口腔粘膜下纤维性变病变组织中差异miRNA的研究

目的构建口腔粘膜下纤维性变（OSF）病变组织中差异miRNA表达谱。方法选取1例临床上具有典型病理特征的OSF组织及其配对正常组织,以正常组织为对照,部分病变组织行Affymetrix miRNA芯片实验,部分组织用于芯片后的进一步验证,同时进行生物信息学分析,并与前期OSF病变组织的差异基因表达谱对接,初步确定差异miRNA的可能靶标。结果所选病变组织属于OSF病变中期,miRNA芯片显示差异1.5倍以上的miRNA共有19个,其中OSF病变组织中上调13个,下调6个,miRNA特异性实时定量PCR验证结果与芯片结果一致,生物信息学分析及与前期差异基因表达谱对接显示其中的miR-23b、miR-203及miR-200c等可能参与了OSF病变过程及其后的癌变。结论 miRNAs可能在OSF病变过程中起着重要作用,并可能参与OSF的癌变过程,其进一步研究将有助于阐明OSF的分子发病机制。     

miR-145在原位结肠癌癌组织和癌旁组织中的表达研究

目的探讨miR-145在原位结肠癌癌组织和癌旁组织中的表达差异。方法利用miRNA表达谱芯片技术检测未发生转移原位结肠癌癌组织和癌旁组织标本中miR-145表达水平的差异,并运用Real-time PCR验证其结果。结果 miRNA表达芯片分析发现miR-145在结肠癌组织中表达显著下调（下调2.5倍）,并被Real-time PCR所证实。结论 miR-145在结肠癌组织中表达下调,可作为供研究的潜在结肠癌分子标记物。     

miR-29在胃癌患者血清中的表达及其对预后的影响

目的观察胃癌患者术前、术后血清标本中miR-29的表达情况及其与预后的关系,探讨胃癌患者血清中miR-29的检测在胃癌早期诊断及预后判断中的价值。方法采用实时荧光定量PCR技术检测46例胃癌患者手术前后及30例健康成年人血清中miR-29的表达水平。结果胃癌患者血清中miR-29表达水平显著低于健康成年人;胃癌患者术后血清中miR-29表达水平较术前上调,且上调水平越高预后则越佳。结论 miR-29在血清中的表达水平可作为胃癌早期诊断及预后判断的miRNA指标。     

胃癌组织中miR-181a及其靶基因KLF6表达变化及意义

目的观察胃癌组织中微小RNA(miRNA)-181a(miR-181a)与其靶基因Kruppel样因子6(Kruppel like factor 6,KLF6,又称锌指转录因子9或核心启动子元件结合蛋白)的表达变化,并探讨其意义。方法 9例胃癌患者,手术时留取癌组织及癌旁组织,抽提其中的总RNA及蛋白质,采用实时荧光定量PCR检测标本中的miR-181a,Western blot检测KLF6蛋白。结果胃癌组织中miR-181a的表达量(2-△△Ct)为(1.981±1.080),癌旁组织miR-181a的表达量为(0.394±0.093);癌组织KLF6蛋白灰度值为(0.241 6±0.135 5),癌旁组织为(0.540 2±0.05 5),两种组织中的miR-181a、KLF6蛋白表达量相比,均p﹤0.01;miR-181a与KLF6蛋白的表达呈负相关(r=-0.590,p﹤0.01)。结论胃癌组织中miR-181a表达明显上调,KLF6蛋白表达明显下降;结合前期实验研究,我们推测miR-181a可能通过转录后基因沉默机制使KLF6蛋白表达下降,从而促进胃癌的发生发展。     

MicroRNA-17-5p促进胃癌的化疗药物抗性

目的:以微小RNA(miRNA或microRNA)研究确定影响胃癌化疗预后因素的生物标记物。方法:研究259例胃癌患者miRNA的表达谱,并对比药物抵抗组和敏感组,从而使miRNA的作用及影响得到了证实。结果:化疗药物可以增加miR-17-5p的表达水平,从而导致了化疗药物抵抗的发生。结论:miR-17-5p可以作为化疗药物疗效的预测因素和胃癌生存率的预后因素。     

microRNA-375、AEG-1在食管癌组织中的表达及相关性研究

目的:研究microRNA-375、AEG-1在食管癌组织中的表达及其相关性。方法:收集2016年1月～2017年5月经胃镜检查并经病理诊断的食管癌患者70例,采用定量聚合酶链反应检测食管癌组及其癌旁组织中miR-375及AGE-1的表达,初步探讨miRNA在食管癌中发生及发展过程中的作用及二者相关性。结果:miR-375在食管癌组织中的表达明显低于癌旁组织(P 0. 05),食管癌组织中AEG-1 mRNA表达较癌旁组织升高(P 0. 05),食管癌组织中miR-375与AEG-1mRNA呈负相关(r=-0. 369,P=0. 045,P 0. 05)。结论:与癌旁组织相比,组织中miR-375表达降低。miR-375在食管癌的发生、发展中可能起重要作用,其机制可能与miR-375调控AEG-1有关。     

miRNA在稳定白斑和癌变白斑组织中表达的比较

目的通过分析癌变白斑和稳定白斑病损组织中miRNA表达谱的异常,以期发现可准确评估此类病损癌变风险的生物学标志物。方法使用Taq Man低密度miRNA芯片对稳定白斑和癌变白斑进行分子生物学检测分析。结果同稳定白斑相比较,癌变白斑中miRNAs的表达发生了显著改变,差异有统计学意义(P0.05),其中13个miRNAs的表达下调(miR-99a-5p、miR-99b-5p、miR-144、miR-100-5p、miR-125-5p、miR-181b、miR-181a、miR-521-3p、miR-339-5p、miR-15a-5p、miR-150-5p、let-7a-5p、miR-9),12个miRNAs的表达上调(miR-10b-5p、miR-708、miR-30e-3p、miR-30a-3p、miR-21、miR-335-5p、miR-144、miR-25-3p、miR-19a-3p、miR-660-5p、miR-140-5p、miR-590-5p)。结论 miRNA生物标志物的检测对稳定白斑和癌变白斑病变的诊断具有重要的意义。     

Ras协同mTOR/SREBP1-c上调miR-182-96-183在肝癌中表达

目的:探讨Ras癌基因诱导的miR-182-96-183高表达机制。方法:采取H-ras12V转基因小鼠肝癌及癌旁组织,miRNA高通量测序检测miR-182-96-183基因表达水平。Westernblot检测调控miR-182-96-183表达的相关信号通路活化状态及其上游转录因子蛋白表达水平。结果:miRNA高通量测序结果表明:与PT相比,T中miR-182-96-183m RNA表达显著升高(P0.01)。Westernblot检测结果表明:与PT相比,T中ERK、mTOR活化水平显著升高,SREBP-1c蛋白水平显著升高。结论:Ras癌基因可能通过活化mTOR通路激活SREBP-1c上调miR-182-96-183的表达水平。     

宫颈癌组织中miR-214的表达及临床意义

目的为探究微小RNA (miRNA)-214在宫颈癌组织中表达与患者临床病理特征及预后的关系。方法实时荧光定量PCR (RT-PCR)法检测84例宫颈癌组织、10例正常宫颈上皮组织中miR-214的表达情况。分析宫颈癌组织中miR-214的表达与患者临床病理特征的关系,并评估miR-214的表达对患者预后的影响。结果 miR-214在宫颈癌组织中的表达较正常宫颈上皮组织中显著下调(P0. 05)。宫颈癌组织中,miR-214表达与FIGO分期、淋巴结转移、腺体浸润、脉管浸润相关(均P0. 05),而与患者年龄、肿瘤组织学分型、肿瘤直径、分化程度、人乳头瘤病毒(HPV)感染无关(均P 0. 05)。KaplanMeier生存分析结果显示,miR-214高表达组患者的术后生存率和平均生存时间均显著优于miR-214低表达组患者(均P 0. 05)。结论 miR-214在宫颈癌组织中的表达显著下调,miR-214可能参与了宫颈癌的发生与转移过程。     

石蜡包埋宫颈癌组织中Fas/FasLmRNA的检测

目的检测Fas/FasLmRNA在石蜡包埋宫颈癌组织中的表达情况及其临床意义.方法采用RT-PCR方法检测31例宫颈癌石蜡标本和20例正常宫颈上皮石蜡标本中Fas/FasLmRNA的表达.结果宫颈癌石蜡标本中FasmRNA呈现低表达,表达率为32.3%.FasLmRNA呈现高表达,表达率为58.1%.Fas/FasLmRNA在宫颈癌中的表达与正常宫颈上皮中的表达差异有显著意义;与患者的年龄和临床分期无关.结论FasmRNA低表达与FasLmRNA高表达在宫颈癌发展中可能起到促进作用.     

常熟市胃癌危险因素的病例对照研究

[目的]探索常熟市胃癌的高危因素,为采取有效的预防措施提供科学依据。[方法]选择常熟市2005年8月至2006年8月期间诊断的男性新发胃癌病例202例,按年龄、性别和居住地进行以人群为基础的1∶1配对病例对照研究,获得环境暴露等资料。分别采用Epi-info(6.04版)和SAS(6.12版)统计软件进行单因素和多因素条件Logistic回归分析,计算各因素的调整比值比(OR)和95%可信限(95%CI)。[结果]单因素分析发现,多吃腌菜(近10年和10年前)、多吃咸鱼咸肉(近10年和10年前)、近10年口味咸、三餐不按时吃、饮茶(浓或较浓)、患病前精神压抑、性格内向、胃溃疡或萎缩性胃炎史等因素与胃癌成正相关(P<0.05),而多吃新鲜蔬菜(近10年和10年前)和生活态度乐观能降低患胃癌的危险(P<0.05)。多因素条件Logistic回归分析结果显示,胃溃疡和萎缩性胃炎史、三餐不按时和10年前多吃腌菜是胃癌的主要危险因素,而10年前多吃新鲜蔬菜则作为胃癌保护因素进入回归方程。[结论]针对上述胃癌危险因素进行预防已显得十分必要。     

MicroRNA在肺癌中的作用机制及其治疗的研究进展

肺癌是恶性肿瘤中最常见的一种,其已成为全球最常见的肿瘤之一。miRNA通过靶基因3端非翻译序列结合。在转录后水平促进靶基因降解或抑制其翻译。miRNA参与一系列生物学过程。大量研究表明,miRNA在细胞增殖,凋亡和肿瘤形成等方面广泛而精确地调控靶基因,从而影响其表达。miRNA的异常表达,被认为与肺癌的发生和发展密切相关。现试就miRNA的分子生物学特征、在肺癌中的作用机制和治疗研究的新进展做一综述。     

microRNAs在肿瘤中的研究与进展

MicroRNAs（miRNAs）是一类分布广泛的小片段内源性非编码蛋白质的单链RNAs,其功能是下调靶基因表达。miRNA序列、结构、丰度和表达方式的多样性,使其可能作为蛋白质编码mRNA的强有力的调节子或者其他形式的调节机制来抑制靶基因的表达,产生基因沉默。最新的研究表明,miRNAs参与了包括肝癌、肺癌、乳腺癌、结肠癌、脑肿瘤及白血病在内的多种肿瘤的发生、发展。miRNAs可以起到肿瘤抑制基因或者癌基因的功能研究表明miRNAs可以抑制重要的肿瘤相关基因的表达,对癌症的靶基因治疗有着重要的意义。因此本研究对阐明miRNA在肿瘤发生、发展过程中的作用机制以及在肿瘤治疗中的应用前景作一综述。     

Fish方法检测HER2基因在胃癌组织中的表达及其意义

目的探讨胃癌组织中HER2基因表达与临床病理特征的相关性。方法采用荧光原位杂交(Fish)技术,检测43例胃癌石蜡组织中的HER2基因扩增状况,将检测结果与患者的临床病理特征进行相关性分析。结果 43例病例中,15例(34.88%)患者胃癌组织中有HER2基因表达,且与TNM分期、淋巴结转移及胃癌浸润深度相关(P值均<0.05)。结论 HER2表达在胃癌中发生率较高,可作为评价胃癌生物学行为及预后的指标。     

PTEN基因在胃癌组织中的表达及临床意义

目的研究正常胃粘膜、慢性萎缩性胃炎（伴肠化）、胃癌组织中抑癌基因PTEN的ⅢRNA和蛋白的表达情况,探讨其在在胃癌发生、发展中的作用及临床意义。方法（1）收集2011年11月--2012年11月期间内蒙古医学院第三附属医院病理和内窥镜结合确诊的正常胃组织30例、慢性萎缩性胃炎（伴肠化）30例．手术切除的45例胃癌标本并经病理确诊。（2）所有患者术前均未接受放、化疗和其他针对性抗肿瘤治疗,无其它肿瘤病史。（3）通过实时荧光定量PCR及Western印迹技术检测PTENmRNA及其蛋白在胃粘膜不同组织中的相对表达,所有数据采用SPSSl3．0统计软件包进行处理,统计学方法采用单因素方差分析及t检验,以P〈O．05为差异有统计学意义。结果（1）PTENmRNA在正常胃粘膜、慢性萎缩性胃炎（伴肠化）、胃癌中表达量分别为（1．902±0．981、1．158±0．241、0．740±0．221）,三组相比差异有统计学意义（F=3．292,P=O．041）。胃癌组织中PTENmRNA表达量分别与正常胃粘膜组织、慢性萎缩性胃炎（伴肠化）组相比,差别均有统计学意义（t=4．451,P=O．001;t=3．007,P=O．041）;（2）PTEN蛋白在正常胃粘膜、慢性萎缩性胃炎（伴肠化）、胃癌中表达量分别为（2．001i0．67I、1．141±0．326、0．599±0．220）,三组相比差异有统计学意义（F=4．122,P=O．030）。胃癌组织中PTEN蛋白的表达量与正常胃粘膜、慢性萎缩性胃炎（伴肠化）组相比,差别均有统计学意义（t=4．301,P=O．001;t=3．123,p-0．040）。结论PTEN基因在胃癌组织中表达降低和缺失与胃癌的发生密切相关,提示PTEN基因的表达可能为临床早期诊断胃癌提供新的指标。     

EB病毒潜伏膜蛋白1在慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生胃黏膜中的表达及意义

目的检测EB病毒（EBV）．潜伏膜蛋白1（LMPl）在作为癌前病变的慢性萎缩性胃炎（CAG）伴肠上皮化生胃黏膜中的表达,探讨其在胃癌发生、发展过程中的作用。方法应用免疫组织化学sP法检测经病理确诊的45例慢性浅表性胃炎（CSG）组织、63例CAG伴肠上皮化生组织、36例胃癌组织中EBV—LMP1的表达。结果45例CSG和36例胃癌组织中未见EBV-LMP1的表达,63例CAG伴肠上皮化生胃黏膜组织有23例阳性,阳性率为36．5％（23／63）,主要定位于细胞核,明显高于CSG及胃癌中的表达,差异有统计学意义（尸值均为0．000）。结论CAG伴肠上皮化生组织中存在EBV-LMP1表达,明显高于CSG及胃癌组织,提示EBV感染可能在胃癌发生的早期阶段起重要作用。     

AKT／mTOR在胃癌组织中的表达及意义

目的研究蛋白激酶B／雷帕霉素靶蛋白（AKT／mTOR）在胃癌组织中的表达水平及与临床病理因素的关系。方法应用免疫组化染色测定磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）和磷酸化雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）在胃癌（32例）、癌旁组织（20例）中的表达情况。结果p-AKT在胃癌、癌旁组织中的阳性表达分别为71．9％、25．0％。p-mTOR在胃癌、癌旁组织中的阳性表达分别为62．5％、20．0％。p-AKT、p—mTOR的表达与胃癌组织分化程度、TNM分期存在相关性（氏O．05），p-AKT、P—mTOR的表达与胃癌患者的年龄、性别、肿瘤直径大小无相关性（P〉0．05）。结论胃癌组织中p-AKT与p-mTOR蛋白的表达与病理分化程度呈负相关。AKT／mTOR信号通路在大部分胃癌组织中过度表达可能是胃癌发生发展的重要机制之一。     

SOCS-1基因启动子区甲基化与胃癌的关系

[目的]探讨细胞因子信号转导抑制分子-1（SOCS-1）基因启动子区甲基化在胃癌发生和发展过程中的意义。[方法]收集南京市原发性胃癌患者102例为胃癌组;采用1：1病例-对照研究方法,随机选取非消化系统疾病、非肿瘤患者102例为对照组。取外周血提取DNA,采用甲基化特异性PCR检测胃癌组及对照组外周血DNASOCS-1基因启动子区甲基化状态。[结果]胃癌组SOCS-1基因启动子区甲基化率为38.24％（39／102）,对照组为12.75％（13／102）。两组OR=4.2381（95％CI：2.0924-8.5840）。两组中年龄及性别亚组问的甲基化率差异均无统计学意义（P〉0.05）。[结论]SOCS-1基因启动子区异常甲基化可能是肿瘤特异性的,在胃癌的发生、发展中可能具有一定的作用。     

碱性成纤维细胞生长因子及其受体在胃癌及癌前病变中的表达及其意义

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）及成纤维细胞生长因子受体-2（fibroblast growth factor receptor-2,FGFR-2）在胃癌组织中的表达及其意义。方法应用免疫组化SP法检测100例胃癌及癌旁组织,bFGF和FGFR-2的表达及两者之间的关系。结果胃癌中bFGF和FGFR-2表达明显高于癌旁组织及正常组织（P〈0．01）,胃癌组织中bFGF、FGFR-2表达的水平与临床病理分期有关,中晚期胃癌bF-GF及FGFR-2阳性率明显高于早期胃癌（P〈0．05）,胃癌组织中bFGF与FGFR-2表达呈正相关,随bFGF表达的增高FGFR-2表达亦增高（P〈0．05）。结论bFGF和FGFR-2在胃癌组织中表达明显增高可能与肿瘤的发生发展有关。     

胃癌患者胃癌组织Tie2的表达及其意义

目的探讨人胃癌组织中Tie2mRNA和Tie2蛋白的表达及其与血管生成的关系。方法以42例胃癌患者癌组织和37例癌旁组织和30例正常胃粘膜组织为研究对象,用RT-PCR技术和免疫组化S-P法检测Tie2mRNA、Tie2蛋白和CD34的表达情况。结果胃癌组织和癌旁组织中Tie2 mRNA和Tie2蛋白的表达均明显高于正常胃组织,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。Tie2蛋白随癌肿瘤分化程度降低和淋巴结转移明显增高(P<0.05),但与性别和年龄无明显相关(P>0.05)。Tie2蛋白阳性表达的MVD显著高于Tie2蛋白阴性者,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 Tie2在人胃癌组织中高表达,可能与肿瘤分化程度与淋巴转移有关,并与肿瘤血管生成关系密切。