective tissue that connects cementum and alveolar bone to constrain teeth within the jaw. Periodontal ligament stem cells (PDLSCs) isolated from the periodontal ligament can differentiate into many types of specialized cells, including osteoblast-like cells that can be used to regenerate alveolar bone. However, little is known about the effect of estrogen-deficient microenvironment on the osteogenic differentiation of PDLSCs. The aim of this study was to explore the role of estrogen on the potential for osteogenic differentiation of PDLSCs using a rat model of osteoporosis. Three-month-old female Sprague-Dawley rats were divided into two groups (n = 6 for each): ovariectomized (OVX) and sham-operated rats (Sham). Then the characteristics of PDLSCs isolated from these rats were investigated. Real-time PCR analysis showed the lower expression levels of estrogen receptors (ERα and ERβ) mRNAs in PDLSCs of OVX animals compared to Sham control. Mineralization assay demonstrated fewer calcium deposits in PDLSCs from OVX group than those from Sham group. Treatment with 17β-estradiol (E2) significantly enhanced the osteogenic differentiation of PDLSCs from both groups in vitro. Furthermore, by means of lentivirus-mediated siRNA targeting ERα or ERβ, the expression of ERα or ERβ was down-regulated (> 50% reduction), which impaired the estrogen-induced osteogenic differentiation of PDLSCs from both groups (> 50% reduction). These results indicate that estrogen plays an important role in maintaining osteogenic differentiation of PDLSCs, which acts through both ERα and ERβ.     

葛根对睾丸切除骨质疏松模型小鼠骨密度和骨构造的作用

背景:研究证实,葛根不仅能够预防卵巢切除雌激素不足骨质疏松模型小鼠骨密度及骨量的下降,而且能够改善骨微细构造,可用于女性闭经后骨质疏松症的预防与治疗.其对男性骨质疏松的治疗是否具有相似的疗效?目的:课题以更接近应用为目的,观察未经提取的植物药葛根对雄激素不足骨质疏松模型小鼠骨密度和骨构造的影响.方法:8周龄雄性ddY小鼠48只,体质量32～35 g,随机数字表法分为假手术组,模型组,低、中、高剂量葛根组和雌二醇组,每组8只.假手术组暴露睾丸与附睾,切除周围脂肪组织:其余各组小鼠摘除双侧睾丸.术后假手术组、模型组和雌二醇组都给予普通饲料,低、中、高剂量葛根组给予含有5%,10%和20%葛根粉的饲料.雌二醇组1713-雌二醇通过体内小渗透泵自动给药0.03 μg/d.饲料给予均为4.0 g/d.4周后,检测精囊质量,以双能X射线骨密度测定仪检测股骨骨密度,显微CT分析股骨远端干骺端海绵骨微细构造.结果与结论:模型组股骨全体骨密度下降了10.9%,这种下降被低剂量葛根完全抑制,被中剂量葛根抑制进一步加强,但两者差异无显著性意义;高剂量葛根组骨密度较模型组、假手术组分别高出26.1%,12.4%,作用强度与雌二醇相当.低剂量葛根完全抑制了雄激素缺乏导致的股骨骨小梁数目下降以及骨小梁间距增大,中剂量葛根抑制作用更强,但两组之间差异无显著性意义;高剂量葛根组抑制作用最强,能够增加骨量和骨小梁数目达到显著高于假手术组水平.葛根各剂量对精巢无刺激作用.提示葛根在不刺激精囊的条件下,低、中剂量葛根可完全抑制雄激素缺乏所致的骨密度和骨量下降,改善骨构造,高剂量效果更显著,与雌二醇作用相当.     

雌激素受体与绝经后骨质疏松症

检索Pubmed数据库和中国期刊全文数据库文献，总结雌激素受体与绝经后骨质疏松症的关系。雌激素受体以雌激素受体α和雌激素受体β两种亚型广泛存在于人体内。雌激素根据其结合的受体亚型，选择性激活细胞内信号传导途径，表现出多种生物学活性。雌激素对骨吸收的调控作用是通过某些细胞因子的介导和直接对破骨细胞作用完成的。近年来对选择性雌激素受体调节剂对两种不同受体亚型的特异性作用的研究已成为热点。     

补肾方药对实验性骨质疏松症大鼠垂体-甲状腺轴及其骨密度的影响

背景将补肾方药分别制成"外贴剂"和"口服剂",根据"体表穴位-经络-内脏-靶器官"相关,分别用外贴穴位和口服两种不同的给药途径治疗骨质疏松,按照中医传统理论推测均会"归入肾经"而发挥调节作用,但实际上是否会有"靶向给药"的特异性?检测"下丘脑-垂体-靶腺"系统的激素,进一步分析肾、骨、子宫、甲状腺、睾丸等靶器官的雌激素受体和雄激素受体,观察"归经与受体"的相关性.设计以骨质疏松大鼠为研究对象的完全随机设计,补肾方药不同给药途径对照实验研究.目的探讨补肾方药对实验性骨质疏松垂体-甲状腺轴的影响.单位河北医科大学中医学院.材料实验于2000-01/2004-12在河北医科大学中西医结合基础实验室完成.选择3月龄健康SD雌性大鼠60只,体重(300±20)g.实验动物由河北省实验动物中心提供.大鼠在实验室常规喂养1周后,随机分成6组正常对照组(10只);病理模型组(10只);补肾方药总成分按0.8 g/100 g体质量灌喂组(10只);穴位贴剂外贴膀胱经穴位组(10只);穴位贴剂外贴肾经穴位组(10只);穴位贴剂外贴非经非穴位组(10只).方法采用注射地塞米松建立骨质疏松模型,用抗骨松穴位贴剂(antagonism osteoporosis acupoint paste,AOAP)外贴穴位、非经非穴位、并与口服补肾方药比较治疗骨质疏松(OP),以血清雌激素、骨密度、降钙素/甲状旁腺素、促甲状腺激素、游离T3、游离T4的变化为衡量指标,取垂体、甲状腺作促甲状腺激素细胞、C细胞和Tg等免疫细胞化学染色,并形态计量,观察其治疗效果.主要观察指标①补肾方药调节甲状腺功能;②补肾方药调节骨密度.结果AOAP能提高雌激素、降钙素/甲状旁腺素、促甲状腺激素、游离T3、游离T4的水平,增加骨密度;促甲状腺激素细胞、C细胞数目增多,Tg阳性反应物增多,颜色深.结论AOAP可以通过"多位点相关集合效应"综合调控影响骨代谢的内分泌功能,提高雌激素、降钙素/甲状旁腺素水平,扭转垂体-甲状腺轴功能减退的趋势,改善甲状腺的功能,使破骨细胞的骨吸收减弱,成骨细胞的骨形成增强,增加骨密度.     

Direct adenoviral transfer of bone morphogenetic protein-2 cDNA enhances fracture healing in osteoporotic sheep

Osteoporosis, a major public health burden, is associated with increased fracture risk. Fracture healing in osteoporosis is delayed, with reduced callus formation and impaired biomechanical properties of newly formed bone leading to high risk of fixation failure. Adenoviral gene transfer of bone morphogenetic protein-2 (BMP-2) has been shown to enhance fracture healing. This study evaluated the ability of gene transfer to enhance bone healing in osteoporosis. An established sheep model of osteoporosis with well-characterized alterations in fracture healing was used. Osteotomies were created surgically in the tibias of adult female sheep and monitored for 8 weeks, using radiographic, biomechanical, and histological methods. For pilot experiments, primary ovine osteoblasts and mesenchymal stem cells were transduced with a recombinant adenovirus carrying BMP-2 cDNA (Ad.BMP-2). Large increases in alkaline phosphatase production and mineralization confirmed the ability of human BMP-2 to stimulate osteoblastic differentiation in sheep. In vivo bending stiffness measurements during fracture healing as well as ex vivo torsional stiffness measurements demonstrated stiffer callus tissue after treatment with Ad.BMP-2. The differences were found mainly in the early fracture-healing period. Computed tomography demonstrated that animals receiving the BMP-2 cDNA had larger cross-sectional callus area and higher callus density. Histological examination of the tibias confirmed enhanced callus formation. Direct, local adenoviral delivery of an osteogenic gene thus led to enhanced healing of fractures in an ovine model of osteoporosis. These promising data encourage the further development of genetic approaches to enhance bone healing in patients suffering osteoporosis-associated fractures.     

雌激素影响肌力与骨量间的关系

目的:在研究原发性骨质疏松的发生及防治时,肌力与骨量的关系的影响因素值得关注。本文拟探讨雌激素作为非力学因素影响肌力与骨量之间关系的机制。方法:通过计算机检索肌力与骨量的关系,雌激素对肌力与骨量之间关系的影响的相关文献,结合作者以往的研究工作,论述雌激素对肌力与骨量间关系的影响。结果:肌力决定骨结构和骨量,使骨强度适应运动负荷。雌激素主要通过影响骨应变阈值来调整肌力与骨量之间的关系。雌激素疗法有益于骨组织,部分通过保护肌力实现。结论:雌激素能够影响肌力与骨量的关系,雌激素疗法可能有保护肌力的作用。     

耳针与补肾食疗对去势后骨质疏松症雌鼠骨密度和甲状腺功能变化的影响

目的：验证耳穴和补肾食疗防治骨质疏松症的疗效并探讨其治疗机理。方法：将切除6月龄雌鼠双侧卵巢建立骨质疏松症的动物模型,以假手术组和雌二醇组作为对照组。耳针组、补肾食疗组、耳针 补肾食疗组、雌二醇组分别经耳针、补肾补肾食疗和雌二醇的3个月治疗。用放免法测定大鼠血清的E2、T3、T4、TSH、PTH和骨密度、骨矿物含量。结果及结论：耳针、“补肾”食疗、雌二醇的治疗均能提高去势雌鼠的骨密度、骨矿物含量。其机理可能通过提高去势雌鼠的雌激素水平,调整垂体-甲状腺轴功能,从而抑制骨吸收,促进骨形成,降低骨转换率,纠正骨代谢的负平衡。