推拿干预对便秘模型大鼠结肠c—kit mRNA表达的影响

目的:探讨大鼠结肠远端c-kit mRNA在便秘大鼠结肠中的表达.方法:剪除大鼠股骨造便秘模型,推拿治疗后,用Real-time PCR方法检测c-kit mRNA表达情况.结果:实时定量PCR显示便秘模型大鼠结肠远端c-kit mRNA表达明显下降(P<0.01);推拿干预后,c-kit mRNA表达明显增加(P<0.01).结论:后肢活动减少可使大鼠结肠c-kit mRNA表达明显降低;经推拿干预后,c-kit mRNA表达明显增加,提示推拿治疗便秘与Cajal间质细胞数目变化有关.     

SD新生大鼠c-kit阳性心肌细胞的分离纯化

目的:建立新生SD大鼠c-kit阳性细胞分离纯化及传代的培养方法。方法:取出生24h之内新生SD大鼠心尖部组织,用PBS液洗去心尖部的血液,将其剪碎成lmm3以下的组织块培养,培养48h后,0.5%Trypsin-EDTA消化,用免疫磁珠分选c-kit阳性的心肌细胞,继续培养传代。用倒置显微镜观察c-kit阳性心肌细胞,用免疫细胞化学法检测心肌组织特异性cTnT及Desmin蛋白。结果:用心脏组织培养法成功得到了体外搏动的原代心肌细胞;用免疫磁珠分选了c-kit阳性心肌细胞,倒置显微镜下观察到c-kit阳性心肌细胞具有传代增殖的特性;同时,检测了c-kit阳性心肌细胞胞质cTnT及Desmin结合蛋白的阳性表达。结论:采用改良后的培养方法获得了c-kit阳性心肌细胞,该细胞具有心肌干细胞的蛋白表达特性,并具有一定的传代增殖能力。     

推拿治疗顽固性便秘体会

便秘属临床常见病,男女老幼均可患之,虽无性命之虞,但患者极其痛苦.除单纯便秘外,尚常伴有肛裂、痔疮等兼证.临床上治疗便秘的药物很多,通便效果多较明显,但治愈率低.近年来,笔者采用单纯推拿手法治疗,通便效果及临床治愈率均令人满意,且可由患者自行操作,无副作用及依赖性.     

推拿治疗便秘58例

便秘是一种慢性而常见的多发症,患者多属中老年。由于肠胃受病或其它原因影响,传导功能失常,粪便在肠内停留过久,水分被吸收,而至粪质干燥,坚硬,使大便不通。排便时间延长,或虽有便意, 但难以排出。本人根据不同的症状,应用推拿治疗本症58例,效果满意,现报道如下。 1 临床资料据门诊统计,2001年3月至2003年12月58 例,女35例,男23例;年龄最大75岁,最小18岁:     

推拿治疗便秘的临床体会

便秘是指由于大肠传导失常,导致大便秘结,排便周期延长:或周期不长,但粪质干结,排出艰难;或粪质不硬,虽有便意,但便而不畅的病证.此症与人们不良的生活习惯关系密切,如:偏食、久坐久卧少动、生活不规律、平时不爱喝水等等.     

推拿治疗单纯性便秘

所谓单纯性便秘是指大便秘结不通,排便时间延长,或虽有便意,而排便困难.这里主要是针对那些由于传导功能失常引起的便秘,而非其它疾病所导致的症状.     

腹部推拿对功能性便秘患者肠电的影响

目的:探讨腹部推拿治疗功能性便秘(FC)患者的临床疗效和肠电图(IEG)的变化。方法:观察50例FC患者腹部推拿治疗前后结肠4个部位IEG的变化。结果:治疗后肠电图较治疗前有改善,差异有统计学意义(P<0.05、P<0.01)。结论:腹部推拿可以改善肠电,调节结肠的运动,从而改善FC患者便秘症状。     

推拿治疗便秘的概况

推拿疗法属于非药物疗法,在常见病、多发病的防治中具有不可替代的作用,尤其在便秘的治疗中,不同的学者分别采用循经取穴、独穴、耳穴、足穴治疗便秘,辨证施治均取得满意的疗效。但仍存在一些不足和问题,如疗效评定标准、客观的观察指标等原因,使许多推拿治疗便秘的文献可信度大大降低。多中心前瞻性研究和作用机理的研究不多,基础实验研究严重滞后。     

推拿手法防治老年性便秘

老年性便秘会严重影响老年人的健康和生活质量,用推拿手法防治老年性便秘,辅以情志引导、饮食指导、排便指导、运动指导等方法,对改善或消除便秘有着非常积极的作用。     

槐黄丸对慢传输型便秘大鼠结肠神经递质及SCF/c-kit通路的影响＊

目的 探讨槐黄丸对慢传输型便秘（STC）大鼠的作用及其对结肠组织神经递质和干细胞因子/酪氨酸激酶受体（stem cell factor / kit proto-oncogene， SCF/c-kit）通路的影响。方法 将60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、槐黄丸低剂量组（30 mg·kg^-1）、槐黄丸中剂量组（75 mg·kg^-1）、槐黄丸高剂量组（150 mg·kg^-1）、莫沙必利组（2 mg·kg^-1），每组10只。除正常组外，其他组别均对大鼠进行大黄灌胃处理模拟STC造模，并以相应药物浓度给药。给药2周后，测量24 h首次排便时间、6 h排便粒数及粪便含水量、干重和肠道推进率。采用酶联免疫反应法（enzyme linked immunosorbent assay， ELISA）检测大鼠结肠P物质（Substance P， SP）、乙酰胆碱（acetylcholine， Ach）、一氧化氮（Nitric Oxide， NO）、血管活性肽（vasoactive intestinal polypeptide， VIP）的含量。RT-PCR法检测大鼠结肠c-kit和SCF的mRNA水平。Western blot检测大鼠结肠c-kit和SCF的蛋白水平。结果 与正常组比较，模型组大鼠首次排便时间明显延长，排便粒数及干重、粪便含水量明显减少，肠道推进率降低，SP、Ach含量降低，VIP、NO含量增高，SCF和c-kit的表达降低，差异均有统计学意义（P<0.05）。与模型组相比，槐黄丸低、中、高剂量组能缩短首次排便时间，6 h排便粒数及干重、粪便含水量明显增高，肠道推进率增高，差异均有统计学意义（P<0.05）。与槐黄丸低、中剂量组相比，槐黄丸高剂量组缓解STC的效果最佳，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 槐黄丸对慢传输型便秘大鼠有明显的改善作用，其机制可能与调控结肠神经递质，提高SCF/c-kit信号通路有关。     

补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血患者骨髓单个核细胞c-kit mRNA及CD117影响的研究

目的:探讨补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血(CAA)患者骨髓单个核细胞c-kitm RNA及CD117表达的影响。方法:分别采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法及流式细胞技术检测CAA病人治疗前后骨髓单个核细胞c-kitm RNA及CD117水平的变化。结果:CAA患者骨髓c-kitm RNA及其CD117表达水平高于正常对照组,治疗后二者表达水平均有不同程度下降,并且补髓生血颗粒对二者表达水平的下调程度优于再障生血片对照组(P<0.05)。结论:CAA患者骨髓c-kitm RNA及CD117的表达存在异常;补髓生血颗粒剂可能通过调节骨髓c-kitm RNA及CD117的表达来改善CAA的骨髓造血功能,促进骨髓造血功能恢复。     

青蒿素对UVB照射小鼠表皮c-kit和PAR-2蛋白表达的抑制作用

目的：研究青蒿素对紫外线照射后小鼠表皮c-kit和PAR-2蛋白的表达,探讨青蒿素光保护作用的可能机制。方法：30只BALB/C小鼠分为3组,正常对照组,给予生理盐水灌胃;模型对照组及青蒿素组分别给予生理盐水及青蒿素灌胃后进行UVB照射。各组灌胃均为100mg/（kg.d）,每日1次,持续2周。UVB照射每次剂量1 J/cm2,每日1次,共2周,累积剂量14 J/cm2,采用免疫组化检测各组小鼠表皮中干细胞因子受体（c-KIT）和蛋白酶激活受体-2（PAR-2）表达量的变化。结果：UVB反复照射后,青蒿素组皮肤中c-kit和PAR-2表达水平均明显低于模型对照组（P〈0.05）,且c-kit和PAR-2表达水平呈正相关性（P〈0.05）。结论：青蒿素可明显抑制UVB反复照射小鼠皮肤中c-kit和PAR-2的表达,提示系统性应用青蒿素对UVB致小鼠皮肤光损伤有保护作用。     

髓复康对大鼠脑缺血损伤区内勿动蛋白（NoGo-A）表达的影响

 目的 研究益气活血补肾方髓复康对大鼠脑缺血损伤区勿动蛋白（NoGo-A）表达的抑制作用。方法 通过Koizumi法制作SD大鼠单侧大脑中动脉阻塞模型（MACO）,将SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组、髓复康大剂量组、中剂量组和小剂量组,各组又分别在给药8、15和30 d 3个时间点取大鼠脑组织,通过免疫组化、RT-PCR的方法检测各组脑缺血损伤区勿动蛋白表达量的差异。结果 中药大剂量及中剂量组勿动蛋白表达最弱,均与模型组形成极显著差异（P＜0.001）,小剂量组的勿动蛋白表达也低于模型组,与之形成显著差异（P＜0.05）。结论 髓复康可以抑制脑缺血损伤区勿动蛋白的表达,改善脑缺血损伤区轴突再生微环境,可能是其促进脑缺血损伤后轴突再生的机制之一。     

川芎嗪对慢性缺氧大鼠肺动脉蛋白质激酶C表达影响的免疫组织化学研究

目的:观察川芎嗪对慢性缺氧大鼠肺动脉蛋白质激酶 C(PKC)表达的影响。方法:30只大鼠随机分为正常对照组(A 组),缺氧加腹腔注射生理盐水4周组(B 组),缺氧加腹腔注射川芎嗪1周组(C 组),缺氧加腹腔注射川芎嗪2周组(D 组),缺氧加腹腔注射川芎嗪4周组(E 组),每组6只。制造常压缺氧肺动脉高压大鼠模型,应用免疫组化染色和计算机定量图像分析技术观察比较各组 PKC 表达变化。结果:A 组肺动脉有一定 PKC 阳性表达,积分光密度(OD 值)为1.08±0.25;B 组肺动脉 PKC 阳性表达最强,积分光密度为1.94±0.19,显著高于 A 组(P<0.05);C 组肺动脉 PKC 阳性表达较 B 组减弱,积分光密度为1.66±0.21 (P<0.05);D 组和 E 组肺动脉 PKC 阳性表达进一步减弱,积分光密度分别为1.34±0.22和1.15±0.22,与B 组比较差异均有显著性(P<0.05)。结论:川芎嗪能使慢性缺氧大鼠肺动脉异常上调的 PKC 表达逆转,提示川芎嗪治疗慢性缺氧肺动脉高压的机制可能与其抑制 PKC 介导的细胞内信息传导有关。     

熄风胶囊对癫痫小鼠海马、皮质层、杏仁核一氧化氮合酶蛋白表达的影响

目的:探讨中成药熄风胶囊对戊四唑致痫小鼠脑一氧化氮合酶(NOS)蛋白表达的影响。方法:50只昆明种小鼠,按随机方法分为5组,即熄风胶囊3个剂量组、模型组、正常对照组。将不同浓度的熄风胶囊浓缩剂分别灌服三组小鼠,连续6d。前4组腹腔注射戊四唑(55ml/kg)致痫,55min后处死动物。采用免疫组织化学法观察熄风胶囊对戊四唑致痫小鼠脑神经元型一氧化氮合酶(nNOS)蛋白表达的影响。结果:熄风胶囊各组nNOS阳性细胞数目明显多于模型组(P<0.01)。熄风胶囊3个剂量组在海马、皮质层、杏仁核各组均有差异(P<0.05)。结论:熄风胶囊对癫痫小鼠海马神经元有保护作用,此结果可能是其治疗癫痫的机理之一。     

从慢传输型便秘大鼠结肠c-kit/SCF的基因表达及信号传导通路探讨四磨汤的调节机制

目的:研究四磨汤对慢传输结肠的c-kit/SCF的基因表达及信号传导通路影响,探索理气中药改善结肠动力的作用机制。方法:选取120只SD大鼠,随机分为正常组30只,造模组90只,造模组饲喂含复方苯乙哌啶的饲料,造模成功后,将90只大鼠再随机分为3组,一组为空白对照组,一组为盐水对照组(安慰剂组),一组为四磨汤治疗组,每组30只。停药7 d后,分别从四组中各抽取10只大鼠,测首例黑便排出时间。结肠肌电检测,验证"四磨汤"对STC大鼠结肠肌电的影响效应。通过Realtime-PCR检测,分别检测c-kit和SCF的mRNA在STC结肠组织中的表达情况。计算机辅助图像分析表达情况。结果:四磨汤组大鼠首粒黑便排出时间较对照组和安慰剂组明显缩短(P0.05);较正常组有所延长(P0.05)。四磨汤组大鼠肌电频率、振幅、频率变异系数、振幅变异系数与正常组相比无统计学意义(P0.05),模型组大鼠肌电频率低于正常组(P0.05),振幅、频率变异系数、振幅变异系数高于正常组,有统计学意义(P0.05)。c-kit mRNA相对含量四磨汤组高于对照组及安慰剂组(P0.05),低于正常组(P0.05)。SCF mRNA相对含量四磨汤组高于对照组及安慰剂组(P0.05),低于正常组(P0.05)。结论:STC模型大鼠的结肠c-kit和SCF基因表达下调,c-kit/SCF系统受损。四磨汤能够显著提高c-kit mRNA、SCF mRNA相对含量,显著抑制造模药物对大鼠结肠慢波的影响,是通过调节c-kit,SCF基因表达及相应的信号通路来治疗慢传输型便秘的。